CagL 재조합 단백질 접종후에 Mongolian gerbil에서 나타나는 Helicobacter pylori 감염에 대한 반응 Effect of Recombinant CagL Immunization on the Gastric Diseases Induced by Helicobacter pylori in Mongolian gerbils원문보기
Helicobacter pylori는 만성 위염, 소화성 궤양, 위암의 중요한 역학적 인자중 하나이다. H. pylori의 독성인자중 CagL은 숙주 세포와 H. pylori의 제 4형 분비기관(Type 4 secretion system)을 연결하는 adhesin으로 작용하는 섬모 단백질로 H. pylori가 발병하는데 중요한 역할을 하는 것으로 알려져 있다. 이번 연구는 저빌에 H. pylori를 감염시킨 동물 모델을 이용하여 CagL 재조합 단백질을 면역화시켰을 때 나타나는 효과를 평가하였다. 재조합 CagL은 클론되었고, 과발현시켜 정제하여 준비하였다 저빌은 H. pylori 감염 대조군과 H. pylori 감염 CagL 재조합 단백질 접종군으로 분류하였고, 접종시 알루미늄 애쥬번트를 사용하였다. 일주일 간격으로 4회 근육내 접종하였고, 마지막 접종 일주일 후, 모든 저빌에 H. pylori 7.13 균주를 $1{\times}10^9\;bacteria/500{\mu}l$ 농도로 위내 투여하였다. H. pylori 감염 6주째 모든 저빌을 희생하여 혈청 IgG 반응평가를 위한 ELISA를 실시하였고, 위에서는 집락화된 H. pylori의 수평가, 병리조직학적 평가 및 사이토카인 유전자발현을 조사하였다. CagL 재조합 단백질접종 일주일 후부터 H. pylori 감염 CagL 재조합 단백질 접종군의 혈청내 IgG 항체형성이 유의적으로 증가하였다. 위에서의 집락화된 세균수는 두군의 차이가 없었다. 저빌 체중에 대한 위무게 비율는 H. pylori 감염 CagL 재조합 단백질 접종군이 유의적으로 감소하였으나 병리조직학적 평가에서는 유의적인 차이는 확인하지 못하였다. 위에서의 IL-$1{\beta}$와 KC (IL-8 homologues)의 유전자발현 정도도 두 군사이에 유의적인 차이는 없었다. 이번 결과는 CagL 재조합 단백질의 접종은 IgG 항체형성은 효과적으로 자극하였지만 면역화된 숙주에서 세균 집락화의 감소 및 병변형성의 방어까지는 유도하지 못한 것으로 나타났으며, 앞으로 H. pylori 감염에 대해 유효한 면역 반응 및 질병 방어 효과를 나타내기 위해서 CagL을 포함한 다른 종류의 재조합 항원 사용 및 보조적으로 전신 면역 및 점막 면역을 효과적으로 유도하기 위해 안정성있는 애쥬번트의 사용을 고려해야 할 것으로 사료된다.
