[논문]HaCaT 피부각질세포에서 들깻잎 추출물의 산화적 스트레스에 대한 항산화 효과

지나; 송가락; 길정하; 박건영

doi:10.3746/jkfn.2013.42.2.161

HaCaT 피부각질세포에서 들깻잎 추출물의 산화적 스트레스에 대한 항산화 효과
Protective Effects of Perilla frutescens Britt var. japonica Extracts from Oxidative Stress in Human HaCaT Keratinocytes 원문보기

한국식품영양과학회지 = Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition, v.42 no.2, 2013년, pp.161 - 167

지나 (부산대학교 식품영양학과 및 김치연구소) , 송가락 (부산대학교 식품영양학과 및 김치연구소) , 길정하 (부산대학교 식품영양학과 및 김치연구소) , 박건영 (부산대학교 식품영양학과 및 김치연구소)

초록
AI-Helper

들깻잎 메탄올추출물(PLME)이 가지는 산화적 스트레스 개선효과를 확인하기 위하여 $H_2O_2$으로 유도된 산화적 스트레스에 대한 HaCaT 피부 각질세포의 보호효과를 조사하였다. 또한 PLME의 항산화 능력을 확인하기 위하여 DPPH, hydroxyl free radical 소거능 및 총 항산화물질(페놀류, 플라보노이드류 및 아스코르브산) 함량을 조사하였다. $H_2O_2$(500 ${\mu}M$)에 의한 산화적 스트레스가 유발된 HaCaT세포에 PLME를 처리한 결과, 농도 의존적으로 세포의 생존율이 증가하였고, 세포 지질과산화물질 MDA의 생성효과는 PLME 처리에 의해 유의적으로 감소하는 것을 관찰하였다. 또한 $H_2O_2$로 인하여 세포내 항산화효소인 SOD, GSH-px와 CAT 등의 활성이 감소된 HaCaT세포에 PLME를 처리했을 때, 이들 효소의 활성이 농도 의존적으로 증가되었다. PLME의 DPPH와 hydroxyl radical 소거능을 측정한 결과, 농도 의존적으로 radical 소거능이 증가함을 알 수 있었다. 50 ${\mu}g/mL$ 이상 농도의 PLME의 DPPH 소거능은 60%의 저해율을 나타낸 천연항산화제인 아스코르브산(50 ${\mu}g/mL$)과 유사한 효과를 보였고, ${\cdot}OH$ radical 소거능은 아스코르브산(50 ${\mu}g/mL$)보다 높은 결과를 나타냈다. 또한 PLME가 함유하고 있는 항산화물질인 폴리페놀류, 플라보노이드류, 아스코르브산의 함량을 측정한 결과 총 페놀류화합물은 $52.2{\pm}1.1$ mg GAE/g, 총 플라보노이드화합물은 $33.7{\pm}4.7$ mg RUE/g, 아스코르브산의 함량은 $17.0{\pm}0.5$ mg AA/g으로 나타났다. HaCaT 세포에서 $H_2O_2$에 의해 발생하는 산화적 스트레스에 대한 보호 효과를 측정한 결과 PLME는 세포 사멸을 방지하고, 세포 지질과산화물질(MDA)의 생성을 억제하여 세포내 항산화효소의 활성을 증가시키는 효과를 가지는 것으로 보인다. 이상의 결과로 들깻잎 메탄올추출물은 인체 피부각질 세포에 대한 보호 작용과 in vitro에서의 항산화 능력이 있는 것으로 확인되었다.

Abstract ▼ AI-Helper

The aim of this study was to investigate the protective effects of methanolic extract from perilla (Perilla frutescens Britt var. japonica) leaves (PLME) on oxidative injury from hydrogen peroxide ($H_2O_2$) in human HaCaT keratinoctyes. Cells were co-incubated with various concentrations (0~200 ${\mu}g/mL$) of PLME for 24 hr, and then exposed to $H_2O_2$ (500 ${\mu}M$) for 4 hr. $H_2O_2$ significantly decreased cell viability (p<0.05). However, PLME provided protection from $H_2O_2$-induced HaCaT cell oxidation in a dose-dependent manner. To further investigate the protective effects of PLME on $H_2O_2$-induced oxidative stress in HaCaT cells, the cellular levels of lipid peroxidation, and antioxidant enzymes (including superoxide dismutase (SOD), glutathione peroxidase (GSH-px) and catalase (CAT)) were measured. PLME decreased cellular levels of lipid peroxidation, and also increased the activities of antioxidant enzymes. In addition, the antioxidant activities of PLME were also determined by DPPH and hydroxyl (${\cdot}OH$) radical scavenging assay, and major antioxidant compounds of PLME were measured by colorimetric methods. DPPH and ${\cdot}OH$ radical scavenging activities of PLME increased in a dose dependent manner and was similar to the DPPH scavenging activity of ascorbic acid at 50 ${\mu}g/mL$; however PLME activities were stronger than ascorbic acid (50 ${\mu}g/mL$) in the ${\cdot}OH$ scavenging assay. The amounts of antioxidant compounds, including total polyphenolics, total flavonoids, and total ascorbic acid from PLME were $52.2{\pm}1.1$ mg gallic acid (GAE)/g, $33.7{\pm}4.7$ mg rutin (RUE)/g, and $17.0{\pm}0.5$ mg ascorbic acid (AA)/g, respectively. These results suggest that PLME has a strong free radical-scavenging activity and a protective effect against $H_2O_2$-induced oxidative stress in the keratinocytes.

