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문제 정의
- 23) 그러나 당뇨 유발 동물모델에 있어서 차가버섯의 섭취가 동물의 혈당과 항산화 상태 및 DNA 손상 개선 정도에 어떠한 영향을 미치는지에 대한 in vivo 연구는 아직 시도되지 않고 있다. 따라서 본 연구는 streptozotocin으로 당뇨를 유발한 흰쥐에게 차가버섯 추출물을 투여한 후 차가버섯추출물이 손상된 췌장의 기능을 회복시키어 혈당 강하 효과를 보이는지, 나아가 차가버섯 추출물의 투여가 당뇨유발 흰쥐의 항산화 체계와 DNA 손상 감소에 효과가 있는지를 알아보고자 하는 목적으로 시도되었다.
- 최근 당뇨환자에게서 산화적 손상이 증가됨이 보고되면서 항산화식품의 섭취를 통한 DNA 손상 개선노력이 다각도로 시도되고 있다. 차가버섯을 비롯한 여러 가지 버섯류에 항산화활성 및 혈당강하 효과가 있음이 알려지고 있으므로 본 연구에서는 streptozotocin (STZ) 유발 당뇨쥐를 사용하여 차가버섯에 항산화 효과 및 DNA 손상 억제효과가 있는지, 그리고 이런 항산화효과가 당뇨쥐의 혈당을 감소시키는지를 알아보았다. Sprague-dawley종 수컷 흰쥐(4주령, 110 ± 6 g) 32마리를 대조군, 당뇨군, 저농도 차가버섯투여군 (0.
제안 방법
- 이를 이용하여 용혈된 적혈구에 glutathione, glutathione reductase, NADPH를 첨가하고 37℃, 10분간 배양한 뒤 t-butylhydroperoxide를 넣어 반응시켰으며 이 때 감소된 NADPH농도를 340 nm에서 90초간 측정함으로써 GSH-Px의 항산화정도를 측정하였다.27) Catalase의 활성은 용혈된 적혈구에 50 mM phosphate buffer (pH 7)와 hydrogen peroxide를 첨가한 후 hydrogen peroxide의 감소량을 240 nm에서 30초간 측정하여 구하였다.28)
- 4주 간의 사육 후 12시간 절식시킨 후에 쥐를 마취하여 심장으로부터 혈액을 채취하였다. 간 조직을 적출하여 무게를 잰 뒤 액체질소로 급속 냉동시킨 후 실험 전까지 -80℃ 냉동고에 보관하였다.
- 4주 후에 혈액과 간을 채취하여 혈장 glucose, 혈장 총항산화능 (total radical-trapping antioxidant potential, TRAP) 수준 및 α-tocopherol 수준, 적혈구 catalase, superoxide dismutase (SOD), 및 glutathione peroxidase (GSH-Px)의 활성도, 그리고 임파구 및 간조직의 DNA 손상 정도를 comet assay로 측정하였다.
- 4)으로 충분히 세척하고 20 μL/mL 농도의 ethidium bromide로 핵을 염색하여 형광현미경 상에서 관찰하였다. CCD camera를 통해 보내진 각각의 세포핵 image는 comet image analyzing system이 설치된 컴퓨터 상에서 분석하였으며, H2O2에 의한 전혈에서의 DNA 손상 및 차가추출물 투여에 의한 손상억제 정도는 핵으로부터 이동한 DNA 파편의 거리 (tail length)로 측정하였다. Comet assay의 분석방법을 도식으로 표현한 것은 Fig.
- 1 M citrate buffer에 녹여서 꼬리 정맥을 통하여 주사하였다. STZ 투여한 지 3~4일 후에 공복혈당이 300 mg/dL 이상을 보여 당뇨가 유발되었음을 확인한 후에 당뇨유발쥐를 선택하여 체중에 따라 난괴법으로 당뇨군 (diabetic control group), 저농도 차가버섯투여군(diabetic low chaga group), 고동도 차가버섯투여군 (diabetic high chaga group)으로 나누었으며 당뇨를 유발시키지 않은 대조군 (normal control)을 포함하여 총 4군을 대상으로 4주 동안 동물실험을 수행하였다. 모든 동물들은 한마리씩 사육실에 넣어 사육하였으며 사육실의 온도와 습도는 자동 조절되도록 하였고 빛은 12시간씩 비추어 낮고 밤이 동일하도록 조절하였으며 식이와 물은 마음대로 먹게 하였다.
