선택한 단어 수는 입니다.
최소 단어 이상 선택하여야 합니다.
최소 단어 이상 선택하여야 합니다.
선택한 단어 수는 30입니다.
최대 10 단어까지만 선택 가능합니다.
최대 10 단어까지만 선택 가능합니다.
문제 정의
- 따라서, 본 연구는 하수오로부터 구성성분을 분리하고 HPLC에 의한 함량평가법을 확립하여 국내 약령시장에 유통되고 있는 하수오의 성분함량 및 이화학적 규격을 분석하였기에 이를 보고하고자 한다 하수오의 함량 및 이화 학적 기준 설정은 백수오의 하수오로 오용을 막고 올바른 유통체계를 확립하는데 기여를 할 것으로 사료된다.
제안 방법
- 1. 하수오 7 kg의 메탄올엑스를 물 분획과 에테르, 에틸아세테이트 분획으로 나누고 에테르 분획을 다시 실리카 겔과 ODS 겔 등을 이용한 반복적인 컬럼크로마트그래피법을 이용하여 3개의 단일 성분을 분리하였으며 그 중 2개의 물질 성분은 1H-NMR, 13C-NMR, El-Mass등 기기분석을 통하여 physdon고} cu-hydroxyemoQn으로 동정하였다.
- 무게를 각각 l.OOmg, 1.03mg, 1.33mg, 1.22mg, L03mg으로 정 밀하게 달아 HPLC용 메탄올 10 mL에 녹이고 이것을 stock solution으로 단계적으로 희석 하여 검액을 만들어 검 량용 표준용액으로 하였다 각각의 표준용액 10 를 HPLC로 분석하여 chromatogram의 면적을 구하고 농도와 면적에 따른 검량선을 그어 함량계산을 실시하였다. 회귀방정식은 각각 y=838.
- 여액을 모두 합한 다음 감압하에서 용매를 날려 보내고 잔류물을 물 50 mL로 녹인 후 동량의 에테르로 2회 분획한 다음 에테르층을 탈수하여 감압 하에서 용매를 날려 보내고 메탄올을 넣어 정확하게 100 mL로 하여 검액으로 사용하였다. 각각의 검액을 10 uL씩 HPLC로 분석하여 얻은 chromatogram의 면적을 구하여 회귀직선 방정식으로부터 각각의 지표물질의 함량을 구하였다(Figure. 1).
- 국내산 하수오 7kg을 메탄올로 3회 추출 여과하여 감압 농축시킨 후 메탄올엑스를 3차 증류수로 현탁시킨 후 같은 양의 에테르를 가하여 3회 분획한 후 감압 농축하여 에테르 에틸아세테이트 물 엑스를 얻었다. 에테르 엑스를 실리카겔을 이용한 column chromatography (헥산 t 에칠아세테이트 gradient)를 시행하여 12개의 분획으로 나누고 이 중 3개의 분획에서 단일 화합물을 순수 분리하였다(Figure.
- 본 연구는 국내 유통되고 있는 하수오의 주성분을 분리하고 정제법을 확립하기 위하여 column chromatography# 실시하여 지표성분으로 설정하고 HPLC 분석기기를 이용한 객관적이고 과학적인 정량법을 실시하여 다음과 같은 결론을 얻었다.
- 에틸아세테이트 물 엑스를 얻었다. 에테르 엑스를 실리카겔을 이용한 column chromatography (헥산 t 에칠아세테이트 gradient)를 시행하여 12개의 분획으로 나누고 이 중 3개의 분획에서 단일 화합물을 순수 분리하였다(Figure. 2).
- 표준액 및 검액의 HPLC 분석조건으로 column은 Luna Ce⑵ (4.6 x 250 mm, 5 ㎛, Phenomenex)를 사용하였고 이동상으로는 0.1% phosphoric acid : acetonitrile의 비율 70 : 30로 60분간 0 : 100 (v/v)의 비율이 되도록 하고 유속은 1.0 mL/min의 분석조건으로 Photodiodearray Detector를 이용하여 분석하였다(Table 1).
