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문제 정의
- 그러나 脾兪의 大黃약침이 비만에 미치는 영향에 대한 연구 보고는 아직 접하지 못하였다. 이에 본 연구에서는 고지방식이로 유발된 비만백서의 脾兪에 大黃약침을 시술한 후 비만개선효과를 알아보고자 체중 변화, 식이효율, 혈청 중 지질조성 및 간기능 수치에 미치는 영향을 살펴보았다.
- 이에 저자는 고지방 식이에 의해 유발된 비만백서의 脾兪에 大黃약침을 시술하여 肥滿에 미치는 영향을 알아보고자, 체중변화, 식이효율, 혈청 중의 지질조성, 간기능에 미치는 변화를 관찰하여 다음과 같은 결과를 얻어 이에 보고하는 바이다.
제안 방법
- Serum AST와 ALT는 GOT-SL Kit(ELITech, France)와 GPT-SL Kit(ELITech, France)를 사용하여 340nm 파장에서 측정하였으며, serum r-GTP는 r-GTP Kit(ELITech, France)를 사용하여 635nm 파장에서 측정하였다.
- Total cholesterol과 HDL(high density lipoprotein)-cholesterol은 Cholesterol-SL kit(ELITech, France)과 HDL-C-SL kit(ELITech, France)를 사용하여 546nm 파장에서 측정하였다. Triglyceride는 triglyceride-SL kit(ELITech, France)를 사용하여 505nm 파장에서 측정하였으며, LDL(low density lipoprotein)-cholesterol은 LDL-cholesterol Kit(Daichi, Japan)를 사용하여 700nm 파장에서 측정하였다.
- Total cholesterol과 HDL(high density lipoprotein)-cholesterol은 Cholesterol-SL kit(ELITech, France)과 HDL-C-SL kit(ELITech, France)를 사용하여 546nm 파장에서 측정하였다. Triglyceride는 triglyceride-SL kit(ELITech, France)를 사용하여 505nm 파장에서 측정하였으며, LDL(low density lipoprotein)-cholesterol은 LDL-cholesterol Kit(Daichi, Japan)를 사용하여 700nm 파장에서 측정하였다.
- 대황약침이 간 기능에 미치는 영향에 대해 알아보기 위해 혈청 내 AST(aspartate transaminase), ALT (alanine transaminase), r-GTP(r-Glutamyl transpeptidase)을 측정하였다. AST, ALT, r-GTP는 일반적으로 간장의 손상정도를 확인하는 효소관련 검사법으로 AST는 간, 심장, 근육, 신장에 존재하는 효소로서 이들 조직이 손상되면 혈중으로 유리되어 수치가 증가된다.
- 동물들은 군 분리에 맞게 각각의 cage에 8주 동안 사료를 공급하였다.
- 모두 30마리의 동물을 6개군으로 균등 분리하였는데, 정상사료를 식이하며 무처치한 정상군(normal, n=5), 고지방 사료를 식이하며 무처치한 대조군(control, n=5), 고지방 사료를 식이하며 脾兪에 saline을 주입한 saline군(saline, n=5), 고지방사료를 식이하며 脾兪에 大黃약침 0.008mg/ml/g(body weight)을 시행한 약침처치 1군(PT-1, n=5), 고지방사료를 식이하며 脾兪에 大黃약침 0.021mg/ml/g(body weight)을 시행한 약침처치 2군(PT-2, n=5), 고지방사료를 식이하며 脾兪에 大黃약침 0.042mg/ml/g(body weight)을 시행한 약침처치 3군(PT-3, n=5)으로 각각 나누었다.
- 처치는 8주 동안 4일에 1회씩 총 14회씩 양측 脾兪에 약침을 시술하였다.
- 체중은 섭취량과 함께 매 주에 1회씩 8주 동안 총 8회를 측정하였고, 식이효율(FE ; food efficiency)은 실험기간 중의 1일 사료 섭취량에 대한 체중 증가량의 비로서 다음 식에 따라 계산하였다.
대상 데이터
- 4% 함유 사료를 사용하였다. 고지방 식이사료(Dyets. USA)는 지방 40.0%, 탄수화물 31.4%, 단백질 17.7%, 섬유질 5.0%, 회분 4.0%, 수분 3.3%로 총 5.542㎉/g(지방 3.6㎉/g, 탄수화물 1.21㎉/g, 단백질 0.732㎉/g)의 열량이 포함된 사료를 사용하였다.
