Among calves' diseases, digestive diseases most frequently occur in Korea, and especially viral diarrhea is one of the most important diseases. This study was conducted to get some basic information for the control of the viral diarrhea in calves. The samples were obtained from 319 calves with clini...
Among calves' diseases, digestive diseases most frequently occur in Korea, and especially viral diarrhea is one of the most important diseases. This study was conducted to get some basic information for the control of the viral diarrhea in calves. The samples were obtained from 319 calves with clinical diarrhea from 195 farms in Gyeongnam south area (Gosung, Tongyung, Hadong) from June 2005 to August 2006, Viral detection was examined by polymerase chain reaction (PCR), Etiological viruses were detected from 171(53,6%) of 319 calves, and bovine rotavirus (BRV) were 130 (40,8%) and bovine viral diarrhea virus (BVDV) 41 (12,9%), and no coronavirus was confirmed, Statistical difference was found in BRV detection between summer (32.6%) and winter (57.7%). However there was no seasonal difference in BVDV. In detection rate of the calves under 19days, BRV was highest (55.1%), but BVDV lowest (5.1%). No big difference was in rate among herd size. However, BRV was lowest (26.8%) in the group over 51 heads, but BVDV was highest (19.5%) in the same.
Among calves' diseases, digestive diseases most frequently occur in Korea, and especially viral diarrhea is one of the most important diseases. This study was conducted to get some basic information for the control of the viral diarrhea in calves. The samples were obtained from 319 calves with clinical diarrhea from 195 farms in Gyeongnam south area (Gosung, Tongyung, Hadong) from June 2005 to August 2006, Viral detection was examined by polymerase chain reaction (PCR), Etiological viruses were detected from 171(53,6%) of 319 calves, and bovine rotavirus (BRV) were 130 (40,8%) and bovine viral diarrhea virus (BVDV) 41 (12,9%), and no coronavirus was confirmed, Statistical difference was found in BRV detection between summer (32.6%) and winter (57.7%). However there was no seasonal difference in BVDV. In detection rate of the calves under 19days, BRV was highest (55.1%), but BVDV lowest (5.1%). No big difference was in rate among herd size. However, BRV was lowest (26.8%) in the group over 51 heads, but BVDV was highest (19.5%) in the same.
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문제 정의
실정이다. 이러한 막대한 피해를 주고 있는 송아지 설사병의 주 발생 원인인 바이러스 감염을 분석함으로써 이에 대한 방역대책수립과 본 질병의 예방과 치료를 위한 기초 자료는 물론죽산농가의 경쟁릭 향상과 농가 소득증대에 기여하고자 한다.
제안 방법
Bovine coronavirus( BC V), bovine viral diarrhea virus (BVDV) 의 유전자 증폭은 Qiagen OneStep RT-PCR Kit를 사용하였다. 즉, RNase-free water 12 , 5xRT-PCR buffer 5, dNTP Mix 1, 원스텝 RT-PCR Enzyme Mix 1^1, Primer(R) 0.
Bovine rotavinis (BRV)의 유전자 증폭은 먼저, 추출된 RNA에 대한 Firststrand cDNA를 합성하기 위하여 Superscript HI reverse transcriptase Kit (Invitrogen, USA)를 사용하였다. 즉, 추줄된 RNA 155에 reverse primer 1 와 DMSO 를 가하여 7CTC 에서 10분간 처리한 다음 4로 냉각시킨 후 여기에 5><buffer 6, 0.
5를 차례로 혼합하여 3℃의 반응 액을 만든 후 5에서 40분간 반응시켜서 First-strand cDNA를 합성하였다. RT반응으로 생산된 First'-strand cDNA 5에 RNase-free water 13X PCR buffer 5, lOmM dNTP 0.5/^, Primer(R) 0*5, Primer(F) 05 DNA iDolymerase 0.5%를 순서대로 가하여 최종 반응액의 양을 2로 하였고, 이 혼합액을 thermoe cycler (Biometra)에서 951 5분 반응시키고 이어서 94℃ 1분, 42℃ 1분, 72℃ 1분씩 35회 반응을 진행시켰고, 최종 72℃에서 5분간 반응을 시켰다.
Germany)를 사용하여 농가에서 심한 설사로 동물병원에 치료를 의뢰하였거나 집단 설사나, 설사로 인하여 폐사되어 병성감정 의뢰된 1세 이하의 송아지 및 육성우의 설사변이나 장을 채취하였다. 설사 변은 항문주위를 70% alcohol 솜으로 소독한 뒤 항문을 자극하여 설사를 유도한 뒤에 50ml tube에 채취하고 폐사한 소는 부검하여 장 병변부를 채취하였다.
