[논문]자외선 B에 유도된 사람유래 HaCaT cells에서의 오미자 종자 분획물의 항산화 및 항노화 효과

최은영; 손호용; 이진태

doi:10.5352/jls.2019.29.10.1071

자외선 B에 유도된 사람유래 HaCaT cells에서의 오미자 종자 분획물의 항산화 및 항노화 효과
The Antioxidant and Anti-aging Effects of Treatment with Schisandra chinensis Seeds Fractions in UVB-irradiated Human HaCaT Cells 원문보기

생명과학회지 = Journal of life science, v.29 no.10, 2019년, pp.1071 - 1079

최은영 (대구한의대학교 화장품약리학과) , 손호용 (안동대학교 식품영양학과) , 이진태 (대구한의대학교 화장품약리학과)

초록
AI-Helper

본 연구에서 우리는 오미자 종자 분획물의 항산화 활성과 자외선에 유도된 human HaCaT cell에서의 MMPs의 발현억제에 의한 항노화 효과를 조사하고자 하였다. 전자공여능, ABTS 라디칼 소거분석, 그리고 hydrogen peroxide 소거분석 실험을 통해, 오미자 종자의 분획물 중 에틸아세테이트 분획물(SCEAf)이 가장 우수한 라디칼 소거활성을 가졌고, collagenase 저해 활성 실험에서 SCEAf는 $500{\mu}g/ml$의 농도에서 92.3% 이상의 저해효과를 보였음을 확인하였다. SCEAf의 HaCaT cell에 대한 세포 독성을 확인하기 위해 MTT assay를 실시한 결과, SCEAf는 세포에 독성이 없음을 나타낼 뿐 아니라 UVB에 손상된 세포의 생존율을 증가시킴으로써 세포 활성에 도움을 주는 것을 확인할 수 있었다. SCEAf의 HaCaT cell에서의 항노화 효과를 조사하기 위해 UVB $50mJ/cm^2$에 유도된 HaCaT cell에 SCEAf를 처리한 후 MMP-1과 -3의 발현을 Western blotting과 reverse-transcription polymerase chain reaction으로 분석하였다. 그 결과 SCEAf가 MMP-1과 -3의 단백질과 mRNAs의 발현을 농도의존적으로 억제시켰다. 이러한 결과는 오미자 종자 에틸아세테이트 분획물이 자외선의 손상을 받은 피부 각질형성세포에서의 collageanse 활성을 억제하여 노화를 예방하고 증상을 완화시킬 것으로 기대할 수 있다. 이러한 결과를 바탕으로 우리는 오미자 종자가 화장품과 식품 산업에서 항노화 효과가 있는 기능성 원료로서 사용하기 위한 잠재성을 가질 것으로 기대한다.

Abstract ▼ AI-Helper

In this study, we investigated the antioxidant and anti-aging activities of Schisandra chinensis seed fractions by adding them to UVB-irradiated HaCaT cells and analyzing the suppression of matrix metalloproteinases (MMPs). An electron-donating assay, ABTS radical scavenging assay, and hydrogen peroxide scavenging assay showed that the ethyl acetate fraction of S. chinensis seed (SCEAf) has scavenging activities. A collagenase inhibition activity assay showed that SCEAf had inhibitory effects of over 92.3% at $500{\mu}g/ml$ concentration. An MTT assay was performed to determine the cytotoxicity of SCEAf in HaCaT cells and the results showed that SCEAf increased cellular viability in a concentration-dependent manner. In addition, SCEAf was found to increase the viability of cells irradiatged by UVB $50mJ/cm^2$. To examine the anti-aging effects of SCEAf on HaCaT cells irradiated with UVB $50mJ/cm^2$, the expression of MMP-1 and -3 was analyzed by Western blotting and reverse-transcription polymerase chain reaction. The results showed that MMP-1 and -3 proteins and mRNA levels were downregulated in a concentration-dependent manner in response to SCEAf. These results suggest that SCEAf can prevent aging and alleviate aging symptoms by inhibiting collagenase activity in skin keratinocytes damaged by UVB. Therefore, S. chinensis seeds may have the potential for use as functional ingredients with anti-aging effects in the cosmetic and food industries.

주제어

표/그림 (7)

그림 Fig. 1. Electron donating assay.
그림 Fig. 2. ABTS radical scavenging activity.
그림 Fig. 3. Hydrogen peroxide scavenging activity.
그림 Fig. 4. Collagenase inhibition activity.
그림 Fig. 5. Cell viability assay on Human HaCaT cells of Schisandra chinensis seeds.
그림 Fig. 6. Expression levels of MMP-1 and -3 on UVB-irradiated HaCaT cells from Schisandra chinensis seeds.
그림 Fig. 7. MMPs mRNA expression on UVB-irradiated HaCaT cells from Schisandra chinensis seeds.

AI 본문요약
AI-Helper

* AI 자동 식별 결과로 적합하지 않은 문장이 있을 수 있으니, 이용에 유의하시기 바랍니다.

