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문제 정의
- 본 연구는 부모가 모두 한국인인 가정과 다문화가정에서, 구강 검진을 시행하고, polymerase chain reaction(PCR)을 이용하여 치아우식증의 주요 원인균인 S. mutans의 serotype 분포와 전이에 대해 알아보기 위한 것이다.
- 본 연구에서는 같은 지역에 사는 부모가 모두 한국인인 가정과 다문화 가정에서 어머니와 어린이의 구강 상태를 검사하고, S. mutans의 serotype 분포를 확인하여 다음과 같은 결과를 얻었다.
제안 방법
- mutans level을 표시할 때에는 0~3으로 나타낼 수 있는데, 0은 <10,000 CFU/ml, 1은<100,000 CFU/ml, 2는 100,000-1,000,000 CFU/ml, 3은>1,000,000 CFU/ml (colony forming unit)를 의미한다. 1 이하에서는 바른 잇솔질 등으로 현재의 양호한 상태를 유지하고 2부터는 우식의 위험이 있음을 의미하며, 3이 되면 우식의 위험이 크다는 것을 의미하기 때문에, 본 연구에서는 S. mutans level에 따른 비교시 level 2를 기준으로 나누어 구분하였다. 하지만 본 연구에서 S.
- 1인의 조사자가 치경을 이용하여 창가에서 구강 검진을 시행하였으며, 구강 검진 기록은 총 치아의 수에 차이가 있으므로 DMFT ratio(dmft ratio)로 기록하였다. DMFT 검사에서 D는 dental caries(우식 치아), M은 missing(상실 치아), F는 filling(치료한 치아), T는 tooth(총 치아)의 개수를 의미하며, white spot이나 rested caries는 우식 치아에 포함시키지 않았다.
- PCR 시 사용된 serotype-specific sets of primers는 다음과 같다(Table 2). 96℃에서 4분 동안 preliminary denaturation을 시행하였으며, 그 후 95℃에서 30초 간 denaturation, 60℃에서 30초 동안 annealing, 72℃에서 1분 동안 extension 과정을 30회 반복하였고, 최종적으로 72℃에서 7분 동안 마무리하여 DNA를 추출하였다. 추출된 DNA에 dye 1 ul를 섞은 후 1% agarose gel에서 5 ul를 marker와 같이 loading하였고 20분간 전기영동 한 후에 결과를 확인하였다.
- 채취한 타액을 흐르거나 고이지 않게 strip에 묻힌 후, 배양액에 넣고, 37℃ 항온 배양기에서 48시간 동안 배양하였다. 배양 후 제작회사의 판정표에 따라 우식 활성도를 음성(negative:0), 경도 활성도(mild:1), 중등도 활성도(moderate:2) 및 고도 활성도(severe:3)로 점수화하였다(Fig. 1).
- 96℃에서 4분 동안 preliminary denaturation을 시행하였으며, 그 후 95℃에서 30초 간 denaturation, 60℃에서 30초 동안 annealing, 72℃에서 1분 동안 extension 과정을 30회 반복하였고, 최종적으로 72℃에서 7분 동안 마무리하여 DNA를 추출하였다. 추출된 DNA에 dye 1 ul를 섞은 후 1% agarose gel에서 5 ul를 marker와 같이 loading하였고 20분간 전기영동 한 후에 결과를 확인하였다.
대상 데이터
- 다문화가정의 어머니들은 필리핀, 베트남 등 동남아시아에서 이주해 오신 분들을 대상으로 하였다.
- 본 연구는 전라북도 장수군에 거주하고 있는 만 6~8세의 어린이와 그 어머니를 대상으로 하였다. 부모가 모두 한국인인 어린이(KC 그룹)와 한국인 어머니(KM 그룹) 13쌍, 다문화가정 어린이(MC 그룹)와 다문화가정 어머니(MM 그룹) 11쌍이 실험에 참여하였다(Table 1).
- 본 연구는 전라북도 장수군에 거주하고 있는 만 6~8세의 어린이와 그 어머니를 대상으로 하였다. 부모가 모두 한국인인 어린이(KC 그룹)와 한국인 어머니(KM 그룹) 13쌍, 다문화가정 어린이(MC 그룹)와 다문화가정 어머니(MM 그룹) 11쌍이 실험에 참여하였다(Table 1).
- 타액 내 S. mutans의 수준을 평가하기 위하여 Orion Diagnostica사의 Dentocult®-SM 키트(Espoo, Finland)를 이용하였다.
데이터처리
- 윈도우용 SPSS 12.0 version을 이용하여 각 그룹간의 S.mutans level, DMFT ratio(dmft ratio), serotype 수 등의 상관성 여부를 Fisher’s exact test, Chi-square test, pearson 상관관계 분석을 통해 검정하였으며, 유의수준은 0.05를 기준으로 하였다.
