선택한 단어 수는 입니다.
최소 단어 이상 선택하여야 합니다.
최소 단어 이상 선택하여야 합니다.
선택한 단어 수는 30입니다.
최대 10 단어까지만 선택 가능합니다.
최대 10 단어까지만 선택 가능합니다.
문제 정의
- 이번 연구에서 우리는 돼지 유전자 유래 H-chain ferritin 발현 효모에 14.3 mM 철분을 반응시킨 FER Lim 등, 2012)를 철분 결핍성 포유자돈과 이유 자돈에 투여하여 체중 증가 정도와 WBC, RBC, Hb 그리고 Ht 수치를 측정하여 FER의 투여가 자돈의 성장에 실질적인 효과가 있는지 검토하였다. 포유 자돈에서 FER의 경구 투여는 철분 주사와 비교하여 유사한 체중 증가 효과를 보였으며 RBC, Hb 그리고 Ht 수치에서도 유사하게 나타났다.
- 이번 실험은 FER의 빈혈 개선 기능에 대한 연구로 포유 자돈과 이유 자돈을 이용하여 그 효과를 알아보았다. FER의 급여는 자돈의 철분의 생체 이용률을 높여 성장을 촉진함으로 철분 공급원으로 임상적 가치가 있다고 할 수 있다.
제안 방법
- 최근 우리는 빈혈을 유도한 mouse에 돼지 유전자 유래 재조합 ferritin (Sus scrofa Heavy-ferritin subunit protein)을 생성하는 효모를 제작하여 철과 반응시킨 FER [iron-fortified yeast (Saccharomyces cerevisiae) producing Sus scrofa ferritin heavy-chain]의 경구 투여는 mouse의 철분결핍성 빈혈을 억제한다고 보고하였다(Lim 등, 2012). 이번 연구에서는 FER을 혼합한 포유 자돈과 이유 자돈용 경구 첨가물과 사료를 제조하였다. 그리고 각각의 목적 동물에 급여하여 체중 증가율 및 혈액 내 WBC, RBC, hemoglobin (Hb) 그리고 hematocrit (Ht) 수치를 검토하였다.
- 이번 연구에서는 FER을 혼합한 포유 자돈과 이유 자돈용 경구 첨가물과 사료를 제조하였다. 그리고 각각의 목적 동물에 급여하여 체중 증가율 및 혈액 내 WBC, RBC, hemoglobin (Hb) 그리고 hematocrit (Ht) 수치를 검토하였다.
- 생후 3일령 포유 자돈 20두를 구입하여(3원 교잡종 [Yorkshire×Landrace]×Duroc, 정진농장, 횡성, 한국)대조군으로 10두, 실험군으로 10두를 사용하였다. 대조군 중 5마리에는 생리식염수를 주사하고 나머지 5마리에는 철분 주사제 글렙토실(씨티씨바이오, 한국)를 각각 3일과 10일에 하루에 한 번 총 2회 근육 주사하였다(100 mg/kg). 실험군 10두에도 대조군과 같은 방법으로 5마리에는 생리식염수를 주사하고 나머지 5마리에는 철분 주사제를 주사하였다(100 mg/kg).
- 대조군 중 5마리에는 생리식염수를 주사하고 나머지 5마리에는 철분 주사제 글렙토실(씨티씨바이오, 한국)를 각각 3일과 10일에 하루에 한 번 총 2회 근육 주사하였다(100 mg/kg). 실험군 10두에도 대조군과 같은 방법으로 5마리에는 생리식염수를 주사하고 나머지 5마리에는 철분 주사제를 주사하였다(100 mg/kg).
- 실험군의 포유 자돈에는 돼지 유전자 유래 ferritin을 생산하는 효모와 철분을 반응시켜 제작한 첨가물을 채혈 전 7일간 하루에 한 번 10 ml씩 경구 투여하였다. 포유 자돈은 각각의 실험돈방에 넣어 사육하였으며 사양 실험 기간은 16일간 실시하였다.
