This study was performed to determine the antioxidative and cytotoxic effects of Elaeagnus multiflora by examining its scavenging effects on the 1,1-diphenyl-2-picryl-hydrazyl(DPPH) radical, the inhibition of lipid peroxidation, and its inhibitory effects on cancer cell proliferation in HeLa cells, ...
This study was performed to determine the antioxidative and cytotoxic effects of Elaeagnus multiflora by examining its scavenging effects on the 1,1-diphenyl-2-picryl-hydrazyl(DPPH) radical, the inhibition of lipid peroxidation, and its inhibitory effects on cancer cell proliferation in HeLa cells, MCF-7 cells, and SNU-638 cells by MTT assay. Here, dried samples were extracted in ehtanol at room temperature and fractionated into five different solvent types: hexane, dichloromethane, ethylacetate, butanol, and aqueous partition layers. The hexane(62.92${\pm}$2.45%) and dichloromethane(65.25${\pm}$4.74%) fractions of Elaeagnus multiflora's flesh, and the aqueous(94.65${\pm}$0.02%) and ethylacetate(93.83${\pm}$0.02%) fractions of Elaeagnus multiflora's seeds, inhibited DPPH radical production. The DPPH radical scavenging effects of the flesh and seed were different according to solvent fractions. The inhibition of lipid peroxidation by the flesh and seed extracts were 76.11${\pm}$3.66 and 69.57${\pm}$2.27, respectively, for hexane and 67.57${\pm}$2.43 and 62.09${\pm}$0.90, respectively, for the dichloromethane fraction. Among the various partition layers of Elaeagnus multiflora's flesh, hexane and dichloromethane showed the strong cytotoxicities on all the cancer cell lines used in the study. Also all the fractions of Elaeagnus multiflora's seed exhibited significant effects on the inhibition of cancer cell growth(hexane > dichloromethane > ethylacetate > butanol > aqueous partition layers). These results indicate that the haxane and dichloromethane partition layers of Elaeagnus multiflora's flesh and seed extracts have possible antioxidative and anticancer capacities. Although further studies are needed, the present work suggests that Elaeagnus multiflora may be an antioxidative and chemopreventive agent.
This study was performed to determine the antioxidative and cytotoxic effects of Elaeagnus multiflora by examining its scavenging effects on the 1,1-diphenyl-2-picryl-hydrazyl(DPPH) radical, the inhibition of lipid peroxidation, and its inhibitory effects on cancer cell proliferation in HeLa cells, MCF-7 cells, and SNU-638 cells by MTT assay. Here, dried samples were extracted in ehtanol at room temperature and fractionated into five different solvent types: hexane, dichloromethane, ethylacetate, butanol, and aqueous partition layers. The hexane(62.92${\pm}$2.45%) and dichloromethane(65.25${\pm}$4.74%) fractions of Elaeagnus multiflora's flesh, and the aqueous(94.65${\pm}$0.02%) and ethylacetate(93.83${\pm}$0.02%) fractions of Elaeagnus multiflora's seeds, inhibited DPPH radical production. The DPPH radical scavenging effects of the flesh and seed were different according to solvent fractions. The inhibition of lipid peroxidation by the flesh and seed extracts were 76.11${\pm}$3.66 and 69.57${\pm}$2.27, respectively, for hexane and 67.57${\pm}$2.43 and 62.09${\pm}$0.90, respectively, for the dichloromethane fraction. Among the various partition layers of Elaeagnus multiflora's flesh, hexane and dichloromethane showed the strong cytotoxicities on all the cancer cell lines used in the study. Also all the fractions of Elaeagnus multiflora's seed exhibited significant effects on the inhibition of cancer cell growth(hexane > dichloromethane > ethylacetate > butanol > aqueous partition layers). These results indicate that the haxane and dichloromethane partition layers of Elaeagnus multiflora's flesh and seed extracts have possible antioxidative and anticancer capacities. Although further studies are needed, the present work suggests that Elaeagnus multiflora may be an antioxidative and chemopreventive agent.