문제 정의

오미자에 대한 다양한 연구에도 불구하고 아직까지 오미자 종자 분획물에 대한 항산화 및 주름억제 활성에 대한 연구에 대한 보고는 찾아볼 수 없었다. 따라서 본 연구에서는 오미자 종자의 분획물의 항산화 활성 및 항주름 활성을 확인하고 UVB에 유도된 사람 유래의 피부각질형성세포인 HaCaT cells에서 MMPs의 발현을 억제하는지를 확인하고자 하였으며 그 결과를 바탕으로 오미자 종자를 화장품과 식품 분야에서의 주름억제 기능성 소재로서의 활용가능성을 알아보고자 하였다.
5%의 결과를 보인 것과 비교하였을 때 유의할 만한 결과였으며, 또한 Lee 등[35]의 연구에서 청다래 에탄올추출물이 500 μg/ml에서 약 90%의 저해활성을 보인 것과 비교해서 우수한 결과임을 확인할 수 있었다. 이러한 결과를 바탕으로 우리는 SCEAf가 UVB에 조사된 사람유래 각질형성세포에서 활성화되는 MMP group을 얼마나 억제하는지를 확인하기로 하였다.

제안 방법

0.5 ml의 다양한 농도(50, 100, 500 및 1,000 μg/ml)의 시료를 0.5 ml의 과산화수소 용액과 37℃에서 10분간 반응시킨 후 230 nm에서 흡광도를 측정하였다.
A260/A280 비율을 사용하여 1.7~2.0의 순도인 total RNA를 추출하였으며 2 μg/μl의 농도로 정량하고 추출된 total RNA는 Transcriptor first Stand cDNA synthesis kit (Roche)를 이용하여 역전사를 진행시켜 cDNA를 합성시켰다.
Collagenase 저해활성 측정은 Cannell 등[5]의 방법을 변형하여 다음과 같이 측정하였다. 즉 반응구는 0.
MMP-1과 -3의 mRNA 발현에 미치는 영향을 관찰하기 위해 HaCaT cell을 100ϕ dish에 1×106 cells/well 이 되도록 분주하고 24시간 동안 안정화하였다.
RT-PCR 증폭으로 생산된 DNA는 0.5 μg/ ml의 ethidium bromide가 포함된 1% metaphor agarose gel에 전기영동하여 cooled CCD camera system EZ-Capture II 와 CA analyzer ver. 3.00 software (EZ-Capture MG)를 이용하여 mRNA의 발현 정도를 확인하였다.
각각의 HRP-conjugated secondary antibody (Santa Cruz Biotechnology, Inc.)를 희석하여 상온에서 1시간 동안 처리하고 다시 TBST로 10분간 교반하여 세척하는 과정을 3회 반복한 뒤 ECL 용액을 가한 후 Western imaging system (EZ-Capture MG, ATTO, NY, USA) 기기를 이용하여 밴드 확인 및 정량하였다.
본 실험에 사용한 오미자 종자는 경북 문경시의 오미자 가공회사(이젠하우스 자연미소 농장, 문경, 한국)로부터 성숙 오미자 열매를 착즙하고 난 후 회수된 종자를 흐르는 물에 과육 잔류물을 수작업으로 제거한 상태로 구입하여 사용하였다. 구입한 오미자 종자는 수분을 제거하고 분쇄기로 12 mesh 이하로 파쇄하였고 시료 중량의 10배의 70% 에탄올을 가하여 실온에서 24시간 침지하여 상층액과 침전물을 분리하여 동일한 방법으로 3회 반복 추출하였다. 추출물은 여과 및 감압농축 후 동결 건조하여 분말을 얻었으며 에탄올 추출물의 극성차를 이용하여 서로 다른 용매를 첨가하여 분획을 실시하였다.
다양한 농도(10, 50, 100 및 500 μg/ml)의 각 시료용액 100 μl에 0.2 mM의 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH, Sigma-Aldrich Co., MO, USA) 50 μl 넣어 잘 혼합한 후 암소에서 30분간 반응시킨 다음 517 nm에서 흡광도를 측정하였다.
다양한 농도(10, 50, 100 및 500 μg/ml)의 시료용액 100 μl와 ABTS solution 100 μl를 혼합하여 30초간 진탕한 후 1분간 상온에서 반응시키고 734 nm에서 흡광도를 측정하였다.
5%의 생존율을 나타내었고 농도의존적으로 생존율은 증가하였다. 또한 자극원으로 UVB를 조사해 준 뒤 SCEAf를 농도별로 처치한 후의 세포 생존율을 확인(Fig. 5B)하였다. 자극원 조사 강도 예비실험을 한 결과 UVB 50 mJ/cm²의 강도에서는 약 74.
배지를 제거 한 후 PBS로 2회 세척한 다음 PBS 존재 하에 UVB (LP471 UVB probe, Delta OHM, Padova, Italy)를 이용하여 50 mJ/cm2 (25 cm/ 300 μW/ cm2)를 조사해준 뒤 시료를 농도별(25, 50 및 100 μg/ml)로 조제하여 0.02 ml 첨가한 후 5% CO2 incubator에서 24시간 동안 배양하였다.
배지를 제거한 후 시료를 농도별(25, 50 및 100 μg/ml)로 처리하고 1시간 반응시킨 후 UVB (50 mJ/cm2 )로 Normal군을 제외하고 세포를 자극한 뒤 24시간 동안 배양 후에 상층액을 제거하고 PBS로 3번 세척하였다.
배지를 제거한 후 시료를 농도별(25, 50 및 100 μg/ml)로 처치하고 1시간 후 자극원인 UVB (50 mJ/cm2 )로 Normal군을 제외한 세포에 자극한 후 24시간 후 PBS로 세척하여 세포를 수확하였다.
세포 생존율 측정은 Mosmann [20]의 방법을 변형하여 측정하였다. HaCaT cell을 96well plate에 1×10³ cells/well이 되게 0.
세포를 수확하여 Radio-immuno-precipitation assay (RIPA) lysis buffer 100 μl에 세포를 용출시켜 단백질을 수확한 후 원심분리하여 얻은 상층액은 Bradford assay로 정량하고 SDS-PAGE에서 전기영동하여 분리하였다.
예비실험의 결과 시료 10 μg/ml 농도에서의 hydrogen peroxide 소거활성의 값이 매우 미비하였기에(no data) 본 실험에서는 50 μg/ml 이상의 농도부터 진행하기로 하였다.
오미자 종자의 에틸아세테이트 분획물의 항주름 활성을 알아보기 위해 MMP-1과 -3의 단백질 발현에 미치는 영향을 관찰하였다. HaCaT cell을 96well culture plate에 1×10⁶ cells/ ml로 cell seeding 후 24시간 동안 배양하여 세포를 안정화시켰다.
이러한 이유로 자외선에 의한 피부노화 예방과 치료를 위해 MMPs의 발현을 억제시키는 천연물에 대하여 많은 연구가 진행되고 있다. 우리는 오미자 종자가 MMP-1과 -3의 mRNA 발현에 미치는 영향을 관찰하고자 HaCaT 세포에 UVB 50 mJ/cm2 의 자극을 주고 SCEAf를 다양한 농도로 처치 한 후 총 RNA를 추출하였고 RT-PCR을 이용하여 이를 분석하였다. 그 결과 SCEAf가 MMP-1과 -3의 mRNA의 발현을 농도의존적으로 억제하고 있음을 확인하였고(Fig.
0의 순도인 total RNA를 추출하였으며 2 μg/μl의 농도로 정량하고 추출된 total RNA는 Transcriptor first Stand cDNA synthesis kit (Roche)를 이용하여 역전사를 진행시켜 cDNA를 합성시켰다. 유전자 발현은 Fast start Essential DNA Green Master kit (Roche)를 사용하여 RT-PCR을 수행하였다. 이 분석에서 internal control은 β-actin (Bioneer, Seoul, Korea)을 사용하였고 Primer (Bioneer)의 sequences는 다음과 같다.
전자공여능은 Blois [2]의 방법을 변형하여 다음과 같이 측정하였다. 다양한 농도(10, 50, 100 및 500 μg/ml)의 각 시료용액 100 μl에 0.
구입한 오미자 종자는 수분을 제거하고 분쇄기로 12 mesh 이하로 파쇄하였고 시료 중량의 10배의 70% 에탄올을 가하여 실온에서 24시간 침지하여 상층액과 침전물을 분리하여 동일한 방법으로 3회 반복 추출하였다. 추출물은 여과 및 감압농축 후 동결 건조하여 분말을 얻었으며 에탄올 추출물의 극성차를 이용하여 서로 다른 용매를 첨가하여 분획을 실시하였다. 오미자 종자 에탄올추출물 중량의 10배의 증류수에 녹인 후, 동량의 에틸아세테이트 및 n-부탄올을 순차적으로 첨가하여 각 3회 반복 후 상층액을 얻었으며, 최종 남은 용액은 물층으로 하였다.