설사분변을 PBS로 5배 희석하여 3회 동결 및 융해한 후 8, 000rpm에서 3분간 원심분리한 다음 상층 액 300를 취하여 RNA 추출에 사용하였고, RNA 추출은 RNeasy MiniKit (Qiagen, USA)를 이용하여 공시된 방법에 준하여 수행하였다.
사용하였다. 즉, 추줄된 RNA 155에 reverse primer 1 와 DMSO 를 가하여 7CTC 에서 10분간 처리한 다음 4로 냉각시킨 후 여기에 5><buffer 6, 0.1 DTT 3, 10mM dNTP 2 //, RNasin 1, supRtase DI 0.5를 차례로 혼합하여 3℃의 반응 액을 만든 후 5에서 40분간 반응시켜서 First-strand cDNA를 합성하였다. RT반응으로 생산된 First'-strand cDNA 5에 RNase-free water 13X PCR buffer 5, lOmM dNTP 0.
대상 데이터
2005년 6월부터 2006년 8월까지 경남 남부지방(고성, 통영, 하동) 195농가에서 설사로 인하여 동물병원에 치료를 요청하였거나, 병성감정 의뢰된 송아지 및 1세 이하 육성 우 319두(하절기 215두, 동절기 104두)를 대상으로 실시하였다.
Bovine rotavirus (BRV), bovine coronavirus (BCV), bovine viral diarrhea virus (BVDV)의 primer는 양 등 이용한 유전자 정보를 이용 제작하여 사용하였으며, 증폭 부위는 Table 1과 같다.
바이러스 분리를 위한 시료채취는 멸균된 50ml cap tube (Sarstedt Aktlengesellachaft & Co D-51588 Numbrecht. Germany)를 사용하여 농가에서 심한 설사로 동물병원에 치료를 의뢰하였거나 집단 설사나, 설사로 인하여 폐사되어 병성감정 의뢰된 1세 이하의 송아지 및 육성우의 설사변이나 장을 채취하였다. 설사 변은 항문주위를 70% alcohol 솜으로 소독한 뒤 항문을 자극하여 설사를 유도한 뒤에 50ml tube에 채취하고 폐사한 소는 부검하여 장 병변부를 채취하였다.
성능/효과
1. 바이러스 감염율은 53.6%였고, 그 중 bovine rotavirus (BRV)는 40.8%, bovine viral diarrhea virus (BVDV)는 12.9%, corona- virus는 분리되지 않았다.
2. BRV의 계절별 감염 율은 동절기 57.7%로 하절기 32.6%에 비하여 매우 높았으며, BVDV의 감염 율은 동절기 12.5%, 하절기 13%로 비슷하였다.
3. 일 령별에 따른 BRV와 BVDV의 분리 율에서 BRV는 19일에서 55.1%로 가장 높았고, BVDV는 60일령 이상에서 35.3%로 가장 높게 나타났다.
4. 사육두수별 BRV와 BVDV의 분리율에서 BRV는 21-50 사육 농가에서 58.3%로 가장 높았고, BVDV는 51두 이상 사육 농가에서 19.5%로 가장 높게 나타났다.
같다. BRV는 동절기 57.70%로 매우 높은 분리 율을 보였으며, 하절기에도 32.6%의 감염 율을보였다. BVDV는 동절기 12.
BVDV는 모든 연령의 소에서 감염되나 60일령 이상 240일령 사이의 송아지에서 감수성이 높은 것으로 보고된 것과 같이 본 조사에서도 60일령 이상 240일령 사이의 송아지에서 35.3%의 높은 감염 율을 보였으며, 40-59일령 17.4%, 20-39일령 7.8%, 19일령 이하 5.1%로 일령이 낮을수록 감염 율이 점차 감소하는 양상을 보였는데 1개월 전후의 어린 송아지는 이미 감염된 송아지나 어미에 의한 접촉감염된 것으로 추정된다. BVDV의 사육두수별 감염 율은 10두 이하 농가에서 6.
BVDV는 소화관점막의 궤양과 설사, 호흡기 병변 등을 유발하고 심하면 폐사하는 전염병으로 본 조사에서 BVDV 분리 율은 12.9% 로서 강 등⑼이 보고한 11.2%와 비슷한 결과를 보였으나, 강 등⑼은 이 BVDV가 바이러스 설사 병중 가장 발생 율이 높다고 보고하였는데 본 조사에서는 BRV가 40.8%로서 가장 높았다. 이러한 것은 많은 원인이 있겠지만 송아지 개 체차이 , 지 역별차이와 특히 다 누 사육에 의한 동거 가축에 급속한 전파 등에서 오는 결과인 것 같다.
