[논문]새싹 추출물의 항산화 작용과 미량 성분

조완구

doi:10.12925/jkocs.2010.27.1.3

새싹 추출물의 항산화 작용과 미량 성분
Anti-oxidative Activity and Trace Component of a Sprout Serum 원문보기

한국유화학회지 = Journal of oil & applied science, v.27 no.1=no.78, 2010년, pp.14 - 19

조완구 (전주대학교 대체의학대학 기초의과학과)

Abstract ▼ AI-Helper

In this study, the anti-oxidative effects and components of sprout serum were investigated. In the buds, high levels of zinc, iron and manganese were analyzed in addition to copper, magnesium, and potassium. The free radical (1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl, DPPH) scavenging activity of sprout serum was evaluated with $IC_{50}$. $IC_{50}$ of sprout serum was $58.0\;mgmL^{-1}$, and that of vitamin C was $3.7\;mgmL^{-1}$. In the test of superoxide scavenging activity of sprout serum, the activity was dependent on the concentration of serum. In this case, the $IC_{50}$ was 2.0 wt%. Cell viability was detected by using the MTT method. Cultured human fibroblast was treated with 15 mM $H_2O_2$ and cell viability was 70% in case of control. However, the effect of treating 0.5% of sprout serum was similar to that of 0.0001% of vitamin C.

주제어

AI 본문요약
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문제 정의

본 연구에서는 브로커리 (Broccoli), 유채 유 (Blassica), 다채 (Tatsoi), 배추 (Chinese cabbage)의 새싹 추출물의 미량원소 분석과 항산화 효과 정도를 측정하여 화장품에의 이용 가능성을 검토 및 보고 하고자 하였다.

제안 방법

농도별로 첨가하고 24시간 배양하였다. 배양 후 배지를 제거하고 well 당 60 mL의 MTT 용액을 넣은 후 2시간 동안 배양하고 세포를 용해하여 96 well에 옮긴 후 microplate를 이용하여 560 nm 에서 흡광도를 측정하고 이를 세포 생존율로 평가하였다.
2 mm 필터를 여과하여 멸균과 침전물을 제거하여 시료 10 Kg을 제조 하고 실험에 사용하였다. 분석 실험을 제외한 모든 실험은 4가지 새싹의 추출물을 동량 혼합하여 새싹 추출물 (sprout serum) 로하고 항산화 활성 등의 실험을 실시하였다.
DPPH를 이용하였다. 실험방법은 메탄올에 용해시킨 0.2 mM DPPH 용액 1 mL에 ethanol 1 mL를 첨가하고 여러 농도의 추출물 1 mL을 첨가하여 섞은 다음 실온에서 10 분 동안 방치 후 spectrophotometer로 517 nm에서 흡광도를 측정하였다, 그 활성의 크기는 시료를 넣지 않은 경우를 대조군으로 하고 시료를 넣은 것을 실험군으로 하여 식 [1]에 의해 DPPH의 활성 저해율을 나타내었다. 소거 활성은 DPPH의 농도가 50% 감소되는데 필요한 시료의 농도(free radical scavenging activity, ICso, mgmlT)로서 표기하였다.
1에 발아 성숙된 새싹의 사진을 나타냈다. 이렇게 재배한 브로커리, 유채유, 다채 및 배추의 새싹 10 Kg을 냉압착법으로 압착 착즙하고 물 10 Kg을 가한 후 6시간 냉침하여 0.2 mm 필터를 여과하여 멸균과 침전물을 제거하여 시료 10 Kg을 제조 하고 실험에 사용하였다. 분석 실험을 제외한 모든 실험은 4가지 새싹의 추출물을 동량 혼합하여 새싹 추출물 (sprout serum) 로하고 항산화 활성 등의 실험을 실시하였다.