- 실험군의 포유 자돈에는 돼지 유전자 유래 ferritin을 생산하는 효모와 철분을 반응시켜 제작한 첨가물을 채혈 전 7일간 하루에 한 번 10 ml씩 경구 투여하였다. 포유 자돈은 각각의 실험돈방에 넣어 사육하였으며 사양 실험 기간은 16일간 실시하였다. 16일째 체중을 측정하였고, 채혈을 하였다.
- 포유 자돈은 각각의 실험돈방에 넣어 사육하였으며 사양 실험 기간은 16일간 실시하였다. 16일째 체중을 측정하였고, 채혈을 하였다. 실험 기간에 시판되고 있는 대용유(큐업프리1, 대한사료, 한국)를 제조사의 권장 사항에 따라 급여하였고, 음수는 자유롭게 섭취하도록 하였으며, 자돈사 주위는 정기적으로 소독하였다.
- 16일째 체중을 측정하였고, 채혈을 하였다. 실험 기간에 시판되고 있는 대용유(큐업프리1, 대한사료, 한국)를 제조사의 권장 사항에 따라 급여하였고, 음수는 자유롭게 섭취하도록 하였으며, 자돈사 주위는 정기적으로 소독하였다. 포유 자돈용 경구 투여용 첨가물은 FER 20 g, 프락토올리고당 240 g 그리고 비타민 B6 0.
- 실험 기간에 시판되고 있는 대용유(큐업프리1, 대한사료, 한국)를 제조사의 권장 사항에 따라 급여하였고, 음수는 자유롭게 섭취하도록 하였으며, 자돈사 주위는 정기적으로 소독하였다. 포유 자돈용 경구 투여용 첨가물은 FER 20 g, 프락토올리고당 240 g 그리고 비타민 B6 0.4 g을 정제수 150 ml에 혼합하여 제작하였다. 대조군의 경구 투여용 첨가물은 FER을 혼합하지 않은 것을 사용하였다.
- 실험동물은 생후 39일령 된 자돈을 이용하였으며, 사양 시험 기간은 40일간 실시하였다. 이유 자돈 실험에서는 철분 주사를 한 군을 대조군(5마리)으로 하였고 실험군(5마리)에는 FER 20 kg를 일반 사료에 톤당 0.2%로 혼합하여 급여하였다. 대조군의 사료는 일반적으로 시판되는 자돈 사료(큐업프리2,3, 대한사료, 한국)를 급여하였으며, 사료와 물은 자유롭게 먹도록 하였다.
- 돼지(Sus scrofa)로부터 H-type ferritin 유전자를 추출하기 위해 돼지 간에서 정제된 total mRNA에 ferritin-FEcoR1 (aattgaattcatgacgacctcgtgctcc)과 ferritin-R-Xho1 (aattctcgagttagctctcactgctcccca) primer (Bioneer, Korea)를 이용하여 RT-PCR (Takara, Japan)하였고 생성된 ferritin cDNA (Sus scrofa ferritin H-chain)를 yeast shuttle vector인 p426 GAL 1 vector에 삽입하였다.
- 돼지(Sus scrofa)로부터 H-type ferritin 유전자를 추출하기 위해 돼지 간에서 정제된 total mRNA에 ferritin-FEcoR1 (aattgaattcatgacgacctcgtgctcc)과 ferritin-R-Xho1 (aattctcgagttagctctcactgctcccca) primer (Bioneer, Korea)를 이용하여 RT-PCR (Takara, Japan)하였고 생성된 ferritin cDNA (Sus scrofa ferritin H-chain)를 yeast shuttle vector인 p426 GAL 1 vector에 삽입하였다. 재조합된 p426- GAL1-Fe vector는 증폭을 위해서 TOP10 competent cell에 heat shock 방법을 통해 형질전환하였고 8시간 배양 후 picking하여 miniprep하고 전기영동으로 재조합 vector를 gel extraction하여 수거하였고 sequencing을 통해 ferritin cDNA 유전자 서열을 확인하였다. Sus scrofa ferritin H-chain유전자(sfH)의 이형접합형 발현을 위해서는 숙주세포로 효모(Saccaromyces cerevisiae) BY4742를 사용하였다.
