It has been well established that S. mutans is the major etiological agent in dental caries, one of the most common oral diseases worldwide. The present study was designed to investigate the effect of Saururus chinensis (S. chinensis) ethanol extracts on the growth, acid production, biofilm formatio...
It has been well established that S. mutans is the major etiological agent in dental caries, one of the most common oral diseases worldwide. The present study was designed to investigate the effect of Saururus chinensis (S. chinensis) ethanol extracts on the growth, acid production, biofilm formation, adhesion, and insoluble glucan synthesis of S. mutans. The ethanol extracts of S. chinensis showed concentration dependent inhibitory activity against the growth and acid production of S. mutans, and produced significant inhibition at the concentration of 0.025, 0.05, 0.1, 0.2 and 0.4 mg/ml compared to the control group. The extracts markedly inhibited S. mutans adherence to HA treated with saliva, and cell adherence was repressed by more than 80% at the concentration of 0.05 mg/ml and complete inhibition was observed at the concentration of 0.4 mg/ml. On the activity of glucosyltransferase which synthesizes water insoluble glucan form sucrose, ethanol extract of S. chinensis showed more than 10% inhibition over the concentration of 0.025 mg/ml. The synthesis of insoluble glucan was decreased in the presence of 0.025 ${\sim}$ 0.4 mg/ml of the ethanol extract of S. chinensis. Our research strongly suggested S. chinensis was a promising natural product for the prevention of dental caries.
It has been well established that S. mutans is the major etiological agent in dental caries, one of the most common oral diseases worldwide. The present study was designed to investigate the effect of Saururus chinensis (S. chinensis) ethanol extracts on the growth, acid production, biofilm formation, adhesion, and insoluble glucan synthesis of S. mutans. The ethanol extracts of S. chinensis showed concentration dependent inhibitory activity against the growth and acid production of S. mutans, and produced significant inhibition at the concentration of 0.025, 0.05, 0.1, 0.2 and 0.4 mg/ml compared to the control group. The extracts markedly inhibited S. mutans adherence to HA treated with saliva, and cell adherence was repressed by more than 80% at the concentration of 0.05 mg/ml and complete inhibition was observed at the concentration of 0.4 mg/ml. On the activity of glucosyltransferase which synthesizes water insoluble glucan form sucrose, ethanol extract of S. chinensis showed more than 10% inhibition over the concentration of 0.025 mg/ml. The synthesis of insoluble glucan was decreased in the presence of 0.025 ${\sim}$ 0.4 mg/ml of the ethanol extract of S. chinensis. Our research strongly suggested S. chinensis was a promising natural product for the prevention of dental caries.
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문제 정의
mutans에 미치는 영향에 대한 과학적인 실험결과는 미비한 실정이다. 따라서 본 연구에서는 삼백초 에탄올 추출물이 S. mutans의 성장과 산 생성, 부착 및 글루칸 생성에 미치는 효과를 관찰하고 이를 보고하고자 한다.
제안 방법
37℃ 의 항온기에서 24시간 배양한 후 BHI 액체배지를 기준으로 ELISA reader (Molecular Devices Co., CF.Z U.S.A.)를 이용하여 550 nm에서 흡광도를 측정하였으며, pH meter (HANNA instrument, Philippines)를 이용하여 pH를 측정하여 산 생성 억제 효과를 관찰하였다. 대조군은 삼백초 주출물을 넣지 않고 시행하였다.
삼백초 에탄올 추출물의 s. mutans에 대한 항균 활성을 관찰하기 위하여 BHI 액체배지에 삼백초의 에탄올 주출물을 0, 0.025, 0.05, 0.1, 0.2, 0.4 mg/ml의 농도로 첨가한 후, S. mutans를 접종하여 37℃ 항온기에서 24시간 배양한 후 흡광도를 측정한 결과는 Fig. 1과 같다. 삼백초 에탄올 추출물을 넣지 않은 대조군에서는 0.
0)으로 3 회 세척한 후 삼백초의 에탄올 추출물을 각각의 농도별로 넣고, S mutans를 1x107 CFU/ml이 되게 넣은 다음 37℃의 흔들리는 배양기에서 90분 동안 S-HA에 부착시켰다. 그 후 0.1 M KPB (pH 7.0) 로 3회 세척한 후 초음파 장치 (AMPLITUDE 30, PULSE 3)를 이용해 S>HA에 부착된 균을 떨어지도록 하였다. 그 다음 균액을 희석하여 Mitis salivarius agar plate (Difico Laboratories, USA.
