[논문]염화수은(II)과 이온화 방사선 처리에 따른 토양 내 환형동물의 DNA 손상 측정

류태호; 모하마드닐리; 안광국; 김진규

염화수은(II)과 이온화 방사선 처리에 따른 토양 내 환형동물의 DNA 손상 측정
Evaluation of DNA Damage Induced by Mercury Chloride (II) and Ionizing Radiation in the Earthworm 원문보기

환경생물 = Korean journal of environmental biology, v.28 no.4, 2010년, pp.212 - 217

류태호 (한국원자력연구원 방사선과학연구소) , 모하마드닐리 (스페인 도네쉬방사선연구소) , 안광국 (충남대학교 생명시스템과학대학) , 김진규 (한국원자력연구원 방사선과학연구소)

초록
AI-Helper

각종 유전독성학적 물질로 인한 생물체내의 영향을 평가해보기 위해 E. fetida를 대상으로 본 연구를 수행하였다. 염화수은에 대한 DNA 손상을 알아보는 실험에서는 노출 시간에 상관없이 노출 농도에 비례한 유전자의 손상이 나타났다. 방사선이 지렁이의 DNA 손상에 미치는 영향을 알아본 실험에서도 역시 방사선 총 선량의 증가에 따라 DNA 손상이 증가하는 경향을 보였다. 염화수은에 48시간 동안 노출시키고 방사선을 조사한 지렁이의 세포를 comet assay하면, 수은 단독 처리군이나 방사선 단독 처리군에 비해 DNA의 손상이 유의적으로 크게 나타났다. 염화수은과 방사선 모두에 복합처리 된 지렁이의 DNA 손상치는 각각 단독 처리한 지렁이의 DNA 손상치를 합한 값보다 크게 나타나 두 요인의 상승작용이 확인되었다. 본 연구를 통해 지렁이의 세포내에서 수은과 방사선이 야기하는 DNA 손상을 측정하고, 두 인자의 복합처리에 따른 유전독성 상승효과를 관찰할 수 있었다. 이는 중금속과 방사선의 복합적인 효과를 나타낸 기존의 여러 연구결과와도 비교가 가능한 연구라고 사료되며, 향후 이를 보완하고 더 정확한 평가를 위해 지렁이 세포 내에서의 스트레스 반응 측정이나 효소 활성 실험등을 추가로 수행하여야 할 것이라고 생각된다.

Abstract ▼ AI-Helper

Soil pollution by heavy metals has become a significant environmental concern due to a variety of human activities. Specially toxicity caused by excessive mercury exposure is now being recognized as a widespread environmental problem and is continuing to attract a great deal of public concerns. The earthworms are very important animals that aerate the soil with their burrowing action and enrich the soil by decomposing organic matters. Especially the earthworm Eisenia fetida is routinely used in ecotoxicological studies. The levels of DNA damage in earthworms treated with HgCl2 and ionizing radiation were investigated in this study. Genotoxic effects were evaluated in the earthworm's coelomocytes using the comet assay (Single Cell Gel Electrophoresis; SCGE). The results showed that the mercury chloride and radiation were responsible for the genotoxic effects on earthworms. The level of DNA damage significantly increased after the treatment of mercury chloride combined with ionizing radiation. The combined treatment of $HgCl_2$ and ionizing radiation had a greater genotoxicity. This study is amenable to further study such as enzyme activation assay.

주제어

AI 본문요약
AI-Helper

* AI 자동 식별 결과로 적합하지 않은 문장이 있을 수 있으니, 이용에 유의하시기 바랍니다.