대상 데이터

Human 유래 keratinocyte cell line인 HaCaT cells는 German Cancer Research Center (DKFZ, Germany)로부터 분양 받아 10% Fetal bovine serum (FBS)과 Penicillin/Streptomycin (Gibco BRL Co., NY., USA) 100 unit/ml이 함유된 Dulbecco's modified Eagle's medium (DMEM, Gibco BRL Co.) 배지를 사용하여 37℃, 5% CO2 incubator (MCO-18AIC, SANYO Co., Sakata, Japan)에서 배양하였으며, 2~3일에 한 번씩 계대 배양을 시행하였다.
본 실험에 사용한 오미자 종자는 경북 문경시의 오미자 가공회사(이젠하우스 자연미소 농장, 문경, 한국)로부터 성숙 오미자 열매를 착즙하고 난 후 회수된 종자를 흐르는 물에 과육 잔류물을 수작업으로 제거한 상태로 구입하여 사용하였다. 구입한 오미자 종자는 수분을 제거하고 분쇄기로 12 mesh 이하로 파쇄하였고 시료 중량의 10배의 70% 에탄올을 가하여 실온에서 24시간 침지하여 상층액과 침전물을 분리하여 동일한 방법으로 3회 반복 추출하였다.
즉, 7.4 mM ABTS [2,2'-azinobis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid), Sigma-Aldrich Co.] 0.5 ml 와 2.6 mM potassium persulfate (K2S2O8, Sigma-Aldrich Co.) 88 μl를 섞은 용액 1 ml와 ethanol 88 ml를 혼합한 ABTS용액 1 ml를 1:1로 섞은 후 12시간 동안 라디컬을 형성시킨 용액을 99% ethanol에 약 1:13의 비율로 섞어서 734 nm에서 대조구의 흡광도 값이 0.706±0.001이 되도록 조절한 ABTS solution을 사용하였다.

