선택한 단어 수는 입니다.
최소 단어 이상 선택하여야 합니다.
최소 단어 이상 선택하여야 합니다.
선택한 단어 수는 30입니다.
최대 10 단어까지만 선택 가능합니다.
최대 10 단어까지만 선택 가능합니다.
문제 정의
- 이 외에도 부인과 질환의 일종인 유방암 세포에 대한 항암 효과12)등이 보고 되어있다. 이러한 선행 연구를 바탕으로 본 연구진은 GS가 직접적으로 PCO의 형성을 저해할 수 있다는 가설을 세우고 본 연구를 수행하였다.
가설 설정
- b) Values are represented as mean±SD (n=8).
제안 방법
- ß-Estradiol 17-valerate (EV, Sigma, USA) 1회 근육 주사법9)을 이용하여 PCO를 유발하였다.
- 정상군(Normal group, n=8)은 PCO를 유발하지 않고, 5주간 정상식이를 투여하였고, 대조군(Control group, n=8)은 PCO를 유발시킨 후, 5주간 정상 식이를 투여하였다. AGR 투여군(GS group, n=8)은 PCO를 유발시킨 후, GS 추출물을 3.3 g/kg으로 고형사료에 섞어 투여하였다.
- GS 200 g을 증류수 1,500 ㎖에 넣어 전기약탕기 (대웅, 한국)를 이용하여 3시간 동안 전탕하여 물 추출을 시행하였다. 얻어진 전탕액을 5,000 g에서 10분간 원심분리하여 찌꺼기는 버리고 상청액을 얻은 다음 감압 농축하고, 동결건조기(Labconco, Missouri, USA)를 이용하여 동결건조 분말을 조제하였다.
- GS 추출물은 0.2 g/㎖로 증류수에 희석하여 상기한 비율의 고형사료와 섞어 실험식이를 제작하였다. GS 추출물의 투여용량은 사람(60 ㎏)의 1일 건재 투여용량을 9 ~ 12 g으로 하였을 때, 흰쥐와 사람의 무게비 (1/300), 시료 추출 수율 (15.
- 2%), 사람보다 10배 이상 빠른 흰쥐의 대사 속도를 감안하여 흰쥐 1마리당 1일 투여용량을 계산한 결과 30 ~ 60 ㎎/day로 계산되었다. 계산된 GS 추출물을 흰쥐의 1일 고형사료 섭취량 (15g)에 골고루 섞어서 실험식이를 제작하였으며, 고형사료 1 ㎏당 GS 추출물 3.3 g이 포함된 것은 사람의 1일 투여용량 (g/kg)의 10배에 해당한다. 자세한 고형 사료의 조성은 Table 1과 같다.
- 이렇게 하여 얻어진 EV용액을 20 ㎎/㎏의 분량으로 1회 근육 주사하였고, 정상군은 동일한 양의 Sesame oil을 근육 주사하였다. 근육주사 후 2일간 주사한 근육부위에 특이사항이 발생하는지를 관찰한 다음, 5주간 약물을 투여하였다.
- 체중의 측정은 측정일 오후 2시에 전자저울 (Hansung, 서울, 한국)을 이용하여 실시하였다. 난소의 무게는 실험 마지막 날 생쥐를 희생시킨 후, 좌, 우측의 난소를 적출하여 측정하였으며, 희생 직전 측정한 체중에 대한 비율로 제시하였다.
- 정상군 (Normal group)은 EV를 녹이지 않은 Sesame oil 200 ㎕를 대퇴부에 근육 주사하였다. 대조군 (Control group)과 실험군 (GS group)은 EV를 Sesame oil에 20 ㎎/㎏의 분량으로 녹여 마리당 200 ㎕씩 대퇴부에 근육 주사하였다.
- 측정은 주당 1회였으며, 측정 단위는 24시간으로 하였다. 모든 측정은 cage 단위로 이루어졌으며, 측정된 값을 cage에 사육된 마리수인 4로 나누어 개체당 식이량 및 음수량으로 제시하였다.
- 본 연구에서는 PCO를 유발하는 물질인 EV를 흰쥐에 주사하여 PCO를 유발한 후, 5주간 GS를 투여하면서 체중변화, 식이량, 음수량에 미치는 영향을 관찰하고, 약물 투여가 끝난 후, 흰 쥐로부터 적출된 난소의 무게와 낭포(Cyst) 형성 정도를 관찰하였다.
- 미세절단기 (microtome, Leica, Wetzlar, Germany)를 이용하여 고정된 조직을 4 ㎛ 두께로 잘라 슬라이드 글라스 위에 부착하였다. 부착된 조직으로부터 파라핀을 제거하고 hematoxylin과 eosin을 이용하여 염색한 후 광학현미경 (Olympus, Japan)으로 관찰하였다.
