[논문]미생물살충제 "비티플러스" 액상 제형화 및 품질 분석 기술에 관한 연구

엄성현; 박현지; 김규순; 홍유경; 박지영; 최봉기; 김준성; 김건우; 강문수; 양경형; 김용균

doi:10.5656/ksae.2013.04.1.086

미생물살충제 "비티플러스" 액상 제형화 및 품질 분석 기술에 관한 연구
Study on Soluble Concentrate Formulation and Quality Control Techniques of a Microbial Insecticide "Bt-Plus" 원문보기

한국응용곤충학회지 = Korean journal of applied entomology, v.52 no.2, 2013년, pp.115 - 123

초록
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곤충병원세균(Bacillus thuringiensis: 비티)의 살충효과를 증가시킨 미생물살충제 "비티플러스"가 개발되었다. 그러나 수화제 형태의 비티플러스는 농가나 산업체에서 높은 단가로 선호하지 않고 있는 실정이다. 이에 본 연구는 액상 제형의 비티플러스를 개발하는 연구 목적을 두었다. 이러한 목적에 따라 먼저 비티플러스 제조에 포함되는 두 세균 배양액의 최적 혼합 비율을 결정하였다. 이 최적 혼합액은 10%의 에탄올을 보존제로 사용되었으며, 비티와 또 다른 곤충병원세균인 Xenorhabdus nematophila (Xn)의 배양액 비율이 5:4 (v/v)로 제조하게 했다. 또한 이 액상제형이 1,000 희석배수에서 효과를 보이기 위해 비티 배양액을 10 배 농축하여 최적 비율로 혼합하였다. 이렇게 해서 얻어진 액상 제형을 발육후기 유충의 배추좀나방(Plutella xylostella)이 가해를 하는 배추밭에 처리하여 7일 후 약 77%의 방제 효과를 보였는데, 이 처리 효과는 현재 상용화되는 배추좀나방 적용 생물농약들과 비등한 효과를 나타내는 것으로 판명되었다. 저온 및 상온의 저장 분석에서 본 액상 제형은 최소한 한 달 동안 안정된 방제효과를 나타내는 것으로 분석되었다. 이 액상 제형의 안정된 방제 효과를 보장하여 주는 품질관리 기술을 개발하기 위해 제형 내 비티 포자 밀도와 Xn 유래 유용물질의 농도를 판별하였다. 본 연구 분석은 최적의 방제 효과를 나타내기 위해서는 비티플러스 액상 제형에 비티포자 밀도가 최소 $5{\times}10^{11}$ spores/mL 이고, Xn 세균 대사물질들 가운데 8 종 유효물질의 농도가 품질관리 판별 기준으로 제시되었다.

Abstract ▼ AI-Helper

A microbial insecticide "Bt-Plus" has been developed to enhance an insecticidal efficacy of an entomopathogenic bacterium, Bacillus thuringiensis (Bt). However, its wettable powder formulation is not preferred by farmers and industry producers due to relatively high cost. This study aimed to develop a soluble concentrate formulation of Bt-Plus. To this end, an optimal mixture ratio of two bacterial culture broths was determined to be 5:4 (v/v) of Bt and Xenorhabdus nematophila (Xn) along with 10% ethanol preservative. In addition, Bt broth was concentrated by 10 times to apply the mixture at 1,000 times fold dilution. The resulting liquid formulation was sprayed on cabbage crop field infested by late instar larvae of the diamondback moth, Plutella xylostella. The field assay showed about 77% control efficacy at 7 days after treatment, which was comparable to those of current commercial biopesticides targeting P. xylostella. For storage test in both low and room temperatures, the liquid formation showed a relatively stable control efficacy at least for a month. To develop a quality control technique to exhibit a stable control efficacy of Bt-Plus, Bt spore density ($5{\times}10^{11}$ spores/mL) and eight active component concentrations of Xn bacterial metabolites in the formulation products have been proposed in this study.