Helicobacter pylori는 만성 위염, 소화성 궤양, 위암의 중요한 역학적 인자중 하나이다. H. pylori의 독성인자중 CagL은 숙주 세포와 H. pylori의 제 4형 분비기관(Type 4 secretion system)을 연결하는 adhesin으로 작용하는 섬모 단백질로 H. pylori가 발병하는데 중요한 역할을 하는 것으로 알려져 있다. 이번 연구는 저빌에 H. pylori를 감염시킨 동물 모델을 이용하여 CagL 재조합 단백질을 면역화시켰을 때 나타나는 효과를 평가하였다. 재조합 CagL은 클론되었고, 과발현시켜 정제하여 준비하였다 저빌은 H. pylori 감염 대조군과 H. pylori 감염 CagL 재조합 단백질 접종군으로 분류하였고, 접종시 알루미늄 애쥬번트를 사용하였다. 일주일 간격으로 4회 근육내 접종하였고, 마지막 접종 일주일 후, 모든 저빌에 H. pylori 7.13 균주를 $1{\times}10^9\;bacteria/500{\mu}l$ 농도로 위내 투여하였다. H. pylori 감염 6주째 모든 저빌을 희생하여 혈청 IgG 반응평가를 위한 ELISA를 실시하였고, 위에서는 집락화된 H. pylori의 수평가, 병리조직학적 평가 및 사이토카인 유전자발현을 조사하였다. CagL 재조합 단백질접종 일주일 후부터 H. pylori 감염 CagL 재조합 단백질 접종군의 혈청내 IgG 항체형성이 유의적으로 증가하였다. 위에서의 집락화된 세균수는 두군의 차이가 없었다. 저빌 체중에 대한 위무게 비율는 H. pylori 감염 CagL 재조합 단백질 접종군이 유의적으로 감소하였으나 병리조직학적 평가에서는 유의적인 차이는 확인하지 못하였다. 위에서의 IL-$1{\beta}$와 KC (IL-8 homologues)의 유전자발현 정도도 두 군사이에 유의적인 차이는 없었다. 이번 결과는 CagL 재조합 단백질의 접종은 IgG 항체형성은 효과적으로 자극하였지만 면역화된 숙주에서 세균 집락화의 감소 및 병변형성의 방어까지는 유도하지 못한 것으로 나타났으며, 앞으로 H. pylori 감염에 대해 유효한 면역 반응 및 질병 방어 효과를 나타내기 위해서 CagL을 포함한 다른 종류의 재조합 항원 사용 및 보조적으로 전신 면역 및 점막 면역을 효과적으로 유도하기 위해 안정성있는 애쥬번트의 사용을 고려해야 할 것으로 사료된다.
Helicobacter pylori is an important factor of chronic gastritis, digestive ulcer, and stomach cancer. CagL, a virulence factor of H. pylori, is well-known as a pilus protein which acts as adhesion to host cell and a component of Type 4 secretion system. In this study, we evaluated the protective res...
Helicobacter pylori is an important factor of chronic gastritis, digestive ulcer, and stomach cancer. CagL, a virulence factor of H. pylori, is well-known as a pilus protein which acts as adhesion to host cell and a component of Type 4 secretion system. In this study, we evaluated the protective response of recombinant CagL protein (rCagL) using Mongolian gerbil animal model for H. pylori infection. The cagL gene was cloned from 26695 H. pylori followed by over-expression and purification of the protein in E. coli. Mongolian gerbils were immunized with rCagL protein mixed with aluminum adjuvant via intramuscular injections once a week during 4 weeks. At a week after the last immunization, the Mongolian gerbils were administrated with H. pylori 7.13 strain into the stomach and sacrificed to measure antibody titer on rCagL by ELISA and bacterial colonization in the stomach, and to examine the histopathological changes and cytokine expression at 6 week after challenge. Antibody titers on recombinant protein were significantly increased from a week after the first immunization. There was no significant change of the number of bacterial colony between control group and immunized group. The relative stomach weight was significantly decreased in immunized group, but the significant change of histopathological assessment was not observed in the stomach. Cytokine expression such as IL-$1{\beta}$ and KC also was not significantly different between control and immunized groups. These results indicate that rCagL could effectively induce the formation of the specific IgG antibodies. However, bacterial colonization and histopathological lesions could not be inhibited by the immunization in the stomach, indicating not enough protection against H. pylori infection. We consider that along with CagL other adequate antigens could be needed stimulating immune response and inducing protective effects against gastric disease, and also a better adjuvant could be considered.
