한우와 젖소 대리모가 OPU 유래 한우 송아지의 체중과 임신 기간에 미치는 영향 Effect of Recipient Breeds on Gestation Length and Birth Weight of Offspring Derived from OPU Hanwoo Embryos원문보기
본 연구는 OPU 유래 한우 수정란을 이식한 대리모의 품종이 임신 기간과 산자의 생시 체중에 미치는 영향을 분석하고자 6~7일차 OPU 유래 한우 체외수정란을 한우와 젖소 대리모에 이식하여 산자를 생산하였다. 1. 대리모에 따른 평균 임신 기간(젖소: $284.4{\pm}9.8$일, 한우: $280.9{\pm}6.2$일)과 산자의 생시 체중(젖소: $27.70{\pm}7.92\;kg$, 한우: $23.56{\pm}3.75\;kg$)에서 유의적인 차이가 없었다. 2. 임신 기간은 수송아지를 생산한 대리모(한우: $283.8{\pm}6.7$일, 젖소: $287.3{\pm}8.9$일)가 암송아지(한우: $277.3{\pm}3.3$일, 젖소: $280.1{\pm}9.9$일)를 임신한 대리모보다 유의적으로 길었다(p<0.05). 단태에서도 수송아지를 분만한 대리모의 임신 기간이 유의적인 차이가 있었다(p<0.05). 3. 산자의 성별에 따른 생시 체중은 암송아지(한우 대리모: $21.5{\pm}3.8\;kg$, 젖소 대리모: $21.5{\pm}6.1\;kg$)보다 수송아지(한우 대리모: $25.2{\pm}3.1\;kg$, 젖소 대리모: $32.3{\pm}6.0\;kg$)가 무거웠으며, 수송아지의 경우 품종간 유의적 차이를 보였다. 단태에서도 수송아지가 유의 하 게 높았다(p<0.05). 이상의 결과, OPU 유래 수정란을 이식한 대리모의 임신 기간은 대리모의 품종에 따른 차이는 없었으나, 분만된 산자의 성별에 따라 유의적인 차이기 있었다. 산자의 생시 제중은 수송아지가 유의적으로 높은 생시 체중을 보였고 임신 기간도 수송아지를 분만했을 때 유의적으로 길었다. 수송아지의 경우 품종간의 차이를 보였는데, 이러한 결과는 수정란이식에 의해 생산되는 송아지의 생시 체중과 대리모의 임신 기간은 태아의 품종보다 대리모의 품종이 영향을 미치는 것으로 판단된다. 본 연구에서 젖소 대리모가 한우 대리모보다 번식 적령기의 체중이 무거우므로 대리모의 품종이 산자의 생시 체중에 영향을 미치는 것으로 판단된다.
본 연구는 OPU 유래 한우 수정란을 이식한 대리모의 품종이 임신 기간과 산자의 생시 체중에 미치는 영향을 분석하고자 6~7일차 OPU 유래 한우 체외수정란을 한우와 젖소 대리모에 이식하여 산자를 생산하였다. 1. 대리모에 따른 평균 임신 기간(젖소: $284.4{\pm}9.8$일, 한우: $280.9{\pm}6.2$일)과 산자의 생시 체중(젖소: $27.70{\pm}7.92\;kg$, 한우: $23.56{\pm}3.75\;kg$)에서 유의적인 차이가 없었다. 2. 임신 기간은 수송아지를 생산한 대리모(한우: $283.8{\pm}6.7$일, 젖소: $287.3{\pm}8.9$일)가 암송아지(한우: $277.3{\pm}3.3$일, 젖소: $280.1{\pm}9.9$일)를 임신한 대리모보다 유의적으로 길었다(p<0.05). 단태에서도 수송아지를 분만한 대리모의 임신 기간이 유의적인 차이가 있었다(p<0.05). 3. 산자의 성별에 따른 생시 체중은 암송아지(한우 대리모: $21.5{\pm}3.8\;kg$, 젖소 대리모: $21.5{\pm}6.1\;kg$)보다 수송아지(한우 대리모: $25.2{\pm}3.1\;kg$, 젖소 대리모: $32.3{\pm}6.0\;kg$)가 무거웠으며, 수송아지의 경우 품종간 유의적 차이를 보였다. 단태에서도 수송아지가 유의 하 게 높았다(p<0.05). 이상의 결과, OPU 유래 수정란을 이식한 대리모의 임신 기간은 대리모의 품종에 따른 차이는 없었으나, 분만된 산자의 성별에 따라 유의적인 차이기 있었다. 산자의 생시 제중은 수송아지가 유의적으로 높은 생시 체중을 보였고 임신 기간도 수송아지를 분만했을 때 유의적으로 길었다. 수송아지의 경우 품종간의 차이를 보였는데, 이러한 결과는 수정란이식에 의해 생산되는 송아지의 생시 체중과 대리모의 임신 기간은 태아의 품종보다 대리모의 품종이 영향을 미치는 것으로 판단된다. 본 연구에서 젖소 대리모가 한우 대리모보다 번식 적령기의 체중이 무거우므로 대리모의 품종이 산자의 생시 체중에 영향을 미치는 것으로 판단된다.