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문제 정의
뜰보리수 열매에 대한 식품영양학적 평가 및 기능성 물질발굴을 통하여 식품의 이용가치 및 가공식품 개발 가능성을 평가하고자 뜰보리수 열매의 항산화, 항암 효과가 어느 정도인지 확인해 보고자 한다. 즉, 뜰보리수 열매의 과육과 종실 분획 추출물의 DPPH 라디칼 소거 효과, 지질 과산화 저해 효과를 측정하여 항산화 효과를 비교하였고, MTT assay를 이용하여 인체 자궁경부암 세포인 HeLa cell, 인체 유방암 세포인 MCF-7 cell 및 인체 위암 세포인 SNU-638 cell에 대한 암세포증식 억제 효과를 측정한 결과는 다음과 같다.
제안 방법
냉각된 용액에 n-butanol을 가하고 잘 섞은 다음 3, 000 ipm으로 20분 동안 원심분리하여 (Hanil, Union 5KR, Incheon, Korea) butanol 층을 취하여 535 nm에서 흡광도를 측정 (Molecular Devices, SpectraMAX 340pc)하였다. Fea에 의해 유도된 linoleic acid 의과 산화물을 TBA로 발색시킨 것을 100%로 가정하였을 때, 농도별 저해 einhibition rate, %)을 구하고, 흡광도를 50%로 감소시킬 수 있는 시료의 농도(IGo)와 50% 억제 효과를 보이는 건조중량(diy weight)을 산출하였다.
Saija 등 Haase와 Dunkley 의 방법에 따라 Fe2+°1] 의해 유도된 linoleic acid의 과산화에 대한 억제 활성을 TBA(Thio- barbituric acid, Sigma, MO, USA)로 발색시켜 측정하였다. 10 mt의 10 mM linoleic acid 용액에 시료 20 ul를 가하고 37 ℃ shaking incubator에서 1시간 동안 shaking 시킨 후, 0.
hydrazyl/ethanol) 190 ul를 가한 후, 37℃에서 30분 동안 반응시킨 다음 517 nm에서 흡광도를 측정하였다 (Molecular Devices, SpectraMAX 340pc). 대조구의 흡광도를 100%로 하였을 때 농도별 저해율(inhibition rate, %)을 구하고, DPPH radical을 50% 소거하는 시료의 농도(IC50)와 50% 억제 효과를 보이는 건조 중량(dry weight)을 산출하였다.
이루어지지 않고 있는 실정이다. 따라서 본 연구에서는 여러 약효가 있다고 알려진 뜰보리수 열매에 대한 식품영양학적 평가 및 기능성 물질 발굴을 통하여 식품의 이용 가치 및 가공식품 개발 가능성을 평가하고자 뜰보리수 열매의 과육과 종실 분획 추출물의 DPPH 라디칼 소거 효과, 지질 과산화 저해 효과를 측정하여 항산화 효과를 비교하였고, MTT assay를 이용하여 인체 자궁경부암 세포인 HeLa cell, 인체 유방암 세포인 MCF-7 cell 및 인체 위암 세포인 SNU-638 cell에 대한 암세포 증식 억제 효과를 각각 비교하였다.
여기에 PBS] 5 mg/mC의 농도로 제조한 MTT 용액 30 ul를 첨가하고 동일한 배양조건에서 4시간을 배양하였다. 배양액을 제거하고 각 well 당 DMSO 300 ul를 가하여 ELISA reader(Molecular Devices, Spectra MAX 340pc, CA, USA)로 570 nm에서 흡광도를 측정하여 농도별 저해율(inhibition rate, %)을 구하고, 흡광도를 50%로 감소시킬 수 있는 시료의 농도(IC50)와 50% 억제 효과를 보이는 건조 중량(dry weight)을 산출하였다.
시료 일정 량(50 g)에 95% 에탄올을 가하여 실온에서 24시간 추출한 후 여과하는 과정을 2회 반복하였다. 이때 얻은 에탄올 추출물은 rotary vacuum evaporator(EYELA, Rotary vacuum evaporator N-N series, Tokyo, Japan)로 농축시 킨 후 용매별로 분획하여 hexane 층, dichloromethane 층, ethyl acetate 층, butanol 층 및 물층으로 나누어 비극성에서 극성쪽으로 계통 분획하였다.
