선택한 단어 수는 입니다.
최소 단어 이상 선택하여야 합니다.
최소 단어 이상 선택하여야 합니다.
선택한 단어 수는 30입니다.
최대 10 단어까지만 선택 가능합니다.
최대 10 단어까지만 선택 가능합니다.
문제 정의
- SALIgAE® 시약을 상온에서 보관할 경우 어느 정도의 안정 성 을 갖는지 알아보았다. 30 μL씩 분주된 SALIgAE® 시약을 상온에서 보관하면서 10일 마다 타액 희석액을 첨가해 색의 변화를 관찰한 결과 30일이 지나도 민감도에 변화가 없어 상온에서도 높은 안정성을 보여주었다 (Fig.
가설 설정
- tests. b; Sensitivity means the detection limit of saliva dilution. c; Specificity for saliva.
제안 방법
- 0.5 g 아가로스(1 %)를 생리식염수 50mL 에 넣고 전자레인지를 이용해 녹인 후 Blue-starch 1알을 막자사발에 갈아 넣고 플라스틱 용기에 붇고 공기 중에서 굳혀 Blue-starch 아가로스 겔을 제조하였다. 준비한 타액 반 시료를 겔 위에 올려놓고 37℃ 항온배양기에서 12시간 반응시켜 blue-starch가 분해되면서 생기는 원형의 clear zone을 관찰하였다.
- 그러나 이 두 타액 검사법은 미생물, 식물, 사람이 아닌 다른 동물에서 발견되는 아밀라아제와 사람의 아밀라아제를 구별할 수 없으며, 검사 시간이 길고 별도의 장비가 필요하거나 특이성이 낮은 단점이 있다5, 6 따라서 특이성이 높고 신속히 타액반을 검사할 수 있는 방법의 개발이 요구되어 왔는데, Abacus Diagnostics사 (West Hills, CA91307 USA)에서 개발된 SALIgAE® 검사는 기존의 검사법을 대체할 새로운 방법으로 주목받고 있다.7 본 논문에서는 SALIgAE® 검사법의 유효성 검토를 통해 법과학 증거물의 타액검사법으로 사용하는데 문제가 없는지 알아보고자 하였으며, 실험실은 물론 사건 현장에서도 간편하게 타액검사를 수행할 수 있도록 시험과정을 일부 변형하였다.
- 따랐다. Phadebas® sheet 위에 타액 희석 액 10 μL를 떨어뜨리고 5분 이내에 청색으로 변화되는지 관찰하였다.
- 2). 또한 기존의 blue-Starch 아가로스 겔 확산법 및 Phadebas® 검사법과 민감도 및 특이성을 비교하였다.
- 각 검사 방법에 따라 시험하여 비교하였다. 또한 동물 타액에 대한 반응을 알아보고자 개와 쥐의 타액을 면봉으로 채취하여 실험에 사용하였다.
- 먼저 타액반을 50 μL의 증류수에 넣고 상온에서 30분간 용출시킨 후 8 μL를 취해 SALIgAE® 바이알 (300 μL) 에 첨가하였다. 바이알을 흔들어 섞어준 후 10분 이내에 무색에서 노란색으로 변화되는 정도를 관찰하였다.
- 변형된 검사법은 타액반을 오려내어 별도의 추출과정 없이 1/10량(30 μL)의 SALIgAE® 용액 이 담긴 투명 플라스틱 튜브에 직접 넣고 색의 변화 정도를 관찰하였다(Fig. 2). 또한 기존의 blue-Starch 아가로스 겔 확산법 및 Phadebas® 검사법과 민감도 및 특이성을 비교하였다.
- 본 연구에서는 사건현장에서 간편하고 신속하게 사용할 수 있으며, 보다 저렴한 타액검사를 위해 제조사의 SALIgAE® 검사법을 일부 변형하여 유효성을 검토하였다. 변형된 검사법은 타액반을 오려내어 별도의 추출과정 없이 1/10량(30 μL)의 SALIgAE® 용액 이 담긴 투명 플라스틱 튜브에 직접 넣고 색의 변화 정도를 관찰하였다(Fig.
