선택한 단어 수는 입니다.
최소 단어 이상 선택하여야 합니다.
최소 단어 이상 선택하여야 합니다.
선택한 단어 수는 30입니다.
최대 10 단어까지만 선택 가능합니다.
최대 10 단어까지만 선택 가능합니다.
문제 정의
- 되었을 뿐 뇌경색 모델에서의 황련에 관한 연구는 전혀 없다. 따라서 본 연구는 허혈성 뇌경색 백서 모델을 이용하여 황련이 infarction volume의 감소 및 운동기능 회복에 미치는 효과와 inflammation 방어효과 및 신경세포 손상의 방어효과를 알아보고자 하였다.
- 본 실험은 황련추출물이 뇌경색 개선효과가 있는지 규명하기 위하여, sensorimotor cortex (SMC)에 뇌경색을 유발한 후 infarction volume을 관찰하였으며, SPRT를 통하여 운동기능회복을 관찰하여 보았다. 관찰 결과 황련추출물을 농도별(100, 250, 500 mg/kg)로 투여한 결과 500 mg/kg에서 유의한 infarction volume 의 감소효과가 관찰되었으며(p = 0.
- 본 연구는 황련 추출물의 광화학적 허혈성 뇌경색 모델을 이용한 뇌경색 개선효과(운동기능 개선 및 항염증 효과, 신경가소성 증진)를 연구한 것으로, 황련 추출물의 여러 농도 중 500 mg/kg에서 infarction volume을 가장 효과적으로 감소시켰으며 또한 황련 추출물 500 mg/kg의 전처치는 뇌경색 volume을 3-7일의 급성기에 효과적으로 감소시켰을 뿐만 아니라 빠른 운동성 회복을 유도하였다. 황련추출물의 전처치는 급성기 뇌경색의 inflammatory cytokine을 serum과 조직에서 감소시켰으며, immunohistochemistry 관찰 결과 대조군(normal saline)에 비하여 astrocytes가 더 많이 관찰되고 connexin-43의 조기형성에 의한 신경가소성이 촉진됨을 나타내었다.
제안 방법
- PCR반응이 끝난 후 1X 샘플링 buffer를 섞은 뒤 1.5% agarose gel에 10 ㎕씩을 넣고 전기영동 한 후 자외선을 이용하여 반응을 확인하였다.
- Photothrombotic infarction을 형성 후 날짜별로 1, 3, 7, 14일 경과하면서 500 mg/kg로 전처치한 황련에 의한 infarction volume의 감소효과를 관찰하였다. 관찰결과 infarction 형성 후 초기 1일째는 두 그룹 간 별다른 volume의 차이를 나타내지 못했는데, 3일째는 황련투약그룹에서 현저한 infarction volume의 감소를 나타내었으며(p = 0.
- SPRT 의 측정은 20개의 먹이 당 앞발이 도달하여 흘리지 않고 정확하게 입으로 가져가 먹이를 획득하는 작업(reaching task)을 정확히 수행하는 수에 대한 백분율로 평가하였다(성공률 = (성공적으로 먹은 먹이의 수 / 20) ×100).
- 이때 마지막 5일간의 자료를 뇌경색 발병 전 자료로 이용하였다. SPRT 훈련시 양측 앞발의 사용정도를 평가하여 우성 앞발을 결정, 반대측 대뇌부위를 뇌경색 병소로 선택하였다.
- ① 행동훈련 2일전 하루 동안 먹이를 제한하여 정상적인 체중의 90% 내외가 되도록 하여 이를 실험기간 동안 유지하도록 하였다. 다음 1일에는 훈련에 사용되는 새로운 먹이에 적응을 위하여 20개의 45 ㎎의 sucrose single pellet (Bio-Serve, New Jersey, USA)을 주었다.