- 동신대학교 부속한방병원에서 구입한 대황(Rhei Radix et Rhizoma) 300g을 증류수 1,000ml와 함께 2시간 동안 끓여 얻은 120ml의 熱水液을 여과지로 여과한 후, 원심분리기(Centricon T-42K, Italy)로 5,000rpm에서 30분간 원심 분리하여 상등액 100ml를 취하였다.
- 실내온도가 24～26℃, 습도가 40～60%로 유지되는 사육실에서 체중이 약 175～195g의 Sprague Dawley계 白鼠를 물과 사료를 충분히 섭취하게 하면서 사육한 후 실험에 사용하였다.
- 정상 식이(Samyang. Korea)는 단백질 22.1%, 회분 8.0%, 섬유질 5.0%, 지방 3.5%, 칼슘 0.6%, 인 0.4% 함유 사료를 사용하였다. 고지방 식이사료(Dyets.
데이터처리
- 실험 성적은 평균값과 표준오차(mean±SE)로 표시하였다. 각 실험군간의 통계학적 분석은 Windows용 SPSS(version 10.05, SPSS)를 이용하여, 비모수적 방법 중 Mann-Whitney U test를 시행하였다. 전체 실험의 통계적인 유의성은 신뢰구간 p<0.
- 실험 성적은 평균값과 표준오차(mean±SE)로 표시 하였다.
성능/효과
- 008mg/ml/g 농도의 大黃약침은 비만백서의 체중감소에 의미있는 효과를 보였고 식이효율에서는 한계적으로 유의한 감소를 보임을 알 수 있었다. 0.021mg/ml/g 농도의 大黃약침은 즉각적인 체중감소는 없었으나 시술 4주째부터 체중감소에 효과를 보였음을 알 수 있으며, 체중감소 및 식이효율에 가장 유의미한 시술농도라고 사료된다. 그러나 체중이 변할 경우 수분손실이나 수분의 저류도 원인이 될 수 있으므로 부종지수 등도 함께 파악할 필요가 있을 것으로 보인다38).
- 1. 주간 체중변화는 대조군에 비해 PT-1군에서 2주부터 8주까지 유의한 감소를 보였으며 PT-2군에서는 4주에서 7주째 유의한 감소를 보였다.
- 2. 식이효율에서는 대조군에 비해 PT-1군에서 한계적으로 유의한 감소를 보였다(0.05≤p<0.06).
- 3. HDL-cholesterol 에서는 대조군에 비해 PT-1, PT-3군에서 증가하는 경향을 보였으나 통계적으로 유의하지는 않았다.
- 4. ALT는 대조군에 비하여 PT-1군에서 한계적으로 유의한 감소를 보였다(0.05≤p<0.06).
- 5. r-GTP에서는 대조군에 비하여 전 실험군이 유의성 있는 감소를 보였다.
- r-GTP에서는 정상군과 대조군의 비교에서 유의한 변화를 보이지 않았고, 대조군과 실험군의 비교에서 대조군에 비하여 saline군, PT-1군, PT-2군, PT-3군은 유의한 감소를 보였다(p<0.01).
- 고지방식이를 공급한 8주 동안 매 1주일에 한 번씩 체중변화를 측정한 결과 대조군에 비하여 PT-1군에서 2주에서 8주째, PT-2 군에서는 4주에서 7주째에 유의한 감소를 보였으며 PT-3군은 1주째에 유의한 증가를 보였다.
- 본 실험에서는 AST, ALT의 대조군과 실험군의 비교에서는 ALT에서의 PT-1군이 한계적으로 유의한 감소를 보였고, 그 이외에는 대조군과 실험군과의 비교에서는 유의한 변화를 보이지 않았다. r-GTP에서는 정상군과 대조군의 비교에서 유의한 변화를 보이지 않았고, 대조군과 실험군의 비교에서 대조군에 비하여 saline군, PT-1군, PT-2군, PT-3군은 유의한 감소를 보였다(p<0.
- 본 실험의 결과 total cholesterol, triglyceride 및 LDL-cholesterol에서는 정상군과 대조군과의 비교, 대조군과 실험군과의 비교에서 각각 유의한 변화를 보이지 않았으며, HDL-cholesterol에서만 정상군과 대조군과의 비교에서 정상군에 비하여 대조군은 유의한 감소를 보였으며, 대조군과 실험군과의 비교에서 대조군에 비하여 PT-2군을 제외한 실험군들에서 증가하는 경향을 보였으나 통계적으로 유의하지는 않았다.