Helicobacter pylori is an important factor of chronic gastritis, digestive ulcer, and stomach cancer. CagL, a virulence factor of H. pylori, is well-known as a pilus protein which acts as adhesion to host cell and a component of Type 4 secretion system. In this study, we evaluated the protective response of recombinant CagL protein (rCagL) using Mongolian gerbil animal model for H. pylori infection. The cagL gene was cloned from 26695 H. pylori followed by over-expression and purification of the protein in E. coli. Mongolian gerbils were immunized with rCagL protein mixed with aluminum adjuvant via intramuscular injections once a week during 4 weeks. At a week after the last immunization, the Mongolian gerbils were administrated with H. pylori 7.13 strain into the stomach and sacrificed to measure antibody titer on rCagL by ELISA and bacterial colonization in the stomach, and to examine the histopathological changes and cytokine expression at 6 week after challenge. Antibody titers on recombinant protein were significantly increased from a week after the first immunization. There was no significant change of the number of bacterial colony between control group and immunized group. The relative stomach weight was significantly decreased in immunized group, but the significant change of histopathological assessment was not observed in the stomach. Cytokine expression such as IL-$1{\beta}$ and KC also was not significantly different between control and immunized groups. These results indicate that rCagL could effectively induce the formation of the specific IgG antibodies. However, bacterial colonization and histopathological lesions could not be inhibited by the immunization in the stomach, indicating not enough protection against H. pylori infection. We consider that along with CagL other adequate antigens could be needed stimulating immune response and inducing protective effects against gastric disease, and also a better adjuvant could be considered.
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문제 정의
, 2004). 이번 연구에서는 최근에 알려진 CagL 단백질을 면역화시켰을 때, H. pylori 감염이 유도된 저빌에서 나타나는 방어작용에 대해서 평가하고자 하였다.
제안 방법
2 μg의 총 RNA를 RT Premix Kit (Bioneer, Korea)를 이용하여 cDNA로 합성하였고, SYBR_GREEN PCR MASTER Mix (Applied Biosystems, UK)와 MyiQ2 Two-Color Real-Time PCR을 이용하여 Quantitative real-time PCR을 실시하였다.
13 균주를 1×109 bacteria/500 μl 농도로 위내 투여하였다. H. pylori 감염 6주째 모든 저빌을 희생하여 혈청 IgG 반응평가를 위한 ELISA를 실시하였고, 위에서는 집락화된 H. pylori의 수평가, 병리조직학적 평가 및 사이토카인 유전자발현을 조사하였다. CagL 재조합 단백질접종 일주일 후부터 H.
H. pylori에 감염된 개체의 위점막은 호중구, 림프구 등의 염증세포 침윤 및 lymphoid follicle의 형성, 수종, 위선조직의 이형성 등의 병변 형성으로 인해 위점막이 비후되고 그로 인해 H. pylori에 감염되지 않은 개체에 비해 위무게가 증가하기 때문에 다음으로 위무게 비율을 측정하고, 위조직에 대한 병리조직학적 평가를 실시하였다. 흥미롭게도 CagL 접종군의 위조직 무게비율이 rCagL 비접종군에 비해 유의적으로 감소하는 것을 확인하였으나(Fig.
HematoxylinEosin 염색을 실시하고 광학현미경으로 관찰하였다. H. pylori에 의해 유도된 위점막에서의 병변은 호중구 침윤, 림프구 및 단핵구의 침윤 및 lymphoid follicle 형성, 장화생(intestinal metaplasia), 위선의 증생(hyperplasia) 및 이소성 증식성 위선(heterotopic proliferative gland) 형성 정도에 따라 grade를 0 (normal), 1 (mild), 2 (moderate), 3 (severe)으로 나누어 평가하였다(Cao et al., 2008).
잘라낸 3 mm 조직은 10% 중성 포르말린에 고정한 후, 파라핀에 포매, 4 μm 두께의 조직 절편을 제작하였다. HematoxylinEosin 염색을 실시하고 광학현미경으로 관찰하였다. H.
His tag을 포함하고 있는 재조합 CagL 단백질은 pET28a–26695 CagL을 가지고 있는 E. coli BL21(DE3)에서 1 mM IPTG로 발현되었고, 발현의 유무는 10% SDS-PAGE gel로 전기영동하여 확인하였다(Fig. 1A).
rCagL 근육내 접종에 의해 형성된 특이 IgG 항체 수준을 평가하기 위해 4회의 rCagL 근육내 접종 및 H. pylori 감염 3주째와 희생시(H. pylori 감염 6주째)마다 혈청을 분리하여 ELISA 방법으로 특이 IgG 항체 수준을 측정하였다(Fig. 3). 그 결과, rCagL 근육내 접종에 의해 특이 IgG 항체가 유의적으로 높게 형성되는 것을 확인하였다.