- ③ 뇌경색 모델을 만든 후 대조군과 각기 다른 황련 추출물 투여군을 대상으로 수술 후 3주까지 매일 행동평가를 실시하였다. 뇌경색 수술 후 1일째에 기능적 평가에서 명확한 기능적 저하를 보이지 않는 백서는 원하는 크기의 뚜렷한 뇌경색 병변이 만들어지지 않은 것으로 판단하여 실험에서 제외하고 희생시켜 병리조직학적 소견을 관찰하여 병소의 생성여부를 확인하였다.
- 2)을 심장에 재주입하여 조직을 고정시켰다. 관류 고정이 끝난 후 뇌를 신속하게 적출한 다음 뇌를 4% PFA의 고정액으로 4℃에서 2-4시간 담가서 후고정을 시행하였고, 30% sucrose에 보관하여 완전히 침투된 다음 동결절편기(RM 2135, Leica CO, Nusslich, Germany)를 이용하여 병변의 처음 시작에서 400 ㎛마다 조직을 40 ㎛으로 얻어서 병변부피 계산에 이용하였으며 선택적인 병변의 위치에서 면역조직화학염색을 시행하였다. 병변부피의 확인을 위해 얻은 조직을 Cresyl violet을 이용하여 Nissl stain을 시행하였다.
- 대조염색으로 Gill's hematoxylin을 사용하고 Permount로 봉입하였다. 광학 현미경(Olympus BX50F4, Olympus Optical Co, Tokyo, Japan)을 이용 하여 대뇌의 9부위를 전체적 개관과 해당 세포를 관찰 한 후, 특이적인 위치를 확인하였다.
- 병변부피의 확인을 위해 얻은 조직을 Cresyl violet을 이용하여 Nissl stain을 시행하였다. 광학 현미경(Olympus BX50F4, Olympus Optical Co, Tokyo, Japan)을 이용하여 각 절편을 관찰한 후 영상을 저장하였고, Image J(National Instate of Health, Bethesda, USA)프로그램으로 뇌경색 변병 부위의 크기 및 면적을 측정하였다.
- 그 후에 PCR은 각각의 tube에 1 ml cDNA, 1x PCR buffer, 1 mM MgCl2, 200 μM dNTPs, 0.2 mM의 primer를 넣고 PCR 조건인 92˚C에서 30초, 58C에서 45초, 그 후에 72˚C에서 30초를 30cycle 반복하였다.
- ③ 뇌경색 모델을 만든 후 대조군과 각기 다른 황련 추출물 투여군을 대상으로 수술 후 3주까지 매일 행동평가를 실시하였다. 뇌경색 수술 후 1일째에 기능적 평가에서 명확한 기능적 저하를 보이지 않는 백서는 원하는 크기의 뚜렷한 뇌경색 병변이 만들어지지 않은 것으로 판단하여 실험에서 제외하고 희생시켜 병리조직학적 소견을 관찰하여 병소의 생성여부를 확인하였다.
- 80 mm에 위치한 40 ㎛두께의 관심절편을 선택한 후 면역염색을 시행하였다. 뇌병변 주위의 astrocyte와 gab junction의 확인을 위해 1차 항체로 polyclonal rabbit anti-cow glial fibrillary acidic protein (GFAP, ready-to-use, Dako-Cytomation)과 polyclonal rabbit anti-connexin 43(1 : 100, Zymed)을 반응시킨 뒤 2차 항체로 biotinylated anti-rabbit IgG(1 : 200, Vector Laboratories)을 사용하고 ABC kit(Vector Laboratories)을 이용하여 DAB으로 해당 항체의 발색을 유도하였다. 대조염색으로 Gill's hematoxylin을 사용하고 Permount로 봉입하였다.
- 1). 따라서 본 실험에서 황련 500 mg/kg를 기본 투약 용량으로 정하여 실험하였다.