성능/효과
- 1. K 그룹을 대상으로 하였을 때에 serotype c는 95%, serotype e, f, k는 10%의 비율로 나타났으며, M 그룹을 대상으로 하였을 때에는 serotype c는 68.8%, serotype e는 31.25%, serotype f는 43.75%, serotype k는 18.8%의 비율로 나타났다.
- 2. 어머니와 어린이 둘 다 serotype이 확인된 경우, 92.86%에서 어머니와 어린이가 한 종류 이상의 serotype을 공유하는 것으로 나타났다. 어머니와 어린이의 serotype이 모두 일치하는 경우는 K 그룹에서는 8쌍 중 5쌍으로 62.
- 3. 한 가지 serotype만 나타난 경우보다 두 종류 이상의 serotype이 확인된 경우에서 평균 S. mutans level이 높게 나왔으나 통계적으로 유의한 차이는 없었다(p>0.05).
- 4. 우식 위험이 높다고 볼 수 있는 S. mutans level 2를 기준으로 비교하였을 때, 각 그룹 간에 우식 위험도는 통계적으로 유의한 차이가 없었다(p>0.05).
- 5. 어머니 그룹과 어린이 그룹에서 S. mutans level과 평균 DMFT ratio(dmft ratio)는 통계적으로 유의한 차이가 없었다(p>0.05).
- 6. 두 종류 이상의 serotype을 포함한 대상에서 평균 DMFT ratio(dmft ratio)가 더 높게 나타났지만, 모든 대상에 대하여 S. mutans의 serotype 수와 DMFT ratio(dmft ratio)는 통계적으로 유의한 상관관계가 없었다(p>0.05).
- mutans가 검출되었으나, 이 중 9명에서만 serotype이 확인되었다. 6명에서 한 종류의 serotype이 검출되었고, 2명에서 두 종류, 1명에서 세 종류의 serotype이 확인되었다. serotype의 종류 별로 살펴보면, serotype c는 7명, serotype e는 1명, serotype f는 3명, serotype k는 2명에서 확인되었다.
- 8%의 비율로 나타났다. K 그룹을 대상으로 한 결과 serotype c가 차지하는 비율이 압도적으로 높았으며, M 그룹을 대상으로 하였을 때에는 serotype c가 가장 많았으나 serotype e, f, k의 비율이 K 그룹에 비해 높았다(Fig. 3).
- S. mutans level에 따라 분류하였을 때, 어머니 그룹과 어린이 그룹에서 S. mutans level이 2 이상일 때 평균 DMFT ratio(dmft ratio)가 높았지만 통계적으로 유의한 차이는 없었다(p>0.05).
- S. mutans의 serotype이 확인된 어머니와 어린이들을 대상으로 하였을 때, 전체적으로 serotype c는 83.3%, serotype e 는 19.4%, serotype f는 25%, serotype k는 13.9%의 비율로 나타났다.
- 두 종류 이상의 serotype이 확인된 대상에서 평균적인 DMFT ratio(dmft ratio)가 더 높게 나타났지만, 모든 대상에 대하여 S. mutans의 serotype 수와 DMFT ratio(dmft ratio)는 통계적으로 유의한 상관관계가 없었다(p>0.05).
- 두 종류 이상의 serotype이 확인된 대상은 K 그룹에서 31.6%, M 그룹에서 50%로 M 그룹에서 높았다(Fig. 4). 어머니 그룹과 어린이 그룹을 비교했을 때에는 어머니 그룹에서는 38.
- mutans의 전이를 주장하였다. 물론 주위의 보호자 중 아버지로부터 전이될 가능성도 의심되었으나 자식의 bacteriocin type이 부친과는 어떤 경우에도 동일한 양상이 나타나지 않았으며 모친과는 모두 1개 이상의 균주를 공유하는 것으로 보아 S. mutans의 모계 전이 양상이 더욱 분명하다고 하였다. Berkowitz 등15)은 어머니의 S.
- 본 연구에서 K 그룹과 M 그룹의 serotype 분포에 차이가 있었음에도 불구하고, 어머니와 어린이 간에 하나 이상의 serotype이 일치하는 비율이 높은 것은 어머니와 어린이 간에 수직적 전이가 있었음을 추측할 수 있게 해준다. 또한 K 그룹에서 모든 serotype이 일치하는 경우가 62.