- 실험 시작일부터 5주간 식이량 및 음수량을 변화를 관찰하였다. 측정은 주당 1회였으며, 측정 단위는 24시간으로 하였다.
- 실험시작일 (day 1) 측정한 체중을 기준으로 5주간 매주 1회 체중 변화를 관찰하였다. 체중의 측정은 측정일 오후 2시에 전자저울 (Hansung, 서울, 한국)을 이용하여 실시하였다.
- GS 200 g을 증류수 1,500 ㎖에 넣어 전기약탕기 (대웅, 한국)를 이용하여 3시간 동안 전탕하여 물 추출을 시행하였다. 얻어진 전탕액을 5,000 g에서 10분간 원심분리하여 찌꺼기는 버리고 상청액을 얻은 다음 감압 농축하고, 동결건조기(Labconco, Missouri, USA)를 이용하여 동결건조 분말을 조제하였다. 얻어진 추출물은 30.
- . 이러한 이유로 한의학적 치료가 PCOS의 개선에 도움을 줄 수 있을 것으로 가설을 세우고, 活血祛瘀藥에 속하기 때문에, 痰飮, 瘀血, 肝鬱 등으로 변증된 환자들에게 사용되어 왔으며, 특히 乳癰과 같은 부인과 질환에 다용하였던 皂角刺(Gleditsiae Spina, GS)를 이용하여 본 연구를 진행하였다. GS는 콩과에 속한 조각자 나무 (Gleditsia sinensis Lam.
- 45 mm Syringe Filter (Whatman, Springfield, UK)로 걸러 줌으로써 멸균을 대신하였다. 이렇게 하여 얻어진 EV용액을 20 ㎎/㎏의 분량으로 1회 근육 주사하였고, 정상군은 동일한 양의 Sesame oil을 근육 주사하였다. 근육주사 후 2일간 주사한 근육부위에 특이사항이 발생하는지를 관찰한 다음, 5주간 약물을 투여하였다.
- 정상군(Normal group, n=8)은 PCO를 유발하지 않고, 5주간 정상식이를 투여하였고, 대조군(Control group, n=8)은 PCO를 유발시킨 후, 5주간 정상 식이를 투여하였다. AGR 투여군(GS group, n=8)은 PCO를 유발시킨 후, GS 추출물을 3.
- PCO 유발을 위하여 ß-Estradiol 17-valerate (EV, Sigma, USA)를 사용하였고, 시료 조제를 위하여 전기약탕기 (대웅, 한국), 감압농축기 (EYELA, Japan), 동결건조기 (Labconco, Missouri, USA), 강제순환건조기 (제이오텍, 한국)를 사용하였다. 조직병리학적 관찰을 위하여 미세절단기 (microtome, Leica, Wetzlar, Germany)와 광학현미경 (Olympus, Japan) 등을 사용하였다.
- 1). 체중의 직접적인 감소 또는 체중 증가율 감소 원인으로는 대체적으로 외적요인인 식이량의 감소와 내적요인인 체내대사의 증가로 인한 소모율의 증가로 구분 할 수 있는데, 어떤 요인이 주요하게 작용했는지 살펴보기 위하여 식이량 및 음수량을 관찰하였다. 그 결과 대조군과 GS군에서 경미한 식이량 감소가 관찰되었으나, 통계적 유의성은 없었고, 음수량에서는 유의한 수준의 감소를 보였다(Table 2).
- 실험시작일 (day 1) 측정한 체중을 기준으로 5주간 매주 1회 체중 변화를 관찰하였다. 체중의 측정은 측정일 오후 2시에 전자저울 (Hansung, 서울, 한국)을 이용하여 실시하였다. 난소의 무게는 실험 마지막 날 생쥐를 희생시킨 후, 좌, 우측의 난소를 적출하여 측정하였으며, 희생 직전 측정한 체중에 대한 비율로 제시하였다.
- 실험 시작일부터 5주간 식이량 및 음수량을 변화를 관찰하였다. 측정은 주당 1회였으며, 측정 단위는 24시간으로 하였다. 모든 측정은 cage 단위로 이루어졌으며, 측정된 값을 cage에 사육된 마리수인 4로 나누어 개체당 식이량 및 음수량으로 제시하였다.
대상 데이터
- 실험동물은 160～180 g의 S/D계 암컷 백서를 샘타코(인천, 한국)로부터 구입하여 사용하였다. 1주일 이상, 고형사료(삼양 배합사료 실험동물용, 한국)와 물을 충분히 공급하면서 실험실 환경에 충분히 적응시킨 후 실험에 사용하였다. 실험실 환경은 온도 22±2℃를 유지하면서 12시간 단위로 낮과 밤이 계속되는 상황을 실험 종료 시까지 유지하였다.
