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문제 정의
- 따라서 이번 조사는 대전지역의 길고양이 중성화 시술 사업(Trap-neuter-release program, TNR)과 연계하여 대전지역 길고양이에 대한 톡소포자충의 감염 실태를 파악하여 인수공통전염병과 동물질병의 예방대책에 대한 기초자료를 제공하고자 한다.
- 또한, 최근에는 경제적인 여건 등으로 기르는 고양이를 유기함에 따라 집고양이가 길고양이화 되는 개체수가 급격하게 증가되고 있다. 따라서 인수공통전염기생충인 T. gondii에 대한 대전지역의 길고양이의 감염 실태를 조사하였다. 이번 조사의 대상은 217마리이다.
제안 방법
- 대전지역 길고양이 TNR 수행을 위해 포획된 217마리의 길고양이에 대한 T. gondii 감염증을 ELISA,LAT, IFA 그리고 PCR로 조사하여 다음과 같은 결론을 얻었다. 대전지역에서 길고양이가 가장 많이 포획된 장소는 아파트 단지로 23.
- 양성과 음성 대조혈청 그리고 Anti-feline IgG FITC conjugate는 VMRD (USA)사 제품을 이용하였다. 반응은 가검혈청을 1：100으로 희석하여 37℃ 배양기에서 항원과 30분간 반응시킨 후 FITC conjugate를 가하여 30분간 반응시킨 다음 형광현미경으로 관찰하였다.
- Toxo-MT kit (EIKEN Chemical, Japan)를 사용하여 제조사의 설명에 따라 실시하였다. 반응의 판독은 응집상이 가장 강하게 반응하는 순서부터 3으로 하여 2, 1, 0.5 및 0의 순으로 하였으며 1：32 이상에서 응집 시 양성으로 판정하였다.
- 이번 연구에서 T. gondii의 감염률에 대해 ELISA, LAT 그리고 IFA의 혈청학적 방법으로 조사한 것은 각 검사법의 민감도 차이를 알기 위해서였고 분자생물학적 방법으로는 항원 검출을 위해 PCR을 수행하였다. 그 결과 ELISA 방법이 15.
- Target gene은 Stiles 등(1996)의 primer와 서와 주(1999)가 제시한 온도조건으로 PCR을 수행하였으며, AccuPower PCR premix kit (Bioneer, Korea)을 사용하였다. 전기영동은 Agilent DNA 1000 chip에 증폭 산물과 시약들을 넣은 후 Agilent 2100 bioanalyzer (Agilent Technologies, Germany)로 501 bp의 증폭산물을 확인하였다.
- 혈액 내 genomic DNA는 EDTA 처리를 한 전혈로부터 100 μl를 채취하여 DNeasy Blood & Tissue Kit (Qiagen, Germany)를 사용하여 추출하였다.
대상 데이터
- 2009년 4월 13일부터 2010년 12월 2일까지 20개월동안 TNR 사업을 수행하기 위해 대전지역 지정 동물병원에 포획 내원한 길고양이 217마리를 대상으로 하였다. 행정구역별 길고양이의 조사대상은 대덕구가 56.
- T. gondii의 빠른 분열소체(tachyzoite)가 코팅된 슬라이드(농림수산검역검사본부 제조)를 이용하였다. 양성과 음성 대조혈청 그리고 Anti-feline IgG FITC conjugate는 VMRD (USA)사 제품을 이용하였다.
- gondii의 빠른 분열소체(tachyzoite)가 코팅된 슬라이드(농림수산검역검사본부 제조)를 이용하였다. 양성과 음성 대조혈청 그리고 Anti-feline IgG FITC conjugate는 VMRD (USA)사 제품을 이용하였다. 반응은 가검혈청을 1：100으로 희석하여 37℃ 배양기에서 항원과 30분간 반응시킨 후 FITC conjugate를 가하여 30분간 반응시킨 다음 형광현미경으로 관찰하였다.
- 이번 실험 대상인 대전지역 길고양이 217두의 분포는 수컷 54.4%, 암컷 45.6%이었다. 이들의 체중 분포는 3 kg 이상부터 6 kg 미만이 63.
- gondii에 대한 대전지역의 길고양이의 감염 실태를 조사하였다. 이번 조사의 대상은 217마리이다. 이는 2009∼2010년도 대전지역 길고양이의 TNR 실적인 765마리의 28.
데이터처리
- 조사 내용의 분석과 통계적 검증은 SPSS (statistical package for the social science)/PC＋ 통계 프로그램을 이용하였으며 변수 간 검증은 χ2-test를 실시하였다.
이론/모형
- T. gondii에 대한 항체검사는 ID Screen Toxoplasmosis Indirect Kit (IDVET, France)를 사용하여 제조사의 설명에 따라 실시하였다. 각 시료의 흡광도는 450 nm에서 측정하였다.
- Target gene은 Stiles 등(1996)의 primer와 서와 주(1999)가 제시한 온도조건으로 PCR을 수행하였으며, AccuPower PCR premix kit (Bioneer, Korea)을 사용하였다. 전기영동은 Agilent DNA 1000 chip에 증폭 산물과 시약들을 넣은 후 Agilent 2100 bioanalyzer (Agilent Technologies, Germany)로 501 bp의 증폭산물을 확인하였다.