문제 정의

각종 유전독성학적 물질로 인한 생물체내의 영향을 평가해보기 위해 E. fetida를 대상으로 본 연구를 수행하였다. 염화수은에 대한 DNA 손상을 알아보는 실험에서는노출 시간에 상관없이 노출 농도에 비례한 유전자의 손상이 나타났다.
2001), 수은 이외 물질 중 살충제와 방사선을 사람의 림프구 세포에동시 노출 시켜 상승작용을 관찰한 연구(김 2001), 그리고 어류 간암세포에 수은과 방사선을 처리하여 세포 생존율을 확인한 연구(한등2009) 등의 시도가 이루어지고있다. 따라서 본 연구는 지렁이에 염화수은과 방사선을 각각 처리하여 DNA의 손상 유무와 손상의 정도를측정하는데 목적이 있으며, 중금속과 방사선의 복합적인효과를 연구하는데 새로운 자료를 제시하기 위하여 염화수은과 이온화 방사선에 지렁이를 순차적으로 노출시켜 단독 처리한 실험 결과와 비교, 분석해 보았다.
염화수은과 방사선 모두에 복합처리 된 지렁이의 DNA 손상치는 각각 단독 처리한 지렁이의 DNA 손상치를 합한 값보다 크게 나타나 두 요인의 상승작용이 확인되었다. 본 연구를 통해 지렁이의 세포내에서 수은과 방사선이 야기하는 DNA 손상을 측정하고, 두 인자의 복합처리에 따른 유전독성 상승효과를 관찰할 수 있었다. 이는 중금속과 방사선의 복합적인 효과를 나타낸 기존의 여러 연구결과와도 비교가 가능한 연구라고 사료되며, 향후 이를 보완하고 더 정확한 평가를 위해 지렁이세포 내에서의 스트레스 반응 측정이나 효소 활성 실험등을 추가로 수행하여야 할 것이라고 생각된다.

제안 방법

E. fetida를 0~160 mg kg-1 농도의 염화수은에 24시간 및 48시간 동안 노출시킨 후, 체강세포를 수집하여 DNA손상 정도를 측정하였다.
0 image analysis (Kinetic Imag-ing Ltd, Liverpool, UK)를 이용하여 이미지를 분석한다. 각 시료당 2개의 슬라이드 표본을 만들고 슬라이드 1개당 50개씩 총 100개의 핵을 관찰하여 나온 데이터를 통해 Olive tail moment 값으로 계산한다.
건조된 슬라이드 글라스는 80 μL의 EtBr (Ethi-dium Bromide) 용액(20 μg mL-1)으로 염색하여 형광현미경(Olympus fluorescence microscope, Japan)에서 200배율로 검경하고, Komet ver. 4.0 image analysis (Kinetic Imag-ing Ltd, Liverpool, UK)를 이용하여 이미지를 분석한다.
염화수은의 노출 농도는 배양토의 총 질량을 기준으로 하여 0~160 mg kg-1으로 설정하였으며, 지렁이는 사육할 때와 동일한 조건에서 용기별로 20마리씩 24시간과 48시간 동안 각각 배양하였다. 방사선 조사는 Petri dish와 뚜껑의 내부에 모두 증류수로 적신 여과지를 깔아 방사선 조사를하는 동안 수분공급이 유지되도록 하고, 한개의Petri dish 당 3~10마리씩의 지렁이를 넣어 수행하였다. 방사선 조사는 한국원자력연구원 방사선과학연구소의 ⁶⁰Co감마선원(선원강도, 7.
방사선 조사는 Petri dish와 뚜껑의 내부에 모두 증류수로 적신 여과지를 깔아 방사선 조사를하는 동안 수분공급이 유지되도록 하고, 한개의Petri dish 당 3~10마리씩의 지렁이를 넣어 수행하였다. 방사선 조사는 한국원자력연구원 방사선과학연구소의 ⁶⁰Co감마선원(선원강도, 7.4 PBq)을 이용하여 0~50 Gy의 이온화 방사선을 조사하였다. 조사가 끝난 시료는 빛이나 온도에 의한 영향을 최소화하기 위해 검은 천으로 덮고 얼음이 담긴 아이스박스 안에 넣어 이동시켰다.
방사선이 지렁이의 DNA 손상에 미치는 영향을 알아보기 위하여 E. fetida를 0~50 Gy의 감마선에 노출시키고, DNA 수복을 방지하기 위해 모든 실험과정은 단시간내에 수행하였다. 실험 결과, 방사선 총 선량의 증가에따라 tail의 끌림 현상이 더 강하게 나타나 DNA 손상이 증가하는 경향을 보였다.
12 kg씩 넣었다. 배양 용기는 수분 증발을 억제하고 지렁이의 탈출을 방지하기 위하여 뚜껑을 덮어 주었으며, 호흡에 필요한 산소가 공급되도록 뚜껑과 용기 바닥에 직경1mm의 구멍을 약 20개씩 뚫어 사용하였다. 염화수은의 노출 농도는 배양토의 총 질량을 기준으로 하여 0~160 mg kg-1으로 설정하였으며, 지렁이는 사육할 때와 동일한 조건에서 용기별로 20마리씩 24시간과 48시간 동안 각각 배양하였다.
조사가 끝난 시료는 빛이나 온도에 의한 영향을 최소화하기 위해 검은 천으로 덮고 얼음이 담긴 아이스박스 안에 넣어 이동시켰다. 염화수은 노출 시험과 방사선 조사가 끝난 지렁이는 다시 깨끗한 인공배양토로 옮기고 comet assay를 통해DNA 손상여부 및 정도를 평가하였다.
배양 용기는 수분 증발을 억제하고 지렁이의 탈출을 방지하기 위하여 뚜껑을 덮어 주었으며, 호흡에 필요한 산소가 공급되도록 뚜껑과 용기 바닥에 직경1mm의 구멍을 약 20개씩 뚫어 사용하였다. 염화수은의 노출 농도는 배양토의 총 질량을 기준으로 하여 0~160 mg kg-1으로 설정하였으며, 지렁이는 사육할 때와 동일한 조건에서 용기별로 20마리씩 24시간과 48시간 동안 각각 배양하였다. 방사선 조사는 Petri dish와 뚜껑의 내부에 모두 증류수로 적신 여과지를 깔아 방사선 조사를하는 동안 수분공급이 유지되도록 하고, 한개의Petri dish 당 3~10마리씩의 지렁이를 넣어 수행하였다.
지렁이의 체강세포 수집은 Eyambe et al. (1991)과 Dio-gene et al. (1997)이 제안한 비침습성 기술을 약간 변형시켜 사용하였다. 지렁이를 증류수로 헹궈 배양토를 제거하고 1mL의 차가운 extrusion 용액(5% ethanol, 95%saline, 2.