This study evaluated the effect of recipient's breed on the gestation length and birth weight of Hanwoo calves produced by Hanwoo ovum pick up (OPU) derived embryos. Embryos of OPU derived Hanwoo cows were transferred into the Hanwoo and Holstein recipients at 6~7 days of estrus cycle. Gestation len...
This study evaluated the effect of recipient's breed on the gestation length and birth weight of Hanwoo calves produced by Hanwoo ovum pick up (OPU) derived embryos. Embryos of OPU derived Hanwoo cows were transferred into the Hanwoo and Holstein recipients at 6~7 days of estrus cycle. Gestation length was expressed in days from the day of embryo transfer to the birth day of offspring, and birth weight of offspring was recorded within 24 h of birth. Breed of recipient cows (Hanwoo and Holstein) has no effect on overall gestation length ($280.9{\pm}6.2$ vs. $284.4{\pm}9.8$ days) and birth weight of calves ($23.56{\pm}3.75$ vs. $27.70{\pm}7.92\;kg$). The gestation length was higher (p<0.05) for male calves than female calves in both Hanwoo ($283.8{\pm}6.7$ vs. $277.3{\pm}3.3$ days) and Holstein ($287.3{\pm}8.9$ vs. $280.1{\pm}9.1$ days) recipient cows. Birth weight of Hanwoo calves did not differ when Hanwoo recipients ($26.5{\pm}1.3$ vs. $23.3{\pm}1.2\;kg$) were used for embryo transfer. However, male calves were heavier (p<0.05) at birth than that of female calves when embryos were transferred into the Holstein cow ($33.5{\pm}4.9$ vs. $27.8{\pm}4.9\;kg$). In conclusion, the present results demonstrated that breed of recipient cows have no effect on gestation length and birth weight of OPU derived Hanwoo calves. However, gestation length and birth weight of male calves were higher in both Hanwoo and Holstein recipient cows.
This study evaluated the effect of recipient's breed on the gestation length and birth weight of Hanwoo calves produced by Hanwoo ovum pick up (OPU) derived embryos. Embryos of OPU derived Hanwoo cows were transferred into the Hanwoo and Holstein recipients at 6~7 days of estrus cycle. Gestation length was expressed in days from the day of embryo transfer to the birth day of offspring, and birth weight of offspring was recorded within 24 h of birth. Breed of recipient cows (Hanwoo and Holstein) has no effect on overall gestation length ($280.9{\pm}6.2$ vs. $284.4{\pm}9.8$ days) and birth weight of calves ($23.56{\pm}3.75$ vs. $27.70{\pm}7.92\;kg$). The gestation length was higher (p<0.05) for male calves than female calves in both Hanwoo ($283.8{\pm}6.7$ vs. $277.3{\pm}3.3$ days) and Holstein ($287.3{\pm}8.9$ vs. $280.1{\pm}9.1$ days) recipient cows. Birth weight of Hanwoo calves did not differ when Hanwoo recipients ($26.5{\pm}1.3$ vs. $23.3{\pm}1.2\;kg$) were used for embryo transfer. However, male calves were heavier (p<0.05) at birth than that of female calves when embryos were transferred into the Holstein cow ($33.5{\pm}4.9$ vs. $27.8{\pm}4.9\;kg$). In conclusion, the present results demonstrated that breed of recipient cows have no effect on gestation length and birth weight of OPU derived Hanwoo calves. However, gestation length and birth weight of male calves were higher in both Hanwoo and Holstein recipient cows.
