선택한 단어 수는 입니다.
최소 단어 이상 선택하여야 합니다.
최소 단어 이상 선택하여야 합니다.
선택한 단어 수는 30입니다.
최대 10 단어까지만 선택 가능합니다.
최대 10 단어까지만 선택 가능합니다.
문제 정의
- 본 연구에서는 이런 약물의 부작용을 최소화 하면서 쉽게 접할 수 있는 배추출물의 기능성을 강화하고, 배추출물과 배합하기에 적합한 약재의 선정을 위한 목적으로 利水滲濕의 약재인 薏苡仁, 澤瀉, 그리고 補益强壯 약재인 枸杞子, 黃芪를 선택하여 이들 추출액의 농도에 따른 효과를 관찰하고자 하였다. 이전 실험에서 배추출물에 구기자, 의이인, 택사, 황기각 추출물 3% 배합 제제의 유효성을 확인한 바, 체중증가를 억제시키고, 식이섭취량을 억제하면서 지질대사를 활성화시키는 작용은 배 추출물에 택사 3%를 배합하는 것이 효과적이었고, 면역 기능 및 항염 작용 증진에는 배 추출물에 의의인 3%를 배합하는 것이 효과적임이 관찰되었고, 한약재 추출물의 농도를 상승시켜 비교하는 것이 필요함을 제기하였다.
- 본 연구자들은 이전 연구에서 배 추출물과 구기자, 의이인, 택사, 황기 각 추출물 3%의 농도로 배합하여 고지방식이 비만 유발 흰쥐에 투여한 연구에서 배-택사배합투여와 배-의이 인배합 투여시 지질대사 활성화 작용과 면역기능 향상 작용이 유효하게 발현됨을 보고하였고, 각 지표별로 각 추출물의 배합 농도를 향상시켰을 시에 발현되어지는 양상을 비교 관찰이 필요함을 제시한 바 있는데, 이에 본 연구에서는 배추출물에 구기자, 의이인, 택사, 황기 각 추출물 9%의 농도로 배합하여 고지방식이로 유발된 비만 백서의 체중, 식이효율, 지질대사, 항염 및 면역기능에 미치는 영향을 관찰한 바 다음과 같은 지견을 얻었다.
- 이전 실험에서 배추출물에 구기자, 의이인, 택사, 황기각 추출물 3% 배합 제제의 유효성을 확인한 바, 체중증가를 억제시키고, 식이섭취량을 억제하면서 지질대사를 활성화시키는 작용은 배 추출물에 택사 3%를 배합하는 것이 효과적이었고, 면역 기능 및 항염 작용 증진에는 배 추출물에 의의인 3%를 배합하는 것이 효과적임이 관찰되었고, 한약재 추출물의 농도를 상승시켜 비교하는 것이 필요함을 제기하였다. 이에 본 연구에서는 구기자, 의이인, 택사, 황기 추출물의 배합비를 향상시켜서, 즉 배추출물에 구기자, 의이인, 택사, 황기 추출물 9% 농도로 배합한 제제의 효과를 체중변화, 혈청 지질대사, 면역기능 지표를 통하여 관찰하고자 하였다.
제안 방법
- IL-1β 측정은 Rat IL-1β(Invitrogen, USA) ELISA-kit를 사용하여 측정하였다.
- IL-6 측정은 Rat IL-6(R&D, USA)를 사용하여 측정하였다.
- Standard curve를 만들어 sample의 IL-1β 양을 assay하였다.
- Stop solution 100㎕를 plate에 넣고 발색반응을 중지시킨 후 Spectramax(M2, Molecular Devices, USA)로 450 ㎚에서 OD(Optical density)를 측정하였다. Standard curve를 만들어 sample의 IL-6 양을 assay하였다.
- Standard curve를 만들어 sample의 TNF-α 양을 assay하였다.
- TNF-α 측정은 Rat TNF-α(Invitrogen, USA) ELISA-kit를 사용하여 측정하였다.
- 각 군들의 실험동물은 심장 채혈에 의하여 혈액 5ml을 얻어 이를 의료용 냉동 원심분리기(VS-6000CFI)에서 3,500 rpm으로 20분간 시행하여 혈청을 분리하였다.