대상 데이터

실험에 사용한 지렁이는 우리나라에서 자생하는 줄지렁이(Eisenia fetida)로서 중량이 300~600 mg으로 환대가 잘 발달된 성체만을 선택하였다. 배양에 이용한 토양은 배양토와 왕겨 및 우분을 각각 6:3:1의 부피비로 혼합하여 조제하였으며, 배양토는 원예용 상토를 시중에서 구입하여 사용하였다. 사육기간 중의 실내 온도는 23± 2℃, 수분은 65±5%를 유지시켰다.
실험에 사용한 지렁이는 우리나라에서 자생하는 줄지렁이(Eisenia fetida)로서 중량이 300~600 mg으로 환대가 잘 발달된 성체만을 선택하였다.

데이터처리

통계학적 유의성 검정은 일원분산분석 (one-way ANOVA test)을 사용하였고, p값이 0.005보다 작은 경우를 유의하다고 판정하였다.

이론/모형

본 분석법은 Singh (1988)이 서술한 바를 토대로 진행하였다. 실험진행 과정 중 외적인 환경요인으로 발생할수있는 DNA 손상을 최소화하기 위하여 모든 과정은 4℃의 어두운 조건에서 수행하였다.

성능/효과

80과 160 mg kg-1의 염화수은을 처리한 실험군의 TM 값은 2.75±1.48과 3.31±1.45이지만, 염화수은에 노출시킨 후 2.5, 5, 10, 20 Gy의 방사선을 조사한 복합 처리군의 TM 값은 모든 구간에서 염화수은단독 처리군의 수치보다 확실히 증가했음을 알수있다(Fig. 3).
Comet assay 결과를 직접 분석해보면, 대조군과 2.5, 5, 10, 20, 50 Gy의 방사선을 조사했을 경우 Olive tail moment±표준편차의 값은 각각 0.18±0.22, 0.54±0.36, 1.28±0.59, 2.27±0.98, 3.8±1.25, 8.99±1.98로 대조군에 비하여 각각 3, 7, 12, 21, 50배정도의 손상을 나타내었다(Fig. 2).
fetida를 0~160 mg kg^-1 농도의 염화수은에 24시간 및 48시간 동안 노출시킨 후, 체강세포를 수집하여 DNA손상 정도를 측정하였다. 그결과, 24시간과 48시간 노출시킨 염화수은의 모든 농도 구간에서 유전자 손상의 차이가 유의하게 나타났다(Table 1). 또한 대조군의 DNA손상을 0%로 하여 노출시킨 수은의 농도에 따라 DNA의 손상률을 구해 보면, 노출 시간에 관계없이 유사한경향으로 DNA가 손상되었음을 알 수 있다.
그결과, 24시간과 48시간 노출시킨 염화수은의 모든 농도 구간에서 유전자 손상의 차이가 유의하게 나타났다(Table 1). 또한 대조군의 DNA손상을 0%로 하여 노출시킨 수은의 농도에 따라 DNA의 손상률을 구해 보면, 노출 시간에 관계없이 유사한경향으로 DNA가 손상되었음을 알 수 있다. 이때 도출된 수식을 통해 DNA가 50% 손상 되는 EC₅₀ 값을 계산해보면 24시간과 48시간 노출 시 각각 23과 19 mg kg^-1의농도인 것으로 추측할 수 있다(Fig.
또한 수은과 방사선의 단독처리와 복합처리 시발생한 DNA의 손상을 비교해 보면, 복합처리 된 지렁이의 DNA 손상치는 각각 단독 처리한 지렁이의 DNA 손상치를 단순히 합한 값보다 크게 나타나 손상의 정도가 더 심해졌다고 판단 할 수 있었다(Table 2).
