In this study, we analyzed and quantified the amounts of bioactive phenolic constituents, xanthotoxin (1), oxypeucedanin (2), and imperatorin (3) in each part of the root of Angelica dahurica by HPLC, which validated by ICH guide lines comparing the linearity, intra day precision, inter-day precisio...
In this study, we analyzed and quantified the amounts of bioactive phenolic constituents, xanthotoxin (1), oxypeucedanin (2), and imperatorin (3) in each part of the root of Angelica dahurica by HPLC, which validated by ICH guide lines comparing the linearity, intra day precision, inter-day precision. As a result, the amount of imperatorin 2.96% in the rootlet was two fold higher than that of the main root 1.32%. On the other hand, the amounts of xanthotoxin and oxypeucedanin in the rootlet showed similar to those of main root. In addition, the cortex of root is more plentiful of three consitituents (0.66%, 0.53%, and 1.85%) than those of xylem (0.29%, 0.05%, and 0.07%). These results show that the rootlet and cortex contain a large amount of bioactive phenolic constituent including xanthotoxin, oxypeucedanin, and imperatorin than other parts of the root.
In this study, we analyzed and quantified the amounts of bioactive phenolic constituents, xanthotoxin (1), oxypeucedanin (2), and imperatorin (3) in each part of the root of Angelica dahurica by HPLC, which validated by ICH guide lines comparing the linearity, intra day precision, inter-day precision. As a result, the amount of imperatorin 2.96% in the rootlet was two fold higher than that of the main root 1.32%. On the other hand, the amounts of xanthotoxin and oxypeucedanin in the rootlet showed similar to those of main root. In addition, the cortex of root is more plentiful of three consitituents (0.66%, 0.53%, and 1.85%) than those of xylem (0.29%, 0.05%, and 0.07%). These results show that the rootlet and cortex contain a large amount of bioactive phenolic constituent including xanthotoxin, oxypeucedanin, and imperatorin than other parts of the root.
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제안 방법
Melting point는 Electrothermal apparatus을 이용하여 측정하였으며, UV 및 IR은 U-3000 spectrophotometer (Hitachi, Japan) and a FTS 135 FT-IR spectrometer (Bio-Rad, CA)을 이용하여 측정하였고, 구조분석을 위하여 1H-NMR 및 13C-NMR은 Jeol 400 NMR spectrometer를 이용하여 측정하였다. 또한 분자량 측정은 JEOL JMS-700 Mstation mass spectrometer를 이용하였으며, 크로마트 그래피용 실리카겔은 silica gel 60 F254 (0.
1), 실험재료의 일부는 충남대학교 생약학 교실에 보관 중이다 (CNU1513). Xanthotoxin (1), oxypeucedanin (2), imperatorin (3)은 잘 건조된 구릿대 뿌리 50 g을 methanol로 추출하고 분획한 다음 dichloromathane 분획물을 open column chromatography (용출용매 hexane 및 ethyl acetate)를 실시하여 분리 정제한 후, mp, UV, IR, 1HNMR, 13C-NMR 및 Mass 등의 물리 화학적 방법을 이용하여 그 구조를 동정하였다. 각각의 구조는 Fig.
본 연구에서는 구릿대의 주근, 세근, 피층 그리고 목질부로 나누어 유효 성분들의 함량을 비교 분석하기위하여 HPLC 로 정량하였으며, 결과를 요약하면 다음과 같다.
분리, 동정한 xanthotoxin, oxypeucedanin 그리고 imperatorin을 methanol로 희석하여 검량선용 표준 용액으로 하였다.
분석방법으로는 Hichrom 5 C18 (25 cm × 4.6 mm, 5 µm) 컬럼을 사용하였고, 이동상은 0에서 25 min 사이는 CH3CN : 30% CH3CN (10:90, v/v)을 30에서 60 min 사이는 CH3CN : 30% CH3CN (40:60, v/v)을 0.8 ml/min의 유속으로 용출시켰으며, 305 nm 파장에서 검출하였고 실온에서 HPLC를 수행하였다.
유효성분 함량 분석 − 구릿대 뿌리 전체, 잔뿌리, 피층 그리고 목질부 시료에 대하여 HPLC 방법으로 세 가지 유효성분의 함량을 각각 구하였다 (Fig. 4).
그러나 백지처럼 일부 생약에서는 아직도 세근뿐만 아니라 모양을 좋게 하기위해 표층이 깍여져 버려진채로 주근 및 목부 위주로 사용되고 있다. 이에 본 연구에서는 백지 각각의 부위에 대한 유효성분의 함량을 HPLC로 정량하여 비교 분석하였다.
대상 데이터
또한, 본 실험에 사용된 아세토니트릴은 HPLC용으로 J. T. Baker (NJ, USA) 로부터 구입하였고, 그 외 시료 추출과 표준품 분리를 위한 용매는 국내외 특급 및 일급시약을 사용하였다. 물은 3차 증류수를 0.
본 실험에 사용된 구릿대(Angelica dahurica Bentham et Hooker)는 충남대학교 약초원에서 시료를 수집하여 뿌리 부분을 세절하고 뿌리 전체, 잔뿌리, 피층, 그리고 목질부로 구분하여 그늘에 말린 후 실험 재료로 사용 하였고 (Fig. 1), 실험재료의 일부는 충남대학교 생약학 교실에 보관 중이다 (CNU1513). Xanthotoxin (1), oxypeucedanin (2), imperatorin (3)은 잘 건조된 구릿대 뿌리 50 g을 methanol로 추출하고 분획한 다음 dichloromathane 분획물을 open column chromatography (용출용매 hexane 및 ethyl acetate)를 실시하여 분리 정제한 후, mp, UV, IR, 1HNMR, 13C-NMR 및 Mass 등의 물리 화학적 방법을 이용하여 그 구조를 동정하였다.