주제어

AI 본문요약
AI-Helper

* AI 자동 식별 결과로 적합하지 않은 문장이 있을 수 있으니, 이용에 유의하시기 바랍니다.

문제 정의

이상과 같이 과거 연구에서 들깻잎의 항산화 효능에 대한 다양한 보고가 있어 왔으나 들깻잎의 피부미용에 대한 효능, 특히 피부의 전반적 노화의 억제에 대한 세부적인 연구는 거의 없다. 본 연구에서는 들깻잎 메탄올추출물의 피부각질 세포 보호작용 및 항산화 효과를 확인하기 위하여 인체 피부 각질세포인 HaCaT 세포에서 과산화수소(H₂O₂)로 유발된 산화적 스트레스의 감소효과를 측정하였다. 세포의 지질과산화물질인 MDA의 생성 억제효과를 관찰하고, 세포내에 항산화 효소(SOD, CAT 및 GSH-px)의 활성을 측정하였다.

제안 방법

24시간 배양이 끝난 후 산화적 스트레스를 유발하기 위해 세포 생존율을 감소시키는 것으로 알려져 있는 500 μM의 과산화수소를 처리하고 배양기에서 4시간 동안 방치하였다.
4)로 3번 세척하여 세포를 모아 sonication한 다음에 4℃, 10,000 rpm에서 약 15분간 원심분리 하였다. Bio-Rad protein assay kit를 이용하여 540 nm에서 세포내 단백질의 함량을 측정하고, 세포 상등액을 이용하여 항산화 효소의 활성을 측정하였다.
는 심근세포, 연골세포, 피부 섬유아세포 등 다양한 세포들의 세포자살을 유도한다(32). H₂O₂에 의한 세포 독성이 PLME 처리에 의해 감소되는지 확인하기 위하여 MTT assay 방법으로 정상군과 H₂O₂ 처리군, 그리고 H₂O₂ 처리와 함께 PLME를 농도별로 처리한 군을 비교하였다. PLME를 24시간 동안 HaCaT세포에 처리한 후 500 μM의 H₂O₂를 4시간 동안 처리하였다.
인체 유래 정상 피부각질세포 HaCaT는 피부 재생, 미백과 관련된 많은 실험에서 사용되고 있다(31). HaCaT 세포의 세포독성에 미치는 영향을 알아보기 위하여 PLME를 농도별로 처리하고, 24시간 배양한 후에 MTT assay 방법으로 세포의 생존율을 측정하였다. PLME는 50 μg/mL부터 200 μg/mL까지 약 90% 이상의 HaCaT 세포 생존율을 유지하였으며, 300 μg/mL 이상의 농도에서는 HaCaT 세포에 대해 독성 효과를 나타냈다(p<0.
HaCaT세포에 농도별로 PLME를 전처리한 후 H2O2(500 μM)로 산화스트레스를 유도한 다음 지질과산화 정도를 측정함으로써 PLME의 지질과산화 억제 효과를 검토하였다.
2 mL를 첨가하여, 37℃의 water bath에서 1시간 동안 반응시킨 후 420 nm에서 UV/VIS spectrophotometer를 이용하여 흡광도를 측정하였다. Rutin(RUN)(Sigma-Aldrich Co.)을 표준 물질로 하여 검량선을 작성한 후 총 플라보노이드 함량을 rutin 기준으로 환산하여 mg RUN/g 단위로 나타내었다.
들깻잎 메탄올추출물(PLME)이 가지는 산화적 스트레스 개선효과를 확인하기 위하여 H₂O₂으로 유도된 산화적 스트레스에 대한 HaCaT 피부 각질세포의 보호효과를 조사하였다. 또한 PLME의 항산화 능력을 확인하기 위하여 DPPH, hydroxyl free radical 소거능 및 총 항산화물질(페놀류, 플라보노이드류 및 아스코르브산) 함량을 조사하였다.
으로 유도된 산화적 스트레스에 대한 HaCaT 피부 각질세포의 보호효과를 조사하였다. 또한 PLME의 항산화 능력을 확인하기 위하여 DPPH, hydroxyl free radical 소거능 및 총 항산화물질(페놀류, 플라보노이드류 및 아스코르브산) 함량을 조사하였다. H₂O₂(500μM)에 의한 산화적 스트레스가 유발된 HaCaT세포에 PLME를 처리한 결과, 농도 의존적으로 세포의 생존율이 증가하였고, 세포 지질과산화물질 MDA의 생성효과는 PLME 처리에 의해 유의적으로 감소하는 것을 관찰하였다.