수은에 48시간 동안 노출시킨 E. fetida를 감마선으로 조사한 뒤 DNA의 손상을 확인한 결과, 수은 단독 처리군이나 방사선 단독 처리군보다 DNA의 손상이 유의적으로 크게 나타났다. 특히 80과 160 mg kg^-1의 염화수은농도에서 지렁이를 배양하고 방사선을 조사한 뒤 DNA가 받는 손상을 측정하면 수은만을 단독으로 처리했을때와 수은과 방사선을 함께 처리했을 때의 영향을 명확히 비교할 수 있다.
fetida를 0~50 Gy의 감마선에 노출시키고, DNA 수복을 방지하기 위해 모든 실험과정은 단시간내에 수행하였다. 실험 결과, 방사선 총 선량의 증가에따라 tail의 끌림 현상이 더 강하게 나타나 DNA 손상이 증가하는 경향을 보였다. Comet assay 결과를 직접 분석해보면, 대조군과 2.
염화수은에 48시간 동안 노출시키고 방사선을 조사한 지렁이의 세포를 comet assay하면, 수은 단독 처리군이나 방사선 단독 처리군에 비해 DNA의 손상이 유의적으로 크게 나타났다. 염화수은과 방사선 모두에 복합처리 된 지렁이의 DNA 손상치는 각각 단독 처리한 지렁이의 DNA 손상치를 합한 값보다 크게 나타나 두 요인의 상승작용이 확인되었다. 본 연구를 통해 지렁이의 세포내에서 수은과 방사선이 야기하는 DNA 손상을 측정하고, 두 인자의 복합처리에 따른 유전독성 상승효과를 관찰할 수 있었다.
염화수은에 48시간 동안 노출시키고 방사선을 조사한 지렁이의 세포를 comet assay하면, 수은 단독 처리군이나 방사선 단독 처리군에 비해 DNA의 손상이 유의적으로 크게 나타났다.
fetida를 대상으로 본 연구를 수행하였다. 염화수은에 대한 DNA 손상을 알아보는 실험에서는노출 시간에 상관없이 노출 농도에 비례한 유전자의 손상이 나타났다. 방사선이 지렁이의 DNA 손상에 미치는영향을 알아본 실험에서도 역시 방사선 총 선량의 증가에 따라DNA 손상이 증가하는 경향을 보였다.

후속연구

여기서, TM은 Tail moment, D는 방사선 선량(radiation dose)을 나타낸다. 이 수식을 이용하면 방사선 선량에 따른 DNA 손상을 TM 값의 수치로 표현할 수 있으며, 반대로 실험을 통해 산출해 낸 TM 값을 식에 대입하여 조사된 감마선의 선량을 추론하는데도 유용한 데이터로 사용될 것이다. 또한 유전독성물질을 생물에 인위적으로 처리하여 DNA 손상을 발생시켰을 때, 선량-반응식을 통해두 처리군 사이의 동일한 TM 값을 구하여 방사선 조사선량과 물질의 농도 값을 서로 대조해 볼 수도 있다.
본 연구를 통해 지렁이의 세포내에서 수은과 방사선이 야기하는 DNA 손상을 측정하고, 두 인자의 복합처리에 따른 유전독성 상승효과를 관찰할 수 있었다. 이는 중금속과 방사선의 복합적인 효과를 나타낸 기존의 여러 연구결과와도 비교가 가능한 연구라고 사료되며, 향후 이를 보완하고 더 정확한 평가를 위해 지렁이세포 내에서의 스트레스 반응 측정이나 효소 활성 실험등을 추가로 수행하여야 할 것이라고 생각된다.
또한 유전독성물질을 생물에 인위적으로 처리하여 DNA 손상을 발생시켰을 때, 선량-반응식을 통해두 처리군 사이의 동일한 TM 값을 구하여 방사선 조사선량과 물질의 농도 값을 서로 대조해 볼 수도 있다. 이는 지렁이뿐만 아니라 다른 여러 생물에도 응용이 가능할 것으로 사료된다.

