혼합치열기 어린이에서 Streptococcus mutans와 Streptococcus sobrinus의 분포도 조사 PREVALENCE OF STREPTOCOCCUS MUTANS AND STREPTOCOCCUS SOBRINUS IN CHILDREN WITH MIXED DENTITION원문보기
본 연구는 125명의 6-11세 혼합치열기 아동을 대상으로 연령에 따라 초기 혼합치열기 A군(6-8세; 62명)과 후기 혼합치열기 B군(9-11세; 63명)으로 분류하고 유치의 dfs, 영구치의 DFS를 기록한 후 자극성 타액을 채취하여 TYCSB 배지에 배양해서 S. mutans와 S. sobrinus를 구분하였으며 PCR을 시행하여 확인하였다. S. mutans와 S. sobrinus의 분포도와 치아우식증과의 상관관계를 조사하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 1. S. mutans와 S. sobrinus의 상관계수는 A군 0.70, B군 0.50로 두 군 모두에서 높은 상관관계를 보였다. 2. S. mutans와 치아우식증과의 관계는 A군(r=0.25)과 B군(r=0.34) 모두에서 약간의 관련성이 나타났다. 3. A군에서 S. sobrinus와 치아우식증간에 상관관계가 없는 것으로 나타났으며, B군(r=0.21)에서는 미약한 상관관계가 성립되었다. 4. S. mutans와 나이의 상관관계는 A군과 B군 모두에서 관련성이 없는 것으로 나타났다. 5. S. sobrinus와 나이의 상관관계는 A군(r=0.32)에서는 약간의 관련성이 나타났고, B군에서는 관련성이 없는 것으로 나타났다.
본 연구는 125명의 6-11세 혼합치열기 아동을 대상으로 연령에 따라 초기 혼합치열기 A군(6-8세; 62명)과 후기 혼합치열기 B군(9-11세; 63명)으로 분류하고 유치의 dfs, 영구치의 DFS를 기록한 후 자극성 타액을 채취하여 TYCSB 배지에 배양해서 S. mutans와 S. sobrinus를 구분하였으며 PCR을 시행하여 확인하였다. S. mutans와 S. sobrinus의 분포도와 치아우식증과의 상관관계를 조사하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 1. S. mutans와 S. sobrinus의 상관계수는 A군 0.70, B군 0.50로 두 군 모두에서 높은 상관관계를 보였다. 2. S. mutans와 치아우식증과의 관계는 A군(r=0.25)과 B군(r=0.34) 모두에서 약간의 관련성이 나타났다. 3. A군에서 S. sobrinus와 치아우식증간에 상관관계가 없는 것으로 나타났으며, B군(r=0.21)에서는 미약한 상관관계가 성립되었다. 4. S. mutans와 나이의 상관관계는 A군과 B군 모두에서 관련성이 없는 것으로 나타났다. 5. S. sobrinus와 나이의 상관관계는 A군(r=0.32)에서는 약간의 관련성이 나타났고, B군에서는 관련성이 없는 것으로 나타났다.
Mutans streptococci have been reported to be implicated in dental caries. Of these streptococcal species, Streptcoccus mutans and Streptococcus sobrinus are most commonly found in human dental caries. Prevalence of these bacterial species in dental caries is found to be varied in different races and...
Mutans streptococci have been reported to be implicated in dental caries. Of these streptococcal species, Streptcoccus mutans and Streptococcus sobrinus are most commonly found in human dental caries. Prevalence of these bacterial species in dental caries is found to be varied in different races and countries. Therefore, importance of these bacteria in dental caries remains to be determined The present study was performed to find out correlation S. mutans and S. sobrinus with dental caries in 125 Korean children with mixed dentition between 6 to 11 years of age. They were classified as group A(6-8 years) and group B(9-11 years) by age. For the study, stimulated saliva samples were collected from each subject. The vials containing saliva specimens were serially diluted (1:10) in saline and plated in duplicate on tryptone-yeast extract-cysteine with sucrose and bacitracin (TYCSB) for S. mutans and S. sobrinus. After genomic DNA was extracted from the samples, polymerase chain reaction (PCR) amplification was performed for identification using universal primers and specific primers to S. mutans and S. sobrinus. Data of microbial variables were compared to caries status of the subjects. According to this study, the result were as follows : 1. S. mutans versus S. sobrinus were moderate positive linear correlated in both group A(r=0.70) and group B(r=0.50). 2. Between S. mutans and dental caries there were weak positive linear correlation in both group A(r= 0.25) and group B(r=0.34). 3. S. sobrinus versus dental caries were not correlated in group A but slightly correlated in group B(r=0.21). 4. Between S. mutans and age, there were not correlation in both group. 5. S. sobrinus versus age were weak correlated in group A(r=0.32) but not correlated in group B.