추출한 후 여과하는 과정을 2회 반복하였다. 이때 얻은 에탄올 추출물은 rotary vacuum evaporator(EYELA, Rotary vacuum evaporator N-N series, Tokyo, Japan)로 농축시 킨 후 용매별로 분획하여 hexane 층, dichloromethane 층, ethyl acetate 층, butanol 층 및 물층으로 나누어 비극성에서 극성쪽으로 계통 분획하였다.
확인해 보고자 한다. 즉, 뜰보리수 열매의 과육과 종실 분획 추출물의 DPPH 라디칼 소거 효과, 지질 과산화 저해 효과를 측정하여 항산화 효과를 비교하였고, MTT assay를 이용하여 인체 자궁경부암 세포인 HeLa cell, 인체 유방암 세포인 MCF-7 cell 및 인체 위암 세포인 SNU-638 cell에 대한 암세포증식 억제 효과를 측정한 결과는 다음과 같다.
대상 데이터
이들 세포는 서울대학교 의과대학 생화학실험실에서 in vitro 로 배양해 온 것을 사용하였다. HeLa cell 과 MCF-7 cell 은 DMEM 배양액 (HyClone, UT, USA) 에, SNU- 638 celle RPMI-1640 배양액(HyClone, UT, USA)에 5% FBS(fetal bovine serum, HyClone, UT, USA)와 항생제가 첨가된 것을 사용하였다.
본 실험에서 사용된 시료는 뜰보리수 나무에서 직접 채취해 과육과 종실을 분리한 후 동결건조하여 실험 전까지 -20℃에서 냉동 보관하였다.
실험에서 사용한 암세포는 인체 자궁경부암세포인 HeLa cell, 인체 유방암 세포인 MCF-7 cell 및 인체 위암 세포인 SNU-638 cell이었다. 이들 세포는 서울대학교 의과대학 생화학실험실에서 in vitro 로 배양해 온 것을 사용하였다.
cell이었다. 이들 세포는 서울대학교 의과대학 생화학실험실에서 in vitro 로 배양해 온 것을 사용하였다. HeLa cell 과 MCF-7 cell 은 DMEM 배양액 (HyClone, UT, USA) 에, SNU- 638 celle RPMI-1640 배양액(HyClone, UT, USA)에 5% FBS(fetal bovine serum, HyClone, UT, USA)와 항생제가 첨가된 것을 사용하였다.
데이터처리
1)를 이용하여 통계처리 하였다. 모든 실험은 3회 반복하여 평균과 표준 편차를 산출하였고, 각 실험군의 평균치간의 차이의 유의성은 ANOVA 실시 후 pQ05 수준에서 Dncarfs multiple range test로 검정하였다.
실험의 결과는 SAS Package(Statistical Analysis System, ver.5.1)를 이용하여 통계처리 하였다. 모든 실험은 3회 반복하여 평균과 표준 편차를 산출하였고, 각 실험군의 평균치간의 차이의 유의성은 ANOVA 실시 후 pQ05 수준에서 Dncarfs multiple range test로 검정하였다.
이론/모형
Chen 등의 방법에 따라 DMSO 10 ul(대조구)와 DMSO 에 녹여 농도별로 희석한 시료 10 ul에 200 “M DPPH(l, l-di- phenyl-2-pictyl hydrazyl/ethanol) 190 ul를 가한 후, 37℃에서 30분 동안 반응시킨 다음 517 nm에서 흡광도를 측정하였다 (Molecular Devices, SpectraMAX 340pc). 대조구의 흡광도를 100%로 하였을 때 농도별 저해율(inhibition rate, %)을 구하고, DPPH radical을 50% 소거하는 시료의 농도(IC50)와 50% 억제 효과를 보이는 건조 중량(dry weight)을 산출하였다.
암세포 증식억제 효과를 측정하기 위해 Carmichael 등의 방법에 따라 3-(4, 5-dimethylthiazol-2-yl)-2, 5-diphenyltetrazolium bromide(MTT assay)를 실시하였다. MTT assay는 세포의 생육을 측정하는 방법으로서 살아있는 세포의 미토콘드리아 내의 탈수소효소가 황색 수용성 물질인 MIT。] 의해 dark blue formazan을 생성하는 원리를 이용한다.