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문제 정의
1980년대 이전 인공수정이 국가 차원에서의 주요 가축 개량 사업의 일환으로 웅성의 우수한 유전자 보급을 위하여 실시하였다. 그러나 인공수정에 의한 개량은 웅성 유전자만을 이용하므로 개 량 측면에서 많은 시 간이 소요된다는 단점이 있어, 이러한 기술을 개선하기 위한 기술이 자성 및 웅성을 동시에 이용한 수정란이식 기술이 개발되어 가축 개량에 활용되고 있다.
따라서 이에 본 연구에서는 OPU 유래 수정란을 한우 및 젖소 대리모에 이식하였을 때 산자의 임신 기간과 생시 체중을 비교 분석하여 OPU 유래 수정란이식 후 생산되는 산자와 대리모의 생산 효율을 개선하고자 실시하였다.
본 연구는 OPU 유래 한우 수정란을 이식한 대리모의 품종이 임신 기간과 산자의 생시 체중에 미치는 영향을 분석하고자 6〜7일차 OPU 유래 한우 체외수정란을 한우와 젖소 대리모에 이식하여 산자를 생산하였다.
제안 방법
체외수정 시 액체질소에서 한우 동결 정액 straw를 38°C에서 1분간 융해 후 10 ml 정자 세척액(D-PBS, Gibco)에 넣었다. 그 후 1, 800 rpm에서 5분간 원심분리 하여 정자 펠렛을 얻은 후 20 ug/ml heparin을 넣어 배양기에서 15분간 수정능 획득을 시켜 정자의 최종 농도 Ixi" sperms/ml로 5% CO2, 98〜99% 습도, 38°C CO2 배양기의 조건에서 24시간 동안 체외수정을 유도하였다.
공란우를 보정틀에 고정시켜 움직임을 최소화 한 후 2% 리도카인 마취제를 약 3~7 ml를 경막외 국소 마취를 시키고 꼬리를 묶어 고정시키고 흐르는 물을 이용하여 외음부 세척을 한 후 70% 알콜과 20%로 희석된 아이오다인으로 외음부를 소독하였다. 이후 직장 검사용 장갑으로 난소를 점검하고, 초음파 채취기를 직장 검사용 장갑으로 보호하여 질 내로 삽입하고, 초음파 채취기(MyLab"24% * GOLD, Genova, Italy)를 통해 난포의 개수를 확인하고, 일회용 long 주사침(18 G)을 이용하여 2~6 mm 크기의 난포로부터 미성숙 난자를 채취하였다(Fig. 1). 난자를 채취하는 과정에서 주사침 및 흡입되는 관내에는 흡입용 배지(HEPES+ 10 IU Heparin)를항시 충전되도록 하였다.
OPU 유래 수정란을 생산하기 위한 한우 공란우는 이식 농가에 사육 중인 고등 등록우 중에서 후대 검정을 통해 자손의 비육 출하 성적이 A1++ 등급을 획득한 경험이 있는 암소를 선발하여 직장 검사에 의한 난소, 자궁 등의 번식 기관의 상태와 body score 등을 고려하여 최종 선발하였다.
방법에 준하여 실시하였다. 공란우를 보정틀에 고정시켜 움직임을 최소화 한 후 2% 리도카인 마취제를 약 3~7 ml를 경막외 국소 마취를 시키고 꼬리를 묶어 고정시키고 흐르는 물을 이용하여 외음부 세척을 한 후 70% 알콜과 20%로 희석된 아이오다인으로 외음부를 소독하였다. 이후 직장 검사용 장갑으로 난소를 점검하고, 초음파 채취기를 직장 검사용 장갑으로 보호하여 질 내로 삽입하고, 초음파 채취기(MyLab"24% * GOLD, Genova, Italy)를 통해 난포의 개수를 확인하고, 일회용 long 주사침(18 G)을 이용하여 2~6 mm 크기의 난포로부터 미성숙 난자를 채취하였다(Fig.
1). 난자를 채취하는 과정에서 주사침 및 흡입되는 관내에는 흡입용 배지(HEPES+ 10 IU Heparin)를항시 충전되도록 하였다. 초음파 진단기는 준비된 transducer guide 내에 장착되어 있고 guide는 질 내로 삽입하여 난소의 난포를 관찰할 수 있게 고안되었다.