대상 데이터

완충용액제조에 사용된 Na2HPO₄ - 12H₂O, NaH₂PO₄ . 2H₂O, NaCl, trizma base, HC₁ 그리고 ethanol (EtOH), methanol (MeOH), ethyl acetate (EtOAc) 등 각종 용매는 시판 특급 시약을 사용하였다. MTT (3-(4, 5- dimethylthiazolyl-2)-2, 5-diphenyltetrazolium bromide는 Sigma Chemical Co.
2H₂O, NaCl, trizma base, HC₁ 그리고 ethanol (EtOH), methanol (MeOH), ethyl acetate (EtOAc) 등 각종 용매는 시판 특급 시약을 사용하였다. MTT (3-(4, 5- dimethylthiazolyl-2)-2, 5-diphenyltetrazolium bromide는 Sigma Chemical Co. (USA) 에서 구입하였다.
UV-visible spectrophotometer 는 Varian (Australia) 의 Cary 50을 사용하였다 L-Ascorbic acid와 free radical 소거활성에 사용한 DPPH (1, 1~ diphenyl - 2 -picry Ihy drazy 1) radicale Sigma Chemical Co. (USA) 에서 구입하여 사용하였다. 기타 H₂O₂는 Dae Jung Chemical & Metals (Korea) 제품을 사용하였다.
경동시장에서 브로커리, 유채유, 다채 및 배추의 씨를 구입한 후 실온에서 물에 넣어 24시간 발아 시킨 후 물이 잘 빠지는 용기에 섬유를 덮고 발아 씨를 뿌려 실온 암소에서 하루에 3 회 물을 주어 7일 동안 재배하였다. Fig.
(USA) 에서 구입하여 사용하였다. 기타 H₂O₂는 Dae Jung Chemical & Metals (Korea) 제품을 사용하였다. 완충용액제조에 사용된 Na2HPO₄ - 12H₂O, NaH₂PO₄ .
기타 H₂O₂는 Dae Jung Chemical & Metals (Korea) 제품을 사용하였다. 완충용액제조에 사용된 Na2HPO₄ - 12H₂O, NaH₂PO₄ . 2H₂O, NaCl, trizma base, HC₁ 그리고 ethanol (EtOH), methanol (MeOH), ethyl acetate (EtOAc) 등 각종 용매는 시판 특급 시약을 사용하였다.
인체의 섬유아세포(WI-38 fibroblast)를 가지고 배양을 하였다. 세포는 사용 전까지 액화 질소에 냉동보존 하였고 실험은 3차례의 계대배양을 진행한 후에 진행되었다.

이론/모형

배양한 Human 유래 섬유아세포에 15 mM H₂O₂를 처리하고 새싹 추출물의 농도에 따른 세포 회복 활성도를 MTT 방법으로 평가하였다. Fig.
새싹 추출물에 대한 free radical 소거활성 측정은 DPPH를 이용하였다. 실험방법은 메탄올에 용해시킨 0.
새싹 추출물의 SOD 유사활성은 S. Marklund 와 G. Marklund의 방법에 따라 H₂O₂로 전환시키는 반응을 촉매하는 pyrogallol의 생성량을 측정하여 SOD 유사활성으로 나타내었다[15]. 각 시료 0.

성능/효과

1. 모든 새싹에서 아연, 철 및 망간은 높은 함량을 보였으며 그 외에도 구리, 마그네슘, 칼륨 등이 분석되었다.
2. DPPH법을 이용한 free radical 소거활성 실험 결과 새싹 추출물은 ICso가 58.0 mgmL^-1, 비교 물질로 사용한 수용성의 Vitamin C의 free radical 소거활성은 3.7 mgmL^-1 이었다.
3. 새싹추출물의 superoxide radical 소거 활성을 측정한 결과 농도 의존적으로 활성을 보였다. IC₅₀ 값은 2.
4. 배양한 Human 유래 섬유아세포에 15 mM H₂O₂를 처리하고 새싹 추출물의 농도에 따른 세포 회복 활성도를 MTT 방법으로 평가한 결과, 과산화수소를 처리하지 않은 것을 contr이로 하여 과산화수소 15 mM을 처리한 경우 70% 정도의 세포 생존력을 보였으나 새싹추출물 0.5 %를 처리하면 vitamin C 0.001% 처리 후와 유사한 정도의 세포 생존력을 보였다.
역시 크게 나타났다. DPPH 실험 결과 새싹추출물은 0.5% 이상에서 매우 좋은 라디칼 소거 능을 보였으며 SOD의 경우 5% 이상의 농도에서 singlet oxygen을 scavenging하는 효과를 보였고 섬유아세포를 이용한 실험에서는 0.5% 이상의 농도에서 카타라제의 효과를 보였다.
정량한 결과를 나타냈다. 모든 새싹에서 아연, 철 및 망간은 높은 함량을 보였으며 그 외에도 구리, 마그네슘, 칼륨 등이 분석되었다. 피부에서 아연은 각화조절, 상처치유, 세포 활성이 보고되어 있으며 구리는 피부 산화적 손상방지, 철은 피부 저항력 증진, 산소공급 그리고 칼슘은 표피 turn over 증진, 보습에 관여하는 중요 원소임이 보고되고 있다[16].
상기 실험 모두에서 새싹 추출물은 항산화 활성을 보이고 있으며 농도가 높을수록 그 활성 역시 크게 나타났다. DPPH 실험 결과 새싹추출물은 0.
새싹 추출물의 superoxide radical 소거 활성을 측정한 결과 농도 의존적으로 활성을 보였다. ICso 값은 Fig.

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