- STZ에 의한 당뇨유발을 확인하기 위한 혈당은 공복상태에서 꼬리정맥으로부터 채혈하여 혈당계 (Accutrend GC, Roche, Germany)를 이용하여 측정하였으며, 희생 후 혈액에서 분리한 혈장 내 혈당측정은 enzymatic kit를 사용하여 자동 생화학 분석기로 500 nm에서 비색 정량하였다.
- Sprague-dawley종 수컷 흰쥐(4주령, 110 ± 6 g) 32마리를 대조군, 당뇨군, 저농도 차가버섯투여군 (0.5 g/kg BW) 및 고동도 차가버섯투여군 (5g/kg BW) 등 4군으로 나누어 동물실험을 진행하였으며, 꼬리 정맥에 STZ을 주사하여 당뇨를 유발시킨 후 4주간 사육하였다.
- 그 상층액을 여러 농도로 나누어 37℃에서 10분간 배양한 후 20 μL의 pyrogallol를 첨가한 후 320 nm에서 180초간 측정하였으며, 적혈구내 SOD의 활성은 pyrogallol의 자동산화를 50% 억제하는 antioxidant capacity로 정의하였다.
- 4~6주된 Sprague-Dawley 100 g 이하의 수컷 흰쥐 32마리를 구입하여 일정기간 환경에 적응시킨 후 당뇨를 유발시키었다. 당뇨를 유발시키기 위해 50 mg/kg의 streptozotocin (STZ)을 0.1 M citrate buffer에 녹여서 꼬리 정맥을 통하여 주사하였다. STZ 투여한 지 3~4일 후에 공복혈당이 300 mg/dL 이상을 보여 당뇨가 유발되었음을 확인한 후에 당뇨유발쥐를 선택하여 체중에 따라 난괴법으로 당뇨군 (diabetic control group), 저농도 차가버섯투여군(diabetic low chaga group), 고동도 차가버섯투여군 (diabetic high chaga group)으로 나누었으며 당뇨를 유발시키지 않은 대조군 (normal control)을 포함하여 총 4군을 대상으로 4주 동안 동물실험을 수행하였다.
- STZ 투여한 지 3~4일 후에 공복혈당이 300 mg/dL 이상을 보여 당뇨가 유발되었음을 확인한 후에 당뇨유발쥐를 선택하여 체중에 따라 난괴법으로 당뇨군 (diabetic control group), 저농도 차가버섯투여군(diabetic low chaga group), 고동도 차가버섯투여군 (diabetic high chaga group)으로 나누었으며 당뇨를 유발시키지 않은 대조군 (normal control)을 포함하여 총 4군을 대상으로 4주 동안 동물실험을 수행하였다. 모든 동물들은 한마리씩 사육실에 넣어 사육하였으며 사육실의 온도와 습도는 자동 조절되도록 하였고 빛은 12시간씩 비추어 낮고 밤이 동일하도록 조절하였으며 식이와 물은 마음대로 먹게 하였다. 저농도 차가버섯투여군은 당뇨유발 후 차가버섯 추출물을 매일 0.
- 5 μM)을 H2O2 (75 μM)로 활성화시킴으로써 생성된 ferryl myoglobin radical species와의 상호 작용에 의해 형성된 ABTS radical cation의 absorbance를 측정하는데 기초를 두고 있으며 그 absorbance의 억제 정도는 sample에 들어 있는 antioxidant capacity에 비례하게 된다. 시료를 6분 동안 30℃에서 배양한 후 UV/VIS spectrophotometer를 이용하여 740 nm의 파장에서 absorbance를 측정하였다. 혈장의 TRAP 항산화능은 trolox의 calibration curve를 이용하여 계산하였으며 TEAC (Trolox equivalent antioxidant capacity, mM)로 표현하였다.
- 5 g/kg씩, 고동도 차가버섯투여군은 매일 5g/kg씩 투여하였으며 나머지는 모두 같은 조건에서 사육하였다. 실험동물을 4주간 사육한 후 희생하여 심장으로부터 곧 바로 채혈한 후 혈당을 측정하고, 이어서 항산화 활성을 측정하며, Comet assay방법으로 전혈과 간의 DNA 손상정도를 측정하였다.