- PCO 유발을 위하여 ß-Estradiol 17-valerate (EV, Sigma, USA)를 사용하였고, 시료 조제를 위하여 전기약탕기 (대웅, 한국), 감압농축기 (EYELA, Japan), 동결건조기 (Labconco, Missouri, USA), 강제순환건조기 (제이오텍, 한국)를 사용하였다.
- 본 연구에 사용된 약재는 皂角刺 (Gleditsia sinensis Lam.)의 가시를 건조한 것으로 화림제약(부산, 한국)을 통하여 구입, 정선하여 사용하였다.
- 본 연구에서 사용된 EV는 cholesterol로부터 유리되는 스테로이드로 성호르몬의 일종으로, PCO 관련 동물 실험에 실제적으로 사용되고 있다8). 일반적으로 PCOS 환자의 상당수에서 비만도가 증가하나2), EV에 의한 PCO 동물 모델에서는 월경이상과 전형적인 PCO는 유발되나 체중의 이상 증가 현상은 관찰되지 않으며, 오히려 EV 투여에 의하여 체중 증가가 억제되는 경향을 보인다13,14).
- 본 연구에서 사용한 GS는 活血祛瘀藥으로 性味가 辛溫 無毒하고 肝胃로 歸經한다. tannin, tracanthine 등을 함유하며 消腫排膿, 祛風殺蟲의 효능을 지니고 있어서, 癰疽腫毒, 瘰癧 등에 사용한다.
- 실험동물은 160～180 g의 S/D계 암컷 백서를 샘타코(인천, 한국)로부터 구입하여 사용하였다. 1주일 이상, 고형사료(삼양 배합사료 실험동물용, 한국)와 물을 충분히 공급하면서 실험실 환경에 충분히 적응시킨 후 실험에 사용하였다.
-
3) 실험군의 선정
정상군 (Normal group)은 EV를 녹이지 않은 Sesame oil 200 ㎕를 대퇴부에 근육 주사하였다. 대조군 (Control group)과 실험군 (GS group)은 EV를 Sesame oil에 20 ㎎/㎏의 분량으로 녹여 마리당 200 ㎕씩 대퇴부에 근육 주사하였다.
데이터처리
- 실험 성적은 평균±표준편차(mean±SD)로 나타내었으며, 결과의 차이를 검정할 때에는 Student's t-test로 검정하여 p-값이 0.05 미만일 때 유의한 차이가 있는 것으로 판정하였다.
- 실험 자료에 대한 통계적 분석은 통계 패키지인 Sigma plot(Sigma plot for Windows, ver. 9.0, U.S.A.)을 이용하였다. 실험 성적은 평균±표준편차(mean±SD)로 나타내었으며, 결과의 차이를 검정할 때에는 Student's t-test로 검정하여 p-값이 0.
이론/모형
- Effects of GS on histo-pathological changes of ovary in PCO rats. Histo-pathological changes of ovary were observed using haematoxylin and eosin stain methods. (A) Normal, (B) Control, (C) GS.
성능/효과
- 5주 간의 약물 투여 기간 동안 식이량 및 음수량 변화를 관찰한 결과 모든 군에서 식이량의 차이는 발견되지 않았으나, 음수량은 대조군에서 정상군에 비하여 유의하게 감소함이 관찰되었다. 약물군은 대조군과 유사한 수준의 음수량을 보였다(Table 2)
- EV 투여 첫 날 체중을 기준으로 하여 5주간의 체중 변화를 측정한 결과 정상군 (Normal)은 유의한 증가세를 보인 반면, 대조군 (Control)은 기준 체중과 유사한 수준의 체중을 유지하였다. GS군은 대조군과 특별한 차이를 보이지 않았다(Fig.
- Estradiol valerate에 의해 유발된 다낭성 난소 질환에 皂角刺 추출물 (GS)을 경구투여하면서 체중변화와 식이량, 음수량을 관찰하고, 실험 마지막 날 난소의 무게와 조직병리학적 소견을 관찰한 결과, 체중, 식이량, 음수량에는 특별한 영향을 미치지 않았고, 유의한 수준의 난소 무게 감소 억제 효과와 낭성 난포 유발 억제효과를 보였다. 이상의 결과에서 예전부터 産後缺乳 등의 婦人科 질환에 다용되어 왔던 皂角刺가 다낭성난소증후군 환자에게 유용할 것임을 알 수 있다.
