[논문]굴피나무 추출물의 항산화, 항노화 효과 및 인체 시험

양희정; 박수남

[국내논문] 굴피나무 추출물의 항산화, 항노화 효과 및 인체 시험
Antioxidative and Antiaging Effects of Platycarya strobilacea Extract and Clinical Trial 원문보기

大韓化粧品學會誌 = Journal of the society of cosmetic scientists of Korea, v.34 no.4, 2008년, pp.275 - 286

양희정 (서울산업대학교 자연생명과학대학 정밀화학과) , 박수남 (서울산업대학교 자연생명과학대학 정밀화학과)

초록
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본 연구에서는 굴피나무 수피 추출물의 항산화, 미백 및 주름생성억제에 관한 효과를 측정하였다. 추출물의 free radical (1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl, DPPH) 소거활성($FSC_{50}$)은 50% 에탄올 추출물($6.75{\mu}g/mL$) < 당을 제거시킨 aglycone 분획(6.62) < ethyl acetate 분획(4.15) 순으로 증가하였다. Luminol-의존성 화학발광법을 이용한 $Fe^{3+}$-EDTA/$H_2O_2$ 계에서 생성된 활성산소종(reactive oxygen species, ROS)에 대한 총항산화능은 ethyl acetate 분획($OSC_{50}$, $0.56{\mu}g/mL$) < 50% 에탄올 추출물(0.02) < 당을 제거시킨 aglycone 분획(0.01) 순으로 당을 제거시킨 aglycone 분획에서 가장 큰 활성을 나타내었다. 굴피나무 추출물에 대하여 rose-bengal로 증감된 사람 적혈구의 광용혈에 대한 보호효과를 조사하였다. 50% 에탄올 추출물의 경우 농도 의존적($1{\sim}50{\mu}g/mL$)으로 광용혈을 억제하였다. 특히 ethyl acetate 분획은 $10{\mu}g/mL$ 농도에서 ${\tau}_{50}$이 717.27 min으로 매우 큰 세포보호 활성을 나타내었다. 미백 및 주름억제 효과측정으로는 각각 tyrosinase와 elastase의 활성 저해 효과를 측정하였다. Tyrosinase의 활성 저해 효과($IC_{50}$)는 50% 에탄올 추출물 ($243.98{\mu}g/mL$) < ethyl acetate 분획(153.87) < 당을 제거시킨 aglycone 분획(137.53) 순으로 나타났고, elastase의 활성 저해 효과($IC_{50}$)도 50% 에탄올 추출물($31.01{\mu}g/mL$) < ethyl acetate 분획(14.42) < 당을 제거시킨 aglycone 분획(1.48) 순으로, aglycone 분획이 매우 큰 활성 저해 활성을 나타내었다. 또한 굴피나무 추출물 중 ethyl acetate 분획을 함유하는 크림을 제조하고, 이를 피부에 도포한 후, 피부 수분 보유량, 경표피 수분 손실량 그리고 미백효과를 측정하였다. 추출물 함유 크림은 대조군(placebo)보다 수분 보유량을 $2{\sim}8%$ 증가시켰고, 경표피 수분 손실량은 감소시켰다. 또한 추출물 함유 크림은 대조군에 비해 멜라닌 생성을 9.55% 감소시켰다. 이상의 결과들은 굴피나무 추출물이 항산화 활성과 더불어 ROS에 대항하여 세포막을 보호함으로써 생체계, 특히 태양 자외선에 노출된 피부에서 항산화제로서 작용할 수 있음을 가리키며, tyrosinase 및 elastase의 활성 저해 효과와 이를 통한 인체 시험의 결과로부터 미백 기능성 화장품 원료로서 응용 가능성이 있음을 시사한다.