- 세 가지 타액 검사법 (SALIgAE® 검사법, blue-Starch 아가로스 겔 확산법, Phadebas® 검사법)의 타액 특이성을 비교하기 위해 준비된 정액, 질액, 뇨, 콧물, 땀 시료를 각 검사 방법에 따라 시험하여 비교하였다. 또한 동물 타액에 대한 반응을 알아보고자 개와 쥐의 타액을 면봉으로 채취하여 실험에 사용하였다.
- 5 g 아가로스(1 %)를 생리식염수 50mL 에 넣고 전자레인지를 이용해 녹인 후 Blue-starch 1알을 막자사발에 갈아 넣고 플라스틱 용기에 붇고 공기 중에서 굳혀 Blue-starch 아가로스 겔을 제조하였다. 준비한 타액 반 시료를 겔 위에 올려놓고 37℃ 항온배양기에서 12시간 반응시켜 blue-starch가 분해되면서 생기는 원형의 clear zone을 관찰하였다.
대상 데이터
- 타액반은 타액 희석 액 10 μL를 직경 5 mm 의 Wattman 필터페이퍼에 묻혀 공기 중에서 건조시켜 준비하였다. 타액검사법에 따른 특이성을 검사하기 위한 정액, 질액, 뇨, 콧물, 땀, 개, 쥐 (rat) 시료는 면봉에 묻혀 건조한 후 사용하였다.
- 표준 타액 시료는 건강한 남성 3인의 타액을 섞어 사용하였다. 이는 타액 내 아밀라아제 활성이 개인별로 차이가 날 수 있기 때문이다.
이론/모형
- Phadebas® 검사는 제조사의 시험법에 따랐다. Phadebas® sheet 위에 타액 희석 액 10 μL를 떨어뜨리고 5분 이내에 청색으로 변화되는지 관찰하였다.
- SALIgAE® 검사는 제조사의 시험법에 따라 수행하였다. 먼저 타액반을 50 μL의 증류수에 넣고 상온에서 30분간 용출시킨 후 8 μL를 취해 SALIgAE® 바이알 (300 μL) 에 첨가하였다.
성능/효과
- 안정 성 을 갖는지 알아보았다. 30 μL씩 분주된 SALIgAE® 시약을 상온에서 보관하면서 10일 마다 타액 희석액을 첨가해 색의 변화를 관찰한 결과 30일이 지나도 민감도에 변화가 없어 상온에서도 높은 안정성을 보여주었다 (Fig. 6).
- 특히 사건 현장에서 빠르고 쉽게 타액을 검사할 수 있다면 더욱 유용할 것이다. Blue-starch 아가로스 겔 확산법이나 Phadebas® 검사법과 같은 타액 검사법은 시간이 오래 걸리고, 별도의 장비가 필요하거나 민감도가 낮은 단점을 갖는데 비해, SALIgAE® 검사 시약을 이용한 변형된 타액 검사법은 비용이 저렴하고, 안정성과 민감도가 높아 법과학 실험실에서는 물론 사건 현장에서도 쉽게 사용이 가능할 것으로 판단되었다. 그러나, 변형된 SALIgAE® 검사법을 이용한 타액 검사 시에는 반응 시간을 5분 이내로 제한해야 하며, 반응 결과가 음성으로 나오더라도 유전자형 분석 과정을 수행해야한다는 점을 유의해야 할 것이다.
- SALIgAE® 검사시약이 유전자형 분석에 미치는 영향을 알아보기 위해 SALIgAE® 검사시 약 30 μL을 타액과 섞 어 QIAgen DNA micro kit (Qiagen Co., Hilden, Deutschland)를 이용해 DNA를 분리하고 AmpFSTR Identifiler kit (Applied Biosystems, Foster City, CA 94404 USA)를 사용해 증폭하여 STR 유전자형을 분석한 결과, SALIgAE® 검사시약은 유전자형 분석에 어떠한 영향도 주지 않았다.