치아우식증 예방제를 개발하기 위하여 천연물인 삼백초를 에탄올로 추출하여서 S, mutans의 성장과 산 생성 억제 효과, S-HA에 대한 부착억제와 비수용성 글루칸 합성 억제를 측정하고 다음과 같은 결과를 얻었다. S.
대상 데이터
본 실험에 사용한 균주는 Streptococcus mutans (S. mutans) ATCC 25175로 Brain heart infusion (BHI, Difco, USA) 액체배지에 1 . 2차 계대배양 후 같은 배지에 식균하여 37℃의 항온기에서 24시간 배양하여 사용하였다.
삼백초는 익산시 대학한약국에서 구입한 후 냉암소에 보관하여 사용하였다. 건조하여 세절한 삼백초 100 g을 에탄올 3.
타액은 건강한 성인 남자로부터 파라핀왁스로 자극하여 분비된 것을 냉각된 비커에 채취한 다음, 채취된 타액은 원심분리 (12, 000 rpm, 4℃, 15분)하여 상청액을 취한 다음, 분해효소를 불활성화 시키기 위하여 60℃에서 30분간 처리한 후, -20℃에 보관하면서 사용하였다.
데이터처리
실험은 모두 3회 반복하였으며, 얻은 결과는 통계프로그램인 SPSS (ver 10.0)를 사용하여 평균과 표준오차로 제시하였고, a=0.05 수준에서 실험군과 대조군의 평균치를 independent sample t-test 로 유의성을 검증하였다.
성능/효과
05). GTFase에 의한 비수용성 글루칸 정량실험을 한 결과 대조군에 비해 0.025, 0.05, 0.1, 0.2, 0.4 mg/ml 농도에서 각각 86.3±4.4%, 85.815.2%, 85.6±5.1%, 84.9±4.1%, 84.5±5.6%의 생성율을 보였다. 특히 0.
05). S. mutansS] 산생성량은 대조군에서 pH 는 5.350±0.039이었고, 삼백초 에탄올 추출물의 경우, 0.025, 0.05, 0.1, 0.2, 0.4 mg/ml 의 농도에서 각각 5.30±0.086, 5.25±0.083, 5.48±0.074, 7.33±0.000, 7.18±0.039로 0.2 mg/ml 이상의 농도에서우식 임계 pH 5.5보다 높아 산생성 억제 효과를 보였다(p<0.05). SHA에 S.
다음과 같은 결과를 얻었다. S. mutansS] 성장억제율이 삼백초 추출물을 넣지 않은 대조군에 비해, 삼백초 에탄올 추출물은 0.025, 0.05, 0.1, 0.2, 0.4 mg/ml의 농도에서 대조군에 비하여 각각 9.4%, 17.1%, 18.8%, 99.2%, 99.6%로 0.2 mg/ml 이상의 농도에서 대조군과 유의한 차이를 보여 S. mutans 성장억제 효과를 나타내었다 (p<0.05). S.
05). SHA에 S. mutans가 부착율이 삼백초의 에탄올 추출물 0.025, 0.05, 0.1, 0.2, 0.4 mg/ml 농도에서 대조군에 비해 각각 15.8%, 87.0%, 91.2%, 93.2%, 100%의 부착억제율을 보여 0.05 mg/ml 이상의 농도에서 대조군과 유의한 차이를 보였다(p<0.05). GTFase에 의한 비수용성 글루칸 정량실험을 한 결과 대조군에 비해 0.
05). 대조군에 비하여 9.4%, 17.1%, 18.8%, 99.2%, 99.6%의 성장억제효과를 나타내었다.
2 mg/ml 이상의 농도에서 95% 이상의 성장억제 효과를 나타내었다. 또한 삼백초 에탄올 추출물을 넣지 않은 대조군에서 pH는 5.35를 나타내었으나, 삼백초 추출물 0.2, 0.4 mg/ml 농도에서 각각 7.33, 7.18을 나타내어 S. mutansS 의한 유기산 생성을 억제하였음을 보여주었다. S.
3과 같다. 삼백초 에탄올 추출물은 대조군에 비해 0.025, 0.05, 0.1, 0.2, 0.4 mg/ml 각각의 농도에서 86.3±4.4%, 85.8±5.2%, 85.6±5.1%, 84.9±4.1%, 84.5±5.6%의 생성율을 보여, 삼백초 에탄을 추출물이 비수용성 글루칸 합성 저해 효과가 있는 것으로 나타났다. 특히 삼벅초 에탄올 추출물의 GTFase에 의한 비수용성 글루칸 합성 억제 효과는 대조군에 비하여 0.