Abstract ▼ AI-Helper

In this study, we investigated the anti-oxidative, anti-wrinkle and whitening effects of Platycarya strobilacea bark extracts. The free radical (1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl, DPPH) scavenging activity ($FSC_{50}$) of extract / fractions of Platycarya strobilacea was in the order: 50% ethanol extract ($6.75{\mu}g/mL$) < deglycosylated aglycone fraction ($6.62{\mu}g/mL$) < ethyl acetate fraction ($4.15{\mu}g/mL$). Reactive oxygen species (ROS) scavenging activities ($OSC_{50}$) of some Platycarya strobilacea extracts on ROS generated in $Fe^{3+}$-EDTA/$H_2O_2$ system were investigated using the luminol-dependent chemiluminescence assay. The order of ROS scavenging activity was ethyl acetate fraction (OSC50, $0.56{\mu}g/mL$) < 50% ethanol extract ($0.02{\mu}g/mL$) < deglycosylated aglycone fraction ($0.01{\mu}g/mL$). The deglycosylated aglycone fraction showed the most prominent scavenging activity. The protective effects of extract / fractions of Platycarya strobilacea on the rose-bengal sensitized photohemolysis of human erythrocytes were investigated. The ethanol extract (50%) suppressed photohemolysis in a concentration dependent manner, particularly ethyl acetate fraction exhibited the most prominent cellular protective effect (${\tau}_{50}$, 717.27 min at $10{\mu}g/mL$). The inhibitory effect of Platycarya strobilacea extracts on tyrosinase were investigated to assess their whitening efficacy. Finally, their anti-elastase activities were measured to predict the anti-wrinkle efficacy in the human skin. The inhibitory effect ($IC_{50}$) on tyrosinase of some Platycarya strobilacea extracts was 50% ethanol extract ($243.98{\mu}g/mL$) < ethyl acetate fraction ($153.87{\mu}g/mL$) < deglycosylated aglycone fraction ($137.53{\mu}g/mL$). Also, The inhibitory effect of elastase ($IC_{50}$) of some Platycarya strobilacea extracts was 50% ethanol extract ($31.01{\mu}g/mL$) < ethyl acetate fraction ($14.42{\mu}g/mL$) < deglycosylated aglycone fraction ($1.48{\mu}g/mL$). The cream containing the ethyl acetate fraction of Platycarya strobilacea extracts was formulated. The skin hydration, transepidermal water loss, and the whitening effects were investigated after topical application of the cream. The skin hydration of cream containing extract was increased by $2{\sim}8%$ than the placebo cream, transepidermal water loss was decreased. The cream containing extract suppressed the melanogenesis of skin by 9.55% than the placebo cream. These results indicate that extract / fractions of Platycarya strobilacea can function as antioxidants in biological systems, particularly skin exposed to UV radiation by anti-oxidative activity and protect cellular membranes against ROS. The inhibitory effect on elastase and tyrosinase, and the increase of skin hydration and the whitening effect of the cream containing extract could be applicable to new functional cosmetics for antiaging.

주제어

AI 본문요약
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문제 정의

계)에서의 각종 ROS에 대한 총항산화능에 관한 연구는 아직 되어 있지 않다. 따라서 본 연구에서는 화장품 원료로서 사용 가능한 굴피나무 수피 추출물(혹은 분획)을 제조하고 이들 추출물(혹은 분획)의 #으로 유도된 세포손상에 대한 보호활성, Fe³⁺-EDTA/H₂O₂ 계에서의 총 항산화능, 피부 미백에 관여하는 tyrosinase 활성 저해 효과 및 피부 주름 생성에서 중요한 역할을 하는 elastase 활성 저해 효과를 알아보고자 하였다. 또한 몇 가지 다른 항산화제들을 대조군으로 하여 굴피나무의 항산화능을 비교 평가하고 위의 결과를 통하여 기능성 미백 화장품 소재로서 가능성이 있는지를 인체 시험을 통하여 미백효과 및 보습효과를 측정하였다.