데이터처리

실험결과에 대한 통계처리는 SPSS 25.0 (IBM SPSS Inc., NY, USA)를 이용하여 평균과 표준편차로 나타내었고, 각 처리군 간의 유의성에 대한 검증은 분산분석(analysis of variance, ANOVA)을 이용하여 유의성을 확인한 후, Duncan’s multiple range tests (p<0.05)로 다중비교를 실시하여 분석하였다.

이론/모형

ABTS 라디칼 소거활성의 측정은 Park 등[40]의 방법에 의해 측정하였다. 즉, 7.
Hydrogen peroxide 소거능 측정은 Jayaprakasha 등[16]의 방법으로 측정하였다. 0.
배지를 제거한 후 시료를 농도별(25, 50 및 100 μg/ml)로 처치하고 1시간 후 자극원인 UVB (50 mJ/cm2 )로 Normal군을 제외한 세포에 자극한 후 24시간 후 PBS로 세척하여 세포를 수확하였다. RNA는 High Pure RNA Isolation Kit (Roche, Basel, Switzerland)를 이용하였으며 제조회사의 방법에 준하여 RNA를 분리하였다. A260/A280 비율을 사용하여 1.

성능/효과

, MO, USA) 50 μl 넣어 잘 혼합한 후 암소에서 30분간 반응시킨 다음 517 nm에서 흡광도를 측정하였다. DPPH를 이용한 항산화 활성은 시료용액의 첨가구와 무첨가구의 흡광도 감소율로 나타내었다.
SCEAf가 100 μg/ml의 농도에서 약 99.4%의 매우 높은 소거활성을 나타내어 분획물 중 가장 우수한 결과를 보였다.
본 연구에서는 오미자 종자 분획물들의 항산화 및 주름억제 활성을 살펴보았고 그 결과 분획물 중 SCEAf가 전자공여능, ABTS 라디칼 소거활성능 그리고 hydrogen peroxide 소거활성능에서 가장 우수한 억제 효과를 보였으며, collagenase 저해 활성 실험 결과 또한 SCEAf가 가장 우수한 저해능을 보였다. SCEAf의 세포 독성을 확인하기 위해 MTT assay를 실시한 결과, SCEAf가 세포에 독성이 없음을 나타낼 뿐 아니라 자극원인 UVB에 손상된 세포의 생존율을 증가시킴으로써 세포 활성에 도움을 주는 것을 확인하였다. 이를 바탕으로 SCEAf가 UVB에 유도된 HaCaT cell에서 주름형성을 유발하는 세포외기질 분해효소의 발현을 얼마나 저해하는지를 western blot을 통해 확인하였으며 그 결과 MMP-1과 -3의 단백질 발현은 농도의존적으로 억제되었다.
6에 나타내었다. UVB 50 mJ/cm²의 자극을 준 세포에 SCEAf를 농도별로 첨가하였을 때 MMP-1과 -3은 농도의존적으로 발현이 매우 효과적으로 억제되었다. 이는 UVB에 자극받은 세포에 SCEAf가 MMP-1과 -3의 단백질 발현을 억제시키므로 collagen type I, III과 IV의 분해를 촉진하는 collagenase의 작용을 저해하여 UVB에 의한 광노화에 효과가 있을 것으로 기대할 수 있다.
우리는 오미자 종자가 MMP-1과 -3의 mRNA 발현에 미치는 영향을 관찰하고자 HaCaT 세포에 UVB 50 mJ/cm2 의 자극을 주고 SCEAf를 다양한 농도로 처치 한 후 총 RNA를 추출하였고 RT-PCR을 이용하여 이를 분석하였다. 그 결과 SCEAf가 MMP-1과 -3의 mRNA의 발현을 농도의존적으로 억제하고 있음을 확인하였고(Fig. 7) 이는 앞서 western blot을 통해 확인한 MMP-1과 -3의 단백질 발현의 억제 결과와도 유의할 만한 결과였다. 이러한 결과를 바탕으로 MMPs의 upstream pathway인 mitogen activated protein kinase (MAPK) 경로의 활성화를 억제하는지의 실험을 진행하여 주름억제 분자생물학적 검증을 확인할 예정이다.
또한 SCEAf에 대한 MMP-1과 -3의 mRNA 발현을 확인하기 위한 RT-PCR를 실시하였으며 MMP-1과 3의 mRNA의 발현 역시 농도의존적으로 억제되었다. 따라서 오미자 종자의 에틸아세테이트 분획물이 항산화 활성뿐 아니라 주름억제 활성에도 우수한 효능이 있음을 확인함에 따라 기능성 식품 및 화장품 분야에서 피부의 노화 예방과 증상 완화에 효과적인 소재로서의 활용가능성을 확인하였다.
