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제안 방법
- Brand-Willams8)5] 방법을 변형하여 자유 라디칼인 1, 1 -diphenyl-2-picryl hydrazyl(DPPH) 에 대한 전자공여효과로 나타나는 시료의 환원력을 측정하였다. 유리시험관에 메탄올과 증류수에 녹인 시료를 유리시험관에서 1㎎/㎖의 농도로 녹인후 희석하여 사용하였다 시료 0.
- Marklund와 Marklundm의 방법에 따라 각 농도별 시료(0.2mL)에 tris-HCl buffer(50mM tris[hydroxymethyl]amino methane containing lQmM EDTA, pH 8.5, 3mL)와 7.2mM pyro- gallol(0.2mL)을 가하고 25℃에서 10분간 방치하였으며, IN HCl(lmL)로 반응을 정지시킨 후 420nm에서흡광도를 측정하였다. SOD 유사 활성은 다음 식에 의하여 활성을 검증하였다.
- 측정하였다. 각 추출물을 10% DMSO 생리식염수에 용해시켜 단일콜로니를 액체배지에 접종하고, 37℃ 배양기에서 18시간 동안 배양한 균주를 접종한 후 24시간 배양한 후항균력을 측정하였다.
- 뱀무 메탄올 추출물과 물 추출물을 처리하여 KM 값을 측정하였다. 메탄올 추출물에서 90.
- 이에 본 연구에서는 뱀무 주출물을 이용하여 항산화 활성과 항균활성을 측정하였다.
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2. DPPH free radical 소거법에 의한 항산화활성
항산화물질로부터 전자나 수소를 받아 불가 역적으로 안정한 분자를 형성하는 DPPH의 특성을 이용한 항산화활성을 측정하였다. 뱀무 물 주줄물과 메탄올 주줄물을 농도별로 처리하여 DPPH방법으로 항산화 활성을 측정한 결 과는 Fig.
대상 데이터
- RPMI medium 1640, antibiotic-antimyzolic, hqjes, L-glutamine, nutrient broth(Difco), nutrient agar(Difco), brain heart infusion broth (Difco), brain heart infusion agar(Difco), sabouraud dextrose broth(Difco), sabouraud dextrose agar(Difco), D-PBS(Dulgecos phosphate buffer solution), HBSS(Hanks, balanced salt solution)등은 Gibco 제품을 사용하였고, 추출용매는 시약급을 재증류하여 사용하였다.
- 실험에 사용된 약재인 뱀무는 전북 완주군에서 채취하여 외부형태를 검정한 후, 음건한 후 물과 메탄올로 추출하여 4℃ 냉장 보관하여 사용직전에 에틸알콜로 동량희석하여 시료로 사용하였다.
데이터처리
- 실험결과의 통계학적 처리는 Student's t-test 를 이용하였으며, p-value가 0.05 미만일 경우 유의한 것으로 판정하였다.
이론/모형
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7. 항균측정
항균력은 Micrcxiilution Broth Method 법(2)를이용하여 측정하였다. 각 추출물을 10% DMSO 생리식염수에 용해시켜 단일콜로니를 액체배지에 접종하고, 37℃ 배양기에서 18시간 동안 배양한 균주를 접종한 후 24시간 배양한 후항균력을 측정하였다.
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