대상 데이터
- A)사의 HPLC급 시약을 사용하였다. TLC plate는 Kieselgel 60 F2& 와 RP-18 F^CMerck) 를 사용하였고 HPLC 는 Waters(USA)사의 Alliance 2695 system, Photodiode Array Detector 2996 system, column은 Luna Ci8(4.6 x 250 mm, 5㎛, Phenomenex), 1H-NMR은 Broker DNX 600 MHz, 13C-NMR은 Bruker DNX 150 MHz(Germany), EI-MS는 JEOL JMS 60(XJapan)을 사용하였다
- 본 실험에서 지표성분 분리를 위하여 사용한 하수오 7 kg은 전북 진안 숙근 약초시험장에서 직접 구입하여 세척건조 후 사용하였으며 유통품의 품질실태 파악을 위하여구입한 하수오는 전국의 약재시장에서 유통되는 중국산 27 점과 한국산 3점, 총 30점을 지역별로 수집, 분류하고 분쇄하여 실험에 사용하였다
성능/효과
- 분포한다. 1) 한방에서는 苦甘源 微溫하고 간(肝), 신경(腎經)으로 들어가 보익청혈(補益淸血), 윤장통변(潤腸通便), 해창독(解瘡毒)의 효능이 있다.架)
- 2. 중국산과 한국산으로 구별하여 구입한 유통품 하수오 30점의 이화학적 실험결과 건조감랴 회분함량, 산 불용성 회분 함량은 각각 1개의 시료를 제외한 모든 시료가 규격인 14.0% 이하, 5.0%이하, 1.5%이하로 나타났다. 묽은 에탄올 엑스는 시료모두 공정서 기준인 17.
- 3. 하수오로부터 분리된 emodin, physcion, w-hydroxye modin과 chrysophanol, rhein을 지표성분으로 하여 유통품 30점에 대해 HPLC 분석을 통한 함량정량 분석 결과 모든 시료에 chrysophanol, emodin, physcion, rhein, w-hydroxy enrdn이 함유되어 있는 것으로 확인할 수 있었고 그 함량은 평균 chrysophanol 0.016%, emodin 0.271%, physcion 0.51 1%, rhein 0.077%, w-hydroxyemodin 0.027%로 나타났고 시료들 간의 편차가 매우 크게 나타나 다양한 품질의 하수오가 유통되고 있는 것으로 확인되었다.
- 4. 기존의 문헌13)의 결과에서는 13점의 하수오 유통품에서 emodin 정량 결과 0.021%로 확인된 바 있으나 본 실험에서는 유통품 30점을 이용하여 실험한 결과 0.271%로 약 10 배 이상 높게 나타났으며 physcion의 함량은 평균 0.478%로 emodin의 함량보다 훨씬 높은 것으로 나타났다.
- Emodin, chrysophanol, physidon, rhein, w-hydroxyemodiii 의 peak는 각각 30.3 min, 38.8 min, 41.9 min, 22.3 min, 15.3min에 각각 분리되어 나타남을 확인하였으며 하수오 시료에서의 분리도 확인하였다. 하수오의 대표적인 물질로 emodin이 알려져 있으나 유통품 30점에 대하여 5가지 성분의 함량분석 결과 physcion 의 함량이 emodin 의 함량보다 높은 것으로 확인되었으며 유통품 평균 0.
- 국내 유통중인 하수오 30점에 대한 이화학 규격 시험 결과 건조감량은 평균 10.07%로 1개의 시료를 제외한 모든 시료가 공정서 기준 14.0% 이하로 적합하였고 회분 함량은 평균 4.25%로 1개의 시료를 제외한 모든 시료가 공정서 기준 5.0% 이하로 나타났다. 산불용성회분함량은 평균 0.