- 대조군(Control group, CON)은 고지방식이 공급을 지속하면서 일반 식수를 섭취하게 하였고, 배·구기자배합투여군(Experimental group Ⅰ, Exp Ⅰ)은 고지방식이 공급을 지속하면서 배추출물과 구기자 추출액 9% 농도로 배합한 제제를 섭취하게 하였고, 배·의이인배합투여군(Experimental group Ⅱ, Exp Ⅱ)은 고지방식이 공급을 지속하면서 배추출물과 의이인 추출액 9% 농도로 배합한 제제를 섭취하게 하였고, 배·택사배합투여군(Experimental group Ⅲ, Exp Ⅲ)은 고지방식이 공급을 지속하면서 배추출물과 택사 추출액 9% 농도로 배합한 제제를 섭취하게 하였고, 배·황기배합투여군(Experimental group Ⅳ, Exp Ⅳ)은 고지방식이 공급을 지속하면서 배추출물과 황기 추출액 9% 농도로 배합한 제제를 섭취하게 하였다.
- 대조군(Control group, CON)은 고지방식이 공급을 지속하면서 일반 식수를 섭취하게 하였고, 배·구기자배합투여군(Experimental group Ⅰ, Exp Ⅰ)은 고지방식이 공급을 지속하면서 배추출물과 구기자 추출액 9% 농도로 배합한 제제를 섭취하게 하였고, 배·의이인배합투여군(Experimental group Ⅱ, Exp Ⅱ)은 고지방식이 공급을 지속하면서 배추출물과 의이인 추출액 9% 농도로 배합한 제제를 섭취하게 하였고, 배·택사배합투여군(Experimental group Ⅲ, Exp Ⅲ)은 고지방식이 공급을 지속하면서 배추출물과 택사 추출액 9% 농도로 배합한 제제를 섭취하게 하였고, 배·황기배합투여군(Experimental group Ⅳ, Exp Ⅳ)은 고지방식이 공급을 지속하면서 배추출물과 황기 추출액 9% 농도로 배합한 제제를 섭취하게 하였다. 대조군은 일반식수를, 각 실험군은 해당 배합 제제 70 ml/day을 섭취하게 하였다.
- 배 추출물과 구기자, 의이인, 택사, 황기 추출물 각각을 9%의 농도로 배합한 제제가 고지방식이로 유발된 비만 흰쥐의 체중, 식이효율, 지질대사, 항염 및 면역기능에 미치는 영향을 관찰한 바 다음과 같은 결과를 나타내었다.
- 25%)을 세척하여 담구었고, 이를 95~98℃에서 3시간 숙성시켰으며, 잔사는 여별한 후 여과기를 거쳐 청정한 즙액을 얻었다. 배합 약물의 추출은 Lycii Fructus(Korea), Coicis Semen(Korea), Alimatis Rhizoma(Korea), Astragali Radix(Korea) 각각 100 g을 증류수 1,000 ml에 넣어 180분간 약탕기로 전탕하였고, 잔사를 여별하고 추출액을 얻었으며, 추출액의 최종 양은 1,000 ml으로 맞추었다. 구기자, 의이인, 택사, 황기 추출액 각각 9%의 농도로 배추출액과 배합하여 시료로 사용하였다.
- 실험 기간은 총 10주간으로 디자인되었으며, 이 기간동안 고지방식이를 섭취하게 하였다. 실험동물은 1주간 실험실 환경에 적응시킨 후 고지방식이를 5주간 섭취하게 하여 일빈 식이를 먹인 동물에 비하여 비만을 유도한 후 대조군과 실험군(배·구기자배합투여군, 배·의이인배합투여군, 배·택사배합투여군, 배·황기배합투여군)으로 분리하여 군당 5마리씩 분류하였으며, 각 군별로 고지방식이 공급을 지속하면서 해당 약물을 4주간 투여하였다.
- 실험동물은 1주간 실험실 환경에 적응시킨 후 고지방식이를 5주간 섭취하게 하여 일빈 식이를 먹인 동물에 비하여 비만을 유도한 후 대조군과 실험군(배·구기자배합투여군, 배·의이인배합투여군, 배·택사배합투여군, 배·황기배합투여군)으로 분리하여 군당 5마리씩 분류하였으며, 각 군별로 고지방식이 공급을 지속하면서 해당 약물을 4주간 투여하였다.