rCagL 접종 0, 1, 2, 3, 4, 7주(H. pylori 7.13 균주 감염 3주째)째에 저빌의 안와정맥총에서 채혈하여 혈청을 분리하였고, 10주(H. pylori 7.13 균주 감염 6주째)째에는 심장에서 채혈하고 희생하였다. 접종기간 동안 형성된 특이 CagL 항체가를 비교하기 위해 면역효소측정법(ELISA)을 실시하였다.
rCagL 접종군은 rCagL 100 μg을 일주일 간격으로 4번 근육 내 접종하였다.
rCagL의 면역화가 저빌의 위점막에서 H. pylori 집락화에 영향을 미치는지 평가하기 위해 위점막을 균질화하여 미호기성 환경에서 배양한 후 집락화된 세균수를 세어 위 조직 내 세균의 수를 계산하였다(Fig. 4A). rCagL 접종군와 rCagL 비접종군사이의 조직내 세균 수는 유의적인 통계학적 차이를 나타내지 않았다.
rCagL의 면역화에 의해 위점막에서 싸이토카인의 발현정도가 변화하는지 평가하기 위해 IL-1β와 KC의 mRNA 발현정도를 real-time PCR을 이용하여 정량하여 측정하였다(Fig. 6).
rCag의 접종이 실험동물에 있어 육안적 변화를 나타내는지 확인하기 위하여 실험기간동안 매주 저빌의 체중과 사료소비량을 측정하였다(Fig. 2). 10주 동안의 실험기간 동안 체중은 H.
이등분한 위조직 중 하나는 정중앙선에서 약 3 mm의 조직을 잘라내어 병리조직학적 평가에 사용하였고 3 mm 잘라낸 나머지 조직의 무게를 측정한 후 1 ml brucella broth에 넣어 조직분쇄기로 균질화하였다. 균질화된 위 조직을 혈액배지에 도말하여 37℃ 미호기성 환경에서 72시간 동안 배양한 후 집락화된 세균수를 세어 위 조직 내 세균의 수를 계산하였다.
5주령 숫컷 저빌(Orient-Bio, Korea)을 도입하여 일주일동안 순화과정을 거쳤다. 실험군은 H. pylori 감염 대조군과 H. pylori 감염 CagL 재조합 단백질(rCagL) 접종군으로 나누어 사육하였다. rCagL 접종군은 rCagL 100 μg을 일주일 간격으로 4번 근육 내 접종하였다.
pylori 감염 6주째 모든 저빌을 희생하였다. 실험기간동안 매주 저빌의 체중과 사료소비량을 측정하였다.
위에서 이등분한 위조직의 나머지 하나는 RNA를 추출하기 위해 위점막면을 sclipper로 긁어내고 Trizol (Invitrogen Corp., USA)을 이용하여 총 RNA를 추출하였다. 2 μg의 총 RNA를 RT Premix Kit (Bioneer, Korea)를 이용하여 cDNA로 합성하였고, SYBR_GREEN PCR MASTER Mix (Applied Biosystems, UK)와 MyiQ2 Two-Color Real-Time PCR을 이용하여 Quantitative real-time PCR을 실시하였다.
pylori가 발병하는데 중요한 역할을 하는 것으로 알려져 있다. 이번 연구는 저빌에 H. pylori를 감염시킨 동물 모델을 이용하여 CagL 재조합 단백질을 면역화시켰을 때 나타나는 효과를 평가하였다. 재조합 CagL은 클론되었고, 과발현시켜 정제하여 준비하였다 저빌은 H.
일주일 간격으로 4회 근육내 접종하였고, 마지막 접종 일주일 후, 모든 저빌에 H. pylori 7.13 균주를 1×109 bacteria/500 μl 농도로 위내 투여하였다.
잘라낸 3 mm 조직은 10% 중성 포르말린에 고정한 후, 파라핀에 포매, 4 μm 두께의 조직 절편을 제작하였다.
pylori를 감염시킨 동물 모델을 이용하여 CagL 재조합 단백질을 면역화시켰을 때 나타나는 효과를 평가하였다. 재조합 CagL은 클론되었고, 과발현시켜 정제하여 준비하였다 저빌은 H. pylori 감염 대조군과 H. pylori 감염 CagL 재조합 단백질 접종군으로 분류하였고, 접종시 알루미늄 애쥬번트를 사용하였다. 일주일 간격으로 4회 근육내 접종하였고, 마지막 접종 일주일 후, 모든 저빌에 H.