성능/효과
과육 추출물에서 hexane 층의 IC50값이 190.7 "g/assay으로 가장 효과가 좋았고, 다음이 dichloromethane 층으로 311.9 /@assay이었고, ethylacetate 층, butanol 층, 물 층은 구할 수가 없었다. 종실 추출물에서 IC50값은 물 층(33.
나타내는 건조 중량을 살펴보면 Table 3, 4와 같다. 과육 추출물에서 hexane 층의 ICsq값이 199.5 Rg으로 가장 효과가 좋았고, dichloromethane 층의 IC50값은 297.3 #"assay이었고, ethylacetate 층、butanol 층, 물 층은 효과가 없었다. 종실 추출물에서 竄畐값은 물 층( 12.
1. DPPH 라디칼 소거 효과에 대한 각 과육의 분획 추출물의 효과를 살펴보면 dichloromethane 층(65.25%), hexane 층(62.92%)이 가장 효과가 좋았고 ethylacetate 층(47.13%), butanol 층(18.64%)」물 층(5.01%) 순으로 나타났다. 종실 분획 추출물에서는 물 층(94.
2. 지질 과산화 억제율은 과육 분획물 중 hexane 층(76.11%) 과 dichloromethane 층(67.57%)에서 가장 효과가 좋았고 ethylacetate 층, 물 층의 효과는 거의 없었다. 종실 분획추출물에서는 hexane 층(69.
3. 자궁경부암 세포인 HeLa cell에 대한 성장 억제 효과는 과육의 분획 추출물에서 hexane 층, dichloromethane 층에서 91.89%, 91.32%의 억제 효과를 보였고 ethylacetate 층, butanol 층, 물 층에서는 억제 효과가 낮았다(21.66%, 11.55%, 5.32%). 종실의 분획 추출물에서는 hexane 층, dichloromethane 층에서 91.
4. 인체 유방암 세포인 MCF-7 cell에 대한 성장 억제 효과는 뜰보리수 과육의 분획 추출물에서 hexane 층과 dichloromethane 층에서 각각 90.34%, 87.85%의 억 제 효과를 보였고, ethylacetate 층, butanol 층, 물 층 추출물에서는 억제 효과가 낮았다(15.78%, 7.73%, 4.53%). 종실의 분획 추출물에서는 hexane 층, dichloromethane 층에서 92.
5. 위암 세포인 SNU-638 cell에 대한 암세포 성장 억제 효과는 과육의 분획 추출물에서 hexane 층, dichloromethane 층에서 각각 88.85%, 85.96%의 억제 효과를 보였고 ethylacetate 층, 물 층, butanol 층 추출물에서는 성장 억제 효과가 낮았다(20.42%, 15.53%, 7.50%). 종실의 분획 추출물에서는 hexane 층, dichloromethane 층에서 91.
1, 2와 같다. DPPH 라디 칼 소거 효과에 대한 각 과육 분획 추출물의 효과를 살펴보면 dichloromethane 층(65.25%), hexane 층(62.92%)이 가장 효과가 좋았고 ethylacetate 층(47.13%), butanol 층(18.64%), 물 층(5.01%)순으로 나타났다. Hong 등은 뜰보리수 열매의 과육의 씨를 분리시 킨 다음 분쇄한 과육에서 DPPH radical 소거 효과를 측정하였는데, 물 추출물에 대한 전자공여능은 에탄올 추출물이나 메탄올 추출물에 비해 낮은 농도에서 비교적 높은 활성을 보였다.
07%)의 순으로 나타났다. DPPH 라디칼 소거 활성 효과는 과육 분획 추출물에서는 비극성 쪽 용매 추출물에서, 종실 분획 추출물에서는 극성쪽 용매 분획 추출물에서 그 효과가 높았으며, 농도에 따른 저해율은 각 과육과 종실 분획 추출물의 농도가 증가할수록 DPPH 라디칼 소거 활성이 증가하였다. DPPH 라디칼 소거 효과에 대한 각 과육과 종실의 분획 추출물의 효과를 살펴보면 과육에서 60% 이상의 저해 율을 보여 준 분획은 hexane 층과 dichloromethane 층이었고, 종실에서 90% 이상 저해율을 보여준 분획은 물 층과 ethylacetate 층이었다.