질의응답

핵심어	질문	논문에서 추출한 답변
	토양은 생태계에서 어떤 역할을 하는가?	토양은 공기, 물과 함께 동∙식물 및 토양에 서식하는모든 생물체의 생존 기반이며, 물질 순환과 오염원의 여과와 같은 자정 능력을 지님으로써 생태계에서 중요한기능을 수행한다. 그러나 급격한 경제개발과 그에 따른환경오염으로 인하여 자연의 정화 능력을 넘는 오염원이발생하였고 이는 자연 생태계의 불균형을 가속화시켰다(Lim 1995).
	본 논문에서 지렁이의 체강세포 수집을 비침습성 기술을 약간 변형시켜 사용하였는데, 구체적으로 어떻게 수집하였는가?	(1997)이 제안한 비침습성 기술을 약간 변형시켜 사용하였다. 지렁이를 증류수로 헹궈 배양토를 제거하고 1mL의 차가운 extrusion 용액(5% ethanol, 95%saline, 2.5 mg mL-1 EDTA, 10 mg mL-1 guaiacol glycerol ether)에 넣어 얼음위에서 3분간 방치시켰다. 체강세포가 함유된 체액이 방출되면 eppendorf tube에 용액을 옮기고 4℃에서 380×g로 5분간 원심분리하여 조심스럽게 상층액만 버린다. 튜브의 바닥에 남은 세포 침전물은 380×g에서 PBS (Phosphate-buffered saline)로 두 번 헹궈낸 후 100 μL의 PBS를 넣어 재부유 시켰다.
	지렁이가 토양 오염의 지표생물로 적절한 이유는 무엇인가?	토양에 유출되어 생물에게 유해성을 미칠 수있는 화학물질들에는 중금속, 산성비, 농약, 각종 화학비료, PCBs (polychlorinated bipenyls), PAHs (polynucleararomatic hydrocarbons) 등이 있다. 이러한 토양 오염물질의 환경모니터링을 위해 다양한 물리화학적, 생물학적지표들이 개발되고 있으며, 육상생태계에서 지렁이는 토양 내 유기물을 분해하고, 설치류나 조류, 포유류 등의먹이가 되는 생태학적 중요성을 지니고 있기 때문에 토양 오염의 지표생물로 적절하다(Button et al. 2010).

참고문헌 (20)

김진규. 2001. 환경재해 방지를 위한 생물정보로서의 사람 림프구 DNA 손상에 대한 방사선과 살충제의 상승작용. 환경생물. 19:19-24.

원문보기 상세보기
박경훈. 2005. 지렁이와 누에에 대한 농약의 위해성 평가. 경북대학교 대학원 박사논문. pp. 1-98.
우현정, 김지향, 안토니나 체불스카바실레프스카, 김진규. 2006. 이온화 방사선 및 염화수은(II)에 의한 자궁경부 암 세포의 DNA 손상 평가. 환경생물. 24:46-52.

원문보기 상세보기
이성언, 원호식, 이동섭. 2005. Pseudomonas balearica를 이용한 고농도의 메틸수은 제거. 대한환경공학회 2005 추계학술연구발표회 논문집. pp. 1440-1446.
한 민, 현경만, 모하마드닐리, 황인영, 김진규. 2009. 이온화 방사선 및 염화수은 처리에 따른 어류 간암세포의 생존능 평가. 환경생물. 27:140-145.

원문보기 상세보기
Bigorgne E, C Cossu-Leguille, M Bonnard and J Nahmani. 2010. Genotoxic effects of nickel, trivalent and hexavalent chromium on the Eisenia fetida earthworm. Chemosphere. 80:1109-1112.

상세보기
Button M, GRT Jenkin, KJ Bowman, CF Harrington, TS Brewer, GDD Jones and MJ Watts. 2010. DNA damage in earthworms from highly contaminated soils: assessing resistance to arsenic toxicity by use of the comet assay. Mutat. Res. 696:95-100.

상세보기
Diogene J, M Dufour, GG Poirier and D Nadeau. 1997. Extrusion of earthworm coelomocytes: comparison of the cell populations recovered from the species Lumbricus terrestris, Eisenia fetida and Octolasion tyrtaeum. Lab. Anim. 31:326-336.