또한 들깻잎 메탄올추출물의 DPPH 및 ∙OH free radical 소거효과, 항산화 작용의 중요한 성분인 총 폴리페놀, 총 플라보노이드와 아스코르브산 함량을 조사하였다.
산화적 스트레스 요인에 의한 세포 손상 보호효과는 MTT 법을 변형하여 측정하였다. 먼저 HaCaT 세포를 96 well plate에 1×10⁴ cell/mL 분주한 후, 배양기(37℃, 5% CO₂)에서 24시간 동안 방치하여 세포를 부착시켰다.
세포내에 항산화 효소는 superoxide dismutase(SOD), catalase(CAT) 및 glutathione peroxidase(GSH-px)의 활성을 측정하였다. 세포에 농도별로 PLME를 처리하고 24시간 배양시킨 다음, 500 μM의 과산화수소를 처리하여 4시간 방치하고, 세포 배양액을 제거한 후 0.
의 배양기(Model 3154, Forma Scientific Inc, Marietta, OH, USA)에서 배양하였다. 세포는 T75 세포 배양용 flask(Nunc, Rochester, NY, USA)의 80% 정도 자랐을 때 세포의 탈착을 위하여 PBS로 가볍게 세척한 다음, 0.05% typsin-0.02% EDTA(Gibco BRL)를 처리한 후, 37℃에서 5분간 방치한 후 세포를 채집하였다. 계대 배양은 2～3일에 한 번씩 시행하였다.
본 연구에서는 들깻잎 메탄올추출물의 피부각질 세포 보호작용 및 항산화 효과를 확인하기 위하여 인체 피부 각질세포인 HaCaT 세포에서 과산화수소(H₂O₂)로 유발된 산화적 스트레스의 감소효과를 측정하였다. 세포의 지질과산화물질인 MDA의 생성 억제효과를 관찰하고, 세포내에 항산화 효소(SOD, CAT 및 GSH-px)의 활성을 측정하였다. 또한 들깻잎 메탄올추출물의 DPPH 및 ∙OH free radical 소거효과, 항산화 작용의 중요한 성분인 총 폴리페놀, 총 플라보노이드와 아스코르브산 함량을 조사하였다.
시료의 메탄올추출물 g당 총 폴리페놀 함량은 Folin-Ciocalteu 시약(Sigma-Aldrich Co., St. Louis, MO, USA)을 이용하여 측정하였다(28). 추출물 희석액 0.
를 첨가하여 Fenton 반응에 따라 37℃에서 4시간 동안 배양하였다. 이 혼합액에 2.8% TCA 1.0 mL와 1.0 mL의 1.0% TBA 용액을 첨가하여 100℃ water bath에서 10분간 반응시킨 다음 냉각시킨 후 532 nm에서 UV/VIS spectrophotometer를 사용하여 홉광도를 측정하였다.
이상의 결과로 보아 적당한 농도(50～200 μg/mL)의 PLME는 HaCaT 세포에 대해 독성을 나타내지 않았으며, 따라서 다음에 진행된 실험에서는 50 μg/mL부터 200 μg/mL까지의 PLME를 사용하였다.

대상 데이터

본 실험에서 사용한 들깻잎은 경상남도 밀양 농수산물 시장에서 신선한 상태로 구입하여 실험하였다. 동결건조 된 들깻잎 10 g에 메탄올 200 mL를 가하여 24시간 동안 교반하고, 이를 3회 반복한 후 filter paper(Roshi Kaisha, Ltd.
실험에 사용된 세포주는 인체 유래 피부 keratinocyte인 HaCaT 세포주(조선대학교 단백질소재연구센터에서 제공받음)로 Dulbecco's modified Eagle medium(DMEM, Gibco BRL, Paisley, UK)에 10%(v/v) fetal bovine serum(FBS, Gibco BRL)과 항생제를 첨가한 후 37℃, 5% CO2의 배양기(Model 3154, Forma Scientific Inc, Marietta, OH, USA)에서 배양하였다.