DPPH 라디칼 소거 활성 효과는 과육 분획 추출물에서는 비극성 쪽 용매 추출물에서, 종실 분획 추출물에서는 극성쪽 용매 분획 추출물에서 그 효과가 높았으며, 농도에 따른 저해율은 각 과육과 종실 분획 추출물의 농도가 증가할수록 DPPH 라디칼 소거 활성이 증가하였다. DPPH 라디칼 소거 효과에 대한 각 과육과 종실의 분획 추출물의 효과를 살펴보면 과육에서 60% 이상의 저해 율을 보여 준 분획은 hexane 층과 dichloromethane 층이었고, 종실에서 90% 이상 저해율을 보여준 분획은 물 층과 ethylacetate 층이었다. 따라서 과육과 종실의 DPPH 라디칼 소거 효과는 극성에 따른 용매 분획에 따라 다른 것을 알 수 있었고 과육보다는 종실에서 더 효과적이었다.
MCF-7 cell, MCF-7 cell 과 SNU-638 cell에서 유사한 암세포 성장 억제 효과가 있었는데, 과육보다는 종실에서 더 효과적이었으며 과육에서는 비극성인 hexane 층, dichloromethane 층 추출물에서 그 세포 성장 저해 효과가 우수했으며(85% 이상), ethylacetate 층, butanol 층 물 층 추출물에서는 저해 효과가적었다. 종실의 분획 추출물에서는 hexane 층, dichloromethane 층 ethylacetate 층, butanol 층 물 층 추출물 순으로 모든 분획추출물에서 80% 이상의 억제 효과가 있었다.
71% 억제 효과를 보였고 나머지 분획 추출물에서도 84% 이상의 억제 효과를 보였다. 각각의 분획 추출물 농도에 따른 암세포 성장 억제 효과를 살펴보면, hexane 층 dichloromethane 층, ethylacetate 층, butanol 층 추출물에서는 농도가 높아짐에 따라 억제 효과가 높아졌으나 물 층 추출물에서는 50 “g/assay에서 60.74%, 100 段/assay에서 78.70%, 400 “g/assay에서 84.77%의 저해 효과를 나타내다 그 이상의 농도에서는 농도가 증가함에 따라 저해 효과가 감소하여 물층은 다른 용매 분획물과는 달리 저농도에서 효과적으로 SNU-638 cell의 성장 억제 효과를 보였다.
50%). 각각의 분획 추출물 농도에 따른 암세포 성장 억제 효과를 살펴보면, hexane 층은 600 班/assay에서 가장 높은 억 제 효과를 보였고, dichloromethane 층은 농도가 높아짐에 따라 억제 효과가 높아졌다.
87%의 억제 효과를 보였고, 나머지 분획추출물에서도 84% 이상의 억제 효과를 보였다. 각각의 분획추출물 농도에 따른 HeLa cell 성장 억제 효과를 살펴보면, 종실 분획 추출물의 경우 hexane 층, dichloromethane 층, ethylacetate 층, butanol 층에서는 농도가 높아짐에 따라 억제 효과가 높아졌으나, 물 층 추출물에서는 100 “攻assay에서 80.20% 의 저해 효과를 나타내어 다른 분획물과 다르게 저 농도에서 효과적이었다.
44% 이상 억제 효과를 보였고, 나머지 분획추출물에서도 83% 이상의 억제 효과를 보였다. 각각의 분획추출물 농도에 따른 암세포 성장 억제 효과를 살펴보면, hexane 층 dichloromethane 층, ethylacetate 층、butanol 층 추출물에서는 농도가 높아짐에 따라 억제 효과가 높아졌으나, 물 층 추출물에서는 100 昭/assay에서 78.66%의 저해 효과를 나타내어 다른 분획물과는 다르게 저 농도에서 효과적으로 MCF-7 cell에 대한 성장 억제 효과를 보였다.