- 식이효율에서는 대조군에 비해 PT-1군만이 한계 적으로 유의한 감소를 보였다(0.05≤p<0.06).
- 이것으로 보아 脾兪에 시술한 0.008mg/ml/g 농도의 大黃약침은 비만백서의 체중감소에 의미있는 효과를 보였고 식이효율에서는 한계적으로 유의한 감소를 보임을 알 수 있었다. 0.
- 이것으로 보아 비수에 시술한 大黃약침이 肝機能에 부정적인 영향을 미치지는 않을 것으로 보이며, r-GTP에 대해서는 유의한 효과를 나타냈음을 알 수 있다. 또한 ALT의 변화를 살펴보면 대조군의 효과보다 실험군의 효과가 좋았으나, saline군이 PT-1, PT-2, PT-3군보다 유의한 효과를 나타나며, 이는 약침액의 효과보다 혈위에 의한 효과가 더욱 ALT의 변화에 영향을 미쳤을 것이라 예상되며, 이를 검증하기 위하여 혈위에의 침자 시술군에 대한 추가적인 연구가 필요할 것으로 사료된다.
- 정상군과 대조군과의 비교, 대조군과 실험군과의 비교에서는 각각 유의한 변화를 보이지 않았다(Fig. 3).
- 정상군과 대조군과의 비교, 대조군과 실험군과의 비교에서는 각각 유의한 변화를 보이지 않았다(Fig. 4).
- 정상군과 대조군과의 비교, 대조군과 실험군과의 비교에서는 각각 유의한 변화를 보이지 않았다(Fig. 7).
- 정상군과 대조군과의 비교에서 정상군에 비하여 대조군은 유의한 감소를 보였으며(p<0.05), 대조군과 실험군과의 비교에서 대조군에 비하여 PT-2군을 제외한 실험군들에서 증가하는 경향을 보였으나 통계적으로 유의하지는 않았다(Fig. 5).
- 정상군과 대조군과의 비교에서 정상군에 비하여 대조군은 유의한 증가를 보였으며(p<0.01), 대조군과 실험군과의 비교에서 대조군에 비하여 PT-1군이 한계 적으로 유의한 감소를 보였다(0.05≤p<0.06)(Fig. 2).
- 정상군과 대조군의 비교에서 유의한 변화를 보이지 않았고, 대조군과 실험군의 비교에서 대조군에 비하여 saline군, PT-1군, PT-2군, PT-3군은 유의한 감소를 보였다(p<0.01)(Fig. 9).
- 정상군과 대조군의 비교에서 정상군에 비하여 대조군은 유의한 증가를 보였으며(p<0.01), 대조군과 실험군의 비교에서 대조군에 비하여 saline군은 유의한 감소를(p<0.05), PT-1군은 한계적으로 유의한 감소를 보였다(0.05≤p<0.06)(Fig. 8).
- 정상군에 비하여 대조군이 유의한 증가를 보였고 (1～7주: p<0.01, 8주: p<0.05), 대조군에 비하여 saline 군은 1주째에 유의한 증가를 보였으며(p<0.01), PT-1군은 2주에서 7주째(p<0.01), 8주째(p<0.05)에 유의한 감소를 보였으며, PT-2군은 4주에서 7주째에 유의한 감소를 보였으며(p<0.05), PT-3군은 1주째에 유의한 증가를 보였다(p<0.05)(Table 1. Fig. 1).
후속연구
- 이것으로 보아 비수에 시술한 大黃약침이 肝機能에 부정적인 영향을 미치지는 않을 것으로 보이며, r-GTP에 대해서는 유의한 효과를 나타냈음을 알 수 있다. 또한 ALT의 변화를 살펴보면 대조군의 효과보다 실험군의 효과가 좋았으나, saline군이 PT-1, PT-2, PT-3군보다 유의한 효과를 나타나며, 이는 약침액의 효과보다 혈위에 의한 효과가 더욱 ALT의 변화에 영향을 미쳤을 것이라 예상되며, 이를 검증하기 위하여 혈위에의 침자 시술군에 대한 추가적인 연구가 필요할 것으로 사료된다.
- 위의 결과를 종합해보면 脾兪에 시술한 大黃약침은 체중변화 및 식이효율, 간기능 변화에 유의한 효과를 나타내어 비만치료에 활용될 수 있을 것으로 사료되며, 약침의 농도와 기간에 따라 효과에 차이가 있으므로 향후 이에 대하여 그 기전 및 약침 농도에 대한 상세한 연구와 임상적 활용 및 후속 연구가 필요할 것으로 사료된다.
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