제안 방법

평가를 실시하기 전에 피시험자들에게 주의 사항과 사용방법을 설명하여 숙지시켰으며, 시험 동의서를 받았다. 6주의 인체 시험이 완료된 후, 배포된 설문지를 수집하고 평가를 완료했다. 설문지에 기재된 결과를 분석하여 도표화 하였다.
1 mL를 혼합한 후 37 ℃에서 10 min 동안 항온 배양한 다음, 반응혼합물을 얼음수조에 넣어 반응을 종결시키고, 475 nm에서 흡광도를 측정 하였다. Tyrosinase를 첨가하지 않은 것을 공시험 (blank)으로 하여 효소활성 저해를 계산하였다. 활성의 크기는 0.
광용혈에 필요한 광조사는 내부를 검게 칠한 50 cm ×20 cm × 25 cm 크기의 상자 안에 20 W 형광등을 장치하고, 형광등으로부터 5 cm 거리에 적혈구 현탁액이 담긴 파이렉스 시험관을 형광등과 평행이 되도록 배열한후 15 min 동안 광조사 하였다.
광용혈에 필요한 광조사는 내부를 검게 칠한 50 cm ×20 cm × 25 cm 크기의 상자 안에 20 W 형광등을 장치하고, 형광등으로부터 5 cm 거리에 적혈구 현탁액이 담긴 파이렉스 시험관을 형광등과 평행이 되도록 배열한후 15 min 동안 광조사 하였다. 광조사가 끝난 후 암반응 (post-incubation) 시간에 따른 적혈구의 파괴정도를 15 min 간격으로 700 nm에서 투광도(transmittance, %)로부터 구하였다. 이 파장에서 적혈구 현탁액의 투광도의 증가는 적혈구의 용혈정도에 비례한다.
굴피나무 추출물 중 ethyl acetate 분획을 포함하여 제조된 크림의 효능 시험을 위하여 20대의 피시험자 10명을 선정하여 6주 동안 평가를 실시하였다. 평가를 위해 Corneometer CM820, Tewameter Tm²10 를 사용하여 수분보유량, 경표피 수분 손실량을 측정하였으며, Mexameter MX16 (CK electronic, Germany)에 의한 melanin Index 및 erythema Index 측정과 설문지를 통한 주관적인 평가 및 육안평가로 미백에 대한 효능과 안 전성, 사용감을 평가하였다.
굴피나무 추출물의 광용혈에 미치는 효과는 post-incubation 시간과 용혈정도로 구성된 그래프로부터 적혈구의 50 %가 용혈되는 시간인 τ50을 구하여 비교하였다.
2 mM DPPH 용액 1 mL에 에탄올 1 mL를 첨가하고 여러 농도의 추출물 1 mL을 첨가하여 섞은 다음 실온에서 10 min 동안 방치 후 spectrophotometer로 517 nm에서 흡 광도를 측정하였다. 그 활성의 크기는 시료를 넣지 않은 경우를 대조군(control)으로 하고 시료를 넣은 것을 실험군(experiment)으로 하여 다음 식에 의해 DPPH의 활성 저해율을 나타내었다. 소거 활성은 DPPH의 농도가 50 %감소되는데 필요한 시료의 농도(free radical scavenging activity, FSC₅₀, µg/mL)로서 표기하였다.
대조군(control)은 시료대신시료용액으로 사용된 용매를 100 µL 첨가하였다.
대조군(control)은 시료용액 대신에 증류수를 넣고, 공시험(blank)은 시료군과 조건이 동일하나 H2O2와 FeCl3⋅6H2O을 첨가하지 않은 것으로 하였다.
따라서 본 연구에서는 화장품 원료로서 사용 가능한 굴피나무 수피 추출물(혹은 분획)을 제조하고 이들 추출물(혹은 분획)의 #으로 유도된 세포손상에 대한 보호활성, Fe³⁺-EDTA/H₂O₂ 계에서의 총 항산화능, 피부 미백에 관여하는 tyrosinase 활성 저해 효과 및 피부 주름 생성에서 중요한 역할을 하는 elastase 활성 저해 효과를 알아보고자 하였다. 또한 몇 가지 다른 항산화제들을 대조군으로 하여 굴피나무의 항산화능을 비교 평가하고 위의 결과를 통하여 기능성 미백 화장품 소재로서 가능성이 있는지를 인체 시험을 통하여 미백효과 및 보습효과를 측정하였다.
미백 효능 인체시험은 피시험자에게 solar Simulator (Solar light. Co., USA)를 이용하여 팔 안쪽에 UVA와 UVB를 조사한 후 6주 동안 3일, 7일, 1주, 2주, 4주, 6주에 멜라닌 지수를 측정하였다. 그 결과 4주가 지난 후 무 도포한 부분에 비해 placebo 크림은 멜라닌을 3.