- 또한 면역조직화학 염색을 위해 대뇌부위의 선택은 전정에서 전두부 쪽으로 2.28 mm에서 0.48 mm까지 범위의 뇌 관상 조직을 이용하였으며, 이 중 전정에서 +1.80 mm에 위치한 40 ㎛두께의 관심절편을 선택한 후 면역염색을 시행하였다. 뇌병변 주위의 astrocyte와 gab junction의 확인을 위해 1차 항체로 polyclonal rabbit anti-cow glial fibrillary acidic protein (GFAP, ready-to-use, Dako-Cytomation)과 polyclonal rabbit anti-connexin 43(1 : 100, Zymed)을 반응시킨 뒤 2차 항체로 biotinylated anti-rabbit IgG(1 : 200, Vector Laboratories)을 사용하고 ABC kit(Vector Laboratories)을 이용하여 DAB으로 해당 항체의 발색을 유도하였다.
- 마취 후 정위 두부 고정장치(Model 900 Small Animal stereotaxic Instrument®, David Kopf Instruments, Tujunga, USA)에 두부를 고정한 후 앙와위를 취하게 하고, 두부의 정중선을 3.5 ㎝ 절개하여 두피를 양쪽으로 벌린 후 골막을 박리하여 두개골을 노출시킨 다음 수술전 미리 측정한 우성측 전족부의 반대편 대뇌반구 쪽에 직경 4 mm의 광섬유 말단 조사부의 중심이 전정(bregma)으로부터 1.5 mm, 측방 3.5 mm 지점에 위치하도록 밀착 고정한 후 열 발생이 없는 할로겐 광원(백색광, 150 W, IlluminatorHalogen FOK-150X/150R, Fiber Optic Korea Co, Cheonan, Korea)을 사용하여 강도가 1.0 W/cm2인 백색광을 조사하였다.
- 동물 실험에 사용할 백서는 250-300g의 수컷 SpragueDawley (Samtako Bio Korea, Osan, Korea)계를 사용하였다. 백서는 cage에서 각각 3마리씩 사육하였으며, 하루에 각각 12시간 주기로 명암을 조절하였다. 사육실은 21-24℃의 온도를 유지하였으며, 물과 음식을 충분히 공급하는 환경에서 일주일 동안 실험실 환경에 적응시킨 후 실험 평가에 사용하였다.
- 관류 고정이 끝난 후 뇌를 신속하게 적출한 다음 뇌를 4% PFA의 고정액으로 4℃에서 2-4시간 담가서 후고정을 시행하였고, 30% sucrose에 보관하여 완전히 침투된 다음 동결절편기(RM 2135, Leica CO, Nusslich, Germany)를 이용하여 병변의 처음 시작에서 400 ㎛마다 조직을 40 ㎛으로 얻어서 병변부피 계산에 이용하였으며 선택적인 병변의 위치에서 면역조직화학염색을 시행하였다. 병변부피의 확인을 위해 얻은 조직을 Cresyl violet을 이용하여 Nissl stain을 시행하였다. 광학 현미경(Olympus BX50F4, Olympus Optical Co, Tokyo, Japan)을 이용하여 각 절편을 관찰한 후 영상을 저장하였고, Image J(National Instate of Health, Bethesda, USA)프로그램으로 뇌경색 변병 부위의 크기 및 면적을 측정하였다.
- 본 연구의 결과 500 mg/kg의 황련 전처치는 급성기 형성된 infarction volume을 빠르게 감소시켰으며, 이러한 작용이 황련의 항염증 효과를 통하여 발생되는지를 알아보기 위하여 황련의 1주간 전처치 후 photothrombotic infarction을 유발 후 12, 24, 48시간 후 inflammatory cytokine인 TNF-α, IL-6, IL-1β의 mRNA발현을 RT-PCR로 확인하였다.
- 이 부위는 Paxinos와 Watson14)에 의한 백서의 뇌지도에서 감각-운동 피질부(sensory-motor cortex)가 위치하는 부위를 선정하였다. 빛 조사 시작 2분 후 빛의 조사 상태에서 Rose bengal dye(20 mg/㎏, Sigma-Aldrich Co, Missouri, USA)를 미리 박리한 표재성 대퇴정맥을 통해 2분에 걸쳐 천천히 주입하였고, 이후 16분 동안에 빛 조사를 지속하여 광화학적 뇌경색을 유발하였다15).