실험에 사용된 HPLC system은 SCL10A system controller, LC-10AD 펌프, SPD-10A UV-Vis 검출기 (Shimadzu, Kyoto, Japan)로 구성되었고, 컬럼은 Hichrom 5 C18 (25 cm × 4.6 mm, 5 µm)을 사용하였다.
성능/효과
1. 구릿대 뿌리 전체의 함량을 측정한 결과 xanthotoxin은 0.44%, oxypeucedanin은 0.43%, imperatorin은 1.32%의 함량을 나타내었다.
2. 잔뿌리에서는 뿌리 전체와 비교했을 때 xanthotoxin의 함량은 비슷하였으나 oxypeucedanin은 1.5배 그리고 imperatorin은 2배 이상의 함량을 나타내었다.
4. 뿌리의 목질부에서 xanthotoxin은 0.29%, oxypeucedanin 은 0.05%, imperatorin은 0.07%으로 적은 함량을 나타내었으며, Fig. 4에서 보는 바와같이 3개의 주성분 외에도 세근에서는 다른 부위보다 성분들의 함량이 대부분 높은 것으로 나타났다. 그러므로 성분학적으로는 세근이 주근보다 더 유용할 것으로 사료된다.
4). 뿌리 전체의 함량을 측정한 결과 xanthotoxin은 0.44%, oxypeucedanin은 0.43%, imperatorin은 1.32%로 고른 함량을 보였다. 잔뿌리에서는 xanthotoxin의 함량은 0.
96%로 뿌리 전체와 비교했을 때 xanthotoxin 의 함량은 비슷하였으나 oxypeucedanin과 imperatorin의 함량은 훨씬 높았다. 뿌리의 피층은 xanthotoxin이 0.66%, oxypeucedanin은 0.53%, 그리고 imperatorin은 1.85%의 함량을 보였고, 뿌리의 목질부에서 xanthotoxin은 0.29%, oxypeucedanin은 0.05%, imperatorin은 0.07%이었다 (Table I).
특이하게도 imperatorin의 함량은 잔뿌리에서 상대적으로 가장 높게 나타났다. 이로 보아 뿌리 전체 (main root)나 뿌리의 기타 부위와 비교해 잔뿌리 (rootlet) 의 약효가 더 강할 것으로 예측되며 효용 가치도 높을 것으로 생각된다. 또한, 약재로 사용 할 때 피층 부분을 너무 깎아 버리지 않도록 주의하고, 잔뿌리도 모두 사용하는것이 바람직 할 것으로 사료된다.
이상의 결과에서 보듯이 유효성분의 함량이 뿌리의 피층에서 비교적 고르고 높은 반면 뿌리의 목질부에서는 전체적으로 매우 낮았다. 특이하게도 imperatorin의 함량은 잔뿌리에서 상대적으로 가장 높게 나타났다.
32%로 고른 함량을 보였다. 잔뿌리에서는 xanthotoxin의 함량은 0.47%였고, oxypeucedanin은 0.77%, imperatorin은 2.96%로 뿌리 전체와 비교했을 때 xanthotoxin 의 함량은 비슷하였으나 oxypeucedanin과 imperatorin의 함량은 훨씬 높았다. 뿌리의 피층은 xanthotoxin이 0.
후속연구
또한, 약재로 사용 할 때 피층 부분을 너무 깎아 버리지 않도록 주의하고, 잔뿌리도 모두 사용하는것이 바람직 할 것으로 사료된다. 각 부분의 추가적인 활성연구도 필요하다.
이로 보아 뿌리 전체 (main root)나 뿌리의 기타 부위와 비교해 잔뿌리 (rootlet) 의 약효가 더 강할 것으로 예측되며 효용 가치도 높을 것으로 생각된다. 또한, 약재로 사용 할 때 피층 부분을 너무 깎아 버리지 않도록 주의하고, 잔뿌리도 모두 사용하는것이 바람직 할 것으로 사료된다. 각 부분의 추가적인 활성연구도 필요하다.
질의응답
핵심어
질문
논문에서 추출한 답변
구릿대란?
한방 생약자원 중 하나인 구릿대(Angelica dahurica Bentham et Hooker)는 산형과(Umbelliferae)에 속하는 2~3년생 초본이며 높이 1~2 m이고 밑부분은 지름 7~8 cm이며 윗부분에 잔털이 있고 가지가 갈라지며 뿌리가 굵다. 꽃은 백색으로 6~8월에 큰 겹산형 꽃차례로 달린다.
구릿대의 꽃은 어떠한가?
한방 생약자원 중 하나인 구릿대(Angelica dahurica Bentham et Hooker)는 산형과(Umbelliferae)에 속하는 2~3년생 초본이며 높이 1~2 m이고 밑부분은 지름 7~8 cm이며 윗부분에 잔털이 있고 가지가 갈라지며 뿌리가 굵다. 꽃은 백색으로 6~8월에 큰 겹산형 꽃차례로 달린다. 작은 꽃자루는 20~40개로 길이 4~6 cm이며 잔돌기가 많고 총포는 없다. 10월에 열매가 성숙하고 열매는 분과로 편평한 타원형이고 길이 8~9 mm이며 가장자리의 것은 날개 모양이며 주로 냇가 습지에 자생한다.
구릿대의 생김새는?
한방 생약자원 중 하나인 구릿대(Angelica dahurica Bentham et Hooker)는 산형과(Umbelliferae)에 속하는 2~3년생 초본이며 높이 1~2 m이고 밑부분은 지름 7~8 cm이며 윗부분에 잔털이 있고 가지가 갈라지며 뿌리가 굵다. 꽃은 백색으로 6~8월에 큰 겹산형 꽃차례로 달린다.
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