미백 효능에 관한 설문지는 4개의 문항을 준비하였다. 이들 문항에 대해, “나빠짐(bad)", “변화없음(no change)”, “약간 좋아짐(mild)”, “좋아짐(good)”, “매우 좋아짐 (excellent)”의 5가지 중에서 택일하도록 하였다.
추출물 함유 크림을팔 안쪽 도포한 후, 수분보유량과 경표피 수분 손실량은 각각 30 min, 60 min 간격으로 180 min 동안 측정하였으며, 미백 평가는 자외선 조사 후 3일, 7일, 1주, 2주, 4주, 6주 후 측정하였다. 미백에 대한 효능 평가에서는 6주 동안 매일 아침, 저녁으로 도포하도록 하였으며, 시험 기간에는 다른 제품의 사용을 금하였다.
보습 및 미백 효능평가에는 굴피나무 추출물 중 ethyl acetate 분획 0.2 %를 함유하는 크림을 제조하고 이를 인체 시험에 사용하였다(Table 1). 추출물 함유 크림을팔 안쪽 도포한 후, 수분보유량과 경표피 수분 손실량은 각각 30 min, 60 min 간격으로 180 min 동안 측정하였으며, 미백 평가는 자외선 조사 후 3일, 7일, 1주, 2주, 4주, 6주 후 측정하였다.
6주의 인체 시험이 완료된 후, 배포된 설문지를 수집하고 평가를 완료했다. 설문지에 기재된 결과를 분석하여 도표화 하였다.
암소에서 30 min 동안 pre-incubation 시킨 후, 광증감제 rose-bengal (10 µM) 0.5 mL 를 가하고 파라필름(Whatman laboratory sealing film, UK)으로 입구를 막은 후 15 min 동안 광조사 하였다.
이들 문항에 대해, “나빠짐(bad)", “변화없음(no change)”, “약간 좋아짐(mild)”, “좋아짐(good)”, “매우 좋아짐 (excellent)”의 5가지 중에서 택일하도록 하였다.
2 %를 함유하는 크림을 제조하였다(Table 1). 추출물 함유 크림을 팔 안쪽(상완부)에 도포한 후, 수분보유량과 경표피 수분 손실량은 각각 30 min, 60 min 간격으로 180 min 동안 측정하였다.
2 %를 함유하는 크림을 제조하고 이를 인체 시험에 사용하였다(Table 1). 추출물 함유 크림을팔 안쪽 도포한 후, 수분보유량과 경표피 수분 손실량은 각각 30 min, 60 min 간격으로 180 min 동안 측정하였으며, 미백 평가는 자외선 조사 후 3일, 7일, 1주, 2주, 4주, 6주 후 측정하였다. 미백에 대한 효능 평가에서는 6주 동안 매일 아침, 저녁으로 도포하도록 하였으며, 시험 기간에는 다른 제품의 사용을 금하였다.
추출물을 농도별로 각각 50 µL씩 첨가하였다.
굴피나무 추출물 중 ethyl acetate 분획을 포함하여 제조된 크림의 효능 시험을 위하여 20대의 피시험자 10명을 선정하여 6주 동안 평가를 실시하였다. 평가를 위해 Corneometer CM820, Tewameter Tm²10 를 사용하여 수분보유량, 경표피 수분 손실량을 측정하였으며, Mexameter MX16 (CK electronic, Germany)에 의한 melanin Index 및 erythema Index 측정과 설문지를 통한 주관적인 평가 및 육안평가로 미백에 대한 효능과 안 전성, 사용감을 평가하였다.
피부 보습 평가를 위해 굴피나무 추출물 중 ethyl acetate 분획 0.2 %를 함유하는 크림을 제조하였다(Table 1). 추출물 함유 크림을 팔 안쪽(상완부)에 도포한 후, 수분보유량과 경표피 수분 손실량은 각각 30 min, 60 min 간격으로 180 min 동안 측정하였다.
대조군(control)은 시료용액 대신에 증류수를 넣고, 공시험(blank)은 시료군과 조건이 동일하나 H₂O₂와 FeCl₃⋅6H₂O을 첨가하지 않은 것으로 하였다. 화학발광기 6-channel LB9505 LT의 각 채널은 실험 전에 보정하여 채널간의 차이가 거의 없도록 하였다. 화학발광으로 측정한 저해율을 다음 식과 같이 나타내었고, 활성산소 소거활성의 크기는 화학발광의 세기가 50 %감소되는데 필요한 시료의 농도(reactive oxygen species scavenging activity, OSC₅₀, µg/mL)로서 표기하였다.