- 2 g/㎖로 증류수에 희석하여 상기한 비율의 고형사료와 섞어 실험식이를 제작하였다. GS 추출물의 투여용량은 사람(60 ㎏)의 1일 건재 투여용량을 9 ~ 12 g으로 하였을 때, 흰쥐와 사람의 무게비 (1/300), 시료 추출 수율 (15.2%), 사람보다 10배 이상 빠른 흰쥐의 대사 속도를 감안하여 흰쥐 1마리당 1일 투여용량을 계산한 결과 30 ~ 60 ㎎/day로 계산되었다. 계산된 GS 추출물을 흰쥐의 1일 고형사료 섭취량 (15g)에 골고루 섞어서 실험식이를 제작하였으며, 고형사료 1 ㎏당 GS 추출물 3.
- 체중의 직접적인 감소 또는 체중 증가율 감소 원인으로는 대체적으로 외적요인인 식이량의 감소와 내적요인인 체내대사의 증가로 인한 소모율의 증가로 구분 할 수 있는데, 어떤 요인이 주요하게 작용했는지 살펴보기 위하여 식이량 및 음수량을 관찰하였다. 그 결과 대조군과 GS군에서 경미한 식이량 감소가 관찰되었으나, 통계적 유의성은 없었고, 음수량에서는 유의한 수준의 감소를 보였다(Table 2). 이는 EV와 같은 일부 스테로이드가 식욕부진을 일으켜 체중 증가를 억제시키기 때문15)에 발생한다는 선행 연구 결과를 감안하여 해석하면, 단순하게 내적 또는 외적 요인 하나 만에 기인한 것이 아니라, 음수량의 감소와 경미하게 감소한 식이량, 그리고 체내 대사율의 증가 등 복합적인 요인이 작용한 것으로 해석된다.
- 2). 난소의 무게를 체중에 대한 비율로 나타낸 결과 대조군의 난소/체중비는 정상군의 53%에 불과 했으나, GS투여에 의하여 정상군의 78% 정도로 회복 되었다(Fig. 2).
- . 본 연구 결과를 살펴보면 EV에 의하여 전형적인 PCO가 유발되었고, 난소의 크기와 무게 또한 유의한 수준으로 감소되었다(Fig. 2). 난소의 무게를 체중에 대한 비율로 나타낸 결과 대조군의 난소/체중비는 정상군의 53%에 불과 했으나, GS투여에 의하여 정상군의 78% 정도로 회복 되었다(Fig.
- 본 연구의 결과를 살펴보면 5주간의 EV 투여는 정상군에 비하여 유의한 수준으로 체중 증가 억제 경향을 보였다(Fig. 1). 결과를 자세히 살펴보면 특히 실험 2주차에 급격한 체중 감소가 일어났음을 알 수 있었으나, 이는 이전 연구 결과에서 고용량 스테로이드에 의한 체중 감소는 초기 1 ~ 2주에 일어난다는 사실15)과 일치한다.
- 실험 마지막날, 흰쥐를 희생시키고 난소를 적출하여 좌, 우 난소의 무게를 측정한 후, 체중에 대한 난소의 비율을 계산한 결과 대조군에서 정상군에 비하여 유의한 난소 무게의 감소가 관찰되었고, GS 투여군에서는 대조군과 비교하여 유의한 난소 무게의 증가가 관찰되었다(Fig. 2)
- 3C). 이상의 결과는 GS가 직접적으로 낭성 난포의 형성을 억제할 가능성이 있는 것으로 해석할 수 있다.
- Estradiol valerate에 의해 유발된 다낭성 난소 질환에 皂角刺 추출물 (GS)을 경구투여하면서 체중변화와 식이량, 음수량을 관찰하고, 실험 마지막 날 난소의 무게와 조직병리학적 소견을 관찰한 결과, 체중, 식이량, 음수량에는 특별한 영향을 미치지 않았고, 유의한 수준의 난소 무게 감소 억제 효과와 낭성 난포 유발 억제효과를 보였다. 이상의 결과에서 예전부터 産後缺乳 등의 婦人科 질환에 다용되어 왔던 皂角刺가 다낭성난소증후군 환자에게 유용할 것임을 알 수 있다.
후속연구
- 또한, PCO의 형성이 염증과 관련된 기전이 관여함이 알려져 있다16). 선행 연구에서 밝혀진 GS의 항당뇨 효과10)와 소염, 항염 효과7,11)등과 본 연구 결과를 종합하면 GS는 항염증 작용을 통하여 직접적으로 PCO의 형성을 억제하여 주었고, 부가적으로 항당뇨 효과를 지니고 있기 때문에 당뇨병을 동반한 PCO환자들의 치료에 도움을 줄 수 있을 것으로 생각되며, 추후, 관련 기전과 여러 가지 인자들에 대한 후속 연구가 진행되어야 할 것으로 생각된다.
※ AI-Helper는 부적절한 답변을 할 수 있습니다.