이를 바탕으로 SCEAf가 UVB에 유도된 HaCaT cell에서 주름형성을 유발하는 세포외기질 분해효소의 발현을 얼마나 저해하는지를 western blot을 통해 확인하였으며 그 결과 MMP-1과 -3의 단백질 발현은 농도의존적으로 억제되었다. 또한 SCEAf에 대한 MMP-1과 -3의 mRNA 발현을 확인하기 위한 RT-PCR를 실시하였으며 MMP-1과 3의 mRNA의 발현 역시 농도의존적으로 억제되었다. 따라서 오미자 종자의 에틸아세테이트 분획물이 항산화 활성뿐 아니라 주름억제 활성에도 우수한 효능이 있음을 확인함에 따라 기능성 식품 및 화장품 분야에서 피부의 노화 예방과 증상 완화에 효과적인 소재로서의 활용가능성을 확인하였다.
또한 농도의존적으로 생존율이 증가하여 100 μg/ml의 농도에서 약 91.4%의 생존율을 나타내었다.
본 연구에서는 사람유래 각질형성세포인 HaCaT cell에 SCEAf를 농도별로 처치한 후의 세포 생존율을 확인(Fig. 5A)하였으며 그 결과 SCEAf 25 μg/ml의 농도에서 약 93.5%의 생존율을 나타내었고 농도의존적으로 생존율은 증가하였다.
자외선에 의한 피부의 광노화는 피부의 주름 형성에 직접적인 주요 요인으로 언급되고 있으며[21], MMPs는 피부의 표피세포, 섬유아세포, 염증세포 등에서 분비되어 결합조직에 손상을 가져와 피부노화를 일으킨다고 알려져 있다[10]. 본 연구에서는 오미자 종자 분획물들의 항산화 및 주름억제 활성을 살펴보았고 그 결과 분획물 중 SCEAf가 전자공여능, ABTS 라디칼 소거활성능 그리고 hydrogen peroxide 소거활성능에서 가장 우수한 억제 효과를 보였으며, collagenase 저해 활성 실험 결과 또한 SCEAf가 가장 우수한 저해능을 보였다. SCEAf의 세포 독성을 확인하기 위해 MTT assay를 실시한 결과, SCEAf가 세포에 독성이 없음을 나타낼 뿐 아니라 자극원인 UVB에 손상된 세포의 생존율을 증가시킴으로써 세포 활성에 도움을 주는 것을 확인하였다.
분획물 중 SCEAf가 100 μg/ml와 500 μg/ml의 농도에서 각각 약 69.2%와 92.3%의 저해효능을 보였으며 다른 분획물과 비교하여 가장 우수한 결과였으며 대조군인 EGCG가 같은 농도에서 각각 약 74.1%와 93.5%의 결과를 보인 것과 비교하였을 때 유의할 만한 결과였으며, 또한 Lee 등[35]의 연구에서 청다래 에탄올추출물이 500 μg/ml에서 약 90%의 저해활성을 보인 것과 비교해서 우수한 결과임을 확인할 수 있었다.
분획물 중 SCEAf가 500 μg/ml의 농도에서 99.0%의 우수한 소거활성능을 보였으며 대조군인 BHT (약 98.5%)의 결과보다 뛰어났다.
오미자 종자의 분획물에 대한 전자공여능의 측정결과는 Fig. 1에서 나타난 바와 같이 에틸아세테이트 분획물(SCEAf)이 500 μg/ml에서 약 98.5%의 소거능력을 보여 다른 분획물들과 비교해서도 가장 우수한 결과였으며 대조군인 ascorbic acid (AA)가 같은 농도에서 약 98.2%의 효능을 보인 것과 비교하여 유의할 만한 결과이다.
SCEAf의 세포 독성을 확인하기 위해 MTT assay를 실시한 결과, SCEAf가 세포에 독성이 없음을 나타낼 뿐 아니라 자극원인 UVB에 손상된 세포의 생존율을 증가시킴으로써 세포 활성에 도움을 주는 것을 확인하였다. 이를 바탕으로 SCEAf가 UVB에 유도된 HaCaT cell에서 주름형성을 유발하는 세포외기질 분해효소의 발현을 얼마나 저해하는지를 western blot을 통해 확인하였으며 그 결과 MMP-1과 -3의 단백질 발현은 농도의존적으로 억제되었다. 또한 SCEAf에 대한 MMP-1과 -3의 mRNA 발현을 확인하기 위한 RT-PCR를 실시하였으며 MMP-1과 3의 mRNA의 발현 역시 농도의존적으로 억제되었다.
5B)하였다. 자극원 조사 강도 예비실험을 한 결과 UVB 50 mJ/cm²의 강도에서는 약 74.5%의 세포생존율을 보였고, 100 mJ/cm²의 강도에서는 약 62.7%의 낮은 생존율을 보였기에 실험에서는 UVB 50 mJ/cm²를 자극 강도로 정하였다(no data). 자극원 조사 후의 결과에서는 자극원만 조사한 세포의 생존율이 약 75.
자극원 조사 후의 결과에서는 자극원만 조사한 세포의 생존율이 약 75.7%였으나 자극받은 세포에 SCEAf를 주입한 결과 25 μg/ml의 농도에서 약 86.8%의 생존효과를 보였으며 이는 생존율이 약 11.1%가 증가한 결과이다.

후속연구

이러한 결과를 바탕으로 MMPs의 upstream pathway인 mitogen activated protein kinase (MAPK) 경로의 활성화를 억제하는지의 실험을 진행하여 주름억제 분자생물학적 검증을 확인할 예정이다.

