[논문]커넥신 세포막채널을 이용한 씨엠티엑스 돌연변이체의 분석

천미색; 오승훈

doi:10.5352/jls.2008.18.6.764

커넥신 세포막채널을 이용한 씨엠티엑스 돌연변이체의 분석
Analysis of CMTX Mutants Using Connexin Membrane Channels 원문보기

생명과학회지 = Journal of life science, v.18 no.6 = no.98, 2008년, pp.764 - 769

천미색 (단국대학교 의과대학 생리학교실) , 오승훈 (단국대학교 의과대학 생리학교실)

초록
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커넥신(connexin) 32 유전자의 돌연변이가 씨엠티엑스(CMTX, X-linked Charcot-Marie-Tooth) 질환과 관련이 있다. 현재까지 300여개 이상의 돌연변이가 보고가 되었으나 이 질환에 대한 상세한 분자병리학적 원인을 거의 알려져 있지 않고 있다. 여러 연구를 통해서 커넥신 세포막채널이 간극결합채널이 갖고 있는 대부분의 생물리학적 특성을 갖고 있는 것으로 판명되었다. 이번 연구에서는 씨엠티엑스 질환과 관련된 두 개의 돌연변이체를 선정하여 간극결합채녈 대신 돌연변이체로 구성된 커넥신 세포막채널을 이용하여 단일채널수준에서 이들 돌연변이체의 특성을 조사하였다. M34T 돌연변이 세포막채널의 생물리학적 특성은 이들로 구성된 돌연변이 간극결합채널의 특성과 거의 유사하였다. 더욱이, 돌연변이 세포막채널을 이용한 연구를 통해서 간극결합채널을 이용한 연구에서는 밝혀지지 않았던 개폐극성의 역전, 빠른 개폐의 소실과 느린 개폐의 생성과 같은 새로운 사실을 알게 되었다. T86C 돌연변이 세포막채널 또한 이의 모체가 되는 커넥신 32 세포막채널과 유사한 특성을 갖고 있음을 알게 되었다. 이상의 결과를 통해서 커넥신 세포막을 이용한 연구가 씨엠티엑스 질환의 돌연변이체를 연구하는데 매우 유용할 것으로 생각된다.

Abstract ▼ AI-Helper

Mutations in the human connexin 32 (Cx32) gene are responsible for X-linked Charcot-Marie-Tooth (CMTX) disease. Although over 300 different mutations have been identified the detailed molecular etiology of CMTX disease is poorly understood. Several studies reported that connexin membrane channels share most biophysical properties with their parental gap junction channels. In this study, two connexin mutant membrane channels (one mutant channel called the M34T channel in which the methionine residue at the $34^{th}$ position of the Cx32 protein is replaced with threonine residue and the other mutant channel called the T86C channel in which the threonine residue at the $86^{th}$ position is replaced with cysteine residue) associated with CMTX mutations were characterized at the single-channel level instead of using mutant gap junction channels. The biophysical properties of the M34T channel were very similar to those of the gap junction channel formed by M34T mutation. In addition, the mutant membrane channel study revealed the reversal of the gating polarity, the loss of fast gating and the gain of slow gating. The T86C channel also behaves like its parental wild type Cx32 membrane channel. Taken together, these results suggest that a study using connexin membrane channels is useful to characterize CMTX mutants.

주제어

AI 본문요약
AI-Helper

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제안 방법

These include the reduced open channel probability and the slow gating at negative potential. In addition, new facts about the M34T channel were revealed: the loss of fast gating at negativpotential and the gain of fast gating (the reversal of the gating polarity) and slow gating at positive potentials. These findings could be obtained by employing the mutant membrane channel rather than using the gap junction channel.

대상 데이터

In this study, we chose two CMTX mutants, M34T (the methionine residue at the 34th position of the Cx32 protein is replaced with threonine residue) and T86C (the threo- nine residue at the 86th position is replaced with cysteine). The connexin membrane channels harboring these mutations were characterized at the single channel level.

성능/효과

In conclusion, we chose two CMTX mutants to test whether the approach of using connexin membrane channels harboring these mutations was useful for characterizing the mutants instead of using mutant gap junction channels. The biophysical properties of the M34T mutant channel were very similar to those of the gap junction channel formed by M34T mutation.
However, this effect was not observed in the Cx32M34Tmutant gap junction channel [9]. It could be explained by the fact that the gating events of the Cx32M34T mutant gap junction channel, whether fast or slow, were too brief to be analyzed carefully. In fact, it has been reported that the Cx32M34T mutant associated with CMTX disease forms a functional gap junction channel with a reduction of open channel probability (~0.
Therefore, it will be useful to test whether these positions are accessible by using SCAM. Taken together, the results of this study suggest that the changes in biophysical properties of the CMTX mutants, including reduced open channel probability, reversed gating polarity, and modification of slow and fast gating, resulted from the mutations and that a new experimental paradigm using the connexin membrane channel instead of the gap junction chann니 is very useful to characterize the CMTX mutants.

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표제어: PCR

동의어: Packet Collision Rate

용어 설명 출처 목록 (6)

용어 설명: PCR은 세균 특이성이 있는 primer를 이용하여 적은 수의 세균이 있을지라도 쉽게 검출할 수 있는 유용한 방법이며, 이를 이용하여 구강 내 치면세균막이나 타액에서 직접 세균을 검출할 수 있게 되었다[8].

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