주제어

AI 본문요약
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문제 정의

본 연구는 비티플러스의 제형을 액제로 개발하려는 목적으로 두었다. 이는 사용자 농민의 액상 제형 선호성과 기존의 수화제 형태에서 액상 제형으로 전환하면서 고체화하는 생산 공정을 줄여 생산 단가를 낮추려는 의도로 시도되었다.
, 2012). 본 연구는 이 8종 물질의 HPLC 분석을 위한 시료 추출 및 분석 조건을 결정하였다. 여기서 물질 추출은 두 유기용매를 이용하였으며, 일반적으로 에틸아세테이트 추출액에서 보다는 헥산 추출액에서 보다 많은 비극성물질들이 추출되었으나, 추출 반복에 따라 서로 차이를 보였다.
그러나 개발된 비티플러스의 제형이 수화제 형태로서, 사용 농민은 물론이고 산업체 생산자가 높은 단가로 산업화에 어려움을 주고 있다. 이를 개선하기 위해 본 연구는 비티플러스의 액상 제형을 개발하는 데 목표를 두었다. 이를 위해 먼저 두 세균 배양액의 배합비율을 결정했다.

제안 방법

Xn 유래 유용물질의 농도는 HPLC를 이용하여 분석하였다(Fig. 4). 초기 1 L 기준의 제품용액을 헥산과 에틸아세테이트로 연속하여 추출하고, 추출물을 역상 HPLC를 통해 8 종의 각 유용물질 함량을 분석하여 두 추출물에서 나온 각 물질의 함량을 합하여 제품의 유용물질 농도로 기록하였다(Fig.
상기에 기술된 생물 검정법으로 서로 다른 혼합 비율별 살충력을 비교하였다. 각각의 혼합 비율은 배추좀나방 4령충 10 마리씩 3 반복으로 처리하였다. 대조구는 증류수로 생물검정법에서 기술한 방법과 동일하게 처리하였다.
각각의 혼합 비율은 배추좀나방 4령충 10 마리씩 3 반복으로 처리하였다. 대조구는 증류수로 생물검정법에서 기술한 방법과 동일하게 처리하였다. 살충력 판별은 처리 후 7 일차 사망률로 비교하였다.
이를 위해 먼저 두 세균 배양액의 배합비율을 결정했다. 또한 살포액 희석배수를 1,000 배로 설정하기 위해 유효성분 함량도 조정하였다. 이 액상 제형의 실온 보관 기술 및 품질 관리 기술을 분석하였다.
비티플러스 처리 기준 농도인 1,000 배 희석을 바탕으로 배량인 500배와 더불어 성숙기 배추에 대한 작물 피해를 조사하였다. 조사 항목은 배추 잎의 변색 및 외형 변화로서 달관조사로 0-5의 약해 정도 수치를 부여하여 분석하였다.
비티플러스의 액상제형을 개발하기 위해 우선 최대 약효를 줄 수 있는 비티와 Xn 배양액의 혼합 비율을 결정하였다(Fig. 1). 서로 다른 혼합 비율에 따라 배추좀나방 4령충에 미치는 방제효과는 상이하였다.
대조구는 증류수로 생물검정법에서 기술한 방법과 동일하게 처리하였다. 살충력 판별은 처리 후 7 일차 사망률로 비교하였다.
비티와 Xn 배양액을 서로 다른 비율(0:9 - 9:0, v/v)로 혼합하여 각각 100 배 희석액으로 준비하였다. 상기에 기술된 생물 검정법으로 서로 다른 혼합 비율별 살충력을 비교하였다. 각각의 혼합 비율은 배추좀나방 4령충 10 마리씩 3 반복으로 처리하였다.
처리 약제는 24시간 섭식처리하고, 이후 정상 배추잎을 제공하였다. 생존수 확인은 24 시간 주기로 7 일차 까지 매일 하루 중 같은 시간(오전10 시)에 조사하였다.
이는 사용자 농민의 액상 제형 선호성과 기존의 수화제 형태에서 액상 제형으로 전환하면서 고체화하는 생산 공정을 줄여 생산 단가를 낮추려는 의도로 시도되었다. 액상 제형을 개발하기 위해 두 미생물제의 최적 배합 비율을 결정하고, 여기에 보존제를 첨가하는 전략을 세웠다. 본 연구에서 결정된 최적 비율은 비티, X.
액상 제형의 비티플러스의 저장 기간 중 안전성을 분석하기 위해 상온과 저온에서 각각 한 달 동안 보관 실험을 실시하였다(Fig. 3). 먼저 액상 제형에 존재하는 비티 포자수의 변화를 추적하였다(Fig.
액상제형으로 개발하기 위한 다음 단계로서 저장 기간 중 안정성 분석을 실시하였다. 이를 위해 액상 제형을 상온과 저온에서 각각 저장하고 시기별로 시료를 추출하여 약효를 분석하였다.
경북 안동시에 소재한 배추 포장에 재배된 얼갈이배추를 가해하는 배추좀나방을 대상으로 실시되었다. 약제처리 전 발생한 배추좀나방 4령의 개체수를 계수하여 처리 전 밀도(시험구당30 마리)로 산출하였다. 이후 500 배, 1,000 배, 2,000 배의 농도로 약제처리를 하였으며 생존수는 약제처리 24 시간 이후부터 계수하여 3 일차, 5 일차, 7 일차 까지 확인하였다.
위에서 결정된 최적 혼합 비율에서 희석배수별 배추좀나방에 대한 방제 효율을 비교하였다(Fig. 2). 100 배까지의 희석배수에서 100%의 방제 효과를 나타냈으나, 기준 농도인 1,000 배 희석 배수에서는 80%의 방제 효과에 미치지 못하였다(Fig.
또한 살포액 희석배수를 1,000 배로 설정하기 위해 유효성분 함량도 조정하였다. 이 액상 제형의 실온 보관 기술 및 품질 관리 기술을 분석하였다.