데이터처리

대조군과 각 시료로부터 얻은 실험 결과들의 유의성을 검정하기 위하여 분산분석(ANOVA)을 행한 후 p<0.05 수준에서 Duncan's multiple range test를 실시하였으며, 그 결과는 평균(mean)±표준편차(standard deviation, SD)로 표시하였다.
05 수준에서 Duncan's multiple range test를 실시하였으며, 그 결과는 평균(mean)±표준편차(standard deviation, SD)로 표시하였다. 모든 통계 분석은 Statistic Analysis System(v9.1 SAS Institute Inc., Cary, NC, USA) 통계프로그램을 이용하여 분석하였다.

이론/모형

효소활성의 1 unit는 반응액 중의 pryogallol의 산화를 50% 억제하는 효소의 양으로 계산하였다. CAT 활성도의 측정은 과산화수소를 기질로 사용하여 spectrophotometer로 240 nm 파장에서 과산화수소가 환원되어 감소하는 흡광도로써 효소 활성을 측정하는 Nelson과 Kiesow(24)의 방법에 의하여 측정하였다. 효소 활성도의 단위는 1분간에 1 mg의 단백질이 반응하여 환원시킨 과산화수소를 nmol로 나타내었다.
효소 활성도의 단위는 1분간에 1 mg의 단백질이 반응하여 환원시킨 과산화수소를 nmol로 나타내었다. GSH-px 활성도는 Lawrence와 Burk(25)의 방법에 따라 340 nm에서 NADPH의 산화로 인한 흡광도 감소율로 측정하였다. GSH-px 활성1 unit은 1분당 1 unit의 NADPH가 산화되는 효소의 양으로 나타내었다.
Hydroxyl free radical(∙OH) 소거 효과는 Chung 등(27)의 방법에 따라 10 mM FeSO₄-ethylenediaminetetraacetic acid disodium salt(EDTA)에 10 mM의 2-deoxyribose와 여러 농도의 시료용액을 혼합한 다음, 10 mM의 H₂O₂를 첨가하여 Fenton 반응에 따라 37℃에서 4시간 동안 배양하였다. 이 혼합액에 2.
SOD는 pyrogallol의 자동 산화율이 억제되는 양을 측정하는 Marklund와 Marklund(23)의 방법으로 측정하였으며, 50 mM PBS(pH 8.2) 8.7 mL에 세포 상등액을 넣은 후 0.3 mL의 3 mM pryogallol 용액을 첨가하여 UV/VIS spectrophotometer(UV-2401PC, Shimadzu, Kyoto, Japan)를 이용해 325 nm에서 흡광도를 측정하였다. 효소활성의 1 unit는 반응액 중의 pryogallol의 산화를 50% 억제하는 효소의 양으로 계산하였다.
들깻잎 추출물이 세포 생존율에 미치는 영향을 측정하기 위해 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyl-2H-tetrazolium bromide(MTT) assay(21)를 수행하였다. 96 well plate(Nunc)에 1×10⁴ cell/mL의 농도로 HaCaT 세포를 분주하여 배양기(37℃, 5% CO₂)에서 24시간 동안 pre-incubation시킨 후 농도별로 추출물을 처리하여 24시간 배양하였다.
시료의 메탄올추출물 g당 아스코르브산 함량은 2,6-dichlorophenolindophenol(DCPIP) 비색법(30)을 이용하여 정량하였다. 추출물 0.
시료의 메탄올추출물 g당 총 플라보노이드 함량은 diethylene glycol 비색법(29)을 이용하여 정량하였다. 추출물 희석액 0.
지질과산화물은 세포의 산화적 스트레스로 인한 손상의 증거로 지질과산화의 반응생성물인 MDA를 triobarbituric acid reactive substance(TBARS)법으로 측정하여 PLME의 산화적 스트레스로 유발된 지질과산화 억제 효과를 확인하였다. HaCaT세포에 농도별로 PLME를 전처리한 후 H₂O₂(500 μM)로 산화스트레스를 유도한 다음 지질과산화 정도를 측정함으로써 PLME의 지질과산화 억제 효과를 검토하였다.