질의응답

핵심어	질문	논문에서 추출한 답변
	피부에서의 노화현상은 어떻게 나뉘어지는가?	노화 현상은 신체의 성장과 발달이 중지되면서 나타나는 피할 수 없는 과정으로[33] 피부는 이러한 신체의 노화를 잘 보여주는 기관 중의 하나이다[21]. 피부에서의 노화현상은 나이가 들어가면서 일어나는 내재적인 노화와 외부 요인의 자극에 의해 촉진되는 환경적인 노화로 구분된다. 환경적인 외적 요인 중 가장 큰 요인은 자외선(Ultra violet, UV)이다[21].
	오미자(Schisandra chinensis (Turcz.) Baill.)의 개화시기는?	)는 오미자과에 속하는 낙엽성 덩굴식물인 목련과(Magnoliaceae)에 속하고, 생약명은 Shizmandrae Furctus인 오미자나무의 붉은 색 과실을 말하며, 사람이 느낄 수 있는 단맛, 쓴맛, 신맛, 매운맛 및 짠맛의 총 다섯 가지 맛을 가지고 있다고 하여 붙여진 이름이다[23, 45]. 주로 우리나라 중부지방에 분포하고 있으며 개화시기는 6~8월이고 과실이 열리는 시기는 9~10월이며 채취하는 시기는 서리가 내린 후이다[18, 34]. 오미자는 예부터 식용으로 널리 사용되어 농가에서는 단기 소득을 올릴 수 있는 임산물로 재배가 장려되어 왔다[24].
	오미자(Schisandra chinensis (Turcz.) Baill.)는 무엇인가?	) Baill.)는 오미자과에 속하는 낙엽성 덩굴식물인 목련과(Magnoliaceae)에 속하고, 생약명은 Shizmandrae Furctus인 오미자나무의 붉은 색 과실을 말하며, 사람이 느낄 수 있는 단맛, 쓴맛, 신맛, 매운맛 및 짠맛의 총 다섯 가지 맛을 가지고 있다고 하여 붙여진 이름이다[23, 45]. 주로 우리나라 중부지방에 분포하고 있으며 개화시기는 6~8월이고 과실이 열리는 시기는 9~10월이며 채취하는 시기는 서리가 내린 후이다[18, 34].

참고문헌 (48)

Ahmad, S. 1995. Oxidative stress and antioxidant defenses in biology, pp. 211-214, Chapman & Hall, NY, USA.
Blois, M. S. 1958. Antioxidant determination by the use of a stable free radical. Nature 181, 1199-1200.

상세보기
Brennan, M., Bhatti, H. Nerusu, K. C., Bhagavathula, N., Kang, S., Fisher, G. J., Varani, J. and Voorthees, J. J. 2003. Matrix metalloproteinase-1 is the major collagenolytic enzyme responsible for collagen damage in UV-irradiated human skin. Photochem. Photobiol. 78, 43-48.

상세보기
Brinckerhoff, C. E., Rutter, J. L. and Benbow, U. 2000. Interstitial collagenases as markers of tumor progression. Clin. Cancer Res. 6, 4823-4830.

상세보기
Cannell, R. J. P., Kellan, S. J., Owsianks, A. M. and Walker, J. M. 1988. Results of a large scale screen of microalgae for the production of protease inhibitors. Planta Med. 54, 10-14.

상세보기
Cho, Y. J., Ju, I. S., Kim, B. C., Lee, W. S., Kim, M. J., Lee, B. G., An, B. J., Kim, J. H. and Kwon, O. J. 2007. Biological activity of Omija (Schizandra chinensis Baillon) extracts. J. Kor. Soc. Appl. Biol. Chem. 50, 198-203.
Choi, S. R., Kim, C. S., Kim, J. Y. You, D. H., Kim, J. M., Kim, Y. S., Song, E. J., Kim, Y. G., Ahn, Y. S. and Choi, D. G. 2011. Changes of antioxidant activity and lignan contents in Schisandra chinensis by harvesting times. Kor. J. Medicinal Crop Sci. 19, 414-420.

원문보기 상세보기
Chung, J. H., Seo, J. Y., Choi, H. R., Lee, M. K., Youn, C. S., Rhie, G., Cho, K. H., Kim, K. H., Park, K. C. and Eun, H. C. 2001. Modulation of skin collagen metabolism in aged and photoaged human skin in vivo. J. Invest. Dermatol. 117, 1218-1224.

상세보기
Fanger, G. R., Johnson, N. L. and Johnson, G. L. 1997. MEK kinases are regulated by EGF and selectively interact with ac/Cdc42. EMBO J. 16, 4961-4972.

상세보기
Fisher, G. J., Datta, S., Talwar, H. S., Wang, Z. Q., Varani, J., Kang, S. and Voorhees, J. J. 1996. Molecular basis of sun-induced premature ageing and retinoid antagonism. Nature 379, 335-339.

상세보기
Gilchrest, B. A. 1996. A review of skin ageing and its medical therapy. Br. J. Dermatol. 135, 867-875.

상세보기
Gross, J. and Lapiere, C. M. 1962. Collagenolytic activity in amphibian tissues: A tissue culture assay. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 48, 1197-1204.
Herrmann, G., Wlaschek, M., Lange, T. S., Prenzel, K., Goerz, G. and Scharffetter-Kochanek, K. 1993. UVA irradiation stimulates the synthesis of various matrix-metalloproteinases (MMPs) in cultured human fibroblasts. Exp. Dermatol. 2, 92-97.

상세보기
Hyon, J. S., Kang, S. M., Han, S. W., Kang, M. C, Oh, M. C., Oh, C. K., Kim, D. W., Jeon, Y. J. and Kim, S. H. 2009. Flavonoid component changes and antioxidant activities of fermented Citrus grandis osbeck peel. J. Kor. Soc. Food Sci. Nutr. 38, 1310-1316.