대상 데이터

(+)-α-Tocopherol (1,000 IU vitamin E/g), L-ascorbic acid, EDTA, luminol, heparin, 증감제로 사용된 rosebengal, free radical 소거활성에 사용한 1,1-diphenyl2-picrylhydrazyl (DPPH) radical은 Sigma Chemical Co. (USA)에서 구입하여 사용하였다.
Ethyl acetate 분획으로부터 aglycone 제조: ethyl acetate 분획에서 얻은 파우더 일부는 산 가수분해 반응을 이용해서 당을 제거시킨 후 얻은 aglycone 파우더를 실험에 사용하였다. 실험 방법은 ethyl acetate 가용분 일정량에 H₂SO₄ 및 acetone 용액을 넣고, 4 h 동안 중탕 가열하면서 환류⋅냉각시킨다.
UV-visible spectrophotometer는 Varian (Australia) 사의 Cary 50, 적혈구 광용혈에 사용한 Spectronic 20D 는 Milton Roy Co. (USA) 제품, 화학발광기는 Berthold (Germany)사의 6-channel LB9505 LT를, pH meter는 Istek (Korea) 사 제품을 사용하였다. 또한 인체 시험을 위해 CK electronic (Germany)사 제품의 Corneometer CM820, Tewameter Tm²10, Mexameter MX16를 사용하였으며, Solar Light Co.
, trizma base 그리고 에 탄올(EtOH), 메탄올(MeOH), ethyl acetate (EtOAc), HCl 등 각종 용매는 시판 특급 시약을 사용하였다. 기질로 사용된 L-tyrosine, N-succinyl-(Ala)₃-p-nitroanilide, 효소로 사용된 tyrosinase (12.7 mg solid, 3,960 units/mg solid), elastase (0.35 mg protein/mL, 7.8 units/mg protein)는 Sigma Chemical Co. (USA)에서 구입하여 사용 하였다. 플라보노이드의 분석에 사용한 thin layer chromatography (TLC)는 aluminum sheet silica gel 60 F254 (0.
기타 FeCl3⋅6H2O는 Junsei Chemical Co. (Japan) 제품을, H2O2는 Dae Jung Chemical & Metals (Korea)사 제품을 사용하였다.
(USA) 제품, 화학발광기는 Berthold (Germany)사의 6-channel LB9505 LT를, pH meter는 Istek (Korea) 사 제품을 사용하였다. 또한 인체 시험을 위해 CK electronic (Germany)사 제품의 Corneometer CM820, Tewameter Tm²10, Mexameter MX16를 사용하였으며, Solar Light Co. (USA) 제품의 Multiport 601150W Solar Light Simulator를 사용하였다.
81 %였다. 본 연구에서는 50 % 에탄올 추출물, ethyl acetate 분획, aglycone 분획을 실험에 사용하였다.
2 mm)로 Merck (USA)사에서 구입하였다. 실험 재료인 굴피나무는 2006년 3월경 경동시장에서 구매하여 사용하였다.
실험에 사용된 적혈구 현탁액은 700 nm에서 O.D.가 0.6이 었으며 이때 적혈구 수는 1.5 × 107 cells/mL이었다.
완충용액제조에 사용된 Na2HPO4⋅12H2O, NaH2PO4⋅2H2O, NaCl, K2HPO4, KH2PO4, trizma base 그리고 에 탄올(EtOH), 메탄올(MeOH), ethyl acetate (EtOAc), HCl 등 각종 용매는 시판 특급 시약을 사용하였다.
적혈구는 건강한 성인 남녀로부터 얻었다. 채혈 즉시 heparin이 첨가된 시험관에 넣은 후, 3,000 rpm으로 5 min 동안 원심분리하여 적혈구와 혈장을 분리하고, 분리한 적혈구는 0.