- 26) GSH-Px는 과산화물 (t-butylhydroperoxide)에 의해 glutathione이 산화되는 반응을 촉매하며 이 때 산화된 glutathione은 glutathione reductase와 NADPH2의 존재하에 다시 glutathione으로 환원되고 NADPH2는 NADP로 산화된다. 이를 이용하여 용혈된 적혈구에 glutathione, glutathione reductase, NADPH를 첨가하고 37℃, 10분간 배양한 뒤 t-butylhydroperoxide를 넣어 반응시켰으며 이 때 감소된 NADPH농도를 340 nm에서 90초간 측정함으로써 GSH-Px의 항산화정도를 측정하였다.27) Catalase의 활성은 용혈된 적혈구에 50 mM phosphate buffer (pH 7)와 hydrogen peroxide를 첨가한 후 hydrogen peroxide의 감소량을 240 nm에서 30초간 측정하여 구하였다.
- 임파구 DNA 손상측정을 위한 comet assay는 Singh의 방법29)을 수정, 보완하여 실시하였다. 전혈 20 μL을 채취하여 75 μL의 0.
- 모든 동물들은 한마리씩 사육실에 넣어 사육하였으며 사육실의 온도와 습도는 자동 조절되도록 하였고 빛은 12시간씩 비추어 낮고 밤이 동일하도록 조절하였으며 식이와 물은 마음대로 먹게 하였다. 저농도 차가버섯투여군은 당뇨유발 후 차가버섯 추출물을 매일 0.5 g/kg씩, 고동도 차가버섯투여군은 매일 5g/kg씩 투여하였으며 나머지는 모두 같은 조건에서 사육하였다. 실험동물을 4주간 사육한 후 희생하여 심장으로부터 곧 바로 채혈한 후 혈당을 측정하고, 이어서 항산화 활성을 측정하며, Comet assay방법으로 전혈과 간의 DNA 손상정도를 측정하였다.
- 적혈구 항산화 효소인 SOD, GSH-Px, catalase 활성도는 UV/VIS spectrometer를 사용하여 측정하였다. SOD는 적혈구 현탁액을 증류수로 용혈시킨 후 ethanol과 chloroform을 가하고 이를 3,000 U/min, 2분간 원심 분리하였다.
- 전기영동이 끝난 후 0.4 M Tris 완충용액(pH 7.4)으로 충분히 세척하고 20 μL/mL 농도의 ethidium bromide로 핵을 염색하여 형광현미경 상에서 관찰하였다.
- 동물실험을 위한 기본실험식이 조성은 AIN-93 diet24)에 따라 제조하였으며(Table 1), 기본식이에 준비된 차가버섯 열수 추출물을 잘 혼합하여 차가버섯 실험식이를 제조하였다. 차가버섯 일일투여량은 사람의 1회 섭취량에 해당하는 농도를 저농도로, 그것의 10배를 고농도로 설정한 후에 체중을 감안하여 환산하였으며 저농도의 경우 동물 체중 1 kg당 0.5 g, 고농도의 경우 체중 1 kg당 5 g이 되도록 투여하였다.
- 혈장 α-tocopherol 수준은 혈장의 단백질을 ethanol로 제거하고 n-hexane으로 지방을 추출한 후 rotary evaporator로 hexane을 증발시키고, mobile phase (methanol：dichloromethane = 85：15) (Fisher Co.)에 녹여 HPLC로 측정하였다.
- 시료를 6분 동안 30℃에서 배양한 후 UV/VIS spectrophotometer를 이용하여 740 nm의 파장에서 absorbance를 측정하였다. 혈장의 TRAP 항산화능은 trolox의 calibration curve를 이용하여 계산하였으며 TEAC (Trolox equivalent antioxidant capacity, mM)로 표현하였다.
대상 데이터
- 4~6주된 Sprague-Dawley 100 g 이하의 수컷 흰쥐 32마리를 구입하여 일정기간 환경에 적응시킨 후 당뇨를 유발시키었다. 당뇨를 유발시키기 위해 50 mg/kg의 streptozotocin (STZ)을 0.
데이터처리
- 각 항목에 따라 평균값 ± 표준오차 (SE)를 구하였으며 각 군별 유의성 검증을 위해서 oneway 분산분석 (ANOVA)을 시행한 후, 각 군 간의 차이는 Duncan’s multiple range test로 사후 검증하였고 모든 통계적 유의성은 α = 0.05 수준에서 평가하였다.
이론/모형
- 차가버섯시료는 백두산에서 채집되어 온 버섯 일정량을 취하여 증류수를 첨가한 후, 진탕기에서 6시간 이상 열수 추출하고, 여과지로 여과하여 추출액을 분리한 후, 2차 추출액을 동일하게 만든 다음 혼합하였다. 동물실험을 위한 기본실험식이 조성은 AIN-93 diet24)에 따라 제조하였으며(Table 1), 기본식이에 준비된 차가버섯 열수 추출물을 잘 혼합하여 차가버섯 실험식이를 제조하였다. 차가버섯 일일투여량은 사람의 1회 섭취량에 해당하는 농도를 저농도로, 그것의 10배를 고농도로 설정한 후에 체중을 감안하여 환산하였으며 저농도의 경우 동물 체중 1 kg당 0.