- 철분과 반응시킨 돼지 유전자 유래 ferritin을 형질전환한 재조합 효모를 포유 자돈에 경구 투여하여 체중 증가에 미치는 영향을 조사하였다(Table 1). 대조군으로 생후 3일과 10일에 철분 주사를 미실시한 군과 실시한 군으로 하였다.
- 철분과 반응시킨 돼지 유전자 유래 ferritin을 형질전환한 재조합 효모를 포유 자돈에 경구 투여하여 체중 증가에 미치는 영향을 조사하였다(Table 1). 대조군으로 생후 3일과 10일에 철분 주사를 미실시한 군과 실시한 군으로 하였다. 실험군으로 FER을 경구 투여하였고 철분 주사를 미실시한 군과 실시한 군으로 나누어 실험을 하였다.
- 대조군으로 생후 3일과 10일에 철분 주사를 미실시한 군과 실시한 군으로 하였다. 실험군으로 FER을 경구 투여하였고 철분 주사를 미실시한 군과 실시한 군으로 나누어 실험을 하였다. 대조군에서 철분을 주사할 경우 미실시한 군에 비해 통계적으로 유의성이 있는 체중 증가 나타났다(P＜0.
- 돼지 유전자 유래 ferritin을 형질 전환한 재조합 효모를 철분과 반응시켜 이유 자돈을 위한 경구 투여용 사료(FER)를 제작하였다. FER을 이유자돈에 급여한 후 체중 변화 및 사료 섭취 효율에 대하여 조사하였다(Table 3).
- 돼지 유전자 유래 ferritin을 형질 전환한 재조합 효모를 철분과 반응시켜 이유 자돈을 위한 경구 투여용 사료(FER)를 제작하였다. FER을 이유자돈에 급여한 후 체중 변화 및 사료 섭취 효율에 대하여 조사하였다(Table 3). 이유 자돈 실험에서는 철분 주사를 하고 FER를 첨가하지 않은 정상 사료를 급여한 군을 대조군으로 하였고 FER를 섞어 만든 사료를 급여한 군을 실험군으로 하였다.
- 철분을 투여한 이유 자돈과 FER 사료를 급여시킨 이유 자돈간의 혈액성분의 변화를 조사하였다(Table 4). 철분을 주사한 대조군과 비교하여 FER사료를 급여하더라도 WBC, RBC, Hb, Ht 수치의 특별한 변화는 나타나지 않았다.
대상 데이터
- 생후 3일령 포유 자돈 20두를 구입하여(3원 교잡종 [Yorkshire×Landrace]×Duroc, 정진농장, 횡성, 한국)대조군으로 10두, 실험군으로 10두를 사용하였다.
- 이유 자돈 실험은 경기도 양주에 있는 양돈 농장에 의뢰하여 실시하였다. 실험동물은 생후 39일령 된 자돈을 이용하였으며, 사양 시험 기간은 40일간 실시하였다.
- 이유 자돈 실험은 경기도 양주에 있는 양돈 농장에 의뢰하여 실시하였다. 실험동물은 생후 39일령 된 자돈을 이용하였으며, 사양 시험 기간은 40일간 실시하였다. 이유 자돈 실험에서는 철분 주사를 한 군을 대조군(5마리)으로 하였고 실험군(5마리)에는 FER 20 kg를 일반 사료에 톤당 0.
- 2%로 혼합하여 급여하였다. 대조군의 사료는 일반적으로 시판되는 자돈 사료(큐업프리2,3, 대한사료, 한국)를 급여하였으며, 사료와 물은 자유롭게 먹도록 하였다.
- 재조합된 p426- GAL1-Fe vector는 증폭을 위해서 TOP10 competent cell에 heat shock 방법을 통해 형질전환하였고 8시간 배양 후 picking하여 miniprep하고 전기영동으로 재조합 vector를 gel extraction하여 수거하였고 sequencing을 통해 ferritin cDNA 유전자 서열을 확인하였다. Sus scrofa ferritin H-chain유전자(sfH)의 이형접합형 발현을 위해서는 숙주세포로 효모(Saccaromyces cerevisiae) BY4742를 사용하였다. P426-GAL1-Fe vector는 lithium acetate를 이용하여 S.