체외성숙은 Jeong 등(2009)의 방법에 준하여 실시하였다. 성숙배양액(TCM-199)에 10% fetal bovine serum(FBS, Gibco), 호르몬(FSH 1 mg/ml, Estradiol 1 mg/ml, Sigma)과 항생제(100 U/ml penicillin streptomycin, 100 ug/ml)를 첨가하였으며, 이와 같이 준비된 체외성숙 배양액은 배양기에서 18시간 이상 전 배양을 실시하여 평형을 유도하였다. 채취된 난자는 98-99% 습도, 38°C, 5% CO2 배양기에서 24시간 동안 배양을 실시하여 난구세포의 팽창과 세포질의 충실도 등으로 체외성숙을 판정하여 체외수정에 공시 여부를 판단하였다.
수정란이식을 시술하기 전에 정상적인 발정 주기를 보인 소를 선발하여 발정 7일째에 자궁과 난소의 상태를 확인하고 황체의 크기(15〜25 mm)와 형태가 정상인 수란우에 자궁경관 경유법을 이용하여 시술하였다. 송아지의 분만 시 임신 기간과 생시 체중을 조사하였다.
. 수를 구분하여 대리모의 품종에 따른 산자의 생시 체중을 조사하였다.
이식하였다. 수정란이식을 시술하기 전에 정상적인 발정 주기를 보인 소를 선발하여 발정 7일째에 자궁과 난소의 상태를 확인하고 황체의 크기(15〜25 mm)와 형태가 정상인 수란우에 자궁경관 경유법을 이용하여 시술하였다. 송아지의 분만 시 임신 기간과 생시 체중을 조사하였다.
초음파 진단기는 준비된 transducer guide 내에 장착되어 있고 guide는 질 내로 삽입하여 난소의 난포를 관찰할 수 있게 고안되었다. 질벽을 통해 난소를 견인하여 transducer에 최대로 밀착시킨 후 난포를 확인하여 미성숙 난자를 채취하였고, 흡입은 vacuum pump를 작동시켜서 작업을 용이하게 하였다. 초음파 상에서 난포를 확인한 후 needle 을 삽입하여 monitor상에 needle을 횡절단할 수 있도록 위치시킨 후, 질벽을 관통하여 복강 내로 들어가 난소에서 확인된 난포 내에 needle을 삽입한 후 vacuum pump의 foot switch를작동시 켜 미성숙 난자와 포함된 난포액을 흡입하여 배지(HEPES+ 10 IU Heparin)에 정치시켰다.
성숙배양액(TCM-199)에 10% fetal bovine serum(FBS, Gibco), 호르몬(FSH 1 mg/ml, Estradiol 1 mg/ml, Sigma)과 항생제(100 U/ml penicillin streptomycin, 100 ug/ml)를 첨가하였으며, 이와 같이 준비된 체외성숙 배양액은 배양기에서 18시간 이상 전 배양을 실시하여 평형을 유도하였다. 채취된 난자는 98-99% 습도, 38°C, 5% CO2 배양기에서 24시간 동안 배양을 실시하여 난구세포의 팽창과 세포질의 충실도 등으로 체외성숙을 판정하여 체외수정에 공시 여부를 판단하였다.
체외배양은 CRlaa 배양액에 4 mg/ml BSA, 10% FBS를 첨가하여 이용하였다. 체외수정 24시간 후에 4 mg/ml BSA 첨가된 CRlaa 배양액으로 2~3회 세척한 후 3일간 체외배양을 실시한 후 분할이 일어난 수정 란만을 선발하여 10% FBS가 첨가된 CRlaa 배양액으로 2차 체외배양을 3일간 한 후 배반포를 생산하였다.
이용하였다. 체외수정 24시간 후에 4 mg/ml BSA 첨가된 CRlaa 배양액으로 2~3회 세척한 후 3일간 체외배양을 실시한 후 분할이 일어난 수정 란만을 선발하여 10% FBS가 첨가된 CRlaa 배양액으로 2차 체외배양을 3일간 한 후 배반포를 생산하였다.
체외수정 배양액에 6 mg/ml BSA를 첨가하고 항생제(100 U/ml penicillin, 100 ug/ml streptomycin, 100 ug/ml)를 첨가한배양액을 5 ml 분주하여 배양기에서 18시간 전 배양을 실시하여 평형을 유도하였다. 체외수정 시 액체질소에서 한우 동결 정액 straw를 38°C에서 1분간 융해 후 10 ml 정자 세척액(D-PBS, Gibco)에 넣었다.