성능/효과

50 μg/mL 이상 농도의 PLME의 DPPH 소거능은 60%의 저해율을 나타낸 천연항산화제인 아스코르브산(50 μg/mL)과 유사한 효과를 보였고, OH radical 소거능은 아스코르브산(50 μg/ mL)보다 높은 결과를 나타냈다.
H2O2(500μM)에 의한 산화적 스트레스가 유발된 HaCaT세포에 PLME를 처리한 결과, 농도 의존적으로 세포의 생존율이 증가하였고, 세포 지질과산화물질 MDA의 생성효과는 PLME 처리에 의해 유의적으로 감소하는 것을 관찰하였다.
5 mg AA/g으로 나타났다. HaCaT 세포에서 H₂O₂에 의해 발생하는 산화적 스트레스에 대한 보호 효과를 측정한 결과 PLME는 세포 사멸을 방지하고, 세포 지질과산화물질(MDA)의 생성을 억제하여 세포내 항산화효소의 활성을 증가시키는 효과를 가지는 것으로 보인다. 이상의 결과로 들깻잎 메탄올추출물은 인체 피부각질 세포에 대한 보호 작용과 in vitro에서의 항산화 능력이 있는 것으로 확인되었다.
HaCaT세포에 H2O2(500 μM)를 처리한 군에서는 세포 생존율이 49%로 정상군에 비해 세포손상이 유발되었음을 확인할 수 있었다(p<0.05).
PLME가 함유하고 있는 항산화물질인 폴리페놀류, 플라보노이드류, 아스코르브산의 함량을 측정한 결과, 총 페놀류 화합물은 52.2±1.1 mg GAE/g, 총 플라보노이드 화합물은 33.7±4.7 mg RUE/g, 아스코르브산의 함량은 17.0±0.5 mg AA/g으로 나타났다(Table 2).
4와 같다. PLME는 농도 의존적으로 DPPH free radical 소거능이 증가함이 관찰되었다. 특히 천연 항산화제인 아스코르브산(50 μg/mL)은 DPPH radical 소거능이 약 60%로 나타났는데, PLME(50～200 μg/ mL)는 아스코르브산(50 μg/mL)과 비슷한 효과를 보였다.
또한 H₂O₂로 인하여 세포내 항산화효소인 SOD, GSH-px와 CAT 등의 활성이 감소된 HaCaT세포에 PLME를 처리했을 때, 이들 효소의 활성이 농도 의존적으로 증가되었다. PLME의 DPPH와 hydroxyl radical 소거능을 측정한 결과, 농도 의존적으로 radical 소거능이 증가함을 알 수 있었다. 50 μg/mL 이상 농도의 PLME의 DPPH 소거능은 60%의 저해율을 나타낸 천연항산화제인 아스코르브산(50 μg/mL)과 유사한 효과를 보였고, OH radical 소거능은 아스코르브산(50 μg/ mL)보다 높은 결과를 나타냈다.
그러나 PLME 를 농도별로 처리한 결과, 50 μg/mL에서 11.1±0.1 unit/mg protein 수준으로 SOD 활성이 회복되었으며, 농도가 100, 150, 200으로 증가됨에 따라 H2O2 처리군과 대조하여 그 활성의 회복 정도가 농도 의존적이면서 유의적(p<0.05)으로 증가되었다.
따라서 본 연구에서 HaCaT세포에 농도별로 PLME를 전처리한 후 H2O2(500 μM)를 처리하였을 때 H2O2 처리군에 비해 유의적(p<0.05)으로 감소하여 세포손상에 의한 지질과산화물 생성이 PLME 처리에 의해 억제되었음을 알 수 있었다(Fig. 3).
1μmole/mg protein/min 수준으로 H₂O₂ 처리군에 비해 증가하였다. 따라서 본 연구에서는 HaCaT세포에 H₂O₂를 처리하였을 때 SOD, CAT 및 GSH-px 등 항산화 효소들의 활성이 떨어졌으나 PLME를 동시에 처리하였을 때에는 모든 항산화 효소의 활성이 회복되어 산화적 스트레스가 유발된 세포의 손상이 완화되었다.
또한 PLME가 함유하고 있는 항산화물질인 폴리페놀류, 플라보노이드류, 아스코르브산의 함량을 측정한 결과 총 페놀류화합물은 52.2±1.1 mg GAE/g, 총 플라보노이드화합물은 33.7±4.7 mg RUE/g, 아스코르브산의 함량은 17.0±0.5 mg AA/g으로 나타났다.
HaCaT 세포에서 H₂O₂에 의해 발생하는 산화적 스트레스에 대한 보호 효과를 측정한 결과 PLME는 세포 사멸을 방지하고, 세포 지질과산화물질(MDA)의 생성을 억제하여 세포내 항산화효소의 활성을 증가시키는 효과를 가지는 것으로 보인다. 이상의 결과로 들깻잎 메탄올추출물은 인체 피부각질 세포에 대한 보호 작용과 in vitro에서의 항산화 능력이 있는 것으로 확인되었다.
이에 비해 100 μg/mL에서 2.1±0.4 μmole/mg protein/min 수준으로 CAT 활성이 회복되었으며 150 μg/mL와 200 μg/mL 처리군에서 그 회복 정도가 농도 의존적이면서 유의적(p<0.05)으로 증가하였다.
정상군의 MDA 생성량은 0.63±0.07 nM/mg protein인데 비하여 H2O2처리군은 1.36±0.03 nM/mg protein으로 나타나 정상군에 비해 2.2배 이상 높았다.
특히 200 μg/mL에서 81%로 정상군에 가까운 세포 생존율을 나타내어 H2O2에 의한 산화적 스트레스로 유발된 세포 손상에 대한 PLME의 보호효과를 확인할 수 있었다(Fig. 2).
특히 50 μg/mL 이상 농도에서 PLME의 ∙OH radical 소거 능력은 50 μg/mL의 천연 항산화제인 아스코르브산의 OH radical 소거능(34%)과 비교하였을 때 높게 나타났다.