원문보기 상세보기
Jang, J. Y. and Park, G. H. 2015. Anti-inflammatory effect of seed oil of Schisandra chinensis in the LPS-treated RAW 264.7 macrophages. Kor. J. Herbology 30, 77-82.
Jayaprakasha, G. K., Jaganmohan Rao, L. and Sakariak, K. K. 2004. Antioxidant activities of flavidin in different in vitro moder system. Bioorg. Med. Chem. 12, 5141-5146.

상세보기
Jenkins, G. 2002. Molecular mechanisms of skin ageing. Mech. Ageing Dev. 123, 801-810.

상세보기
Jeong, H. S. and Joo, N. M. 2003. Optimization of rheological properties for processing of omija-pyun (omija jelly) by response surface methodology. Kor. J. Soc. Food Cookery Sci. 19, 429-438.
Jeong, S. J., Kim, K. H. and Yook, H. S. 2015. Whitening and antioxidant activities of solvent extracts from hot-air dried Allium hookeri. J. Kor. Soc. Food Sci. Nutr. 44, 832-839.

원문보기 상세보기
Jeppsson, N. and Johansson, R. 2000. Changes in fruit quality in black chokeberry (Aronia melanocarpa) during maturation. J. Hort. Sci. Biotechnol. 75, 340-345.
Jin, X. J., Kim, E. J., Oh, I. K., Kim, Y. K., Park, C. H. and Chung, J. H. 2010. Prevention of UV-induced skin damages by 11,14,17-eicosatrienoic acid in hairless mice in vivo. J. Kor. Med. Sci. 25, 930-937.

상세보기
Kehrer, J. P. 1993. Free radicals as mediators of tissue injury and disease. CRC Crit. Rev. Toxicol. 23, 21-28.

상세보기
Kim, B. H., Cho, D. U., Han, K. S. and Bae, Y. L. 2011. Efficiency analysis of Schisandra tea using image & acoustic signal processing. Journal of Korea Academia Industrial Cooperation Society 12, 2975-2981.

원문보기 상세보기
Kim, C. H., Kwon, M. C., Kim, H. S., Bae, G. J., Ahn, J. H., Chio, G. P., Choi, Y. B., Ko, J. R. and Lee, H. Y. 2007. Enhancement of immune activities of Kadsura japonica Dunal. through conventional fermentation process. Kor. J. Med. Crop. Sci. 15, 162-169.
Kim, H. R., Kim, S. J., Kim S., Kim H. J., Jeong, S. I., Yu, K. Y. and Kim, S. Y. 2018. Anti-inflammation and hangover relief effects of Schisandra chinensis (SC) and Lycium chinense (LC) water extracts depending on drug processing and fermentation. Herbal Formula Science 26, 295-306.
Kim, J. K. and Kang, S. A. 2018. Antioxidant effect of Kochugang with added omija (Schizandra chinensis) by-product extract powder. Kor. J. Food Nutr. 31, 388-394.
Kim, J. S. and Choi, S. 2008. Physicochemical properties and antioxidative activities of Omija (Schizandra chinensis Bailon). Kor. J. Food Nutr. 21, 35-42.
Kim, S. I., Sim, K. H., Ju, S. Y. and Han, Y. S. 2009. A study of antioxidative and hypoglycemic activities of Omija (Schizandra chinensis Baillon) extract under variable extract conditions. Kor. J. Food Nutr. 22, 41-47.
Ko, B. S., Park, S. K., Choi, S. B., Jun, D. W., Choi, M. K. and Park, S. M. 2004. A study on hypoglycemic effects of crude extracts of Schizandrae fructus. J. Kor. Soc. Appl. Biol. Chem. 47, 258-264.
Koivukangas, V., Kallioinen, M., Autio-Harmainen, H. and Oikarinen, A. 1994. UV irradiation induces the expression of gelatinases in human skin in vivo. Acta. Derm. Venereol. 74, 279-282.

상세보기
Kwak, C. S. and Yang, J. 2016. Suppressive effects of ethanol extract of Aralia elata on UVB-induced oxidative stress in human keratinocytes. J. Nutr. Health 49, 135-143.

원문보기 상세보기
Lee, G. D., Chang, H. K. and Kim, H. K. 1997. Antioxidative and nitrite scavenging activities of edible mushrooms. Kor. J. Food Sci. Technol. 29, 432-436.
Lee, J. H., Jung, J. H. and Kim, H. S. 2010. Modulation of immune parameters by aging process. Kor. J. Nutr. 43, 152-160.

원문보기 상세보기
Lee. S. H. 2013. Quality characteristics of Omija (Schizandra chinensis) extracts with various water types. J. Kor. Soc. Food Cult. 26, 706-712.
Lee, S. Y. and Lee, J. Y. 2013. Inhibitory efficacy of Smilax china L. on pro-collagen type-1 activity and MMP-1 gene expression in fibroblasts (CCD-986sk). J. Life Sci. 23, 1239-1245.

원문보기 상세보기
Lim, J. D., Cha, H. S., Choung, M. G., Choi, R. N., Choi, D. J. and Youn, A. R. 2014. Antioxidant activities of acidic ethanol extract and the anthocyanin rich fraction from Aronia melanocarpa. Kor. J. Food Cook Sci. 30, 573-578.