3, 4 와 같다. 과육 분획물 중 hexane 층(76.11%)과 dicMoromethane 층(67.57%)은 가장 효과가 좋았고, 상대적으로 ethylacetate 층 물 층의 효과는 적었다. 종실 분획 추출물에서는 hexane 층 (69.
건조 중량은 Table 3, 4와 같다. 과육 추출물에서 hexane 층의 IC50값은 185.9 昭/assay으로 가장 효과가 좋았고 dichloromethane 층이 240.2 姒assay, ethylacetate 층이 52, 088.0 姒assay이었으며, butanol 층, 물 층은 효과가 없었다. 종실 추출물에서 心)값은 물 층(26.
57%의 저해율을 보여주었고 그 이상의 농도에서 농도가 증가할수록 저해율이 감소하였고 ethylacetate 층과 물 층의 효과는 거의 없었지만 농도가 증가할수록 감소하는 경향을 보였다. 과육과 종실 분획 추출물 모두에서 60% 이상의 지질 과산화 억제율을 보여 준 분획은 hexane 층과 dichloromethane 층으로 비극성 분획에서 효과적이었다.
57%의 저해율을 보여주었고 그 이상의 농도에서 농도가 증가할수록 저해율이 감소하였고 ethylacetate 층과 물 층의 효과는 거의 없었지만 농도가 증가할수록 감소하는 경향을 보였다. 과육과 종실 분획 추출물 모두에서 60% 이상의 지질 과산화 억제율을 보여 준 분획은 hexane 층과 dichloromethane 층으로 비극성 분획에서 효과적이었다.
5, 6과 같다. 과육의 분획 추출물에서 HeLa cell에 대한 성장 억제 효과는 hexane 층, dichloromethane 층에서 91.899와 91.32%의 억제 효과를 보였고 ethylacetate 층, butanol 층, 물 층에서는 억제 효과가 낮았다(21.66%, 11.55%, 5.32%). 농도에 따른 암세포 성장 억제 효과를 살펴보면, 과육 분획 추출물에서 hexane 층은 600 网assay에서 가장 높은 억제 효과를 보였고, dichloromethane 층은 분획 추출물 농도가 증가함에 따라 억제 효과가 높아졌다.
67%) 순이었다. 농도별로 살펴보면, 대부분의 분획 추출물에서 농도가 증가할수록 지질 과산화 억제 활성이 증가하였으나, 과육 분획 추출물 중 dichloromethane 층은 100 “g/assay 농도에서 67.57%의 저해율을 보여주었고 그 이상의 농도에서 농도가 증가할수록 저해율이 감소하였고 ethylacetate 층과 물 층의 효과는 거의 없었지만 농도가 증가할수록 감소하는 경향을 보였다. 과육과 종실 분획 추출물 모두에서 60% 이상의 지질 과산화 억제율을 보여 준 분획은 hexane 층과 dichloromethane 층으로 비극성 분획에서 효과적이었다.
32%). 농도에 따른 암세포 성장 억제 효과를 살펴보면, 과육 분획 추출물에서 hexane 층은 600 网assay에서 가장 높은 억제 효과를 보였고, dichloromethane 층은 분획 추출물 농도가 증가함에 따라 억제 효과가 높아졌다.
DPPH 라디칼 소거 효과에 대한 각 과육과 종실의 분획 추출물의 효과를 살펴보면 과육에서 60% 이상의 저해 율을 보여 준 분획은 hexane 층과 dichloromethane 층이었고, 종실에서 90% 이상 저해율을 보여준 분획은 물 층과 ethylacetate 층이었다. 따라서 과육과 종실의 DPPH 라디칼 소거 효과는 극성에 따른 용매 분획에 따라 다른 것을 알 수 있었고 과육보다는 종실에서 더 효과적이었다. Kang 등끄)에 의하면 DPPH 라디칼 소거 활성 효과는 phenolic acids, flavonoids 및 기타 phen이성 물질에 의한 항산화 작용이며, 이러한 물질의 환원력이 클수록 DPPH 라디칼 소거 활성이 크다고 하였다.
