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문제 정의
- abeliicola는 지금까지 일본에서만 기록되어 있다(Tanda와 Nomura, 1978). 저자들은 한국에서 2009년부터 꽃댕강나무에 흰가루병이 발생함을 관찰하였으며, 이를 채집하여 병원균을 동정하였으므로 이에 보고한다.
제안 방법
- 고려대학교 식물표본관에 보존되어 있는 꽃댕강나무의 흰가루병균 E. abeliicola 시료 중에서 KUS-F25628을 선정하여 ribosomal DNA(rDNA)의 complete internal transcribed spacer(ITS) 영역의 염기서열을 분석하였다. Takamatsu 등(2009)의 방법에 따라 시료에서 채취한 자낭구로부터 rDNA를 추출하였고, ITS5(White 등, 1990)와 P3(Kusaba와 Tsuge, 1995) 프라이머를 사용하여 PCR로 증폭시켰다.
- 꽃댕강나무 잎과 줄기에 발생한 흰가루병균의 무성세대와 유성세대를 검경하였다. 이 균의 분류학적 특성을 파악하고 크기를 측정하기 위해서 명시야광학현미경(BX51, Olympus, Tokyo, Japan)을 사용하였고, 현미경사진은 미분간섭현미경(Axio Imager, Carl Zeiss, Göttingen, Germany)을 이용하여 촬영하였다.
- 이 균의 분류학적 특성을 파악하고 크기를 측정하기 위해서 명시야광학현미경(BX51, Olympus, Tokyo, Japan)을 사용하였고, 현미경사진은 미분간섭현미경(Axio Imager, Carl Zeiss, Göttingen, Germany)을 이용하여 촬영하였다. 무성세대와 유성세대의 검경에서 모두 신선시료를 사용하였으며, 물을 이용하여 관찰하였다.
- 이 균의 분류학적 특성을 파악하고 크기를 측정하기 위해서 명시야광학현미경(BX51, Olympus, Tokyo, Japan)을 사용하였고, 현미경사진은 미분간섭현미경(Axio Imager, Carl Zeiss, Göttingen, Germany)을 이용하여 촬영하였다.
- Takamatsu 등(2009)의 방법에 따라 시료에서 채취한 자낭구로부터 rDNA를 추출하였고, ITS5(White 등, 1990)와 P3(Kusaba와 Tsuge, 1995) 프라이머를 사용하여 PCR로 증폭시켰다. 증폭된 PCR 산물을 전기영동을 통하여 확인한 후에 LaboPassTM PCR kit(Cosmo Genetech, Seoul, Korea)로 정제하였다. 이 염기서열을 DNASTAR computer package 5.
대상 데이터
- 꽃댕강나무 흰가루병은 2009년 11월에 서귀포시와 제주시에서 발견되었다. 그 후 2010년에는 부산시 및 통영시에서 채집됨으로써 우리나라의 남부지방에서 관상용으로 식재된 꽃댕강나무에 흰가루병이 흔히 발생함을 알 수 있었다.
- 분생포자는 무색의 단세포이며, 피브로신체(fibrosin body)를 갖지 않으며, 타원형 내지 장타원형이며, 크기는 26−38×15−20 µm(장폭비=1.5−2.3)이며, 대부분 분생포자의 배꼽테두리(perihilar position) 바로 옆에서 발아하였다(Fig. 1I).
- 증폭된 PCR 산물을 전기영동을 통하여 확인한 후에 LaboPassTM PCR kit(Cosmo Genetech, Seoul, Korea)로 정제하였다. 이 염기서열을 DNASTAR computer package 5.05(Lasergene, Madison, WI, USA)를 이용하여 정리한 후, NCBI(National Center for Biotechnology Information)의 GenBank에 등록하여 기탁번호를 부여받았다(JQ710724). 계통수는 MEGA4 프로그램(Tamura 등, 2007)을 이용하여 neighbor-joining 방법으로 작성하였다(Fig.