- Toxo-MT kit (EIKEN Chemical, Japan)를 사용하여 제조사의 설명에 따라 실시하였다. 반응의 판독은 응집상이 가장 강하게 반응하는 순서부터 3으로 하여 2, 1, 0.
성능/효과
- 05)(Table 6). 3가지 항체 검사법에서 ELISA방법에서 검출되고 LAT에서도 검출된 경우는 25마리였으며, 그 중 IFA에서도 검출된 경우는 23마리이었다. 따라서 모두 양성이 나온 경우는 23마리(10.
- 행정구역별 감염률은 검사방법에 따라 구역별로 차이가 있었고, 동일한 행정구역이라도 차이가 있었다. ELISA 검사 결과에서 유성구가 31.8%로 가장 높게 나타났으며, 다음은 서구 20.0%, 대덕구 12.2%, 중구 10.0% 그리고 동구 8.3% 순위로 나타났다. LAT법에서 유성구가 22.
- 4%로 가장 높게 나타났다. ELISA 방법에서 행정구역별로는 유성구가 31.8%로 가장 높은 양성률을 보였고 성별로는 암컷이 17.2%로 수컷보다 높게 나타났으며 포획장소 별로는 국립중앙과학관이 37.5%로 가장 높았으며, 아파트 단지가 22.0%로 나타났다.
- 그러나 검사방법에 따라 동일한 성이라도 다소 차이가 있었으며, 통계적으로 유의하지 않았다. ELISA법은 암컷이 17.2%로 높게 나타났으며, 수컷은 14.4%로 나타났다. LAT법은 암컷이 15.
- 2%로 나타났다. IFA법은 암컷이 15.2%로 높게 나타났으며, 수컷은 14.4%로 나타났다. PCR법은 암컷에서만 2.
- 4%로 나타났다. LAT법은 암컷이 15.2%로 높게 나타났으며, 수컷은 10.2%로 나타났다. IFA법은 암컷이 15.
- 0%였다. T. gondii의 검출률은 4가지 검사방법 중 ELISA가 15.4%로 가장 높게 나타났다. ELISA 방법에서 행정구역별로는 유성구가 31.
- 검사방법에 따른 검출률은 ELISA＞IFA>LAT＞ PCR 순으로 나타났다(Table 3). 검출률이 높은 ELISA 방법에서 검출된 T. gondii에 대해 LAT 방법에서는 73.5%, IFA 방법 88.2% 그리고 PCR 방법 2.9%가 검출되었으며, 공히 통계적으로 매우 유의한 차이를 보였다(P＜0.001)(Table 6). 또한, 검출률이 낮은 PCR 방법에서 검출된 T.
- 그 결과 ELISA 방법이 15.7%로 가장 높게 나타났고 다음은 LAT, IFA 그리고 PCR 순위였으며, 통계적으로 매우 유의한 차이를 보였다(P＜0.05∼0.001).
- 길고양이의 성별 개체 수에는 큰 차이가 없으나 수컷이 많은 것으로 나타났다. 길고양이의 체중별 개체 수에서 3 kg 이상∼6 kg 미만이 63.
- 1%로 순위로 나타났다. 또한, LAT법과 IFA법에서도 ELISA방법에 따른 감염률 순위와 같았으나 감염률 수치는 차이가 있었다. PCR법에서는 아파트 지역에서 포획된 고양이 한 개체에서만 검색되었다(Table 5).
- 또한, 검출률이 낮은 PCR 방법에서 검출된 T. gondii에 대해 ELISA 방법, LAT 방법 그리고 IFA 방법은 100.0% 검출되는 것으로 나타났으며, 공히 통계적으로 유의하였다(P＜0.01∼0.05)(Table 6).
- 5%로 이번 실험과 반대되는 결과를 보였다. 포획장소별 T. gondii 감염률은 ELISA 방법에서 사람의 주거지인 아파트나 단독주택이 22.0%, 16.1%로 비교적 높게 나타났는데, 이는 고양이가 먹이를 구하기 용이하고 야생동물의 자기구역의 표시와 활동에 따른 경쟁이 약하여 서식 밀도가 높아져 감염률도 높을 것으로 생각한다. 따라서 길고양이의 개체수를 한정하는 방법으로 아파트 단지의 고양이의 포획, 중성화 수술의 필요성이 있다고 생각한다.
후속연구
- 따라서 시민의 건강 보건 위생을 위하여 인수공통전염기생충병의 중요성에 대한 홍보과 보건 교육이 필요하며 길고양이에 대한 지속적인 조사가 이루어져 지금까지 길고양이 등 유기 동물의 소홀한 부분에 더욱 관심을 가져야 할 것으로 본다. 더불어 집고양이를 키우는 사람에게서 T. gondii가 발견될 가능성이 크므로 향후 집고양이의 T. gondii에 대한 감염률 조사도 이루어질 필요가 있다고 판단된다.
- gondii 감염이 발생하고 있음을 알 수 있다. 따라서 시민의 건강 보건 위생을 위하여 인수공통전염기생충병의 중요성에 대한 홍보과 보건 교육이 필요하며 길고양이에 대한 지속적인 조사가 이루어져 지금까지 길고양이 등 유기 동물의 소홀한 부분에 더욱 관심을 가져야 할 것으로 본다. 더불어 집고양이를 키우는 사람에게서 T.
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