상세보기
Emanuelli T, JBT Rocha, ME Pereira, LO Porciuncula, VM Morsch, AF Martins and DOG Souza. 1996. Effect of mercuric chloride intoxication and dimercaprol treatment on $\sigma$ -aminolevulinate dehydratase from brain, liver and kidney of adult mice. Pharmcol. Toxicol. 79:136-143.

상세보기
Eyambe GS, AJ Goven, LC Fitzpatrick, BJ Venables and EL Cooper. 1991. A non-invasive technique for sequential collection of earthworm (Lumbricus terrestris) leukocytes during subchronic immunotoxicity studies. Lab. Anim. 25: 61-67.

상세보기
Hertel-Aas T, DH Oughton, A Jaworska, H Bjerke, B Salbu and G Brunborg. 2007. Effects of chronic gamma irradiation on reproduction in the earthworm Eisenia fetida (oligochaeta). Radiat. Res. 168:515-526.

상세보기
ICRP. 2003. A framework for assessing the impact of ionising radiation on non-human species. Publication 91, Annals of the ICRP. Elsevier. Amsterdam. Vol. 33.
Lim SK. 1995. Studies on the establish of soil environmental standard in Korea. Korea Committee Environ. Sci. Res., Seoul. pp. 125-135.
Manerikar RS, AA Apte and VS Ghole. 2008. In vitro and in vivo genotoxicity assessment of Cr (VI) using comet assay in earthworm coelomocytes. Environ. Toxicol. Phar. 25:63-68.

상세보기
Mirlean N, P Baisch, I Machado and E Shumilin. 2008. Mercury contamination of soil as the result of long-term phosphate fertilizer production. Bull. Environ. Contam. Toxicol. 81:305-308.

상세보기
OECD. 1984. Guideline for testing of chemicals 207. Earthworm acute toxicity tests. OECD, Paris.
Ozuah PO. 2000. Mercury poisoning. Curr. Probl. Pediatr. 30: 91-99.

상세보기
Panek A, JK Kim and A Cebulska-Wasliewa. 2001. In Vitro studies of repair efficiency of DNA damage induced by Xrays in lymphocytes exposed to mercury. 12nd Symposium of Polish Radiation Research Society, Sept. 10-12, 2001, Krakow, Poland.
Reinecke SA and AJ Reinecke. 2004. The comet assay as biomarker of heavy metal genotoxicity in earthworms. Arch. Environ. Contam. Toxicol. 46:208-215.

상세보기
Singh NP, MT McCoy, RR Tice and EL Schneider. 1988. A simple technique for quantitation of low levels of DNA damage in individual cells. Exp. Cell Res. 175:184-191.

상세보기

저자의 다른 논문 :

표제어: PCR

동의어: Packet Collision Rate

용어 설명 출처 목록 (6)

용어 설명: PCR은 세균 특이성이 있는 primer를 이용하여 적은 수의 세균이 있을지라도 쉽게 검출할 수 있는 유용한 방법이며, 이를 이용하여 구강 내 치면세균막이나 타액에서 직접 세균을 검출할 수 있게 되었다[8].

내보내기 구분	파일저장 인쇄 메일전송
구성항목	기본정보 상세정보 관리번호, 논문명, 저널/프로시딩명, 저자 , 발행년, 권, 호, 시작페이지, 끝페이지, 발행기관 관리번호, 논문명, 대등논문명, 저자 , 저널/프로시딩명, 발행기관, 발행년, 발행언어, 권, 호, 시작페이지, 끝페이지, ISBN, ISSN, 주제분야, 키워드, 초록(한글), 초록(영문), 저자(소속기관)
저장형식	Text(ASCII format) Excel format RefWorks Direct Export RIS format (for Reference Manager, ProCite, EndNote), Scholar's Aids, Mendeley
메일정보	받는사람 (필수) @ 보내는사람 (선택) @ 제목 내용 KISTI 검색결과 이메일 서비스
안내	총 건의 자료가 검색되었습니다. 다운받으실 자료의 인덱스를 입력하세요. (1-10,000) 검색결과의 순서대로 최대 10,000건 까지 다운로드가 가능합니다. 데이타가 많을 경우 속도가 느려질 수 있습니다.(최대 2~3분 소요) 다운로드 파일은 UTF-8 형태로 저장됩니다. 파일의 내용이 제대로 보이지 않을실 때는 웹브라우저 상단의 보기 -> 인코딩 -> 자동선택 여부를 확인하십시오. ~ Text(ASCII format) Excel format

연합인증