데이터처리

Rose-bengal을 첨가하고 광조사를 안 했을 경우와 rose-bengal을 첨가하지 않고 광조사만 했을 경우는 모두 암반응 120 min까지는 용혈이 거의 일어나지 않았다. 모든 실험은 3회 반복하여 평균하였다.
모든 실험은 3회 반복하였고 통계분석은 5 % 유의수준에서 Student’s t-test를 행하였다.

이론/모형

Free radical은 노화, 특히 피부노화의 원인 물질로 간주 되고 있다. 굴피나무 추출물에 대한 free radical 소거활성 측정은 DPPH를 이용하였다. 실험방법은 메탄올에 용해시킨 0.

성능/효과

1) 굴피나무 추출물의 수득율의 경우 50 % 에탄올 추출물은 9.08 %, ethyl acetate 분획의 경우 1.88 %, ethyl acetate 분획을 산 가수분해시켜서 당을 제거한 aglycone 의 경우 33.81 %였다.
10 µg/mL 농도에서 굴피나무 50 % 에탄올 추출물, ethyl acetate 분획과 당이 제거된 분획(aglycone) 모두 비교물질로 사용한 지용성 항산화제이며 비타민 E 성분인 (+)-α-tocopherol보다도 세포보호 효과가 큼을 알 수 있었다.
2) 굴피나무 추출물의 free radical 소거능력(FSC50)은 50 % 에탄올 추출물 6.75 µg/mL, ethyl acetate 분획 4.15 µg/mL, ethyl acetate 분획에서 당 제거시킨 aglycone은 6.62 µg/mL로, 3가지 추출물 모두 큰 활성을 나타내었다.
3) 굴피나무 추출물의 활성산소 소거활성(OSC50)은굴피나무 에탄올 추출물이 0.02 µg/mL, ethyl acetate 분획, 0.56 µg/mL, ethyl acetate 분획에서 당 제거시킨 aglycone은 0.01 µg/mL로 굴피나무 ethyl acetate 분획의 당 제거한 aglycone이 가장 큰 활성을 나타냈다.
3가지 추출물 모두 free radical 소거활성이 크게 나타났으며 그중에서 ethyl acetate 분획이 보다 큰 활성을 나타내었으며, 이는 비교 물질인 (+)-α-Tocopherol보다도 큼을 보여주고 있다.
4) 1O2으로 유도된 적혈구의 광용혈 현상에 있어서, 굴 피나무 추출물은 µg/mL의 농도 범위(1 ∼ 50 µg/mL)에서 농도-의존적으로 1O2으로 유도된 용혈에서 세포보호 활성을 나타내었다.
5) 굴피나무 추출물 중 ethyl acetate 분획과 aglycone 분획은 tyrosinase 저해활성(IC50)이 각각 153.87 µg/mL, 137.53 µg/mL로 arbutin (IC50: 226.88 µg/mL)에 비하여 매우 큰 활성을 나타내었다.
50 % 에탄올 추출물, ethyl acetate 분획, 당을 제거시킨 분획 모두 비교물질로 사용한 L-ascorbic acid (1.50 µg/mL)보다도 큰 활성을 보였다.
6) 굴피나무 추출물 중 aglycone 분획은 elastase 저해 활성(IC50)이 1.48 µg/mL로 매우 큰 활성을 나타내었다.
7) 굴피나무 추출물 중 ethyl acetate 분획을 함유하고 있는 크림은 placebo 크림에 비해 수분 보유량을 2~8 %증가시켰으며, 유의적인 경표피의 수분 손실량을 감소시켰다.
8) 인체실험의 결과, 굴피나무 추출물(ethyl acetate 분획) 함유 크림은 placebo 크림이 비해 멜라닌을 9.55% 감소시켰으며, 피시험자들의 설문지 평가에서도 추출물 함유 크림이 피부색을 더 엷게 변화시키는 미백효과가 있다는 결과를 얻을 수 있었다.