- 백서는 cage에서 각각 3마리씩 사육하였으며, 하루에 각각 12시간 주기로 명암을 조절하였다. 사육실은 21-24℃의 온도를 유지하였으며, 물과 음식을 충분히 공급하는 환경에서 일주일 동안 실험실 환경에 적응시킨 후 실험 평가에 사용하였다. 본 연구의 동물실험은 실험동물 표준 실험지침(대한의학회, NIH Guide for the Care and Use of Laboratory Animals)에 의거하여 사육되고 연구되었다.
- 실험군은 황련추출물 100, 250, 500 mg/kg의 각기 다른 황련 농도를 존데를 통하여 뇌경색 유발 1주전 투여한 그룹이며, 대조군(control)은 모든 조건이 동일한 동일량, 동일방법의 생리식염수(NS)를 먹인 그룹으로 하였다.
- 운동기능 행동평가는 실험전 행동훈련(reaching training)을 통하여 백서를 훈련시킨 후 뇌경색 유발 후 그 운동기능 행동평가를 수술 후 3주까지 매일 행동평가를 실시하여 관찰하였다.
- 다음 1일에는 훈련에 사용되는 새로운 먹이에 적응을 위하여 20개의 45 ㎎의 sucrose single pellet (Bio-Serve, New Jersey, USA)을 주었다. 이 후 7일간 SPRT 훈련을 위해 같은 먹이를 오전과 오후에 각각 20분씩 노출하며, 1주일 동안 20개의 먹이 먹기 훈련을 오전과 오후에 실시하였다. 이때 마지막 5일간의 자료를 뇌경색 발병 전 자료로 이용하였다.
- 이를 위해 행동 평가를 할 수 있게 자체 고안한 행동기능평가 상자(behavior box)는 45× 35×35 ㎝의 투명한 5 ㎜ plexiglas로 만들어진 함의 전면 중앙에 바닥으로부터 2 ㎝ 높이에 1 ㎝ 넓이의 15 ㎝ 높이의 구멍을 만들고, 이 구멍의 밑 부분에 바깥으로 5×4 ㎝, 깊이 5 ㎜(구멍이 위치한 부위는 열려있는)의 먹이받이를 설치하여 사용하였다.
- 전자현미경(×100)을 통한 GFAP 염색후 photothrombotic infarction 유발 3일후 가장 염증이 극대화 되었을 때 희생하여 뇌의 조직을 절편하여 관찰하였다.
- 존데를 이용하여 백서에 구강내로 2.5 ml의 0.9 % normal saline (NS) 주사용수에 건조 분말 황련을 kg 당 계산하여 녹여 투여하였다.
- 본 연구의 결과 500 mg/kg의 황련 전처치는 급성기 형성된 infarction volume을 빠르게 감소시켰으며, 이러한 작용이 황련의 항염증 효과를 통하여 발생되는지를 알아보기 위하여 황련의 1주간 전처치 후 photothrombotic infarction을 유발 후 12, 24, 48시간 후 inflammatory cytokine인 TNF-α, IL-6, IL-1β의 mRNA발현을 RT-PCR로 확인하였다. 황련 500 mg/kg을 일주일간 전처치한 그룹과 생리식염수를 먹인 두 그룹을 photothrombotic infarction을 유도한 뒤 12, 24, 48시간에 실험동물을 분석하였다. 실험동물의 뇌에 infarction이 가장 심하게 이루어진 부분을 잘라내어 그 조직에서 inflammatory cytokine들인 IL-1β, IL-6, TNF-α의 mRNA 발현차이를 확인한 결과 황련의 전처치는 IL-1β와 TNF-α의 발현을 억제하였으며, IL-6의 경우도 어느 정도 억제하는 것으로 나타났다(Fig.