후속연구

또한 Lee 등(15)의 연구 결과에서는 PLME은 in vitro에서 H₂O₂와 FeSO₄로 유발된 ICR 마우스의 간 조직에서 MDA의 생성 억제 효과를 가진다고 보고하였다. 따라서 깻잎은 항산화효과를 나타내므로 산화와 관련된 여러 가지 퇴행성 질병의 예방에 도움을 줄 것으로 생각된다.
3 mg/g)와 비슷하게 나타났다. 따라서 이러한 항산화물질(폴리페놀류, 플라보노이드류, 아스코르브산)을 많이 함유하고 있는 들깻잎을 이용하여 식품이나 의약품, 화장품 등 많은 분야에 활용될 수 있을 것으로 사료된다.

질의응답

핵심어	질문	논문에서 추출한 답변
	인체 피부의 구성 요소는?	인체 피부는 표피, 진피, 피하조직으로 구성되어 있으며, 이 중 표피에 있는 각질세포(keratinocytes)는 외부 자극(화학적 및 물리적)으로부터 신체를 보호하고, 체온 조절, 보습 유지 등의 작용을 한다. 하지만 각질세포는 이런 외부 자극에 의해 세포내에 산화적 스트레스(oxidative stress)를 일으킨다.
	각질세포의 역할은?	인체 피부는 표피, 진피, 피하조직으로 구성되어 있으며, 이 중 표피에 있는 각질세포(keratinocytes)는 외부 자극(화학적 및 물리적)으로부터 신체를 보호하고, 체온 조절, 보습 유지 등의 작용을 한다. 하지만 각질세포는 이런 외부 자극에 의해 세포내에 산화적 스트레스(oxidative stress)를 일으킨다.
	과량의 reactive oxygen species가 세포막에 미치는 영향은?	산화적 스트레스와 reactive oxygen species(ROS)는 다양한 기전을 통하여 암, 염증, 심장질환, 당뇨병, 비만 및 노화 등의 여러 가지 질병의 발생과 진행에 관여한다(1,2). 과산화수소는 직접적으로 피부 각질 세포 내에서 산화적 스트레스를 유발하며(3), 과량의 ROS는 세포막의 구성 성분인 불포화지방산을 공격하여 지질과산화물질인 malondialdehyde(MDA)를 생성한다. 세포 내에 많은 MDA가 축적되면 세포막에서 교차결합, 중합 및 변성이 일어나 이온 수송, 효소 활성 및 세포 표면의 부착상태를 변성시키며 DNA의 염기와 반응하여 돌연변이성 병변을 일으킨다고 알려져 있다(4).

참고문헌 (39)

Halliwell B, Gutteridge JM. 1985. The importance of free radicals and catalytic metal ions in human diseases. Mol Aspects Med 8: 89-193.

상세보기
Cross CE, Halliwell B, Borish ET, Pryor WA, Ames BN, Saul RL, McCord JM, Harman D. 1987. Oxygen radicals and human disease. Ann Intern Med 107: 526-545.

상세보기
Applegate LA, Noel A, Vile G, Frenk E, Tyrrell RM. 1995. Two genes contribute to different extents to the heme oxygenase enzyme activity measured in cultured human skin fibroblasts and keratinocytes: implications for protection against oxidant stress. Photochem Photobiol 61: 285-291.

상세보기
Fridovich I. 1986. Biological effects of the superoxide radical. Arch Biochem Biophys 247: 1-11.

상세보기
Lee KI, Rhee SH, Kim JO, Chung HY, Park KY. 1999. Anticancer activity of phytol and eicosatrienoic acid identified from perilla leaves. J Korean Soc Food Sci Nutr 28: 1107-1112.
Kim ES, Im KJ. 1977. A study on oxalic acid and calcium content in Korean foods. Korean J Nutr 4: 104-110.
Hyun KW, Kim JH, Song KJ, Lee JB, Jang JH, Kim YS, Lee JS. 2003. Physiological functionality in Geumsan perilla leaves from greenhouse and field cultivation. Korean J Food Sci Technol 35: 975-979.
Kim JY, Kim JS, Jung CS, Jin CB, Ryu JH. 2007. Inhibitory activity of nitric oxide synthase and peroxynitrite scavenging activity of extract of Perilla frutescens. Kor J Pharmacogn 38: 1-24.
Oh SI, Lee MS. 2003. Screening for antioxidative and antimutagenic capacities in 7 common vegetables taken by Korean. J Korean Soc Food Sci Nutr 32: 1344-1350.

