선택한 단어 수는 입니다.
최소 단어 이상 선택하여야 합니다.
최소 단어 이상 선택하여야 합니다.
선택한 단어 수는 30입니다.
최대 10 단어까지만 선택 가능합니다.
최대 10 단어까지만 선택 가능합니다.
문제 정의
- HPLC-MS의 분석 방법은 가장 감도가 좋으나, 장비와 그 유지 비용의 단점이 있다 I'16) 펄스식 전기화학검출기(由皿 amperometric detector, PAD)는 전기화학적 검출기의 일종으로 금전 극에서 탄수화물의 산화에 의해 발생하는 전류를 측정하는 것으로 pico-mol 농도 단위까지 검출할 수 있다. 펄스식 전기화학검출기는 고성능 음이온교환칼럼 (HPAEC)을 이용하여 당을 분석측정하나 배당체의 경우 음이온 교환칼럼에서 당과 배당체를 분리하기 어려운 단점이 있다", 18) 이에 본 연구팀은 역상 칼럼과 PAD를 조합하여 배당체를 효과적으로 분석할 수 있는 방법을 연구하였으며成, 이 방법을 이용하여 갈근과 갈근이 포함된 처방에서 puerarin과 daidzin의 분석을 실험하여 유의한 결과를 얻었기에 보고하는 바이다.
제안 방법
- HPLC 분석조건은 puerarin과 daidzin, 내부표분물질인 geniposide가 동시에 분리되는 조건으로 정확도와 재현성 검증을 위하여 LOD (limits of detection), LOQ (limits of quantitation), recovery 일 중st, 일간 및 일중 변화를 측정하였다.
- RP-HPLC-PAD의 분석 방법을 갈근 및 갈근을 함유한 처방인 갈근탕 및갈근 황금 황련 탕에에 적용하였다. 갈근과 갈근탕 및 갈근황금황련탕에 함유된 puerarin과 daidzin 및 내부표준물질인 geniposide는 HPLC 분석 방법에 대하여 분리도와 재현성이 유지되었으며 (Fig.
- 결과를 Table 3에 나타내었다. 각 puerarin과 daidzin은 정량한계 (limits of quantification, LOQ) 에 해당하는 농도부터 2.5, 5, 10, 25, 50 mg/L에 해당하도록 조제한 후 각 농도별로 3회씩 반복 측정하여 얻은 평균값으로 정량 곡선과 상관계수를 얻었으며 정량 곡선은 Fig. 4에 나타내었다.
- 5, 5, 10, 25, 50 yg/mL의 농도로 희석하여 농도별 표준액을 조제하였다. 각 농도별 표준액은 내부표준물질인 geniposide를 20 y/mL 함유하도록 조제하여 HPLC로 분석하였다. 분석한 cbromatogram은 각 peak면적과 internal stamdard와의 비율을 측정하여 검량선을 작성하였다.
- 각 농도별 표준액의 면적과 내부표준물질인 geniposide 의 면적을 나누어 X축을 표준액의 농도로 y축을 표준액과 geniposide의 피크 면적 비율로 검량선을 작성하였다. 추세선 및 수식을 설정한 후 수식에 대입하여 검액의 함량으로 계산하였다.
- , Tokyo, Japan)로 여과한 후 100 yL 을 취하고 내부표준물질인 geniposide를 20 yg을 첨가한 후 증류수를 넣어 총 1 mL로 제조하여 HPLC 로 분석하였다. 갈근을 함유하는 방제인 갈근탕과 갈근 황금 황련 탕도 갈근과 같은 방법으로 검액을 제조하여 분석하였다. 갈근, 갈근탕 및 갈근 황금 황련 탕의 수득률은 각각 30.
- 각 농도별 표준액은 내부표준물질인 geniposide를 20 y/mL 함유하도록 조제하여 HPLC로 분석하였다. 분석한 cbromatogram은 각 peak면적과 internal stamdard와의 비율을 측정하여 검량선을 작성하였다.
- 표준액을 제조하였다. 이 표준액을 2.5, 5, 10, 25, 50 yg/mL의 농도로 희석하여 농도별 표준액을 조제하였다. 각 농도별 표준액은 내부표준물질인 geniposide를 20 y/mL 함유하도록 조제하여 HPLC로 분석하였다.
- 추세선 및 수식을 설정한 후 수식에 대입하여 검액의 함량으로 계산하였다.
대상 데이터
- Pu&a血과 daidzin의 표준품과 내부표준물질로 사용한 geniposide는 Wako Co. (Tokyo, Japan) 의 제품을 사용하였다. HPLC 분석에 사용한 acetonitrile (Thermo Fisher Scientific Inc.
- 그 구성 약재와 양은 Table 1과 같다. 갈근 함유 처방의 제조에 사용한 작약은 전라북도 임실에서 생산된 것을 사용하였으며, 황금은 전라남도 여수에서 생산된 것을 사용하였다. 황련, 감초, 마황은 중국에서 수입한 것을 사용하였으며, 계지는 베트남산을 사용하였다.
- 갈근은 강원도 정선에서 채취한 것을 사용하였다. 갈근을 함유하는 처방은 갈근탕(葛根湯)과 갈근황금황련탕(葛根黃苓黃連湯)의 처방조성에 따라 제조하였다 20).