- 돼지의 채혈은 경정맥으로부터 실시하였다. 채혈한 혈액은 EDTA 처리된 시험관에 모아 hemoglobin 수치는 hemoglobin reagent (Young-dong, Korea)를 이용하여 흡광도 분석법으로 측정하고, hematocrit (PCV), RBC, WBC는 FORCYTE (Oxford science Inc.
데이터처리
- 모든 데이터에 대한 각 군간 유의성을 확인하기 위해 one-way ANOVA를 실시 후 유의적 차이가 인정되는 경우 Fisher's PLSD test를 통하여 분석하였다.
이론/모형
- 채혈한 혈액은 EDTA 처리된 시험관에 모아 hemoglobin 수치는 hemoglobin reagent (Young-dong, Korea)를 이용하여 흡광도 분석법으로 측정하고, hematocrit (PCV), RBC, WBC는 FORCYTE (Oxford science Inc., USA)을 사용하여 측정하였다.
성능/효과
- 실험군으로 FER을 경구 투여하였고 철분 주사를 미실시한 군과 실시한 군으로 나누어 실험을 하였다. 대조군에서 철분을 주사할 경우 미실시한 군에 비해 통계적으로 유의성이 있는 체중 증가 나타났다(P＜0.05). 실험군에서 철분 주사 미실시군에서 대조군의 철분 주사를 미실시한 군에 비해 유의성 있는 체중증가가 관찰되었다(P＜0.
- 05). 실험군에서 철분 주사 미실시군에서 대조군의 철분 주사를 미실시한 군에 비해 유의성 있는 체중증가가 관찰되었다(P＜0.05). 그러나 대조군의 철분 주사 실시군과 FER의 철분 주사 미실시군 사이에서 유의성 있는 체중증가 변화는 관찰되지 않았다.
- WBC의 경우 대조군과 실험군을 포함한 모든 군에서 유의성 있는 변화가 나타나지 않았다. RBC, Hb, Ht 수치는 대조군에서 철분주사 미실시군에 비교하여 모든 군에서 유의성 있는 증가가 나타났다(P＜0.05). 그러나 대조군에서 철분주사 실시군과 실험군에서 FER만을 경구 투여한 군 사이의 유의성 있는 차이는 나타나지 않았다.
- 이유 자돈 실험에서는 철분 주사를 하고 FER를 첨가하지 않은 정상 사료를 급여한 군을 대조군으로 하였고 FER를 섞어 만든 사료를 급여한 군을 실험군으로 하였다. FER 사료를 급여시킨 실험군에서 유의성 있는 체중 증가가 나타났다(P＜0.05). 또한, 대조군보다 실험군에서 사료를 적게 섭취하는 것으로 나타났다(P＜0.
- 05). 또한, 대조군보다 실험군에서 사료를 적게 섭취하는 것으로 나타났다(P＜0.05). 그러나 두 군 사이의 사료 효율성을 조사한 결과, 사료 효율이 높아진 것으로 보이나(1.
- 3 mM 철분을 반응시킨 FER Lim 등, 2012)를 철분 결핍성 포유자돈과 이유 자돈에 투여하여 체중 증가 정도와 WBC, RBC, Hb 그리고 Ht 수치를 측정하여 FER의 투여가 자돈의 성장에 실질적인 효과가 있는지 검토하였다. 포유 자돈에서 FER의 경구 투여는 철분 주사와 비교하여 유사한 체중 증가 효과를 보였으며 RBC, Hb 그리고 Ht 수치에서도 유사하게 나타났다. 이유 자돈을 이용한 실험에서 FER을 급여한 군과 철분을 주사한 군에서 혈액의 RBC, Hb 그리고 Ht 수치가 유사하였다.