- SALIgAE® 시약을 증류수를 이용해 1/2배 씩 희석한 후 타액 원액 5를 첨가하고 색의 변화 정도를 관찰하였는데, 희석된 SALIgAE® 시약은 모두 색의 변화를 보이지 않았다. 이는 SALIgAE® 시약의 희석으로 인해 본래의 기능이 상실된 것으로 추정되었다.
- 정액과 질액은 5시간 정도 이상 경과하면서 색의 변화를 보이며, 하루가 지나면 모두 노란색으로 변화되었다. 또한 동물 타액과의 반응성을 검사하였는데, 개의 타액은 5분 이내에 색의 변화를 보이지 않았지만 쥐의 타액은 사람의 타액과 유사한 정도의 시간 내에 색의 변화를 보였으며, Phadebas® 검사법에서도 동일한 결과를 보여주었다. 다양한 동물 종에 대한 타액 검사는 추후 더 많은 실험이 필요할 것으로 사료되었다.
- 5). 세 가지 타액검사법에 대한 민감도 비교 실험 결과를 요약하면, blue-starch 아가로스 겔 확산법은 민감도는 높으나, 별도의 항온배양기가 필요하고 반응시간이 긴 단점이 있었으며, Phadebas® 검사법은 짧은 시간(5분) 내에 타액검사를 수행할 수 있었으나 민감도가 낮은 단점이 나타난 반면 SALIgAE® 검사법은 신속하면서도 높은 민감도를 보여주어 법과학적으로 가장 효과적인 타액검사법으로 판단되었다(Table 1).
- 다양한 동물 종에 대한 타액 검사는 추후 더 많은 실험이 필요할 것으로 사료되었다. 이상의 결과에서 SALIgAE® 검사법을 이용한 사람 타액의 존재 여부를 판정하는데 있어 반응 시간은 매우 중요한 기준이 될 수 있는데, 위양성 판정을 방지하기 위해서는 판정 기준 시간을 5분 이내로 하여야할 것으로 판단되었다.
후속연구
- Blue-starch 아가로스 겔 확산법이나 Phadebas® 검사법과 같은 타액 검사법은 시간이 오래 걸리고, 별도의 장비가 필요하거나 민감도가 낮은 단점을 갖는데 비해, SALIgAE® 검사 시약을 이용한 변형된 타액 검사법은 비용이 저렴하고, 안정성과 민감도가 높아 법과학 실험실에서는 물론 사건 현장에서도 쉽게 사용이 가능할 것으로 판단되었다. 그러나, 변형된 SALIgAE® 검사법을 이용한 타액 검사 시에는 반응 시간을 5분 이내로 제한해야 하며, 반응 결과가 음성으로 나오더라도 유전자형 분석 과정을 수행해야한다는 점을 유의해야 할 것이다.
- 또한 동물 타액과의 반응성을 검사하였는데, 개의 타액은 5분 이내에 색의 변화를 보이지 않았지만 쥐의 타액은 사람의 타액과 유사한 정도의 시간 내에 색의 변화를 보였으며, Phadebas® 검사법에서도 동일한 결과를 보여주었다. 다양한 동물 종에 대한 타액 검사는 추후 더 많은 실험이 필요할 것으로 사료되었다. 이상의 결과에서 SALIgAE® 검사법을 이용한 사람 타액의 존재 여부를 판정하는데 있어 반응 시간은 매우 중요한 기준이 될 수 있는데, 위양성 판정을 방지하기 위해서는 판정 기준 시간을 5분 이내로 하여야할 것으로 판단되었다.
- 역할을 할 수 있다. 특히 사건 현장에서 빠르고 쉽게 타액을 검사할 수 있다면 더욱 유용할 것이다. Blue-starch 아가로스 겔 확산법이나 Phadebas® 검사법과 같은 타액 검사법은 시간이 오래 걸리고, 별도의 장비가 필요하거나 민감도가 낮은 단점을 갖는데 비해, SALIgAE® 검사 시약을 이용한 변형된 타액 검사법은 비용이 저렴하고, 안정성과 민감도가 높아 법과학 실험실에서는 물론 사건 현장에서도 쉽게 사용이 가능할 것으로 판단되었다.
※ AI-Helper는 부적절한 답변을 할 수 있습니다.