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문제 정의
- 따라서 본 연구는 국내 젖소에서 브루셀라병의 정확한 검색을 위해 브루셀라병으로 살처분 되었거나 음성으로 판정된 혈청을 대상으로 하여 indirect ELISA (ELISA) < TAT, CFT, RBT 등으로 그 결과를 상호 비교하여 국내에서의 사용 여부를 확인하였다.
제안 방법
- TAT, CFT17) 그리고 RBT18)는 국가 공인진단법에 따라 실험을 수행하여, 항체 역가를 측정한 후 그 결과를 판독하였으며, ELISA 는 제조사의 방법에 따라 실험을 수행한 후 제조사에서 정한 기준에 따라 그 결과를 판독하였다. 즉, kit에 동봉된 음성 표준 혈청을 포함한 가검 혈청에 대한 흡광도 치를 동봉된 양성 표준 혈청에 대한 흡광도 치로 나눈 후 100을 곱한 다음 나온 수치 (percent positivity; PP) 가 25보다 크면 양성으로, 25 이하면 음성으로 판정하였다.
- 즉, kit에 동봉된 음성 표준 혈청을 포함한 가검 혈청에 대한 흡광도 치를 동봉된 양성 표준 혈청에 대한 흡광도 치로 나눈 후 100을 곱한 다음 나온 수치 (percent positivity; PP) 가 25보다 크면 양성으로, 25 이하면 음성으로 판정하였다.
대상 데이터
- TAT와 CFT 그리고 RBT용 진단 항원은 수의과학 검역원으로부터 제공받아 실험에 사용하였으며, ELISA용 항원은 Svanova 사 Brucella—Ab I—ELISA 진단 kit (Svanova Biotech AB, Sweden) 을 사용하였다 .
- 경기도, 충남.북, 제주도 그리고 전북 등지에서 브루셀라병 감염 양성, 의양성, 음성 등으로 판정된 소 혈청 109건을 실험에 사용하였다.
성능/효과
- 같다. 즉, 109 두 중 RBT에서 양성으로 판정된 38두에서 35두는 ELISA에서 양성으로 관찰되었지만 나머지 3두는 ELISA에서 PP가 25 이하로 음성이었으며, RBT에서 음성으로 판정된 기두 중 2두는 ELISA에서 PP 25 이상으로 양성으로, 그리고 나머지 69두는 음성으로 관찰되었다.
- 2와 그림 2에서와 같았다. 즉, 109 두 중에서 TAT에서 양성으로 판정된 36두 중 33두는 ELISA에서 양성으로 관찰되었지만 나머지 3두는 ELISA에서 음성으로 관찰된 반면, TAT에서 의양성으로 판정된 26두 중 3두는 ELISA에서 양성으로 그리고 나머지 23두는 음성으로 관찰되었으며, TAT에서 음성으로 판정된 47두 중 46두는 ELISA에서 음성으로 그리고 나머지 1두 만 양성으로 관찰되었다.
- 브루셀라병 확정검사에 사용되는 CFT와 ELISA 의 항체역가를 비교하여 본 결과 Table 3과 그림 3에서 보는 바와 같이 109 두 중 CFT에서 양성인 37두 모두 ELISA에서 양성으로, CFT에서 음성인 72두 모두 ELISA에서 음성으로 관찰되었다.
- ELISA와 CFT 및 RBT 그리고 TAT 항체역가의 상관관계를 비교하여 본 결과는 Table 4 에서 보는 바와 같이 ELISA와 CFT 에서 양성인 37두가 RBT에서는 35두에서 양성으로 관찰되었고 이 35두는 TAT에서 33두는 양성, 1두는의양성 그리고 나머지 1두는 음성으로 관찰되었으며 ELISA와 CFT에서는 양성이었지만 RBT 에서 음성으로 관찰된 2두 모두 TAT에서 의 양성으로 관찰되었다. 그리고 ELISA와 CFT에서음성으로 관찰된 72두 중 69두는 RBT에서도 음성으로 관찰되었고 이 69두 중에서 44두만이 TAT에서 음성으로, 22두는 의양성으로 그리고 2두는 양성으로 관찰된 반면, ELISA와 CFT에 서는 음성이었지만 RBT에서 양성으로 관찰된 인 3두가 TAT에서는 각 1두씩이 양성, 의양성, 음성으로 관찰되었다.
- 관찰되었다. 그리고 ELISA와 CFT에서음성으로 관찰된 72두 중 69두는 RBT에서도 음성으로 관찰되었고 이 69두 중에서 44두만이 TAT에서 음성으로, 22두는 의양성으로 그리고 2두는 양성으로 관찰된 반면, ELISA와 CFT에 서는 음성이었지만 RBT에서 양성으로 관찰된 인 3두가 TAT에서는 각 1두씩이 양성, 의양성, 음성으로 관찰되었다.