원문보기 상세보기
Jo MJ, Min KJ. 2007. Antimicrobial activity against oral microbes and growth-inhibitory effect of oral tumor cell of extract of Perilla and Mugwort. Korean J Env Hlth 3: 115-122.
Park KY, Lee KI, Rhee SH. 1992. Inhibitory effect of greenyellow vegetables on the mutagenicity in Salmonella assay system and on the growth of AZ-521 human gastric cancer cells. J Korean Soc Food Nutr 21: 149-153.
Kwak CS, Yeo EJ, Moon SC, Kim YW, Ahn HJ, Park SC. 2009. Perilla leaf, Perilla frutescens, induces apoptosis and G1 phase arrest in human leukemia HL-60 cells through the combinations of death receptor-mediated, mitochondrial, and endoplasmic reticulum stress-induced pathways. J Med Food 12: 508-517.

원문보기 상세보기
Ueda H, Yamazaki C, Yamazaki M. 2003. Inhibitory effect of perilla leaf extract and luteolin on mouse skin tumor promotion. Biol Pharm Bull 26: 560-563.

상세보기
Banno N, Akihisa T, Tokuda H, Yasukawa K, Higashihara H, Ukiya M, Watanabe K, Kimura Y, Hasegawa J, Nishino H. 2004. Triterpene acids from the leaves of Perilla frutescens and their anti-inflammatory and antitumor-promoting effects. Biosci Biotechnol Biochem 68: 85-90.

상세보기
Lee KI, Rhee SH, Kim JO, Chung HY, Park KY. 1993. Antimutagenic and antioxidative effects of perilla leaf extracts. J Korean Soc Food Nutr 22: 175-180.
Saita E, Kishimoto Y, Tani M, Iizuka M, Toyozaki M, Sugihara N, Kondo K. 2012. Antioxidant activities of Perilla frutescens against low-density lipoprotein oxidation in vitro and in human subjects. J Oleo Sci 61: 113-120.

상세보기
Yamasaki K, Nakano M, Kawahata T, Mori H, Otake T, Ueba N, Oishi I, Inami R, Yamane M, Nakamura M, Murata H, Nakanishi T. 1998. Anti-HIV-1 activity of herbs in Labiatae. Biol Pharm Bull 21: 829-833.

상세보기
Okuda T, Hatano T, Agata I, Nishibe S. 1986. The components of tannic activities in Labiatae plants. I. Rosmarinic acid from labiatae plants in Japan. Yakugaku Zasshi 106: 1108-1111.

상세보기
Ueda H, Yamazaki C, Yamazaki M. 2002. Luteolin as an anti-inflammatory and anti-allergic constituent of Perilla frutescens. Biol Pharm Bull 25: 1197-1202.

상세보기
Ryu JH, Son HJ, Lee SH, Sohn DH. 2002. Two neolignans from Perilla frutescens and their inhibition of nitric oxide synthase and tumor necrosis factor- ${\alpha}$ expression in murine macrophage cell line RAW 264.7. Bioorg Med Chem Lett 12: 649-651.

상세보기
Park JG, Kramer BS, Steinberg SM, Carmichael J, Collins JM, Minna JD, Gazdar AF. 1987. Chemosensitivity testing of human colorectal carcinoma cell lines using a tetrazolium- based colorimetric assay. Cancer Res 47: 5875-5879.

상세보기
Fraga CG, Leibovitz BE, Tappel AL. 1988. Lipid peroxidation mearsured as thiobarbituric-reactive substance in tissue slices: characterization and comparison with homogenates and microsomes. Free Radical Biol Med 4: 155-161.

상세보기
Marklund S, Marklund G. 1974. Involvement of the superoxide anion radical in the antioxidation of pyrogallol and a convenient assay for superoxide dismutase. Eur J Biochem 47: 469-474.

상세보기
Nelson DP, Kiesow LA. 1972. Enthalpy of decomposition of hydrogen peroxide by catalase at 25 degrees (with molar extinction coefficients of $H_2O_2$ solutions in the UV). Anal Biochem 49: 474-478.

상세보기
Lawrence RA, Burk RF. 1976. Glutathione peroxidase activity in selenium-deficient rat liver. Biochem Biophys Res Commun 71: 952-958.