- 37%로 공정서 기준보다 훨씬 높은 수치를 나타내었다. 그러나 묽은 에탄올 엑스함량 시험결과 모든 시료가 공정서 기준 17.0% 이상으로 적합하였으며 물엑스 함량은 공정서에 미수재 되어 있으나 실험결과 평균 21.62%로 시료에 따라 11.64~31.53%로 다양하게 나타났다(Table 2).
- 62 (1H, s) ppm으로 4개의 proton 이 각각 meta coupling 하고 있음을 추측할 수 있었다. 또한 6 3.94과 6 2.46에서 methoxyl 및 methyl group signal을 확인하였다 13C-NMR에서는 총 16개의 car bon signal이 나타났으며 5 187.5과 S 187.9 pp에서 두 개의 ketone기의 carbon을 확인하였고 또한 S 56.3 ppm에서 하나의 methoxy group와 S' 22.9 ppm에서 한 개의 meth yl group에 해당하는 특징적인 signal이 관찰되었다. 이상의 spectral data를 바탕으로 compound 1은 CigHwCk 의 분자식을 갖는 anthraquinone 계열로 추정하고 문헌의 물리 화학적 성상 및 기기분석 data와 비교 검토한 결과 phys don으로 동정하였다(Figure.
- 990%로 그 함량차이가 컸다. 또한 대부분의 시료는 emo din 함량이 높을수록 physcion의 함량 또한 높은 것으로 나타났다. 앙rysophanol의 함량은 평균 0.
- 5%이하로 나타났다. 묽은 에탄올 엑스는 시료모두 공정서 기준인 17.0% 이상을 나타내었고 공정서에 기준이 설정되어 있지 않은 물엑스는 평균 21.6% 를 나타내었다.
- 9 ppm에서 한 개의 meth yl group에 해당하는 특징적인 signal이 관찰되었다. 이상의 spectral data를 바탕으로 compound 1은 CigHwCk 의 분자식을 갖는 anthraquinone 계열로 추정하고 문헌의 물리 화학적 성상 및 기기분석 data와 비교 검토한 결과 phys don으로 동정하였다(Figure. 2).
- 7 ppm에서 C&OH에 해당하는 특징적인 signal이 관찰되었다. 이상의 spectral data를 바탕으로 compound 3은 C15H10O6 의 분자식을 갖는 anthraquinone 계열로 추정하고 문헌®의 물리 화학적 성상 및 기기분석 data와 비교 검토한 결과 3 -hydroxyemodin으로 동정하였다(Figure. 2).
- 3min에 각각 분리되어 나타남을 확인하였으며 하수오 시료에서의 분리도 확인하였다. 하수오의 대표적인 물질로 emodin이 알려져 있으나 유통품 30점에 대하여 5가지 성분의 함량분석 결과 physcion 의 함량이 emodin 의 함량보다 높은 것으로 확인되었으며 유통품 평균 0.511%였으나 시료에 따라 0.044~2.105%로 그 함량차이가 크게 나타났다. Emodin의 함량은 평균 0.
- 하수오의 메탄올 추출물을 증류수로 현탁한 후 같은 양의 에테르와 에칠아세테이트을 가하여 3회 분획 후 감압농축 하여 에테르, 에칠아세테이트 물 엑스를 얻어, 이 중에테르 분획물을 대상으로 column chromatography를 실시하여 3개의 단일화합물을 얻었으며 이 중 3개의 화합물 compound 1은 미황색의 침상결정이며 특성이 유사한 물질로 UV 365 nm에서 노란색의 반점으로 나타났고 UV 254 nm에서 갈색으로 나타났다. Compound 2는 주황색, com pound 3은 적갈색 침상결정이며 UV 365 nm에서 주황색, UV 254 nm에서 갈색을 나타내었다.
※ AI-Helper는 부적절한 답변을 할 수 있습니다.