- 황련은 기존의 연구에서 항염증 효과에 대해 많이 보고되었으며9,28-30), 이러한 infarction volume의 감소효과가 과연 이러한 황련의 항염증 효과에서 기인하는지를 알아보기 위하여, 가장 효과를 보인 황련추출물 500 mg/kg을 뇌경색 유발 7일전 전처치한 군과 normal saline(동일량, 동일방법)을 전처치한 군으로 나누어, anti-inflammation 관련 cytokines (TNF-α, IL-6, IL-1β)을 RT-PCR과 ELISA를 이용하여 관찰하였다.
- 황련의 농도에 따른 cerebral infarction의 volume 변화를 관찰하기 위하여 뇌경색 유발 1주 전 대조군과 황련 100, 250, 500 mg/kg의 황련 농도를 존데를 통하여 투여하여 뇌경색 유발 3일 후 그 volume(mm3)을 비교하였다. 황련의 농도가 증가함에 따라 infarction volume은 줄어드는 경향을 나타내었으며 특히, 황련 500 mg/kg의 경우 대조군(NS)과 유의성 있게 근접한 infarction volume의 차이를 나타내었다(p = 0.
대상 데이터
- 대조염색으로 Gill's hematoxylin을 사용하고 Permount로 봉입하였다.
- 동물 실험에 사용할 백서는 250-300g의 수컷 SpragueDawley (Samtako Bio Korea, Osan, Korea)계를 사용하였다. 백서는 cage에서 각각 3마리씩 사육하였으며, 하루에 각각 12시간 주기로 명암을 조절하였다.
데이터처리
- 결과는 평균 ± 표준오차(mean ± standard error of mean; SEM)로 요약하였으며, 통계학적 분석은 SPSS 14.0K for Windows (SPSS Inc, IL, USA)를 사용하여 independent t-test를 시행하였고, P-값이 0.05 이하인 경우 통계적으로 유의성이 있는 것으로 판단하였다.
이론/모형
- Tri-zol로 추출한 RNA는 MML-V reverse transcriptase 의 protocol을 사용하여 cDNA로 합성하였다. 간단히 기술하자면 역전사 반응을 위하여 total RNA (1 mg)에 0.
- mRNA발현 결과를 바탕으로 실제로 실험동물에 위와 같은 방법으로 infarction을 유도하였을 때에 혈청내로 나오는 염증 사이토카인(proinflammatory cytokine)인 TNF-α, IL-6, IL-1β 수치를 enzymelinked immunosorbent assay (ELISA) kits (R&D Systems, Inc, MN, USA) 방법으로 측정하였다.
- ② 백서의 운동기능 평가를 위해 Vergara-Aragon 등16)이 제시한 방법에 따라 SPRT를 시행하였다. 이를 위해 행동 평가를 할 수 있게 자체 고안한 행동기능평가 상자(behavior box)는 45× 35×35 ㎝의 투명한 5 ㎜ plexiglas로 만들어진 함의 전면 중앙에 바닥으로부터 2 ㎝ 높이에 1 ㎝ 넓이의 15 ㎝ 높이의 구멍을 만들고, 이 구멍의 밑 부분에 바깥으로 5×4 ㎝, 깊이 5 ㎜(구멍이 위치한 부위는 열려있는)의 먹이받이를 설치하여 사용하였다.
- 뇌경색 병변의 생성에 따른 뇌경색 volume을 측정하기 위하여, 행동평가가 끝난 실험동물을 chloral hydrate를 과용량 주입하여 신속히 마취시킨 후 심장관류법(transcardiac perfusion method)을 이용하여 고정하였다. 관류액(heparin 20,000 IU, 3 ml/0.
성능/효과
- Data showed that 500mg/kg Coptidis Rhizoma (CR) treated group (n=10) had a better improvement of motor function than control operation group (n=10).