- 있는 실정이다 5). 본 실험에서도 국내 소에서 브루셀라병을 좀 더 빠르고 신속하면서 정확하게 검색하기 위한 한 방법으로 최근 OIE 등에서 권장하고 있는 B abortus의i lipopolysaccharide (LPS) < 이용한 ELISA5) 진단 kit을 국내에서 사용되고 있는 각종 브루셀라병 검색 진단법과 비교하기 위해 1995년부터 2004년까지 브루셀라병으로 판정되어 살처분 되었거나 음성으로 판정된 109두의 소 혈청을 대상으로 하여 TAT와 CFT 그리고 RBT 등으로 그 결과를 상호 비교하여 본 결과, 국내에서 소 브루셀라병 screening test 로 주로 사용되고 있는 RBT에서 양성으로 판정된 38두 중 35두가 ELISA와 CFT에서양성이었고 나머지 3두는 ELISA어서 음성기준치인 PP 25보다도 낮은 10이하로 관찰되었으며 CFT에서도 역가가 1:10이하로 음성으로 관찰되었고 TAT에서는 양성 (1:800) 1두, 의양성 (1:±50) 1두 그리고 음성 (1:25) 1두로 각각 관찰되었다. RBT에서 음성으로 판정된 기두 중 2두는 ELISA에서 PP 29이상으로 그리고 CFT에서는 1:20의 역가 관찰되었으며 TAT에서는 1:50으로 의 양성 반응이 관찰되었다.
- RBT에서 음성으로 판정된 기두 중 2두는 ELISA에서 PP 29이상으로 그리고 CFT에서는 1:20의 역가 관찰되었으며 TAT에서는 1:50으로 의 양성 반응이 관찰되었다. 이는 최근 개발되어 전 세계적으로 그 사용이 증가하고 있는 B abortus LPS를 이용한 ELISA경우 민감도에 있어서는 RBT의 결과와 일치하거나 그 이상이라는 보고5J5J9)와 일치한 결과가 관찰되어 국내에서 소 브루셀라병 진단을 위한 screening test로 ELISA 또한 RBT와 더불어 사용 가능함을 확인할 수 있었다.
- 있다5). 본 실험에서도 109두의 소 혈청으로 TAT와 ELISA를 상호 비교하여 본 결과, TAT에서 양성으로 판정된 36두 중 33두는 ELISA와 CFT 그리고 RBT 모두에서도 양성의 결과가 관찰된 반면, TAT 항체가 1:100의 2두와 1:80051 1두는 ELISA에서 PP가 20이하로 음성으로 관찰되었으며, 같은 가검물에서 RBT의 경우에는 TAT 역가 1:100의 가검물 모두에서는 응집반응이 관찰되지 않았지만 1:800의 가검물에서는 응집반응이 관찰되었다. 그리고 TAT에서 항체가가 높을수록 ELISA 에서도 대체로 높은 PP 수치가 관찰되었으며, TAT에서 음성으로 관찰된 47두 충 46두는 ELISA와 CFT 모두에서 음성으로 관찰된 반면 1두는 PP가 89이상의 매우 높은 수치로 양성으로 관찰되었는데 이는 RBT에서도 응집반응이 관찰되었고 CFT에서는 1:20으로 양성으로 관찰되었다.
- 본 실험에서도 109두의 소 혈청으로 TAT와 ELISA를 상호 비교하여 본 결과, TAT에서 양성으로 판정된 36두 중 33두는 ELISA와 CFT 그리고 RBT 모두에서도 양성의 결과가 관찰된 반면, TAT 항체가 1:100의 2두와 1:80051 1두는 ELISA에서 PP가 20이하로 음성으로 관찰되었으며, 같은 가검물에서 RBT의 경우에는 TAT 역가 1:100의 가검물 모두에서는 응집반응이 관찰되지 않았지만 1:800의 가검물에서는 응집반응이 관찰되었다. 그리고 TAT에서 항체가가 높을수록 ELISA 에서도 대체로 높은 PP 수치가 관찰되었으며, TAT에서 음성으로 관찰된 47두 충 46두는 ELISA와 CFT 모두에서 음성으로 관찰된 반면 1두는 PP가 89이상의 매우 높은 수치로 양성으로 관찰되었는데 이는 RBT에서도 응집반응이 관찰되었고 CFT에서는 1:20으로 양성으로 관찰되었다. TAT에서 의양성으로 관찰된 26두 중 23두는 ELISA와 CFT에서 음성으로 관찰되었고, 나머지 3두는 ELISA에서 PP가 25 이상이었고 CFT에선 1:20 이상으로 양성으로 관찰된 반면 RBT의 경우에는 2두는 음성을 그리고 나머지 1두는 양성으로 관찰되었다.