- mutans serotype이 발견되었다고 하였고, Davey 와 Rogers는 성인에서 78%, 어린이의 46%에서 두 종류 이상의 serotype이 발견되었다고 보고하였다. 본 연구에서 두 가지 이상의 serotype이 발견된 대상은, K 그룹에서는 31.6%, M 그룹에서는 50%였으며, 어린이 그룹에서는 41.2%, 어머니 그룹에서는 38.9%로 나타나 기존 연구의 결과의 평균 범위에 속한다고 할 수 있겠다. 하 등25)에 의하면, 한국인 105명을 대상으로한 연구에서 대상의 78%에서 S.
- 본 연구에서는 K 그룹과 M 그룹의 구강 상태 비교에 있어, M 그룹의 우식이환율이 비교적 높았지만, 통계적으로 유의한 차이는 없었다. 그 이유는 연구대상 선정에 있어 실제로 우리가 염려하였던 의사소통과 경제적 문제가 있는 다문화가정이 많이 포함되지 못한데 있다고 생각된다.
- 임상적으로 구강 내에 분포하는 serotype의 빈도와 분포를 조사해보면, 대부분 약 70~80%는 serotype c이며, 약 20%가 serotype e, f, 그리고 k가 5% 미만을 차지하고 있다고 하였다4,21,22). 본 연구에서도 serotype c의 비율이 높았으며, 특히 K 그룹의 경우 대상의 95%인 대부분에서 serotype c가 확인되었다.
- 어머니와 어린이 둘 다 serotype이 확인된 경우, 총 14쌍 중 13쌍, 즉 92.86%에서 어머니와 어린이가 하나 이상의 같은 serotype을 포함하는 것으로 나타났다.
- 어머니와 어린이의 serotype이 모두 일치하는 경우는 K 그룹에서는 8쌍 중 5쌍으로 62.5%였으며, M 그룹에서 모두 일치하는 경우는 없었다.
- 우식 위험이 높다고 볼 수 있는 S. mutans level 2를 기준으로 비교하였을 때, MM 그룹에서 S. mutans level이 2 이상인 대상이 KM 그룹보다 더 많았으나, 통계적으로 유의하지는 않았다(p>0.05).
- KC 그룹과 MC 그룹 사이, 그리고 K 그룹과 M 그룹 사이에서도 통계적으로 유의한 차이는 없었다. 우식 위험이 높다고 할 수 있는 level 2 이상인 경우는 어머니들에서 37.5%였고, 어린이들에서는 66.7%로 아이들의 평균적인 S. mutans level이 더 높았다.
- mutans가 검출되었다. 이 중 1명에서는 serotype이 확인되지 않았으며, 8명에서 한 종류의 serotype만 확인되었고, 2명에서 두 종류의 serotype이 확인되었다. serotype의 종류 별로 살펴보면, serotype c는 10명에서, serotype e는 1명, serotype k는 1명에서 확인되었다.
- 이상의 결과를 종합해보면 두 가정에서 serotype 분포에는 차이가 있었으며, 그럼에도 불구하고 어머니와 어린이 사이에 하나 이상의 serotype이 일치하는 비율이 높아(92.86%) S. mutans의 어머니에 의한 수직 감염을 뒷받침한다는 결론을 내릴수 있었다.
- mutans level에 따른 비교시 level 2를 기준으로 나누어 구분하였다. 하지만 본 연구에서 S. mutans level과 우식경험률은 유의한 상관관계가 없었다. 이는 Seki 등29), 김 등30)의 연구 결과와 일치하지만, 임 등31)의 연구와는 상반된 결과이다.
- 한 가지 serotype만 나타난 경우보다 두 가지 이상의 serotype을 보인 대상에서 평균 S. mutans level이 높게 나왔으나 통계적으로 유의한 차이는 없었다(p>0.05).
후속연구
- 본 연구에서는 기대했던 multiple serotype과 우식 이환율 간에 유의성 있는 상관관계를 발견하지는 못하였는데, 이는 다른 요인들을 통제하기 어려웠기 때문이라고 생각되며, 우식에 다양한 원인이 작용함을 시사한다고 할 수 있다.
- 이번 연구는 다문화가정 어머니와 어린이의 S. mutans 분포와 구강 건강 상태를 파악하는 기초적인 자료가 될 것이다. 추후 실험 대상 수를 늘려 다문화가정 어린이의 구강건강상태를 파악한다면 다문화가정에 대한 사회적, 치과적 관심을 고무시키는 계기가 될 것이다.
- mutans 분포와 구강 건강 상태를 파악하는 기초적인 자료가 될 것이다. 추후 실험 대상 수를 늘려 다문화가정 어린이의 구강건강상태를 파악한다면 다문화가정에 대한 사회적, 치과적 관심을 고무시키는 계기가 될 것이다.
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