- HPLC 분석 조건은 Table 2에 제시하였다. 혈장 총 항산화능을 나타내는 TRAP (Total radical-trapping antioxidant potential) assay는 Rice-Evans와 Miller의 inhibition assay25)에 따라 분석하였다. 이 방법은 ABTS{2,2’-azinobis (3-ethylbenzothiazo- line 6-sulfonate), 150μM}와 metmyoglobin (2.
성능/효과
- 19,20) 국내 연구로는 인슐린 비의존형 당뇨환자의 경우, 혈중 과산화지질이 증가하고 항산화 방어 체계가 저하되며,21) 당뇨병성 신증환자의 경우도 정상 대조군에 비해 oxidative stress가 증가함이 나타났고, 이것이 당뇨병성 신증 유발에 기여하는 것으로 보고되었다.22) 이러한 고혈당증세와 증가되어 있는 세포의 산화적 손상은 당뇨 환자의 동맥경화, 심혈관질환으로의 진전 위험 요인이 될 수 있다. 이처럼 당뇨환자는 항산화 상태가 불균형일 가능성이 높으므로, 체내 산화적 손상이 증가한 당뇨환자에게 항산화 식품을 섭취하게 하여 항산화 방어체계를 강화시킨다면 당뇨환자의 대표적인 합병증을 완화시킬 수 있을 것이다.
- 그 상층액을 여러 농도로 나누어 37℃에서 10분간 배양한 후 20 μL의 pyrogallol를 첨가한 후 320 nm에서 180초간 측정하였으며, 적혈구내 SOD의 활성은 pyrogallol의 자동산화를 50% 억제하는 antioxidant capacity로 정의하였다.26) GSH-Px는 과산화물 (t-butylhydroperoxide)에 의해 glutathione이 산화되는 반응을 촉매하며 이 때 산화된 glutathione은 glutathione reductase와 NADPH2의 존재하에 다시 glutathione으로 환원되고 NADPH2는 NADP로 산화된다. 이를 이용하여 용혈된 적혈구에 glutathione, glutathione reductase, NADPH를 첨가하고 37℃, 10분간 배양한 뒤 t-butylhydroperoxide를 넣어 반응시켰으며 이 때 감소된 NADPH농도를 340 nm에서 90초간 측정함으로써 GSH-Px의 항산화정도를 측정하였다.
- 3에 제시하였다. Comet assay에 의한 DNA 손상 정도를 나타내는 세 가지 지표 모두 대조군에 비해 당뇨군에서 증가하는 경향을 보였으며 특히 Tail length에서 그 차이가 뚜렷하였다. 당뇨쥐에 저농도 차가버섯을 투여한 군은 당뇨군에 비해 DNA 손상정도가 감소하는 경향은 보였으나 유의적인 차이는 아닌데 비해, tail length로 본 고농도 차가버섯투여군의 DNA 손상정도는 당뇨군에 비해 유의적으로 감소하였으며 (p < 0.
- STZ-유발 당뇨쥐에 차가버섯 추출물을 4주 동안 투여하였을 때 혈장 TRAP 수준 및 α-tocopherol 수준에서 차가버섯 추출물의 투여효과가 보이지 않았고 적혈구 항산화효소의 수준도 차이가 나타나지 않았으나, comet assay로 본 임파구 DNA 손상정도는 차가버섯 추출물 투여에 의해 유의적으로 감소하였다.
- 혈당의 평균값이 크게 감소하고도 통계적인 유의성이 나타나지 않은 것은 아마도 대조군의 편차에 비해 당뇨유발 후 차가를 섭취한 군의 편차가 훨씬 더 큰 데 기인한 것으로 생각되므로 앞으로 편차를 줄이기 위해 더 많은 개체 수의 동물을 사용하여 동물실험이 수행된다면 보다 의미 있는 결과가 나올 수 있을 것이다. 고농도 차가버섯군의 평균혈당이 저농도 차가버섯군보다 높았던 점은 해석하기 어려웠으나 본 실험에서 저농도 차가버섯과 고농도 차가버섯의농도 차이가 10배로 설정되어 고농도의 경우 혈당강하의 생리활성을 보이기에는 그 농도가 너무 높았던 것이 아닌가 생각된다. 그러나 이 부분도 앞으로 여러 농도의 차가버섯 추출물을 처리하는 실험들이 보강되어야 하리라고 본다.