nematophila의 곤충 면역억제 기작을 통합하여 상승적 살충력을 꾀하는 IBC 전략 하에 개발된 약제이다(Seo and Kim, 2011). 이들의 상승 살충효과는 각각의 생물제제가 갖는 특성을 고려하여 볼 때 추정되고, 이를 여러 사례를 통해 입증하였다. 비티는 그람양성균으로 곤충의 경구로 체내에 들어가면 비티의 내독소에 의해 독성이 나타나게 된다.
이후 처리된 배추잎을 여과지가 깔린 용기에 놓아 10 분간 건조시켰다. 이때 1 시간 동안 절식시킨 배추좀나방 4령충을 처리구당 10 마리씩 3 반복으로 처리하였다. 처리 약제는 24시간 섭식처리하고, 이후 정상 배추잎을 제공하였다.
액상제형으로 개발하기 위한 다음 단계로서 저장 기간 중 안정성 분석을 실시하였다. 이를 위해 액상 제형을 상온과 저온에서 각각 저장하고 시기별로 시료를 추출하여 약효를 분석하였다. 총 5 주까지 분석된 연구에서 저온의 경우 비티의 포자수의 증감에서 차이를 보이지 않았고, 약효에서도 뚜렷한 차이를 보이지 않았다.
약제처리 전 발생한 배추좀나방 4령의 개체수를 계수하여 처리 전 밀도(시험구당30 마리)로 산출하였다. 이후 500 배, 1,000 배, 2,000 배의 농도로 약제처리를 하였으며 생존수는 약제처리 24 시간 이후부터 계수하여 3 일차, 5 일차, 7 일차 까지 확인하였다. 대조약제로서 슈리사이드(Bayer, Seoul, Korea)와 응삼이(Korea Bio, Hwasung, Korea)의 약효가 비교되었다.
최적의 효과를 갖는 비티플러스를 결정한 후 이 제조액을 4℃와 25℃에 각각 보관하였다. 이후 일주일 간격으로 시료를 수거하여 생물검정에 이용하였다. 생물검정은 배추좀나방 4령충을 대상으로 상기에 기술한 생물검정 방법대로 실시하였다.
9353). 저장 기간 동안 액상 비티플러스의 배추좀나방 4령충에 대한 살충력 변화를 추적하였다(Fig. 3B). 초기의 100% 방제효과는 저장 기간이 증가함에 따라 다소 감소하는 경향을 보였으나, 통계적으로 큰 차이 없는 것으로 보여 액상 제형의 비티플러스는 최소 한 달간의 저장 동안 약효에 있어서도 차이를 보이지 않는 안정성을 나타냈다(4℃ 보관: F = 3.
생물검정은 배추좀나방 4령충을 대상으로 상기에 기술한 생물검정 방법대로 실시하였다. 저장시료는 3회 독립적으로 채취하여 3반복으로 실시하였다.
비티플러스 처리 기준 농도인 1,000 배 희석을 바탕으로 배량인 500배와 더불어 성숙기 배추에 대한 작물 피해를 조사하였다. 조사 항목은 배추 잎의 변색 및 외형 변화로서 달관조사로 0-5의 약해 정도 수치를 부여하여 분석하였다. 여기서 0은 약해가 없는것이고, 1은 소수 반점, 2는 다수의 반점, 3은 잎 외형 변이, 4는 탈색, 5는 외형과 잎 색이 모두 변하는 것으로 달관조사의 기준으로 정하였다.
이들 균주는 tryptic soy broth (TSB, MBcell, Seoul, Korea) 배지를 이용하여 28℃에서 12 시간 동안 배양하여 단일 균총을 채취하였다. 채취된 단일 균총을 TSB 액체배지를 이용하여 28℃에서 16 시간 동안 배양한 후, 글리세롤이 30%가 되도록 첨가하여 보관용 세균 균주를 만들었다. 이 보관 균주는 반복되는 세균 배양의 원시료로 이용되어 계대배양에 따른 세균 변이 가능성을 줄였다.
이때 1 시간 동안 절식시킨 배추좀나방 4령충을 처리구당 10 마리씩 3 반복으로 처리하였다. 처리 약제는 24시간 섭식처리하고, 이후 정상 배추잎을 제공하였다. 생존수 확인은 24 시간 주기로 7 일차 까지 매일 하루 중 같은 시간(오전10 시)에 조사하였다.
4). 초기 1 L 기준의 제품용액을 헥산과 에틸아세테이트로 연속하여 추출하고, 추출물을 역상 HPLC를 통해 8 종의 각 유용물질 함량을 분석하여 두 추출물에서 나온 각 물질의 함량을 합하여 제품의 유용물질 농도로 기록하였다(Fig. 5). 이때 물질의 극성에 따라 보다 비극성 물질(PY, oxindole, indole, HPA, cPY, BZA)은 헥산 추출물에 보다 많이 포함했고, 덜 비극성 물질(PHPP, Ac-FGV)은 에틸아세테이트 추출물에 존재한 것을 확인할 수 있었다.
최적 혼합 비율을 바탕으로 제조된 액상 제형 비티플러스의 야외 조건에서 방제 효과를 검정하였다(Table 1). 처리 3일차에서는 비티플러스의 약효가 상용화된 비티 약제보다 높았지만, 친환경방제제인 응삼이 보다는 낮았다.
최적의 효과를 갖는 비티플러스를 결정한 후 이 제조액을 4℃와 25℃에 각각 보관하였다. 이후 일주일 간격으로 시료를 수거하여 생물검정에 이용하였다.
평판배지에서 배양된 세균에서 단일 콜로니를 얻고 이를 멸균수로 희석하여 TSB 액체배지를 이용하여 28℃에서 48 시간 동안 200 rpm에서 교반배양 후, 다시 48 시간 동안 4℃ 저온고에 보관하여 세균의 포자 형성율을 증가시켰다. 포자 형성은 위상차 광학현미경(BX-PHD, Olympus, Tokyo, Japan)을 이용하여 1,000 배 배율에서 확인하였다.