- 원심분리 후 얻어진 혈청을 활용하여 Total cholesterol은 Cholesterol-SL Kit(ELITech, France)에 반응시킨 후 photometer(5010, Robert Riele GmbH &Co. Germany)를 이용하여546 nm파장에서 측정하였으며, HDL-cholesterol은 HDL-C-SL Kit(ELITech, France)에 반응시킨 후 photometer(5010, Robert Riele GmbH &Co. Germany)를 이용하여 546 nm파장에서 측정하였으며, LDL-cholesterol(Direct)은 LDL-cholesterol Kit(Daichi, Japan)에 반응시킨 후 photometer(5010, Robert Riele GmbH &Co. Germany)를 이용하여 700 nm 파장에서 측정하였으며, Triglyceride는 Triglyceride-SL Kit(ELITech, France)에 반응시킨 후 photometer(5010, Robert Riele GmbH &Co. Germany)를 이용하여 505 nm파장에서 측정하였으며, Free fatty acid는 Sicdia nefazyme Kit(영연 화학, 한국)을 사용하여 측정하였다.
- 체중은 매주 각 군의 개체별로 주 2회 측정하였으며, 섭취량은 약물 투여 4주 동안 주 2회 측정하였다. 식이효율(EF : Food Efficiency)은 실험기간 중의 총 사료 섭취량에 대한 체중의 증가량의 비로써 다음 식에 따라 계산하였다.
- 추출된 즙액의 수율은 약 60~65%로 약 216~234 리터를 얻었다. 추출된 즙액을 수조에 넣었고 여기에 Platycodon grandiflours(korea) 22.5 kg(배 중량의 6.25%)을 세척하여 담구었고, 이를 95~98℃에서 3시간 숙성시켰으며, 잔사는 여별한 후 여과기를 거쳐 청정한 즙액을 얻었다. 배합 약물의 추출은 Lycii Fructus(Korea), Coicis Semen(Korea), Alimatis Rhizoma(Korea), Astragali Radix(Korea) 각각 100 g을 증류수 1,000 ml에 넣어 180분간 약탕기로 전탕하였고, 잔사를 여별하고 추출액을 얻었으며, 추출액의 최종 양은 1,000 ml으로 맞추었다.
대상 데이터
- 공시 동물로서는 체중이 약 180~200g의 Sprague Dawley계의 흰쥐(샘타코(주), 한국)를 항온항습 환경의 사육장(실내온도 24~26 ℃, 습도 40~50%)내에서 12시간 간격으로 명암유지를 하였으며, 고형사료(Pellet, GMO, 한국)와 물을 충분히 공급하면서 1주일 이상 실험실 환경에 적응시킨 후 실험에 사용하였다.
- 배합 약물의 추출은 Lycii Fructus(Korea), Coicis Semen(Korea), Alimatis Rhizoma(Korea), Astragali Radix(Korea) 각각 100 g을 증류수 1,000 ml에 넣어 180분간 약탕기로 전탕하였고, 잔사를 여별하고 추출액을 얻었으며, 추출액의 최종 양은 1,000 ml으로 맞추었다. 구기자, 의이인, 택사, 황기 추출액 각각 9%의 농도로 배추출액과 배합하여 시료로 사용하였다.
- 배추출물 시료의 준비는 나주배돌이(영)의 설비를 활용하였으며, 나주산 신고배 18 box(1 box=20 kg) 360 kg을 세척하였고, 이를 분쇄기를 이용하여 분쇄한 후 압착기를 이용하여 즙을 추출하고, 잔사는 여별하였다. 추출된 즙액의 수율은 약 60~65%로 약 216~234 리터를 얻었다.
데이터처리
- 0 version for windows를 사용하였다. 각 군간의 통계학적 분석은 ANOVA test를 시행하였고, 측정 시기에 따른 차이를 검정하기 위하여 paired t-test를 시행하였다. 실험의 분석에서 유의수준은 p<0.
성능/효과
- 1. 체중변화에 있어서 대조군에 비하여 배·구기자배합투여군과 배·의이인배합투여군의 1주째와 2주째에 유의한 감소를 나타내었고, 배·택사배합투여군과 배․황기배합투여군의 1주째에 유의한 감소를 타내었다.
- 2. 식이섭취량의 경우 대조군에 비하여 실험군 모두 유의한 감소를 나타내었고, 증체량과 식이효율의 경우 배·구기자 배합투여군에서 감소의 경향을 나타내었다.
- 3. 지질대사에 있어서 대조군에 비하여 total cholesterol의 경우 배·의이인배합투여군이 유의한 감소를 나타내었고, LDL-cholesterol의 경우 배·의이인배합투여군이 유의한 감소를 나타내었고, free fatty acid의 경우 배·의이인배합투여군과 배·황기배합투여군이 유의한 감소를 나타내었다.