- 그리고 TAT에서 항체가가 높을수록 ELISA 에서도 대체로 높은 PP 수치가 관찰되었으며, TAT에서 음성으로 관찰된 47두 충 46두는 ELISA와 CFT 모두에서 음성으로 관찰된 반면 1두는 PP가 89이상의 매우 높은 수치로 양성으로 관찰되었는데 이는 RBT에서도 응집반응이 관찰되었고 CFT에서는 1:20으로 양성으로 관찰되었다. TAT에서 의양성으로 관찰된 26두 중 23두는 ELISA와 CFT에서 음성으로 관찰되었고, 나머지 3두는 ELISA에서 PP가 25 이상이었고 CFT에선 1:20 이상으로 양성으로 관찰된 반면 RBT의 경우에는 2두는 음성을 그리고 나머지 1두는 양성으로 관찰되었다.
- 이상의 결과는 최근 개발되어 전 세계적으로 그 사용이 증가하고 있는 B abortus LPS 를 이용한 ELISA는 민감도에 있어서는 RBT 의 결과와 일치하거나 그 이상이며, 특이도에 있어서는 CFT의 결과와 일치하거나 좀 더 정확하다고 보고된 결과5, i5, i9)와 일치함을 확인 할 수 있었다.
- 그리고 비록 CFT가 그 진단법을 수행함에 있어 좋은 실험실 설비와 고도의 숙련된 기술자를 요하지만 전 세계적으로 확정 진단법으로 인정되고 있으며 또한 사용5)되어 오고 있어, CFT와 ELISA를 비교하여 본 결과, CFT에서 양성과 음성으로 관찰된 모든 혈청은 ELISA에서도 같은 결과가 관찰되었는데 이는 최근 개발되어 전 세계적으로 그 사용이 증가하고 있는 B abortus LPS를 이용한 ELISA는 민감도에 있어서는 RBT의 결과와 일치하거나 그 이상이며, 특이도에 있어서는 CFT의 결과와 일치하거나 좀 더 정확 G 하다고 알려져 있는데 본 실험에서도 CFT에서 음성인 소 혈청 모두 ELISA에서 음성이었고 또한 RBT에서 양성인 경우에는 ELISA에서 대다수의 가검물에서 양성이었으며 또한 RBT에서음성인 한 가검물은 ELISA와 CFT 모두에서 양성으로 관찰되어 OIE에서 규정한 내용과 일치할 뿐만 아니라 오히려 국내에서 소 브루셀라병 검색에 있어 screening test로 RBT 보다 좀 더 적합한 진단법임을 확인할 수 있었다. 그리고 ELISA의 PP 값은 CFT 역가가 1:80까지는 역가가 증가할수록 ELISA PP의 값도 증가하였지만 1:80이상의 경우에는 CFT 역가가 증가하였음에도 불구하고 ELISA PP 값이 별 차이가 나지 않았음이 관찰되었다.
- 그리고 ELISA의 PP 값은 CFT 역가가 1:80까지는 역가가 증가할수록 ELISA PP의 값도 증가하였지만 1:80이상의 경우에는 CFT 역가가 증가하였음에도 불구하고 ELISA PP 값이 별 차이가 나지 않았음이 관찰되었다.
- 국내에서 소 브루셀라병을 좀 더 정확하게 진단하기 위한 일환으로 최근 OIE 등에서 권장하고 있는 B. abortus% LPS를 이용한 ELISA kit을 국내에서 1995년부터 2004년까지 브루셀라병으로 판정되어 살처분 되었거나 음성으로 판정된 109두의 소 혈청을 대상으로 하여 RBT와 CFT 그리고 TAT 등과 그 결과를 상호 비교하여 본 결과, RBT에서양성으로 판정된 38두 중 35두는 ELISA에서도 양성으로 관찰되었으며, RBT에서 음성으로 판정된 71두 중 69두는 음성으로 그러나 나머지 2두는 ELISA와 CFT에서 양성으로 그리고 TAT에서는 1:50의 항체 역가가 관찰되어 의양성으로 판정되었고 CFT 에서 양성 또는 음성으로 판정된 모든 혈청이 ELISA에서 같은 결과가 관찰되어 ELISA가 screening test와 확정 진단법 모두에서 활용될 수 있음을 확인할 수 있었다.
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