1%로 일령이 낮을수록 감염 율이 점차 감소하는 양상을 보였는데 1개월 전후의 어린 송아지는 이미 감염된 송아지나 어미에 의한 접촉감염된 것으로 추정된다. BVDV의 사육두수별 감염 율은 10두 이하 농가에서 6.5%로 낮았으나, 11-20두 14.3%, 21-50두 16.7%, 51두 이상에서 19.5%로 사육두수가 높을수록 감염 율이 증가하였는데, 이는 BVDV는 전 연령에 감수성이 있으며, 소화기 병변, 호흡기 병변, 번식장애, 유방염과 같은 뚜렷한 임상증상을 보이지 않는 준 임상 형을 보이는 등 다양한 증상으로 나타나기 때문에 송아지가 쉽게 어미 소로부터 감염이 이루어지는 것으로 생각된다. 또한 10두 -50두 사육하는 부업농가 및 51두 이상 전업농가는 송아지 분만 시 보온시설 등이 부족하여 쉽게 추위에 노출되는 사례가 많아 10 두 이하 농가에 비하여 발생이 많은 것으로 판단된다.
3%로 가장 높게 분리되었다. bovine viral diarrhea virus (BVDV)는 10두 이하 사육농가가 6.5%로 가장 낮았으며, 11~20 두 14.3%, 21~50두 16.7%, 51두 이상 사육농가 19.5%로 사육규모가 많을수록 분리 율이 높게 나타났다.
2%, 40~60일령 38%, 20~39일령이 33%로 가장 낮았다. bovine viral diarrhea virus /DV는 19일령이하 5.1%로 가장 낮고, #일령 7.8%, 40~60일령 17.4%, 60일령 이상이 35.3%로 가장 높아 연령이 높을수록 분리 율이 증가하였다.
2%, 1998년 최 등이 보고한 16% 보다는 매우 높은 분리 율을 보여, 본 조사의 결과 BRV의감염 율이 급속히 증가하고 있는 것으로 보인다. 또한 본 조사에서 BRV가 동절기에 57.7%의 높은 감염 율을 보여 이 질병이 동절기에 집중 발생하는 설사병임을 알 수 있었으나, 특히 하절기에 32.6%의 감염 율을 보여 이 질병이 계절에 관계없이 연중 발생함을 알 수 있었다.
바이러스 설사 중 BRV의 분리 율은 319건 중 130건인 40.8%가 분리되었는데, 1997~1999 년 강 등이 보고한 BRV 감염 율 10.2%, 1998년 최 등이 보고한 16% 보다는 매우 높은 분리 율을 보여, 본 조사의 결과 BRV의감염 율이 급속히 증가하고 있는 것으로 보인다. 또한 본 조사에서 BRV가 동절기에 57.
본 조사는 2005년 6월부터 2006년 8월까지 경남 남부지역 송아지 및 1세 이하 육성우에서 설사병 발생으로 동물병원에 진료를 의뢰하였거나, 연구소에 병성감정을 의뢰한 319두에 대한 바이러스성 설사병의 감염 율을 조사한 결과 감염 율이 1기건 53.6%였으며, 이 중 BRV는 130건 40.8%, BVDV는 41건 12.9%였으며 Coronaviruse 감염은 없었다. 또한 BRV와 BVDV가 복합감염은 17건으로 5.
5%라고 보고하였다. 위와 같이 송아지에서 설사 발생 율이 97.2%로 매우 높고, 송아지 질병 발생 중 소화기계 질병의 발생이 64 72.8%로 높은 발생을 보이는 것으로 나타났나.
초유 중 면역글로브린은 분만 후 3일경에 급속히 감소되며, 초유 중에 함유된 로타바이러스 특이항체는 장관 내에서만 방어력을 가지고 있는 반면 혈액내로 흡수된 혈청 면역항체는 장 감염을 방어하지 못하므로 인해 BRVe 분만 후 주로 5-7일령에 집중적으로 발생하며 감염된 송아지는 약 3주 동안 분변을 통한 대량으로 배출함으로 접촉에 의해 동거 송아지에 전파되는데 본 시험에서도 19일령 이하의 송아지에서 55.1%로 다른 일령에 비하여 높은 감염 율을 보였다. BRV 의 사육두수별 감염 율은 10두 이하에서 35.
참고문헌 (26)
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