대상 데이터

Determination of dilution factor of soluble concentrate “Bt-Plus”. The test mixture was prepared by 5:4 (v/v) bacterial culture borth mixture (BCM) of Bacillus thuringiensis (Bt) and Xenorhabdus nematophila (Xn) along with 10% ethanol (EtOH). (A) Control efficacy of "Bt-Plus" in different dilutions, were applied on cabbage leaves by dipping method and were fed by fourth instar larvae of Plutella xylostella for 24 h.
경북 안동시에 소재한 배추 포장에 재배된 얼갈이배추를 가해하는 배추좀나방을 대상으로 실시되었다. 약제처리 전 발생한 배추좀나방 4령의 개체수를 계수하여 처리 전 밀도(시험구당30 마리)로 산출하였다.
곤충병원세균(X. nematophila)은 기주 선충에서 분리된 후 동결보관중인 것을 이용하였다(Jung and Kim, 2006). 이들 균주는 tryptic soy broth (TSB, MBcell, Seoul, Korea) 배지를 이용하여 28℃에서 12 시간 동안 배양하여 단일 균총을 채취하였다.
본 연구는 2012년 안동대학교 학부선진화사업(ACE)의 지원으로 수행되었다. 또한 본 연구의 재료비는 2012년도 농촌진흥청 아젠다사업(대과제명: 화학농약 대체기술)으로부터 지원받았다.
시험곤충은 안동시 송천동에 소재한 배추밭에서 유충을 채집하여 약제 처리하지 않고 실내에서 누대 사육한 것을 실내 약제 노출 실험에 사용하였다. 유충은 온도 25±1℃, 광주기 16:8 h (L:D), 상대습도 40~60%의 배양기에서 사육했다.
비티플러스의 약효 확인 및 보증을 위해서는 제품 내 유효성분의 기준한계를 설정해야 한다. 이러한 약효 유효성분으로 비티 포자수와 X. nematophila에서 유래되는 세균대사물질이 분석 대상이 된다. 비티 농도는 앞에서 기술한 대로 5x10¹¹ cfu/mL의 제품 농도를 기준으로 비티플러스의 품질분석에 기준으로 삼을 수 있다.