- 당뇨군에 비해 저농도 및 고농도 차가버섯 투여군들에서 혈당이 감소하는 경향이 있었고 혈장 TRAP 수준과 α-tocopherol 수준이 증가하는 경향을 보였으나 모두 유의적인 차이는 아니었으며, 당뇨군에 비해 차가버섯 투여군에서 tail length로 본 임파구 DNA 손상 정도가 유의적으로 감소하였다 (p < 0.05).
- 당뇨군에 비해 저농도 차가버섯투여군 (401.7 ± 154.7 mg/dL)의 혈당은 39% 감소하였고, 고농도 차가버섯투여군 (609.9 ±117.8 mg/dL)은 6% 감소하였으나 두 군 모두 당뇨군에 비해 통계적으로 유의적인 차이를 보이지 않았다.
- 당뇨쥐에 저농도 차가버섯을 투여한 군은 당뇨군에 비해 DNA 손상정도가 감소하는 경향은 보였으나 유의적인 차이는 아닌데 비해, tail length로 본 고농도 차가버섯투여군의 DNA 손상정도는 당뇨군에 비해 유의적으로 감소하였으며 (p < 0.05) 대조군의 DNA 손상 수준까지 감소됨을 보여 차가버섯추출물의 투여가 당뇨쥐의 DNA 손상개선에 효과가 있음을 알 수 있었다.
- 대조군 (173.9 ± 8.7 mg/dL)에 비해 당뇨군 (660.1 ± 86.8 mg/dL)의 혈당이 382% 증가하였으며 통계적으로 유의적인 차이를 보였다.
- 본 연구결과, 차가버섯 열수추출물을 고농도 (5 g/kg BW)로 4주 동안 당뇨유발 흰쥐에게 투여하였을 때 혈당강하 효과는 유의적으로 나타나지 않았으나 당뇨로 인해 유발된 DNA 손상정도가 정상수준까지 뚜렷하게 감소함을 관찰하였으며 이를 통해 부분적으로 차가버섯의 항산화 효과를 관찰할 수 있었다. 이와 같은 결과는 앞으로 차가버섯을 이용하여 당뇨환자의 DNA손상을 개선시키기 위한 건강기능식품 개발 연구에 활용될 수 있을 것으로 생각된다.
- 본 연구에서 STZ으로 당뇨를 유발시킨 당뇨쥐에 있어서 차가버섯의 혈당강하 효과를 살펴본 결과, 저농도 차가버섯군의 평균 혈당이 당뇨군의 평균치에 비해 39%나 떨어졌고 고농도 차가군에서는 6% 떨어졌으나 두 군 모두 통계적으로 유의적인 차이는 보이지 않아 본 실험에서 사용한 차가버섯 추출물이 당뇨유발쥐의 혈당강하에 큰 영향을 미치지는 않았다. 그러나 저농도 차가버섯군의 혈당이 당뇨군에 비해 39% 정도나 감소한 것은 주목할 만한 결과라고 볼 수 있다.
- 본 연구에서 천연 차가버섯 열수추출물에 항산화 능력이 있을 것으로 예상하였고 이 항산화 능력이 STZ로 유발한 당뇨쥐의 당뇨증상을 완화하는지를 보고자 하였으나 실험결과 차가버섯의 DNA 손상 개선 정도로 본 항산화 효과는 나타났지만, 기타 총 항산화능 (TRAP)이나 항산화 효소로 본 항산화 능력은 크게 나타나지 않아 부분적인 항산화 효과를 보였으며, 혈당 강하 효과도 기대만큼 나타나지 않았다. 그 이유 중 하나로 생각해 볼 수 있는 것이 당뇨동물 모델이다.
- 본 연구에서도 대조군에 비해 STZ-유발 당뇨군들에서 유의적으로 DNA 손상 정도가 증가하였다. STZ은 산화스트레스를 일으킬 수 있는 잠재적인 물질일 뿐 아니라 잘 알려진 유전독성 물질이며 포유동물의 세포의 chromosome과 DNA에 손상을 줄 수 있다.
- 실험 결과, 대조군에 비해 당뇨군에서 혈당이 상승하고 (p < 0.05) 혈장 TRAP 수준은 감소하였으며 (p < 0.05) 임파구의 DNA손상은 증가하였고 (p < 0.05) 나머지 지표들은 차이가 나타나지 않았다.