- 그 후 2010년에는 부산시 및 통영시에서 채집됨으로써 우리나라의 남부지방에서 관상용으로 식재된 꽃댕강나무에 흰가루병이 흔히 발생함을 알 수 있었다. 이상의 모든 시료는 표본으로 제작하여 고려대학교 식물표본관(KUS)에 영구보존하였는데, KUS-F24850(무성세대+유성세대, 1 Nov. 2009, 서귀포시 외돌개), F24863(무성세대+유성세대, 2 Nov. 2009, 제주시 노형동), F25628(무성세대+유성세대, 8 Nov. 2010, 부산시 동삼동), F25653(무성세대+유성세대, 15 Nov. 2010, 통영시 무전동) 등 총 4점이다.
이론/모형
- abeliicola 시료 중에서 KUS-F25628을 선정하여 ribosomal DNA(rDNA)의 complete internal transcribed spacer(ITS) 영역의 염기서열을 분석하였다. Takamatsu 등(2009)의 방법에 따라 시료에서 채취한 자낭구로부터 rDNA를 추출하였고, ITS5(White 등, 1990)와 P3(Kusaba와 Tsuge, 1995) 프라이머를 사용하여 PCR로 증폭시켰다. 증폭된 PCR 산물을 전기영동을 통하여 확인한 후에 LaboPassTM PCR kit(Cosmo Genetech, Seoul, Korea)로 정제하였다.
- 05(Lasergene, Madison, WI, USA)를 이용하여 정리한 후, NCBI(National Center for Biotechnology Information)의 GenBank에 등록하여 기탁번호를 부여받았다(JQ710724). 계통수는 MEGA4 프로그램(Tamura 등, 2007)을 이용하여 neighbor-joining 방법으로 작성하였다(Fig. 2). GenBank BLAST를 이용하여 ITS 영역의 염기서열을 비교한 결과, 우리나라 꽃댕강나무의 흰가루병균 E.
성능/효과
- 2). GenBank BLAST를 이용하여 ITS 영역의 염기서열을 비교한 결과, 우리나라 꽃댕강나무의 흰가루병균 E. abeliicola와 일치하는 염기서열이 없었다. 현재 NCBI에 등록된 댕강나무류(Abelia spp.
- syringae-japonicae 등과 함께 Microsphaera절(section)에 포함되었다. 그러므로 우리나라에서 채집된 꽃댕강나무 흰가루병균 E. abeliicola는 분자계통학적으로도 Erysiphe속의 Microsphaera절에 위치하는 종으로 확인되었다.
- 본 연구팀이 제주시 노형동에서 관찰한 꽃댕강나무 흰가루병은 대형건물의 그늘 쪽에 경계화단용으로 밀식된 상태에서 발생하였는데, 그늘이 많고 통풍이 불량한 군락에서 더 심한 발병을 나타냈다. 또한 가로수의 하단에 생울타리용으로 식재된 경우(통영시 무전동)에도 그늘 환경이 발병에 영향을 주었다고 판단되었다. 한편, 제주, 부산, 통영, 해남, 완도 등 꽃댕강나무 흰가루병이 전혀 발생하지 않은 밀식식재지도 있었는데, 이러한 곳은 일조가 충분하고 통풍이 원활한 공통점을 발견할 수 있었다.
- 로 동정되었다. 무성세대의 분류학적 특징은 이 연구를 통하여 처음으로 기재되는데, 균사의 굴곡형 부착기와 분생포자경의 짧은 기부세포가 특징적이었다. 성숙한 자낭구의 분류학적 특징은 앞선 일본의 기재와 거의 일치하였다.
- 성숙한 자낭구의 분류학적 특징은 앞선 일본의 기재와 거의 일치하였다. 우리나라 시료에서 rDNA ITS 영역의 염기서열을 처음으로 분석하여 이 종이 Erysiphe속의 Microsphaera절에 속함을 밝혔으며, 이는 형태적 특징과 상응하는 결과였다. 이로써 우리나라에서 E.
- 0배에 불과하다. 한국에서 채집된 꽃댕강나무 흰가루병균의 자낭구는 부속사의 길이가 대부분 자낭구 직경의 2배 이상이었으므로 E. abeliicola로 동정할 수 있었다.
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