08 %이었다. Ethyl acetate 분 획은 50 % 에탄올로 추출한 것을 1차 hexane으로 비극성 물질을 제거한 뒤 ethyl acetate 분획을 추출하여 감압․농축하였고 수득률이 약 1.88 %이었으며, ethyl acetate 분 획을 산 가수분해시켜서 당을 제거한 aglycone의 수득률은 33.81 %였다. 본 연구에서는 50 % 에탄올 추출물, ethyl acetate 분획, aglycone 분획을 실험에 사용하였다.
굴피나무 50 %에탄올 추출물은 1, 5, 10, 50 µg/mL의 농도에서 거의 농도 의존적(τ50이 각각 50.13, 238.00, 460.00, 510.24 min) 으로 세포 파괴를 억제하였다.
굴피나무 ethyl acetate 분획은 1, 5, 10, 50 µg/mL의 농도에서 거의 농도 의존적(τ50이 각각 73.00, 538.50, 717.27, 95.53 min) 으로 세포 파괴를 억제하였다.
경표피 수분 손실량은 추출물 함유 크림 도포 후, 60 min 간격으로 180 min 동안 측정하였다(Figure 9). 그 결과 180 min이 지난 후 무도포한 부분의 수분 손실량은 5.8 g/m² h , placebo 크림은 5.7 g/m² h, 굴피나무 추출물 함유한 크림은 5.0 g/m² h으로, 굴피나무 추출물을 함유한 크림이 경표피 수분 손실량을 유의적으로 감소시킴을 알 수 있었다.
, USA)를 이용하여 팔 안쪽에 UVA와 UVB를 조사한 후 6주 동안 3일, 7일, 1주, 2주, 4주, 6주에 멜라닌 지수를 측정하였다. 그 결과 4주가 지난 후 무 도포한 부분에 비해 placebo 크림은 멜라닌을 3.97 %, 굴 피나무 함유 크림은 9.55 % 감소 시켰으며, 이를 통하여 굴피나무 함유 크림이 멜라진 지수를 더 감소시키는 미백효과가 있음을 확인하였다(Figure 10).
Figure 7은 추출물 함유 크림을 사용하기 직전부터 시작하여 30 min 간격으로 3 h 동안 수분 보유량을 측정한 결과이다. 그 결과 무도포한 부분과 placebo 크림에 비하여 굴피나무 함유 크림의 수분 보유량이 더 증가함을 알 수 있었으며, placebo 크림에 비하여 굴피나무 함유 크림의 경우 수분 보유량 증가율(2 ~ 8 %)이 더 큼을 알 수 있었다(Figure 8).
대조군(control)은 τ50이 31 min으로 오차범위 ± 1 min 이내로 모든 경우의 실험에서 재현성이 양호하게 나타났다.
56µg/mL로 나타났다. 따라서 총항산화능은 당을 제거시킨 분획이 50 % 에탄올 추출물보다 활성산소 소거활성이 보다 큼을 보여주었다. 50 % 에탄올 추출물, ethyl acetate 분획, 당을 제거시킨 분획 모두 비교물질로 사용한 L-ascorbic acid (1.
위의 결과에서 보듯이 50% 에탄올 추출물은 50 µg/mL의 농도에서 가장 큰 세포 보호 효과(510.24 min)를 보여주었다.
위의 결과에서 보듯이 ethyl acetate 분획은 10 µg/mL의 농도에서 가장 큰 세포보호 효과(717.27 min)를 보여주었고, 농도가 50µg/mL에서 95.53 min으로 감소하는 경향을 나타내었다.
이상의 결과들은 굴피나무 추출물의 항산화 작용과 더불어 ethyl acetate 분획과 당 제거 실험 후 얻어진 aglycone 분획의 큰 tyrosinase, elastase 저해활성을 확인하였으며, ethyl acetate 분획을 함유하는 크림을 이용한 인체 시험의 결과로부터 미백 기능성 화장품원료로서 응용 가능성이 큼을 알 수 있었다.
조사 결과, 피부 색 변화 문항 중 굴피나무 함유 크림의 “약간 좋아짐(mild)” 항목이 10 %, “좋아짐(good)” 항목이 70%로 placebo 크림의 “약간 좋아짐(mild)” 항목이 70 %, “좋아짐(good)” 항목이 20 %인 것에 비해 피부색을 더 엷게 변화시켰다고 평가하였다(Figures 11, 12).