저빌을 희생시킨 후 위를 적출하여 소만곡을 따라 절개하고 위내 내용물을 제거하였다. 전위 부위를 제거한 위의 무게를 측정하고 펼쳐진 위점막면의 정중앙선을 따라 이등분하였다.
저빌을 희생시킨 후 위를 적출하여 소만곡을 따라 절개하고 위내 내용물을 제거하였다. 전위 부위를 제거한 위의 무게를 측정하고 펼쳐진 위점막면의 정중앙선을 따라 이등분하였다. 이등분한 위조직 중 하나는 정중앙선에서 약 3 mm의 조직을 잘라내어 병리조직학적 평가에 사용하였고 3 mm 잘라낸 나머지 조직의 무게를 측정한 후 1 ml brucella broth에 넣어 조직분쇄기로 균질화하였다.
대상 데이터
5주령 숫컷 저빌(Orient-Bio, Korea)을 도입하여 일주일동안 순화과정을 거쳤다. 실험군은 H.
rCagL 접종군은 rCagL 100 μg을 일주일 간격으로 4번 근육 내 접종하였다. rCagL 접종시 알루미늄 애쥬번트를 사용하였고, H. pylori 감염 대조군에는 알루미늄 애쥬번트만을 근육내 접종하였다. 4번째 rCagL 접종이 끝나고 일주일 후, 모든 저빌에 H.
pylori 26695 균주로 부터 연쇄중합반응으로 얻어낸 후 pET28a plasmid vector에 제한 효소 NdeI과 BamHI을 이용해서 삽입하였다. 삽입 결과로 얻은 pET28a-26695 CagL은 BL21(DE3)에 형질전환하였다. BL21 형질전환체는 Kanamycine (50 μg/ml)이 들어간 Luria-Bertany (LB) Broth에 OD600nm이 0.
데이터처리
세척 후 TMB substrate 용액을 100 μl씩 분주하고 2 N 황산 수용액 100 μl으로 반응을 정지시킨 후 450 nm 파장에서 흡광도를 측정하였다. ELISA 결과, 모든 개체 혈청의 rCagL 접종 시작 시점의 흡광도 값의 평균을 기준값으로 하여 실험기간 동안 각 개체의 흡광도 값의 증가정도를 계산하였다.
SPSS 12.0 statistical package program (SPSS Inc., USA)을 모든 통계평가에 사용하였고, unpaired t-test로 군간의 통계학적 차이를 평가하였다. P값이 0.
이론/모형
유전자 발현의 상대적인 평가는 2-△△Ct analysis method (Livak and Schmittgen, 2001)를 적용하였다. 모든 real-time PCR procedures는 melting curve analysis를 이용하였다.
사용한 forward (F)와 reverse (R) primer는 IL-1β-F, TGA CTT CAC CTT GGA ATC CGT CTC T; IL-1β-R, GGC AAC AAG GGA GCT CCA TCA C; KC-F, CAC CCG CTC GCT TCT TC; KC-R, ATG CTC TTG GGG TGA ATC C; GAPDH-F, AAC GGC ACA GTC, AAG, GCT, GAG, AAC, G; GAPDH-R, CAA CAT ACT CGG CAC CGG CAT CG 였다. 유전자 발현의 상대적인 평가는 2-△△Ct analysis method (Livak and Schmittgen, 2001)를 적용하였다. 모든 real-time PCR procedures는 melting curve analysis를 이용하였다.
13 균주 감염 6주째)째에는 심장에서 채혈하고 희생하였다. 접종기간 동안 형성된 특이 CagL 항체가를 비교하기 위해 면역효소측정법(ELISA)을 실시하였다. rCagL을 100 mM 중 탄산염/탄산염 흡착완충용액(pH 9.