Mutans streptococci have been reported to be implicated in dental caries. Of these streptococcal species, Streptcoccus mutans and Streptococcus sobrinus are most commonly found in human dental caries. Prevalence of these bacterial species in dental caries is found to be varied in different races and countries. Therefore, importance of these bacteria in dental caries remains to be determined The present study was performed to find out correlation S. mutans and S. sobrinus with dental caries in 125 Korean children with mixed dentition between 6 to 11 years of age. They were classified as group A(6-8 years) and group B(9-11 years) by age. For the study, stimulated saliva samples were collected from each subject. The vials containing saliva specimens were serially diluted (1:10) in saline and plated in duplicate on tryptone-yeast extract-cysteine with sucrose and bacitracin (TYCSB) for S. mutans and S. sobrinus. After genomic DNA was extracted from the samples, polymerase chain reaction (PCR) amplification was performed for identification using universal primers and specific primers to S. mutans and S. sobrinus. Data of microbial variables were compared to caries status of the subjects. According to this study, the result were as follows : 1. S. mutans versus S. sobrinus were moderate positive linear correlated in both group A(r=0.70) and group B(r=0.50). 2. Between S. mutans and dental caries there were weak positive linear correlation in both group A(r= 0.25) and group B(r=0.34). 3. S. sobrinus versus dental caries were not correlated in group A but slightly correlated in group B(r=0.21). 4. Between S. mutans and age, there were not correlation in both group. 5. S. sobrinus versus age were weak correlated in group A(r=0.32) but not correlated in group B.
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문제 정의
이 있고, 어린이의 경우에는 더 많은 조사연구가 있어야 할 것으로 생각된다. 따라서 본 연구에서는 초기 혼합치열기 어린이와 후기 혼합치열기 어린이에서 자극성 타액을 채취한 다음 TYCSB 배지를사용하여 S. mu tans 와 S. sobrinus 의 타액 내 출현을 조사함으로써 이들 세균과 치아우식증과의 관계를 관찰하였다.
제안 방법
125명의 6T1 세 혼합치열기 아동을 대상으로 연령에 따라초기 혼합치열기 A군(6-8세; 62명)과 후기 혼합치열기 B군 (9-11 세; 63명)으로 분류하고 유치의 dfs, 영구치의 DFS를기록한 후 자극성 타액을 채취하여 TYCSB 배지에 배양해서 PCR을시행하여 S. mutants, s 사)rinus 의 분포도와 치아우식증과의 상관관계를 조사하여 다음과 같은 결과를 얻었다.
sobrinus의 universal primer와 specific primer를 제작한 후(Table 1), PCR ampliScation을 시행하였다. PCR 산물은 2% agarose gel 상에서 전기영동하였고, gele ethidium bromide (0.5ug/ul)로 염색한 후 Gel DocTM EQ Bio-Rad)에서 PCR 산물을 관찰하고 사진을 촬영하여 기록하였다.
so~ brinus로 생각되는 colony를 brain heart infusion(BHI; Difco) agar plate에 도말하여 배양한 후 다시 BHI broth에배양하여 DNA를 추출하였다. S. mutans와 S. sobrinus의 universal primer와 specific primer를 제작한 후(Table 1), PCR ampliScation을 시행하였다. PCR 산물은 2% agarose gel 상에서 전기영동하였고, gele ethidium bromide (0.
sobrinus 에 일치하는지 알아보기 위하여 각각의 군락을 PCR 방법을 이용하여 동정하였다. TYCSB에서 배양한 S. mutant S. so~ brinus로 생각되는 colony를 brain heart infusion(BHI; Difco) agar plate에 도말하여 배양한 후 다시 BHI broth에배양하여 DNA를 추출하였다. S.