삼백초 에탄올 추출물이 &HA에 대하여 S. mutans 부착 억제 효과가 있는지 알아본 결과(Fig. 2), 대조군은 606±301 (x103) CFU/ml이었으며, 삼백초 에탄올 주출물 0.025 mg/ml에서는 510±60 (x103) CFU/ml, 0.05 mg/ml 에서는 79±6 (x103) CFU/ml, 0.1 mg/ml에서는 53±8 (x103) CFU/ml, 0.2 mg/ml에서는 41±1 (x103) CFU/ml, 그리고 0.4 mg/ml에서는 0.0±0.001 CFU/ml이었다. 실험 결과, 0.
mutms를 치면에 부착 시켜 다른 미생물을 끌어들여 그 치면에서의 부착, 증식을 가능하게 한다. 삼백초 에탄올 추출물이 치아표면의 세균 부착을 억제하는지 알아보기 위해 S-HA에 대한 부착억제 효과를 확인한 결과 대조군에서는 606±301 (x103) CFU/ml, 0.025 mg/ml 에서는 510±60 (x103) CFU/ml, 0.05 mg/ml 에서는 79±6 (x103) CFU/ml, 0.1 mg/ml에서는 53±8 (x103) CFU/ml, 0.2 mg/ml에서는 41±1 (x103) CFU/ml이 관찰된 반면, 0.4 mg/ml에서는 세균을 관찰할 수 없어 대조군에 비하여 각각 15.8%, 87.0%, 91.2%, 93.2%, 100%의 부착 억제율을 보여 0.05 mg/ml 이상으로 첨가한 군에서 유의한 차이를 볼 수 있었다 (p<0.05). S.
001 CFU/ml이었다. 실험 결과, 0.05 mg/ml 이상의 농도에서 대조군에 비하여 S-HA에 부착하는 균수가 농도 의존적으로 유의한 차이를 보이며 적어졌으며(p<0.05), 대조군에 비해 각각 15.8%, 87.0%, 91.2%, 93.2%, 100%의 부착 억제율을 보였다.
이상의 결과를 종합해 보면, 삼백초 에탄올 추출물은 S. mutans의 성장 억제, 유기산의 생성 억제, S-HA 부착 억제, 비수용성 글루칸 합성 억제에 효과적임을 알 수 있었다. 이에 앞으로 삼백초의 어떤 구성성분이 어떤 효과를 나타내는지에 대해서 순수정제 과정을 거쳐 연구가 더 진행되어야 할 것으로 사료된다.
5이하로 떨어뜨린다찌. 이에 본 연구에서는 삼백초를 에탄올로 추출한 후 0.025, 0.05, 0.1, 0.2, 0.4 mg/ml의 농도별 시료를 사용하여 S. mutans가 대한 성장억제 효과를 관찰한 결과, S. mutans 성장률이 대조군에 비해 0.2 mg/ml 이상의 농도에서 95% 이상의 성장억제 효과를 나타내었다. 또한 삼백초 에탄올 추출물을 넣지 않은 대조군에서 pH는 5.
6%의 생성율을 보여, 삼백초 에탄을 추출물이 비수용성 글루칸 합성 저해 효과가 있는 것으로 나타났다. 특히 삼벅초 에탄올 추출물의 GTFase에 의한 비수용성 글루칸 합성 억제 효과는 대조군에 비하여 0.025 mg/ml 이상의 농도에서 억제능을 보였다(pV).O5).
후속연구
이상의 결과를 토대로 하여 볼 때 삼백초 에탄올 추출물은 성장 억제, 유기산의 생성억제, S-HA에 대한 부착억제, 비 수용성 글루칸 합성 억제에 효과가 있으므로, 항치아우식 효과를 기대할 수 있을 것으로 보인다. 이에 앞으로 삼백초의 어떤 구성성분이 어떤 효과를 나타내는지에 대해서 순수정제 과정을 거쳐 연구가더 진행되어야 할 것으로 사료된다.
mutans의 성장 억제, 유기산의 생성 억제, S-HA 부착 억제, 비수용성 글루칸 합성 억제에 효과적임을 알 수 있었다. 이에 앞으로 삼백초의 어떤 구성성분이 어떤 효과를 나타내는지에 대해서 순수정제 과정을 거쳐 연구가 더 진행되어야 할 것으로 사료된다.
mutans의 성장 억제, 유기산의 생성 억제, S-HA 부착 억제, 비수용성 글루칸 합성 억제에 효과적임을 알 수 있었다. 이에 앞으로 삼백초의 어떤 구성성분이 어떤 효과를 나타내는지에 대해서 순수정제 과정을 거쳐 연구가 더 진행되어야 할 것으로 사료된다.
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