- 4. IL-1β의 경우 대조군에 비하여 배·의이인배합투여군과 배·황기배합투여군이 유의한 감소를 나타내었고, TNFα와 IL-6의 경우 대조군에 비하여 각 실험군은 비슷한 수치를 나타내었다.
- triglyceride의 경우 배·의이인배합투여군과 배·황기배합투여군이 유의성은 없었으나 감소를 나타내었고, free fatty acid의 경우 배·택사배합투여군을 제외한 나머지 군들은 감소의 경향을 나타내었으며, 특히 배·의이인배합투여군과 배·황기배합투여군에서 유의한 감소를 나타내었다.
- 또한 free fatty acid 함량변화의 경우 3%로 배합한 배·택사배합투여군이 유의한 감소를 나타내었으나, 9%의 경우 배·의이인배합투여군과 배·황기배합투여군이 유의성을 나타낸 것으로 보아 택사 배합군은 3% 의이인과 황기 배합군은 9%의 함량이 유효함을 확인할 수 있었다.
- 배 추출물에 한약재 구기자, 의이인, 택사, 황기를 증류수로 추출한 용액을 각각 9%씩을 배합시켜 고지방 식이로 유도한 비만 흰쥐에 4주 동안 투여하여 변화를 관찰하였으며, 체중 및 식이관련 지표에 있어서는 Fig 1과 Table 1, 2에서와 같이 체중변화의 경우 대조군에 비하여 배․구기자배합투여군과 배·의이인배합투여군의 1주째와 2주째에 유의한 감소를 나타내었는데 이는 식이초반에 사용되는 약재의 효과가 나타났으나 시간이 지나가면서 내성 및 식성이 변화하지 않은 것으로 사료된다.
- 배추출물에 구기자, 의이인, 택사, 황기 각 추출물 9% 배합한 제제의 투여가 증체량, 식이섭취량, 식이효율에 미치는 영향을 관찰한 결과, 증체량의 경우 대조군에 비하여 배․구기자배합투여군에서 유의성은 없었으나 감소의 경향을 나타내었고, 식이섭취량의 경우 대조군에 비하여 실험군 모두 유의한 감소를 나타내었고, 식이효율의 경우 대조군에 비하여 배․구기자배합투여군에서 유의성은 없었으나 감소의 경향을 나타내었다(Table 2).
- 배추출물에 구기자, 의이인, 택사, 황기 각 추출물 9% 배합한 제제의 투여가 체중변화에 미치는 영향을 관찰한 결과, 대조군은 각 주별로 완만하게 증가하는 변화 추이를 나타내었으며, 대조군에 비하여 배·구기자배합투여군과 배·의이인배합투여군의 1주째와 2주째에 유의한 감소를 나타내었고, 배·택사배합투여군과 배·황기배합투여군의 1주째에 유의한 감소를 타내었으며, 실험군 모두 실험기간동안 대조군에 비하여 감소된 경향을 유지하였다(Fig. 1, Table 1).
- 배추출물에 구기자, 의이인, 택사, 황기 각 추출물 9% 배합한 제제의 투여가 혈청 TNF-α, IL-1β, IL-6 함량에 미치는 영향을 관찰한 결과, TNF-α의 경우 대조군에 비하여 각 실험군은 비슷한 수치를 보였으며, IL-1β의 경우 대조군에 비하여 배·의이인배합투여군과 배·황기배합투여군이 유의한 감소를 나타내었으며, IL-6의 경우 대조군에 비하여 배·구기자배합투여군과 배·황기배합투여군은 유의한 차이는 없었으나 감소의 경향을 나타내었다(Table 4).
- 배추출물에 구기자, 의이인, 택사, 황기 각 추출물 9% 배합한 제제의 투여가 혈청 지질 변화에 미치는 영향을 관찰한 결과, total cholesterol의 경우 대조군에 비하여 배·의이인 배합투여군이 유의한 감소를 나타내었고, HDL-cholesterol의 경우 대조군에 비하여 배·황기배합투여군이 유의성은 없었으나 증가의 경향을 나타내었고, LDL-cholesterol의 경우 대조군에 비하여 배·의이인배합투여군이 유의한 감소를 나타내었고, triglyceride의 경우 대조군에 비하여 배·의이인배합 투여군과 배·황기배합투여군이 유의성은 없었으나 감소의 경향을 나타내었고, free fatty acid의 경우 대조군에 비하여 배·의이인배합투여군과 배·황기배합투여군이 유의한 감소를 나타내었다(Table 3).