- 이것은 철분결핍 때 철분이 있어야 하는 세포가 효모와 함께 공급된 철분의 생체 이용률을 증가시켰을 뿐만 아니라 효모가 생산한 ferritin의 섭취로 인한 실험동물 조직 내 ferritin의 생성 증가가 철분 공급 확대해 가져온 결과라고 생각되었다(Lim 등, 2012). 이번 실험에서 포유자돈의 경우 실험군에서 FER만을 경구투여한 군과 대조군에서 철분만을 주사한 군사이의 결과가 상당히 유사하게 나타났다. 또한, 이유 자돈에서 체중의 증가량은 철분을 주사한 대조군보다 FER를 투여한 군에서 컸다.
- 이번 실험에서 포유자돈의 경우 실험군에서 FER만을 경구투여한 군과 대조군에서 철분만을 주사한 군사이의 결과가 상당히 유사하게 나타났다. 또한, 이유 자돈에서 체중의 증가량은 철분을 주사한 대조군보다 FER를 투여한 군에서 컸다. 통계적으로 유의성 있는 결과는 아니지만, 사료 효율에서도 FER를 투여한 군에서 효과적인 것으로 나타났다.
- 또한, 이유 자돈에서 체중의 증가량은 철분을 주사한 대조군보다 FER를 투여한 군에서 컸다. 통계적으로 유의성 있는 결과는 아니지만, 사료 효율에서도 FER를 투여한 군에서 효과적인 것으로 나타났다. 이번 실험을 통해서는 분명치 않으나 이번 실험에서 사용한 식이성 효모 Sacccharomyces cerevisiae가 생산한 돼지 유전자 유래 ferritin이 철분의 조직 내 흡수를 증가시켜 철분을 주사하지 않았음에도 포유 자돈과 이유 자돈의 체중을 증가시켰으리라 생각된다.
- 이번 실험의 조건에서는 포유 자돈에게 철분을 근육 주사한 경우에 괴사 등의 소견은 나타나지 않았고 혈액 내 WBC의 수치도 정상이었다. 또한, 포유 자돈의 혈액 내 RBC, Hb 그리고 Ht 수치도 철분을 투여하지 않은 대조군과 비교하여 통계적으로 유의성 있는 결과가 나타났기에 주사를 통한 철분의 이용도 효율적인 것으로 보인다. 이유 자돈의 실험에서는 철분을 주사하지 않은 대조군이 없어 분명히 알 수 없으나 FER을 급여시킨 군에서 RBC, Hb 그리고 Ht 수치가 철분을 주사한 대조군의 결과와 차이가 없는 것으로 보아 두 군에서 모두 철분을 효율적으로 이용한 것으로 생각한다.
- 이번 실험의 결과로는 포유 자돈과 이유 자돈의 조직 내 철분 농도와 ferritin 생성 정도는 알 수 없지만, 혈액 성분과 체중의 변화를 통해 철분 회복에서 FER의 급여는 자돈에서 철분 결핍성 빈혈을 예방하고 포유 자돈과 이유 자돈의 체중 증가에 효과적인 방법으로 생각된다.
후속연구
- 통계적으로 유의성 있는 결과는 아니지만, 사료 효율에서도 FER를 투여한 군에서 효과적인 것으로 나타났다. 이번 실험을 통해서는 분명치 않으나 이번 실험에서 사용한 식이성 효모 Sacccharomyces cerevisiae가 생산한 돼지 유전자 유래 ferritin이 철분의 조직 내 흡수를 증가시켜 철분을 주사하지 않았음에도 포유 자돈과 이유 자돈의 체중을 증가시켰으리라 생각된다. 이유 자돈을 이용한 실험에서 철분을 주사한 대조군보다 FER를 투여한 실험군에서 체중 증가율이 높은 것은 지속적인 FER의 급여는 효모의 ferritin이 철분의 이용률을 높였을 뿐만 아니라 사료에 포함된 효모가 에너지원으로 이용되었을 가능성이 있다고 생각된다.
※ AI-Helper는 부적절한 답변을 할 수 있습니다.