- 실험동물의 체중변화를 관찰한 결과, 당뇨를 유발시킨 군들의 체중 증가가 대조군에 비해 유의적으로 낮아 당뇨 유발 4주 후 당뇨유발군들의 체중은 대조군의 50~60% 수준에 불과하였다 (Table 3). 이에 비해 식이섭취량은 대조군에 비해 당뇨유발군들에서 유의적으로 높았으며 이는 당뇨병이 유발된 후에 나타나는 당연한 현상으로 생각된다.
- 총항산화능을 나타내는 혈장 TRAP 수준은 예상과 같이 대조군에 비해 당뇨군에서 유의적으로 낮았다. 저농도 차가버섯투여군의 혈장 TRAP 수준은 당뇨군과 차이를 보이지 않았으며, 고농도 차가버섯투여군의 경우도 당뇨군에 비해 증가하는 경향을 보였으나 통계적으로 유의적인 차이는 보이지 않았다.
- 적혈구 항산화 효소인 catalase, superoxide dismutase(SOD), 및 glutathione peroxidase (GSH-Px)의 활성도는 모든 군 간에 유의적인 차이를 보이지 않았다 (Table 5).
- 먼저 혈장 α-tocopherol 수준은 대조군에 비해 당뇨군에서 감소하는 경향을 보이고 차가버섯 투여군에서 증가하는 경향은 보이나 각 군간에 통계적으로 유의적인 차이를 보이지 않았다. 총항산화능을 나타내는 혈장 TRAP 수준은 예상과 같이 대조군에 비해 당뇨군에서 유의적으로 낮았다. 저농도 차가버섯투여군의 혈장 TRAP 수준은 당뇨군과 차이를 보이지 않았으며, 고농도 차가버섯투여군의 경우도 당뇨군에 비해 증가하는 경향을 보였으나 통계적으로 유의적인 차이는 보이지 않았다.
후속연구
- 고농도 차가버섯군의 평균혈당이 저농도 차가버섯군보다 높았던 점은 해석하기 어려웠으나 본 실험에서 저농도 차가버섯과 고농도 차가버섯의농도 차이가 10배로 설정되어 고농도의 경우 혈당강하의 생리활성을 보이기에는 그 농도가 너무 높았던 것이 아닌가 생각된다. 그러나 이 부분도 앞으로 여러 농도의 차가버섯 추출물을 처리하는 실험들이 보강되어야 하리라고 본다.
- 또 하나의 제한점으로 각 군당 개체수가 충분치 않음으로 해서 개체 간 편차가 컸다는 점을 들 수 있다. 앞으로 제2형 당뇨모델을 사용하여 차가버섯의 혈당 강하 효과를 측정하는 연구 및 좀 더 많은 수의 동물을 대상으로 차가버섯추출물의 혈당 강하 및 항산화 관련 생리활성효과를 검토해 보는 연구가 적극적으로 이루어져야 하리라고 본다.
- 본 연구결과, 차가버섯 열수추출물을 고농도 (5 g/kg BW)로 4주 동안 당뇨유발 흰쥐에게 투여하였을 때 혈당강하 효과는 유의적으로 나타나지 않았으나 당뇨로 인해 유발된 DNA 손상정도가 정상수준까지 뚜렷하게 감소함을 관찰하였으며 이를 통해 부분적으로 차가버섯의 항산화 효과를 관찰할 수 있었다. 이와 같은 결과는 앞으로 차가버섯을 이용하여 당뇨환자의 DNA손상을 개선시키기 위한 건강기능식품 개발 연구에 활용될 수 있을 것으로 생각된다.
- 혈당의 평균값이 크게 감소하고도 통계적인 유의성이 나타나지 않은 것은 아마도 대조군의 편차에 비해 당뇨유발 후 차가를 섭취한 군의 편차가 훨씬 더 큰 데 기인한 것으로 생각되므로 앞으로 편차를 줄이기 위해 더 많은 개체 수의 동물을 사용하여 동물실험이 수행된다면 보다 의미 있는 결과가 나올 수 있을 것이다. 고농도 차가버섯군의 평균혈당이 저농도 차가버섯군보다 높았던 점은 해석하기 어려웠으나 본 실험에서 저농도 차가버섯과 고농도 차가버섯의농도 차이가 10배로 설정되어 고농도의 경우 혈당강하의 생리활성을 보이기에는 그 농도가 너무 높았던 것이 아닌가 생각된다.
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