- 이 결과로 소량의 택사 배합비가 더욱 효과적임을 알 수 있었으며, 배·구기자배합투여군과 배·의이인배합투여군 및 배·황기배합투여군은 약재의 함량이 높을수록 유의한 효과를 나타내는 것을 확인할 수 있었다.
- 증체량의 경우 대조군에 비하여 배·구기자배합투여군에서 유의성은 없었으나 감소의 경향을 나타내었고, 식이섭취량의 경우 대조군에 비하여 실험군 모두 유의한 감소를 나타내었고, 식이효율의 경우 대조군에 비하여 배·구기자배합투여군에서 유의성은 없었으나 감소의 경향을 나타내었다. 이는 3%의 식이섭취량의 경우 구기자배합투여군과 택사배합투여군만이 유의한 감소를 보였는데, 9%의 경우 모든 투여군에서 유의성을 나타낸 것으로 보아 약재의 함량이 높을수록 식욕 억제 효과를 보임을 알 수 있었다. 혈청지질 지표에 있어서는 Table 3에서와 같이 total cholesterol, LDL-cholesterol, free fatty acid 경우 배·의이인배합투여군이 유의한 감소를 나타내었으며, HDL-cholesterol의 경우 유의성은 없었으나 감소의 경향을 나타내었다.
- 이는 3%의 의이인 배합시 IL-1β 함량변화와 비슷한 유의성을 나타낸 것으로 보아 의이인은 3% 이상의 농도에서 면역반응에 유효하게 영향을 미치는 것을 알 수 있었으며, 황기배합물의 경우 함량비가 높을수록 면역반응에 유의성을 나타냄을 알 수 있었다.
- 이상의 결과로 보아 체중증가를 억제시키고 또한 식이섭취량을 억제하면서 지질대사를 활성화시키는 작용에 있어서는 배 추출물에 구기자 9%를 배합하는 것이 효과적이고, 면역 기능 및 항염 작용 증진에는 배 추출물에 의의인, 황기 9%를 배합하는 것이 효과적인 것으로 사료된다.
- 본 연구에서는 이런 약물의 부작용을 최소화 하면서 쉽게 접할 수 있는 배추출물의 기능성을 강화하고, 배추출물과 배합하기에 적합한 약재의 선정을 위한 목적으로 利水滲濕의 약재인 薏苡仁, 澤瀉, 그리고 補益强壯 약재인 枸杞子, 黃芪를 선택하여 이들 추출액의 농도에 따른 효과를 관찰하고자 하였다. 이전 실험에서 배추출물에 구기자, 의이인, 택사, 황기각 추출물 3% 배합 제제의 유효성을 확인한 바, 체중증가를 억제시키고, 식이섭취량을 억제하면서 지질대사를 활성화시키는 작용은 배 추출물에 택사 3%를 배합하는 것이 효과적이었고, 면역 기능 및 항염 작용 증진에는 배 추출물에 의의인 3%를 배합하는 것이 효과적임이 관찰되었고, 한약재 추출물의 농도를 상승시켜 비교하는 것이 필요함을 제기하였다. 이에 본 연구에서는 구기자, 의이인, 택사, 황기 추출물의 배합비를 향상시켜서, 즉 배추출물에 구기자, 의이인, 택사, 황기 추출물 9% 농도로 배합한 제제의 효과를 체중변화, 혈청 지질대사, 면역기능 지표를 통하여 관찰하고자 하였다.
- 증체량의 경우 대조군에 비하여 배·구기자배합투여군에서 유의성은 없었으나 감소의 경향을 나타내었고, 식이섭취량의 경우 대조군에 비하여 실험군 모두 유의한 감소를 나타내었고, 식이효율의 경우 대조군에 비하여 배·구기자배합투여군에서 유의성은 없었으나 감소의 경향을 나타내었다.
- 혈청지질 지표에 있어서는 Table 3에서와 같이 total cholesterol, LDL-cholesterol, free fatty acid 경우 배·의이인배합투여군이 유의한 감소를 나타내었으며, HDL-cholesterol의 경우 유의성은 없었으나 감소의 경향을 나타내었다.
※ AI-Helper는 부적절한 답변을 할 수 있습니다.