각각의 어린이들을 한명의 연구자가 구강검사를 통해 dfs와 DFS를 기록한 후에 paraffin wax를 약 1분간 씹게 한 후 자극성타액을 2-3ml 정도 채취하였다. 채취된 타액은 약 10초간 vortexing을 시행하였으며 Westergren과 Krasse"。의 방법에따라 생리식염수에 순차적으로 희석(1:10)하여 TYCSB 배지에 도말한 후 10%의 CO2가 함유된 37 ℃ 배양기에서 72시간배양하였다.
sobrinus의 분포도와 치아우식증과의 상관관계를 조사하였다. 또한 나이에 따라 초기 혼합치열기인 A군(6-8세)과 후기혼합치열기인 B군(9-11 세)으로 분류하여 나이와 치아우시증과의 상관관계를 조사하였다.
본 연구에서는 125명의 6-11 세 혼합치열기 아동을 대상으로유치의 dfs, 영구치의 DFS를 기록한 후 자극성 타액을 채취하여 TYCSB 배지에 배양해서 PCR을 시행하여 S. mutans와 S. sobrinus의 분포도와 치아우식증과의 상관관계를 조사하였다. 또한 나이에 따라 초기 혼합치열기인 A군(6-8세)과 후기혼합치열기인 B군(9-11 세)으로 분류하여 나이와 치아우시증과의 상관관계를 조사하였다.
시각적으로 구별한 군락이 각각 S. mutans와 S. sobrinus 에 일치하는지 알아보기 위하여 각각의 군락을 PCR 방법을 이용하여 동정하였다. TYCSB에서 배양한 S.
이 같은 단점을 극복하기 위해 , 최근 들어 세균종.특이 primer를 사용한 polymerase chain reaction (PCF打을 이용하여 .정확하게 mutans streptococci에 속한 세균종을 동정하는 연구가 활발하게 진행되고 있다攻06>.
대상 데이터
경희대학교 치과대학 소아치과에 내원한 6세에서 11세 사이의 혼합치열기 어린이 중 최근 1개월 이내에 항생제를 복용하지 않고 48시간 이내에 항균 양치액이나 전문가 불소도포를 받지 않은 어린이 125명을 연령에 따라 초기 혼합치열기 A군(6 세-8세; 62명)과 후기 혼합치열기 B군9세-11세; 63명으로나누었다.
총 127명의 어린이가 실험에 참가하였으며, 나이에 따라 6-8 세를 A군, 9T1 세를 B군으로 분류하였다. 실험에 참여한 각 군의 나이와 dfs 및 DFS의 평균 및 표준편차는 Table 2에 기록되었다.
데이터처리
각 군에 대하여 나이, dfs와 DFS에 대한 평균과 표준편차를구했다. 자극성 타액 1ml 당 S.
자극성 타액 1ml 당 S. mutanser S. sobrinus의 CFU 값은 log 값으로 변환하여 통계처리 하였다.
이론/모형
mu~ tans는 투명한 외층이 있는 작은 흰색의 군락을 형성하며 S. sobrinus는 경계가 불명확한 외층이 있거나 또는 외층이 없는황백색의 군락을 형성한다1。% 이와 같이 배양된 두 군락의 정확한 동정을 위해서 본 연구에서는 PCR 방법을 사용하였다. PCR 방법은 DNA 또는 RNA의 특정 영역을 시험관내에서 대량으로 증폭하여 확인하는 방법으로 세균배양 방법이나 세균배양 후 시행하는 생화학적, 면역학적, 유전학적 방법에 비해 쉽고 시간이 절약되며 특이성, 정확성, 효율성이 높아2” 치아우식증에서 mutans streptococci를 동정하는데 현재 가장 많이 사용하고 있는 방법 이다.