질벽을 통해 난소를 견인하여 transducer에 최대로 밀착시킨 후 난포를 확인하여 미성숙 난자를 채취하였고, 흡입은 vacuum pump를 작동시켜서 작업을 용이하게 하였다. 초음파 상에서 난포를 확인한 후 needle 을 삽입하여 monitor상에 needle을 횡절단할 수 있도록 위치시킨 후, 질벽을 관통하여 복강 내로 들어가 난소에서 확인된 난포 내에 needle을 삽입한 후 vacuum pump의 foot switch를작동시 켜 미성숙 난자와 포함된 난포액을 흡입하여 배지(HEPES+ 10 IU Heparin)에 정치시켰다. 초음파 화상에서 난포가 완전히 사라질 때까지 vacuum pump를 작동시 켜 음압을 유지 시 켜난자를 흡입하게 히였으며, 2~3개의 난포 흡입 후에 배지로 세척하여 혈액과 붙는 현상을 방지하였으며, 이를 모든 난포의 흡입이 끝날 때까지 반복하였다.
대상 데이터
수정란이식은 한우와 젖소의 복합 농가에서 2009년 8월에서 2010년 2월까지 실시하였으며 미경산우 젖소와 한우에 각각 2개의 수정란을 총 52두(젖소 44두, 한우 8두)에 이식하였다. 수정란이식을 시술하기 전에 정상적인 발정 주기를 보인 소를 선발하여 발정 7일째에 자궁과 난소의 상태를 확인하고 황체의 크기(15〜25 mm)와 형태가 정상인 수란우에 자궁경관 경유법을 이용하여 시술하였다.
데이터처리
자료 분석은 SPSS package(Ver. 18.0.0)의 ANOVA를 이용해 각 요인의 유의성(p<0.05)을 검정하였다.
이론/모형
난포란의 채란은 1주일에 2회 3〜4 일 간격으로 진 등(2010) 의 방법에 준하여 실시하였다. 공란우를 보정틀에 고정시켜 움직임을 최소화 한 후 2% 리도카인 마취제를 약 3~7 ml를 경막외 국소 마취를 시키고 꼬리를 묶어 고정시키고 흐르는 물을 이용하여 외음부 세척을 한 후 70% 알콜과 20%로 희석된 아이오다인으로 외음부를 소독하였다.
체외성숙은 Jeong 등(2009)의 방법에 준하여 실시하였다. 성숙배양액(TCM-199)에 10% fetal bovine serum(FBS, Gibco), 호르몬(FSH 1 mg/ml, Estradiol 1 mg/ml, Sigma)과 항생제(100 U/ml penicillin streptomycin, 100 ug/ml)를 첨가하였으며, 이와 같이 준비된 체외성숙 배양액은 배양기에서 18시간 이상 전 배양을 실시하여 평형을 유도하였다.
성능/효과
1. 대리모에 따른 평균 임신 기간(젖소: 284.4±9.8일, 한우: 280.9±6.2일)과 산자의 생시 체중(젖소 27.70±7.92 kg, 한우: 23.56±3.75 kg)에서 유의적인 차이가 없었다.
3. 산자의 성별에 따른 생시 체중은 암송아지(한우 대리모: 21.5±3.8 kg, 젖소 대리모: 21.5±6.1 kg)보다 수송아지(한우 대리모: 25.2±3.1 kg, 젖소 대리모: 32.3±6.0 kg)가 무거웠으며, 수송아지의 경우 품종간 유의적 차이를 보였다. 단태에서도 수송아지가 유의하게 높았다(p<0.
대리모에 따른 산자의 성별 체중을 단태에서 조사하였을 때한우 대리모에서 분만된 수송아지 26.5±1.3 kg, 암송아지 23.2± 1.2 kg으로 태어난 송아지의 성별에 따라 유의적 차이를 보였다. 젖소 대리모에서도 수송아지 33.