질의응답

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	굴피나무 수피 추출물에는 어떤 성분들이 함유되어 있는가?	굴피나무 지상부 추출물의 항진균 활성 및 잎 추출물의 항암활성들이 보고되고 있고[24-28], 항산화 작용으로 free radical 소거활성(DPPH), 항염증 작용으로 NFκB의 활성 억제와 IL-8 mRNA 발현 억제작용 등이 알려져 있다[29]. 굴피나무 수피 추출물 성분으로는 quercetin, morin, quercitrin 및 그 배당체들이 함유되어 있는 것으로 보고되었다[30,31].
	굴피나무 지상부 추출물은 어떤 효능을 지니고 있는가?	굴피나무(Platycarya strobilacea)는 가래나무과에 속하는 낙엽수목으로, 열매와 뿌리는 약용으로 이용되어 왔으며, 뿌리 껍질은 소염작용이 있는 것으로 알려져 있다. 굴피나무 지상부 추출물의 항진균 활성 및 잎 추출물의 항암활성들이 보고되고 있고[24-28], 항산화 작용으로 free radical 소거활성(DPPH), 항염증 작용으로 NFκB의 활성 억제와 IL-8 mRNA 발현 억제작용 등이 알려져 있다[29]. 굴피나무 수피 추출물 성분으로는 quercetin, morin, quercitrin 및 그 배당체들이 함유되어 있는 것으로 보고되었다[30,31].
	활성산소종 중 피부 광손상에 있어서 중요한 역할을 한다고 알려진 물질은 무엇인가?	ROS란 반응성이 매우 큰 1O2 및 ⋅OH을 비롯하여 O2⋅- , H2O2, ROO⋅, RO⋅, ROOH 및 HOCl 등을 말한다. ROS 중에서 특히 1O2 및 ⋅OH은 피부 광손상에 있어서 중요한 역할을 하는 것으로 알려져 있다. 이들 ROS는 효소적 그리고 비효소적 항산화제로 이루어진 피부 항산화 방어망을 붕괴시키고 생체 분자의 산화적 변형, 피부 장벽의 손상과 결합조직 성분인 콜라젠, 히아루론산 등의 사슬절단 및 비정상적인 교차결합에 의한 주름생성 등 피부노화를 가속시킨다[1-7].

참고문헌 (31)

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저자의 다른 논문 :

표제어: PCR

동의어: Packet Collision Rate

용어 설명 출처 목록 (6)

용어 설명: PCR은 세균 특이성이 있는 primer를 이용하여 적은 수의 세균이 있을지라도 쉽게 검출할 수 있는 유용한 방법이며, 이를 이용하여 구강 내 치면세균막이나 타액에서 직접 세균을 검출할 수 있게 되었다[8].

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