성능/효과
2). 10주 동안의 실험기간 동안 체중은 H. pylori 감염 대조군과 H. pylori 감염 rCagL 접종군 모두 유사한 증가양상을 나타내었고, 저빌 희생시 두군의 체중 차이는 거의 없었다. 사료소비량 또한 rCagL 접종한 저빌과 접종하지 않은 저빌사이에 유의적인 변화(하루 평균소비량 4.
4번째 rCagL 접종이 끝나고 일주일 후, 모든 저빌에 H. pylori 7.13 균주를 1×109 bacteria/500 μl 농도로 위내 접종하였고, H. pylori 감염 6주째 모든 저빌을 희생하였다.
pylori의 수평가, 병리조직학적 평가 및 사이토카인 유전자발현을 조사하였다. CagL 재조합 단백질접종 일주일 후부터 H. pylori 감염 CagL 재조합 단백질 접종군의 혈청내 IgG 항체형성이 유의적으로 증가하였다. 위에서의 집락화된 세균수는 두군의 차이가 없었다.
H. pylori 감염 6주째의 IL-1β와 KC의 발현정도는 rCagL 접종군과 비접종군사이의 유의적인 차이를 나타내지 않았다.
3). 그 결과, rCagL 근육내 접종에 의해 특이 IgG 항체가 유의적으로 높게 형성되는 것을 확인하였다. 특이 IgG 항체 수준은 rCagL 근육내 접종시작 일주일 후부터 뚜렷하게 증가하여 마지막 근육내 접종 시에 수거한 저빌 혈청에서의 특이 IgG 항체 수준은 rCagL을 접종하지 않은 저빌에 비해 약 80배 정도 증가하였다.
pylori 감염 rCagL 접종군 모두 유사한 증가양상을 나타내었고, 저빌 희생시 두군의 체중 차이는 거의 없었다. 사료소비량 또한 rCagL 접종한 저빌과 접종하지 않은 저빌사이에 유의적인 변화(하루 평균소비량 4.5 g 정도)는 관찰되지 않았다. 체중증가 정도와 사료소비율의 변화는 실험동물의 생리적인 건강상태를 육안적으로 판단할 수 있는 근거가 된다.
특이 IgG 항체 수준은 rCagL 근육내 접종시작 일주일 후부터 뚜렷하게 증가하여 마지막 근육내 접종 시에 수거한 저빌 혈청에서의 특이 IgG 항체 수준은 rCagL을 접종하지 않은 저빌에 비해 약 80배 정도 증가하였다. 저빌 희생시의 rCag 접종군의 저빌의 IgG 항체 수준은 rCagL을 접종하지 않은 군에 비해 약 60배 정도 높게 나타나, 형성된 IgG 항체가가 지속되는 양상을 관찰할 수 있었다.
그 결과, rCagL 근육내 접종에 의해 특이 IgG 항체가 유의적으로 높게 형성되는 것을 확인하였다. 특이 IgG 항체 수준은 rCagL 근육내 접종시작 일주일 후부터 뚜렷하게 증가하여 마지막 근육내 접종 시에 수거한 저빌 혈청에서의 특이 IgG 항체 수준은 rCagL을 접종하지 않은 저빌에 비해 약 80배 정도 증가하였다. 저빌 희생시의 rCag 접종군의 저빌의 IgG 항체 수준은 rCagL을 접종하지 않은 군에 비해 약 60배 정도 높게 나타나, 형성된 IgG 항체가가 지속되는 양상을 관찰할 수 있었다.
후속연구
coli heat-liable toxin이 점막 면역을 유도하는 애쥬번트로써 효과가 뛰어나지만 독성이 강해 사람에게는 사용할 수 없는 단점이 있다. 또한 H. pylori 감염에 있어 한가지나 두가지 항원을 사용할 때보다 세가지 이상의 항원을 사용할 때, 보다 질병에 대한 방어효과가 뛰어나다는 보고가 있어(Wu et al., 2008), 향후에는 H. pylori의 T4SS에서 높은 발현을 나타내는 CagA 또는 CagC (Ta et al., 2012) 등과의 혼합 접종 및 점막 면역을 유도하는 애쥬번트의 사용 등을 제고하여 연구를 진행할 필요가 있을 것으로 생각한다.