- ELISA법에 의한 혈청내로 나오는 염증 사이토카인(proinflammatory cytokine)인 TNF-α, IL-6, IL-1β 수치는 infarction 유발 후 그 수치가 증가하였으며, 500 mg/kg의 황련을 전처치한 군에서 IL-1β는 12, 24, 48시간에서 대조군에 비하여 유의한 감소를 나타내었고(p ＜ 0.05), IL-6의 경우 감소하되 12시간에서 가장 통계적으로 유의한 감소를 나타내었으며(p ＜ 0.05), TNF-α 또한 IL-6와 마찬가지로 대조군에 비하여 황련 처치군이 12시간에서 가장 유의한 감소를 나타내었다(p ＜ 0.05, Fig. 6).
- ELISA에 의한 serum내 cytokine의 양은 infarction 유발 후 증가하였으며, 황련추출물(500 mg/kg)의 전처치는 IL-1β는 12, 24, 48시간에서(p ＜ 0.05), IL-6와 TNF-α는 12시간에서(p＜ 0.05) 그 양을 현저히 감소시켰다.
- RT-PCR을 통한 mRNA의 발현을 관찰한 결과 inflammatory cytokines은 infarction 유발 후 증가하였으며, 황련추출물(500 mg/kg)을 전처치한 그룹은 그 발현을 억제하였다. ELISA에 의한 serum내 cytokine의 양은 infarction 유발 후 증가하였으며, 황련추출물(500 mg/kg)의 전처치는 IL-1β는 12, 24, 48시간에서(p ＜ 0.
- 본 실험은 황련추출물이 뇌경색 개선효과가 있는지 규명하기 위하여, sensorimotor cortex (SMC)에 뇌경색을 유발한 후 infarction volume을 관찰하였으며, SPRT를 통하여 운동기능회복을 관찰하여 보았다. 관찰 결과 황련추출물을 농도별(100, 250, 500 mg/kg)로 투여한 결과 500 mg/kg에서 유의한 infarction volume 의 감소효과가 관찰되었으며(p = 0.051), 시간별 황련의 infarction volume 감소변화를 관찰한 결과 그 효과는 3-7일의 급성기에 효과적이었다. Fig.
- Photothrombotic infarction을 형성 후 날짜별로 1, 3, 7, 14일 경과하면서 500 mg/kg로 전처치한 황련에 의한 infarction volume의 감소효과를 관찰하였다. 관찰결과 infarction 형성 후 초기 1일째는 두 그룹 간 별다른 volume의 차이를 나타내지 못했는데, 3일째는 황련투약그룹에서 현저한 infarction volume의 감소를 나타내었으며(p = 0.012), 7일째까지 그 효과가 어느정도 지속되었다(p = 0.180), 그러나 병변 형성 후 약 2주가 지난 시점에서는 infarction volume은 두 그룹 간 큰 차이를 보이지 않았다(Fig. 2). Fig.
- 전자현미경(×100)을 통한 GFAP 염색후 photothrombotic infarction 유발 3일후 가장 염증이 극대화 되었을 때 희생하여 뇌의 조직을 절편하여 관찰하였다. 그 결과 백서의 motor cortex를 coronal section한 사진에서 병변 형성 3일째 생성된 infarction 주변으로 황련 500 mg/kg 전처치군에서는 많은 astrocyte를 GFAP 염색에 의하여 관찰할 수 있으나 생리식염수를 전처치한 대조군에서는 astrocyte의 양이 현저히 대조군에 비하여 적게 형성됨이 조직학적으로 관찰되었다 (Fig. 7, 8).
- 본 실험에서 면역조직화학법을 이용한 GFAP, connexin-43을 통하여 뇌조직의 신경손상 변화를 관찰한 결과 황련추출물(500 mg/kg)의 전처치는 대조군(normal saline)에 비하여 astrocytes가 더 많이 관찰되고 신경가소성이 촉진됨을 나타내었다.