07%)의 순으로 나타났다. 따라서 과육과 종실의 DPPH 라디칼 소거 효과는 극성에 따른 용매분획 에 따라 그 효과가 다른 것을 알 수 있었고 과육보다는 종실에서 더 효과적이었다.
53%). 분획 추출물 농도에 따른 암세포 성장 억제 효과를 살펴보면, hexane 층은 600 姒assay에서 가장 높은 억제 효과를 보였고, dichloromethane 층은 농도가 높아짐에 따라 억제 효과가 높아졌다.
Hong 등은 뜰보리수 열매의 과육의 씨를 분리시 킨 다음 분쇄한 과육에서 DPPH radical 소거 효과를 측정하였는데, 물 추출물에 대한 전자공여능은 에탄올 추출물이나 메탄올 추출물에 비해 낮은 농도에서 비교적 높은 활성을 보였다. 전체적으로 메탄올 추출물에서 높은 활성을 나타내었으며 뜰보리수 추출물의 농도가 증가할수록 전자공여 능이 증가하는 경향을 나타내었는데, 이는 본 연구 결과와도 일치하였다. Song 등*은 찔레영지버섯 추출물의 DPPH radical 소거 활성이 농도에 의존적인 경향을 나타내었다고 보고하였다.
57%)은 가장 효과가 좋았고, 상대적으로 ethylacetate 층 물 층의 효과는 적었다. 종실 분획 추출물에서는 hexane 층 (69.57%)이 가장 높은 효과를 보였고, dichloromethane 층(62.09%), ethylacetate 층(54.09%), butanol 층(48.83%), 물 층(26.67%) 순이었다. 농도별로 살펴보면, 대부분의 분획 추출물에서 농도가 증가할수록 지질 과산화 억제 활성이 증가하였으나, 과육 분획 추출물 중 dichloromethane 층은 100 “g/assay 농도에서 67.
01%) 순으로 나타났다. 종실 분획 추출물에서는 물 층(94.65%), ethylacetate 층(93.83%) 이 가장 효과가 좋았고 butanol 층(65.91%), dichloromethane 층(45.31%), hexane 층(41.07%)의 순으로 나타났다. 따라서 과육과 종실의 DPPH 라디칼 소거 효과는 극성에 따른 용매분획 에 따라 그 효과가 다른 것을 알 수 있었고 과육보다는 종실에서 더 효과적이었다.
0 姒assay이었으며, butanol 층, 물 층은 효과가 없었다. 종실 추출물에서 心)값은 물 층(26.4 //g/assay)에서 가장 효과가 좋았고, 다음이 butanol 층(282.7 /zg/assay), ethylacetate 층(285.3 昭 /assay), dichloromethane 층(288.2 //g/assay), hexane 층(404.3 fig /assay) 순이었다.
3 #"assay이었고, ethylacetate 층、butanol 층, 물 층은 효과가 없었다. 종실 추출물에서 竄畐값은 물 층( 12.6 飓/assay)에서 가장 효과가 좋았고, 다음이 dichloromethane 층(258.3 丿姒assay), ethylacetate 층 (334.7 网assay), hexane 층(354.7 园assay), butanol 층(439.0 /zg/assay) 순이었다.
즉, 뜰보리수 과육에서 비극성층인 hexane 층과 di사iloromethane 층은 85% 이상의 성장 억제 효과를 보였으며, ethylacetate 층, 물층, butanol 층 추출물에서는 성장 억제 효과는 낮았다. 종실의 경우 비극성층인 hexane 층과 dichloromethane 층은 90% 이상의 성장 억제 효과를 보였으며, 나머지 모든 용매 분획물에서도 80% 이상의 성장 억제 효과가 있었다.
종실의 분획 추출물에서는 hexane 층, dichloromethane 층 ethylacetate 층, butanol 층 물 층 추출물 순으로 모든 분획추출물에서 80% 이상의 억제 효과가 있었다.