위에서의 IL-1β와 KC (IL-8 homologues)의 유전자발현 정도도 두 군사이에 유의적인 차이는 없었다. 이번 결과는 CagL 재조합 단백질의 접종은 IgG 항체형성은 효과적으로 자극하였지만 면역화된 숙주에서 세균 집락화의 감소 및 병변형성의 방어까지는 유도하지 못한 것으로 나타났으며, 앞으로 H. pylori 감염에 대해 유효한 면역 반응 및 질병 방어 효과를 나타내기 위해서 CagL을 포함한 다른 종류의 재조합 항원 사용 및 보조적으로 전신 면역 및 점막 면역을 효과적으로 유도하기 위해 안정성있는 애쥬번트의 사용을 고려해야 할 것으로 사료된다.
이번 실험의 결과를 미루어 보아 H. pylori 감염에 대해 유효한 면역 반응 및 질병 방어 효과를 나타내기 위해서 CagL을 포함한 다른 종류의 재조합 항원 사용 및 보조적으로 전신 면역 및 점막 면역을 효과적으로 유도하기 위해 안정성 있는 애쥬번트의 사용을 고려해야 할 것으로 사료된다.
, 2008). 이번 연구에서도 알루미늄 애쥬번트로 근육내 주사하여 전신 면역을 유도하였을 때 혈청내에서 특이 IgG 항체가 유의적으로 높게 형성되었지만 위점막에서의 세균 집락화, 병리조직학적 소견 및 싸이토카인의 mRNA 발현에서는 유의적인 차이는 확인 할 수 없어 재조합 항원에 대한 알루미늄 애쥬번트 사용은 제한점을 가지는 것으로 사료된다. 최근에는 cholera toxin (Durrani and Rijpkema, 2003; Jeremy et al.
질의응답
핵심어
질문
논문에서 추출한 답변
H. pylori가 숙주세포 내로 독성 인자들을 이주시키는 경로는 무엇인가?
H. pylori는 제4형 분비기관(Type IV secretion system)이라 알려진 복합체 수송기관(multisubunit transport apparatus)을 통해 숙주세포 내로 독성 인자들을 이주시킨다 (Cascales and Christie, 2003; Backert and Meyer, 2006). H.
Helicobacter pylori란 무엇인가?
사람의 위점막 표면 근처에 기생하는 그램 음성 세균인 Helicobacter pylori는 감염된 사람의 20% 이상이 만성 위축성 위염, 위궤양, 위암 등을 포함하는 여러가지 위장질환으로 발전하는 것으로 보고되어 있다(Marshall and Warren, 1984; Parsonnet et al., 1991).
Helicobacter pylori의 독성인자 중 발병하는데 중요한 역할을 하는 것은 무엇이며 어떻게 작용하는가?
H. pylori의 독성인자중 CagL은 숙주 세포와 H. pylori의 제 4형 분비기관(Type 4 secretion system)을 연결하는 adhesin으로 작용하는 섬모 단백질로 H. pylori가 발병하는데 중요한 역할을 하는 것으로 알려져 있다. 이번 연구는 저빌에 H.
참고문헌 (30)
Amieva, M.R., Vogelmann, R., Covacci, A., Tompkins, L.S., Nelson, W.J., and Falkow, S. 2003. Disruption of the epithelial apical-junctional complex by Helicobacter pylori CagA. Science 300, 1430-1434.
Del Giudice, G., Covacci, A., Telford, J.L., Montecucco, C., and Rappuoli, R. 2001. The design of vaccines against Helicobacter pylori and their development. Annu. Rev. Immunol. 19, 523-563.
Durrani, Z. and Rijpkema, S. 2003. Orogastric vaccination of guinea pigs with Helicobacter pylori sonicate and a high dose of cholera toxin lowers the burden of infection. FEMS Immunol. Med. Microbiol. 36, 169-173.
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Kwok, T., Zabler, D., Urman, S., Rohde, M., Hartig, R., Wessler, S., Misselwitz, R., Berger, J., Sewald, N., Konig, W., and et al. 2007. Helicobacter exploits integrin for type IV secretion and kinase activation. Nature 449, 862-866.
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