- 상기의 결과는 photothrombotic ischemic infarction model에서 황련추출물이 뇌경색 유발 백서의 infarction volume에 대한 급성기 감소효과와 운동기능 회복효과를 나타내었으며, 이러한 효과는 anti-inflammation 및 astrocyte의 조기형성, connexin-43의 역할에 기인한 것으로 사료된다. 이러한 결과는 향후 황련추출물이 뇌경색 치료에 응용될 수 있는 기초연구와 임상적 활용가능성을 보여준 기초 자료로 이용될 수 있을 것으로 생각된다.
- 실험동물의 뇌에 infarction이 가장 심하게 이루어진 부분을 잘라내어 그 조직에서 inflammatory cytokine들인 IL-1β, IL-6, TNF-α의 mRNA 발현차이를 확인한 결과 황련의 전처치는 IL-1β와 TNF-α의 발현을 억제하였으며, IL-6의 경우도 어느 정도 억제하는 것으로 나타났다(Fig. 5).
- 황련의 농도에 따른 cerebral infarction의 volume 변화를 관찰하기 위하여 뇌경색 유발 1주 전 대조군과 황련 100, 250, 500 mg/kg의 황련 농도를 존데를 통하여 투여하여 뇌경색 유발 3일 후 그 volume(mm3)을 비교하였다. 황련의 농도가 증가함에 따라 infarction volume은 줄어드는 경향을 나타내었으며 특히, 황련 500 mg/kg의 경우 대조군(NS)과 유의성 있게 근접한 infarction volume의 차이를 나타내었다(p = 0.051, Fig. 1). 따라서 본 실험에서 황련 500 mg/kg를 기본 투약 용량으로 정하여 실험하였다.
- 본 연구는 황련 추출물의 광화학적 허혈성 뇌경색 모델을 이용한 뇌경색 개선효과(운동기능 개선 및 항염증 효과, 신경가소성 증진)를 연구한 것으로, 황련 추출물의 여러 농도 중 500 mg/kg에서 infarction volume을 가장 효과적으로 감소시켰으며 또한 황련 추출물 500 mg/kg의 전처치는 뇌경색 volume을 3-7일의 급성기에 효과적으로 감소시켰을 뿐만 아니라 빠른 운동성 회복을 유도하였다. 황련추출물의 전처치는 급성기 뇌경색의 inflammatory cytokine을 serum과 조직에서 감소시켰으며, immunohistochemistry 관찰 결과 대조군(normal saline)에 비하여 astrocytes가 더 많이 관찰되고 connexin-43의 조기형성에 의한 신경가소성이 촉진됨을 나타내었다. 이처럼 황련의 뇌경색 모델에서의 효과는 황련의 전처치가 뇌경색 유발 백서의 급성기 뇌경색에 anti-inflammation 효과와 neural plasticity의 형성촉진에 기인한 것으로 사료된다.
후속연구
- 또한 황련추출물(500 mg/kg)의 전처치는 운동기능의 회복을 대조군에 비하여 빠르게 회복시켰는데, 이러한 운동기능 회복의 기전으로는 새로운 가지돌기 형성(dendritic formation)을 포함한 신경연접 가소성(synaptic plasticity)의 강화20) 등이 기여할 것으로 추측된다. 지금까지 뇌졸중 후 기능적 회복을 설명할 정확한 신경 가소성 기전에 대한 연구는 부족한 상태이지만 시냅스 재생(synaptogenesis)21)이 중요한 역할을 수행하는 것으로 알려져 있다.
- 상기의 결과는 photothrombotic ischemic infarction model에서 황련추출물이 뇌경색 유발 백서의 infarction volume에 대한 급성기 감소효과와 운동기능 회복효과를 나타내었으며, 이러한 효과는 anti-inflammation 및 astrocyte의 조기형성, connexin-43의 역할에 기인한 것으로 사료된다. 이러한 결과는 향후 황련추출물이 뇌경색 치료에 응용될 수 있는 기초연구와 임상적 활용가능성을 보여준 기초 자료로 이용될 수 있을 것으로 생각된다.
※ AI-Helper는 부적절한 답변을 할 수 있습니다.