원문보기 상세보기
Oh, M. C., Kim, K. C., Ko, C., Ahn, Y. S. and Hyun, J. W. 2015. Peptides-derived from scales of Branchiostegus japonicus inhibit ultraviolet Binduced oxidative damage and photo-aging in skin cells. J. Life Sci. 25, 269-275.

원문보기 상세보기
Park, B. N. and Lee, J. W. 2017. Antioxidant activity of residue after omija (Schisandra chinensis) juice extract. J. Appl. Biol. Chem. 60, 95-100.
Park, C., Hwang, H. J., Choi, B. T., Choi, T. H., Kim, B. W., Choi, Y. W. and Choi, Y. H. 2010. G1 arrest of the cell cycle by gomisin N, a dibenzocyclooctadiene lignan, isolated from Schizandra chinensis Baill in human leukemia U937 cells. J. Life Sci. 20, 977-982..

원문보기 상세보기
Park, E. J. and Kang, M. H. 2002. Application of the alkaline comet assay for detecting oxidative DNA damage in human biomonitoring. J. Kor. Soc. Food Sci. Nutr. 35, 213-222..
Park, J. Y., Yun, J. W., Choi, Y. W., Bae, J. U., Seo, K. W., Lee, S. J., Park, S. Y., Hong, K. W. and Kim, C. D. 2012. Antihypertensive effect of gomisin A from Schisandra chinensis on angiotensin II induced hypertension via preservation of nitric oxide bioavailability. Hypertens. Res. 35, 928-934.

상세보기
Park, S. H. and Han, J. H. 2004. A study of medicinal plants for applications in functional foods. 1. Effects of Schizandrae fructus on the regional cerebral blood flow and blood pressure in rats. J. Kor. Soc. Food Sci. Nutr. 33, 34-40.

원문보기 상세보기
Park, S. Y., Park, D. J., Kim, Y. H., Kim, Y., Kim, S. G., Shon, K. J., Choi, Y. W. and Lee, S. J. 2011. Upregulation of heme oxygenase-1 via PI3K/Akt and Nrf-2 signaling pathways mediates the anti-inflammatory activity of Schisandrin in Porphyromonas gingivalis LPS-stimulated macrophages. Immunol. Lett. 139, 93-101.

상세보기
Ryu, M. and Chung, H. S. 2011. Effect on hot water extract of Schizandra chinensis on colon cancer cell line. Food Eng. Prog. 15, 64-69.
Suh, W. S., Park, S. Y., Min, B. S., Kim, S. H., Song, J. H. and Shim, S. H. 2014. The anti-proliferative effects of compounds isolated from Schisandra chinensis. Kor. J. Food Sci. Technol. 46, 665-670.

원문보기 상세보기
Sun, Z., Park, S. Y., Hwang, E., Zhang, M., Jin, F., Zhang, B. and Yi, T. H. 2015. Salvianolic acid B protects normal human dermal fibroblasts against ultraviolet B irradiation- induced photoaging through mitogenactivated protein kinase and activator protein-1 pathways. Photochem. Photobiol. 91, 879-886.

상세보기
Varani, J., Perone, P., Fligiel, S. E., Fisher, G. J. and Voorhees, J. J. 2002. Inhibition of type I procollagen production in photodamage: correlation between presence of high molecular weight collagen fragments and reduced procollagen synthesis. J. Invest. Dermatol. 119, 122-129.

상세보기
Yang, J. W. and Kwak, C. S. 2016. Inhibitory effect of Aralia elata ethanol extract against skin damage in UVB-exposed human keratinocytes and human dermal fibroblast. J. Nutr. Health 49, 429-436.

원문보기 상세보기

저자의 다른 논문 :

LOADING...

표제어: PCR

동의어: Packet Collision Rate

용어 설명 출처 목록 (6)

용어 설명: PCR은 세균 특이성이 있는 primer를 이용하여 적은 수의 세균이 있을지라도 쉽게 검출할 수 있는 유용한 방법이며, 이를 이용하여 구강 내 치면세균막이나 타액에서 직접 세균을 검출할 수 있게 되었다[8].

내보내기 구분	파일저장 인쇄 메일전송
구성항목	기본정보 상세정보 관리번호, 논문명, 저널/프로시딩명, 저자 , 발행년, 권, 호, 시작페이지, 끝페이지, 발행기관 관리번호, 논문명, 대등논문명, 저자 , 저널/프로시딩명, 발행기관, 발행년, 발행언어, 권, 호, 시작페이지, 끝페이지, ISBN, ISSN, 주제분야, 키워드, 초록(한글), 초록(영문), 저자(소속기관)
저장형식	Text(ASCII format) Excel format RefWorks Direct Export RIS format (for Reference Manager, ProCite, EndNote), Scholar's Aids, Mendeley
메일정보	받는사람 (필수) @ 보내는사람 (선택) @ 제목 내용 KISTI 검색결과 이메일 서비스
안내	총 건의 자료가 검색되었습니다. 다운받으실 자료의 인덱스를 입력하세요. (1-10,000) 검색결과의 순서대로 최대 10,000건 까지 다운로드가 가능합니다. 데이타가 많을 경우 속도가 느려질 수 있습니다.(최대 2~3분 소요) 다운로드 파일은 UTF-8 형태로 저장됩니다. 파일의 내용이 제대로 보이지 않을실 때는 웹브라우저 상단의 보기 -> 인코딩 -> 자동선택 여부를 확인하십시오. ~ Text(ASCII format) Excel format

연합인증