상세보기
Blois MS. 1958. Antioxidant determination by the use of a stable free radical. Nature 181: 1199-1200.

상세보기
Chung SK, Osawwa T, Kawakishi S. 1997. Hydroxyl radical scavenging effect of spices and scavengers form brown mustard (Brassica nigra). Biosci Biotechnol Biochem 61: 118-123.

상세보기
Velioglu YS, Mazza G, Cao L, Oomah BD. 1998. Antioxidant activity and total phenolics in selected fruits, vegetables and grain products. J Agric Food Chem 46: 4113-4117.

상세보기
NFRI. 1990. Manuals of quality characteristic analysis for food quality evaluation (2). National Food Research Institute, Skuba, Japan. p 61.
Klein BP, Perry AK. 1982. Ascorbic acid and vitamin A activity in selected vegetables from different geographical areas of the United States. J Food Sci 47: 941-945.

상세보기
Park HJ, Kim HJ, Lee JY, Cho BK, Gallo RL, Cho DH. 2007. Adrenocorticotropin hormone stimulates interleukin-18 expression in human HaCaT keratinocytes. J Invest Dermatol 127: 1210-1216.

상세보기
Yuan J, Murrell GC, Trickett A, Wang M. 2003. Involvement of cytochrome c release and caspase-3 activation in the oxidative stress-induced apoptosis in human tendon fibroblast. Biochim Biophysica Acta 1641: 35-41.

상세보기
Soare JR, Dinis TC, Cunha AP, Almeida LM. 1997. Antioxidant activities of some extracts of Thymus zygis. Free Radical Res 26: 469-478.

상세보기
Chou HJ, Kuo JT, Lin ES. 2009. Comparative antioxidant properties of water extracts from different parts of beefsteak plant (Perilla frutescens). J Food Drug Anal 17: 489-496.
Giovannini C, Scazzocchio B, Vari R, Santangelo C, D'Archivio M, Masella R. 2007. Apoptosis in cancer and atherosclerosis: polyphenol activities. Ann Ist Super Sanita 43: 406-416.

상세보기
Khan N, Afaq F, Saleem M, Ahmad N, Mukhtar H. 2006. Targeting multiple signaling pathways by green tea polyphenol(-)-epigallocatechin-3-gallate. Cancer Res 66: 2500-2505.

상세보기
Cushnie TP, Lamb AJ. 2005. Antimicrobial activity of flavonoids. Int J Antimicrob Agents 26: 343-356.

상세보기
Kim DH, Kim YC, Choi UK. 2011. Optimization of antibacterial activity of Perilla frutescens var. acuta leaf against Staphylococus aureus using evolutionary operation factorial design technique. Int J Mol Sci 12: 2395-2407.

상세보기
Meng L, Lozano YF, Gaydou EM, Li B. 2009. Antioxidant activities of polyphenols extracted from Perilla frutescens varieties. Molecules 14: 133-140.

상세보기

저자의 다른 논문 :

표제어: PCR

동의어: Packet Collision Rate

용어 설명 출처 목록 (6)

용어 설명: PCR은 세균 특이성이 있는 primer를 이용하여 적은 수의 세균이 있을지라도 쉽게 검출할 수 있는 유용한 방법이며, 이를 이용하여 구강 내 치면세균막이나 타액에서 직접 세균을 검출할 수 있게 되었다[8].

내보내기 구분	파일저장 인쇄 메일전송
구성항목	기본정보 상세정보 관리번호, 논문명, 저널/프로시딩명, 저자 , 발행년, 권, 호, 시작페이지, 끝페이지, 발행기관 관리번호, 논문명, 대등논문명, 저자 , 저널/프로시딩명, 발행기관, 발행년, 발행언어, 권, 호, 시작페이지, 끝페이지, ISBN, ISSN, 주제분야, 키워드, 초록(한글), 초록(영문), 저자(소속기관)
저장형식	Text(ASCII format) Excel format RefWorks Direct Export RIS format (for Reference Manager, ProCite, EndNote), Scholar's Aids, Mendeley
메일정보	받는사람 (필수) @ 보내는사람 (선택) @ 제목 내용 KISTI 검색결과 이메일 서비스
안내	총 건의 자료가 검색되었습니다. 다운받으실 자료의 인덱스를 입력하세요. (1-10,000) 검색결과의 순서대로 최대 10,000건 까지 다운로드가 가능합니다. 데이타가 많을 경우 속도가 느려질 수 있습니다.(최대 2~3분 소요) 다운로드 파일은 UTF-8 형태로 저장됩니다. 파일의 내용이 제대로 보이지 않을실 때는 웹브라우저 상단의 보기 -> 인코딩 -> 자동선택 여부를 확인하십시오. ~ Text(ASCII format) Excel format

연합인증