- 방식으로 분석하였다(Fig 2). 사용한 기기는 SHISHEIDO NANOSPACE SI-2 HPLC system (Shisheido, TNyo, Japan)으로 칼럼은 UK-C18 GOID (100 mmx2.0 mm I.D.; 3 ym, Imtakt Co., Japan), 검출기는 펄스식 전기화학 검출기로 금전극과 Ag/AgCl 참조전극이 포함된 ICS-3000 series Eionex (Sunnyvale, CA)를 사용하였으며, Dionex (Sunnyvale, CA)의 Chromeleon client program을 사용하였다.
- 황련, 감초, 마황은 중국에서 수입한 것을 사용하였으며, 계지는 베트남산을 사용하였다. 사용한 약재는《대한약전》과 《대한약전외한약규격집》의 성상을 기준으로 관능검사를 실시하여 적합한 것을 실험에 사용하였다.
- 표준품으로 사용한 puerarin과 daidzin을 각각 정밀하게 1 mg으로 측정하여 증류수에 녹여 각각 1 mg/mL의 표준액을 제조하였다. 이 표준액을 2.
- 갈근 함유 처방의 제조에 사용한 작약은 전라북도 임실에서 생산된 것을 사용하였으며, 황금은 전라남도 여수에서 생산된 것을 사용하였다. 황련, 감초, 마황은 중국에서 수입한 것을 사용하였으며, 계지는 베트남산을 사용하였다. 사용한 약재는《대한약전》과 《대한약전외한약규격집》의 성상을 기준으로 관능검사를 실시하여 적합한 것을 실험에 사용하였다.
이론/모형
- HFLC 분석에 사용한 기기는 Reverse phase-HFLC- PAD 방법으로 한약재 분석에 일반적으로 사용하는 역상 칼럼의 HPLC 방식에 따라 배당체를 분리한 뒤, 당의 분리 분석에 사용하는 HPAEC-PAD 방법을 결합하는 방식으로 분석하였다(Fig 2). 사용한 기기는 SHISHEIDO NANOSPACE SI-2 HPLC system (Shisheido, TNyo, Japan)으로 칼럼은 UK-C18 GOID (100 mmx2.
- LC-MS의 분석방법은 가장 감도가 좋으나, 고비용의 문제로 적용의 어려움이 있다I'16). HPAEC-PAD 방법은 단당 및 다당 그리고 아미노산 등의 이온성 물질을 분리하고 분석하기 위해 고안된 장치이나 한약재에 주로 함유된 배당체의 적용에는 당과 배당체가동 시에 검출되기 때문에 한계가 있다”, 18)이에 갈근에 함유된 배당체인 puerarin^)- daidzin의 분석에 적용하기 위해 배당체의 분리에 유용한 reversed- phase 컬럼과당 분석에 유용한 펄스식 전기화학 검출기를 적용한 RP-HPLC-PAD법을 이용하여 실험하였다.
- 사용하였다. 갈근을 함유하는 처방은 갈근탕(葛根湯)과 갈근황금황련탕(葛根黃苓黃連湯)의 처방조성에 따라 제조하였다 20). 그 구성 약재와 양은 Table 1과 같다.
- 갈근의 puerarin^- daidzin 의 분석은 주로 HPLC- UV 방법을 사용하였다04).그러나 UV 검출법은 발색단을 가진 물질들을 모두 검출하기 때문에 puerarin 과 daidzin뿐만 아니라 그 비당체 및 발색단을 가진 모든 물질들이 검출됨으로써 분석에 어려움이 있다 13).
성능/효과
- RP-HPLC-PAD의 분석 조건에서 puerarin과 daidzin 및 내부 표준물질인 geniposide는 20분 내에 분리되었으며, 갈근 및 한방제제에서 검출에 선택적으로 분리되었다. Ruerarin의 검출 한계와 정량한계는 각각 0.
- 2%로 나타났다. 갈근 및 갈근 함유 처방에 대하여 puerarin의 평균 회수율은 99.7 - 101.3%, daidzin의 평균 회수율은 101.0 - 102.8%로 나타났다(Table 5).
- 2%로 나타났다. 갈근 및 갈근함유 처방에 대하여 puerarin의 평균 회수율은 99.7 - 101.3%, daidzin의 평균 회수율은 101.0 - 102.8%로 나타났다. 이는 RP-HPLC- PAD를 이용한 갈근 및 한방제제에서 puerarin과 daidzin의 분석 방법이 기존에 보고된 결과와 비교하여 좋은 재현성과 정확성을 나타내었다.
- 8%로 나타났다. 이는 RP-HPLC- PAD를 이용한 갈근 및 한방제제에서 puerarin과 daidzin의 분석 방법이 기존에 보고된 결과와 비교하여 좋은 재현성과 정확성을 나타내었다. 이 방법은 갈근 및 갈근을 함유하는 제제의 품질평가에 활용할 수 있을 것으로 사료되며, 나아가 한약재 및 이를 함유한 제제에 대하여 적용이 가능할 것으로 사료된다.
후속연구
- 이는 RP-HPLC- PAD를 이용한 갈근 및 한방제제에서 puerarin과 daidzin의 분석 방법이 기존에 보고된 결과와 비교하여 좋은 재현성과 정확성을 나타내었다. 이 방법은 갈근 및 갈근을 함유하는 제제의 품질평가에 활용할 수 있을 것으로 사료되며, 나아가 한약재 및 이를 함유한 제제에 대하여 적용이 가능할 것으로 사료된다.
※ AI-Helper는 부적절한 답변을 할 수 있습니다.