성능/효과
1. S. mutanser S. sobrinus의 상관계수는 A군 0.70, B 군 0.50로 두 군 모두에서 높은 상관관계를 보였다.
2. S. mutans와 치아우식증과의 관계는 A군(r=0.25)과 B 군(r=0.34) 모두에서 약간의 관련성이 나타났다.
3. A군에서 S. sobrinus와 치아우식증간에 상관관계가 없는 것으로 나타났으며, B군(r=0.21)에서는 미약한 상관관계가 성립되었다.
4. S. mutans와 나이의 상관관계는 A군과 日군 모두에서관련성 이 없는 것으로 나타났다.
5. S. sobrinus와 나이의 상관관계는 A군(r=0.32)에서는약간의 관련성이 나타났고, B군에서는 관련성이 없는 것으로 나타났다.
B군에서 S. mutans와 S. sobrinus 상관관계 (r = 0.50)는상당한 관련성이 나타났다. S.
mu tans 가치아우식증의 개시와 진행에 밀접한 영향을 미친다는 기존의 연구f 를 뒷받침하고 있다. S. 80-brinus와 치아우식증의 상관관계는 A군에서는 관련성이 없는것으로 나타났고 B군에서는 약간의 관련성이 있는 것으로 나타났다. 이 결과에 따르면 A군은 S.
S. mutanse S. sobrinus의 상관관계에 있어 A군 (r=0.70)과 B군(r=0.50) 모두에서 상당한 관련성이 나타났다. 이는 S.
34)는 약간의 관련성이 나타났다. S. sobrinus와치아우식증의 상관관계(r=0.21)는 약간의 관련성이 나타났다 (Table 4).
mutnas와'S. sobrinus 군락을 동정하기 위해 PCR을 시행한 결과, 이전 연구에서 보고된 것처럼 dexA primer를 이용한 S. mutant PCR 산물은 l, 272bp, S. sobrinus2] PCR 산물은 l, 610bp 루 나타남으로서 각각의 군락이 S. mu tans 와 S. sobrinus 에일치함을 확인하였다(Fig. 1).
sobrinus와 우식활성의 관계를 명확히 규명하기 어려웠을 것으로 추정된다. 또한 B군에서는 S. mutans와 S. sobrinus 모두 나이와는 관련성이 없는 것으로 나타났는데, A군에서는 S. sobrinus가 나이와 상관관계가 있는 것으로 나타났다. A군이 초기 혼합치열기이고 B군이 후기 혼합치열기임을 고려할 때 S.
알려진 연쇄상구균을 말하며 생리 . 생화학적 성상이 서로 다른 이종성 세균군으로, 사람에서 주로 분리되는 S. mu~ Zarzs와 S. sobrinus, 원숭이에서 나타나는 S. downei, 횐쥐에서 분리되는 S. rattus, 햄스터에서 분리된 S. cricetus 둥이포함되는데气 현재는 생화학적, 혈청학적, 유전적 차이에 따라 S. cricetus, S. rattus, S. mutans, S. sobrinus, S. downei, S. macacae, S. ferus 등 7개의 세균종으로 분류된다%. Mutans streptococci 중에서도 S.
후속연구
Mutans streptococci가 치아우식증에 중요하다고 가정했을때 mutans streptococci 중에서 인간에서 많이 나타나는 것으로 알려진 S. mu tans 와 S. sobrinus 두 세균종 중어느 것이더 치아우식증과 연관성을 갖는 중요한 것인지에 대해서도 아직까지는 분명하지 않아이에 대한 조사와 연구가 필요하다. Loesche"는 우식부위에서 S.
세균종과의 관계를 결론내리기에는 부족힘.이 있고, 어린이의 경우에는 더 많은 조사연구가 있어야 할 것으로 생각된다. 따라서 본 연구에서는 초기 혼합치열기 어린이와 후기 혼합치열기 어린이에서 자극성 타액을 채취한 다음 TYCSB 배지를사용하여 S.
이처럼 A군과 B군의 결과가다르게 나타나는 점으로 보아 초기 혼합치열기와 후기 혼합치열기 간에 치아우식증과 관련 세균의 분포에 차이점이 있을 것으로 추정할 수도 있다. 이는 성장과 관련된 신체변화 또는 유치의 감소와 영구치의 증가에 따른 변화 등 여러 가치 요인을고려해서 더 많은 연구가 있어야 할 것으로 사료된다.
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