본 연구에서도 OPU 유래 수정란을 한우 및 젖소 대리모에 이식하여 태어난 산자의 체중은 수송아지가 젖소 대리모에서 태어난 산자의 체중이 한우 대리모에서 태어난 산자보다 더 무거웠다. 대리모의 임신 기간과 산자의 생시 체중의 차이는 대리모의 품종 간의 차이보다는 산자의 성별에 의한 차이로 판단되고, 특히 수송아지에서는 품종 간의 차이가 있었다. 이러한 결과는 번식 적령기에 도달한 젖소의 14〜15개월령으로 체중이 340-360 kg, 한우는 15〜16개월령의 체중이 300 kg 정도(손 등, 2001)로서 대리모의 체중에 의한 자궁 용적, 팽창도 등의 차이에 의해서 젖소 대리모에서 산자의 생시 체중이 늘어나는 것으로 판단된다.
본 연구에서 이식된 수정란은 6~7일차 배반포를 이식하였으며, 임신 기간은 이식 전 7일을 합산하여 임신 기간을 조사한 결과, 품종 간의 임신 기간(한우 대리모 280.9±6.2일, 젖소 대리모 284.4±9.8일)은 유의적인 차이를 보이지 않았다. 그러나 생산한 산자의 성별에 따른 차이는 수송아지를 생산한 젖소(287.
수송아지의 경우 품종 간의 차이를 보였는데, 이러한 결과는 수정란이식에 의해 생산되는 송아지의 생시 체중과 대리모의 임신 기간은 태아의 품종보다 대리모의 품종이 영향을 미치는 것으로 판단된다. 본 연구에서 젖소 대리모가 한우 대리모보다 번식 적령기의 체중이 무거우므로 대리모의 품종이 산자의 생시 체중에 영향을 미치는 것으로 판단된다.
따라 유의적인 차이가 있었다. 산자의 생시 체중은 수송아지가 유의적으로 높은 생시 체중을 보였고 임신 기간 도수 송아지를 분만했을 때 유의적으로 길었다. 수송아지의 경우 품종 간의 차이를 보였는데, 이러한 결과는 수정란이식에 의해 생산되는 송아지의 생시 체중과 대리모의 임신 기간은 태아의 품종보다 대리모의 품종이 영향을 미치는 것으로 판단된다.
3과 같다. 수송아지의 생시 체중은 젖소 대리모(32.3±6.0 kg) 가 한우 대리모(25.2±3.1 kg)의 산자 생시 체중보다 유의적으로 높았으나8<0.05), 암송아지의 경우 한우와 젖소 대리모 (21.5± 3.8과 21.5±6.1 kg) 간에는 유의차가 없었다. 한우 대리모에서 태어난 산자는 단태(암, 수 23.
이러한 결과를 볼 때 한우 체외수정란을 이식한 경우, 평균 임신 기간이 연구자에 따라 차이는 있었으나, 한우와 젖소의 품종 간의 임신 기간이 다르게 나타나 결과는 본 연구에서 유의적 차이는 없었으며, 다른 연구자의 결과와 유사하였다. 본 연구에서도 OPU 유래 수정란을 한우 및 젖소 대리모에 이식하여 태어난 산자의 체중은 수송아지가 젖소 대리모에서 태어난 산자의 체중이 한우 대리모에서 태어난 산자보다 더 무거웠다.
이상의 결고卜, OPU 유래 수정란을 이식한 대리모의 임신 기간은 대리모의 품종에 따른 차이는 없었으나, 분만된 산자의 성별에 따라 유의적인 차이가 있었다. 산자의 생시 체중은 수송아지가 유의적으로 높은 생시 체중을 보였고 임신 기간 도수 송아지를 분만했을 때 유의적으로 길었다.
참고문헌 (21)
Kruip TA, Boni R, Wurth YA, Roelofsen MW and Pieterse MC. 1994. Potential use of ovum pick-up for embryo production and breeding in cattle. Theriogenology 42:675-684.
Manik RS, Singla SK and Palta P. 2003. Collection of oocytes through transvaginal ultrasound-guided aspiration of follicles in an Indian breed of cattle. Anim. Reprod. Sci. 76:155-161.
Pieterse MC, Kappen KA, Kruip TA and Taverne MA, 1988. Aspiration of bovine oocytes during transvaginal ultrasound scanning of the ovaries. Theriogenology 30:751-762.
Jeong WJ, Cho SJ, Lee HS, Deb GK, Lee YS, Kwon TH and Kong IK. 2009. Effect of cytoplasmic lipid content on in vitro developmental efficiency of bovine IVP embryos. Theriogenology 72:584-589.
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