종실의 분획 추출물에서는 hexane 층, dichloromethane 층에서 91.02%, 91.71% 억제 효과를 보였고 나머지 분획 추출물에서도 84% 이상의 억제 효과를 보였다. 각각의 분획 추출물 농도에 따른 암세포 성장 억제 효과를 살펴보면, hexane 층 dichloromethane 층, ethylacetate 층, butanol 층 추출물에서는 농도가 높아짐에 따라 억제 효과가 높아졌으나 물 층 추출물에서는 50 “g/assay에서 60.
32%). 종실의 분획 추출물에서는 hexane 층, dichloromethane 층에서 91.98%, 91.87% 억제 효과를 보였고 나머지 분획 추출물에서도 84% 이상의 억제 효과를 보였다.
종실의 분획 추출물에서는 hexane 층, dichloromethane 층에서 91.98%와 91.87%의 억제 효과를 보였고, 나머지 분획추출물에서도 84% 이상의 억제 효과를 보였다. 각각의 분획추출물 농도에 따른 HeLa cell 성장 억제 효과를 살펴보면, 종실 분획 추출물의 경우 hexane 층, dichloromethane 층, ethylacetate 층, butanol 층에서는 농도가 높아짐에 따라 억제 효과가 높아졌으나, 물 층 추출물에서는 100 “攻assay에서 80.
53%). 종실의 분획 추출물에서는 hexane 층, dichloromethane 층에서 92.01%, 91.44% 억제 효과를 보였고 나머지 분획 추출물에서도 83% 이상의 억제 효과를 보였다.
종실의 분획 추출물에서는 hexane 층, dichloromethane 층에서 92.01%, 91.44% 이상 억제 효과를 보였고, 나머지 분획추출물에서도 83% 이상의 억제 효과를 보였다. 각각의 분획추출물 농도에 따른 암세포 성장 억제 효과를 살펴보면, hexane 층 dichloromethane 층, ethylacetate 층、butanol 층 추출물에서는 농도가 높아짐에 따라 억제 효과가 높아졌으나, 물 층 추출물에서는 100 昭/assay에서 78.
9, 10과 같다. 즉, 과육의 분획 추출물에서 hexane 층 dichloromethane 층에서 각각 88.85%, 85.96%의 억제 효과를 보였고 ethylacetate 층, 물 층, butanol 층 추출물에서는 성장 억제 효과가 낮았다 (20.42%, 15.53%, 7.50%). 각각의 분획 추출물 농도에 따른 암세포 성장 억제 효과를 살펴보면, hexane 층은 600 班/assay에서 가장 높은 억 제 효과를 보였고, dichloromethane 층은 농도가 높아짐에 따라 억제 효과가 높아졌다.
7, 8과 같다. 즉, 과육의 분획 추출물에서 hexane 층과 dichloromethane 층에서 각각 90.34%, 87.85%의 억제 효과를 보였고 ethylacetate 층, butanol 층 물 층 추출물에서는 억제 효과가 낮았다(15.78%, 7.73%, 4.53%). 분획 추출물 농도에 따른 암세포 성장 억제 효과를 살펴보면, hexane 층은 600 姒assay에서 가장 높은 억제 효과를 보였고, dichloromethane 층은 농도가 높아짐에 따라 억제 효과가 높아졌다.
억제 효과는 매우 유사한 경향을 나타내었다. 즉, 뜰보리수 과육에서 비극성층인 hexane 층과 di사iloromethane 층은 85% 이상의 성장 억제 효과를 보였으며, ethylacetate 층, 물층, butanol 층 추출물에서는 성장 억제 효과는 낮았다. 종실의 경우 비극성층인 hexane 층과 dichloromethane 층은 90% 이상의 성장 억제 효과를 보였으며, 나머지 모든 용매 분획물에서도 80% 이상의 성장 억제 효과가 있었다.
후속연구
뜰보리수의 과육과 종실 분획 추출물에서 항산화 효과와 암세포 성장 억제 효과에 의해 새로운 기능성 식품의 소재로서 활용 가능성이 높을 것으로 추측되며 아울러 각종 기능성 식품 개발의 기초 자료로서 국민 건강 증진에 기여할 것으로 이에 대한 계속적인 연구가 진행되어야 할 것으로 사료된다.
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