데이터처리

모든 살충효과 시험 결과는 백분율 자료로서 arsine 변환 후 SAS의 PROC GLM (SAS Institute, 1989)을 이용하여 ANOVA 분석 및 처리 평균간 비교를 실시하였다.

이론/모형

이후 일주일 간격으로 시료를 수거하여 생물검정에 이용하였다. 생물검정은 배추좀나방 4령충을 대상으로 상기에 기술한 생물검정 방법대로 실시하였다. 저장시료는 3회 독립적으로 채취하여 3반복으로 실시하였다.
생물검정은 옆침지법으로 실시하였다. 처리 용액은 포자형성된 비티용액과 48 시간 Xn 배양액의 혼합액에 10% 에탄올을 첨가하였다.

성능/효과

결론적으로 본 연구를 통해 비티플러스 액상제형의 개발이 가능하게 되었으며, 야외 조건에서 이 제형의 약효가 인정되었으며, 또한 이 제형의 품질 분석 기술이 개발되었다. 그러나 상온 조건에서 보다 지속적으로 약효를 유지시킬 수 있는 보존제 개발이 요구되고 있다.
총 5 주까지 분석된 연구에서 저온의 경우 비티의 포자수의 증감에서 차이를 보이지 않았고, 약효에서도 뚜렷한 차이를 보이지 않았다. 그러나 상온에 저장한 액상제형은 통계학적으로는 차이가 없으나 3 주 이후 약효의 감소 추세를 보였으며, 5 주가 경과하면서 약 10%의 약효 감소를 나타냈다. 본 연구 개발에서는 액상 보존제로서 10%의 에탄올을 이용하였으나, 본 연구 최적의 상온 저장을 위해 새로운 보존제를 개발하여야 한다는 결론을 얻었다.
유사한 연구로서 Seo and Kim(2011)은 배추좀나방의 경우 5:5 및 파밤나방의 경우 6:4의 최적비율을 결정하였다. 따라서 본 연구의 5:4:1의 비율에서 보존제를 제외하면 비율이 배추좀나방과 파밤나방의 최적 조건의 비율의 중간 정도의 비율을 나타낸 것으로 산출된다. 그러나 이렇게 제조된 비티플러스 액상제형은 1,000 배 희석에서 높은 살충력을 보이지 않았다.
본 연구에서도 조제된 비티플러스 액제 제형을 1,000 배 희석하여 야외에 처리한 결과 현재 배추좀나방을 대상으로 시판되는 비티제제와 친환경농자재에 비해 우수한 방제효과를 나타낸 것으로 확인되었다. 또한 어린 배추 잎을 대상으로 기준량(1,000 배 희석)과 배량(500 배 희석)의 약제 처리에서 약해를 나타내지 않았고, 등록과정에서 실시된 포유동물 및 어류에 대한 독성시험에서 낮은 독성치를 보였다(목록공시: 공시 2-2-2).
이러한 결과는 비티플러스의 살충력을 결정하는 데 기본적으로 가져야 할 비티의 최소농도가 존재한다는 것을 의미했다. 배양된 세균이 약 10¹⁰ cfu/mL이기에 이를 10 배 농축하고 다시 1,000 배 희석하여 살포하였다는 이야기는 최종 살포액에 비티가 10⁸ cfu/mL의 최소약효농도를 가져야 한다는 결론을 얻을 수 있다. 이러한 비티의 농도는 일반 상용 비티 수화제 제형에 포함된 비티 밀도와 비등하였다.
액상 제형을 개발하기 위해 두 미생물제의 최적 배합 비율을 결정하고, 여기에 보존제를 첨가하는 전략을 세웠다. 본 연구에서 결정된 최적 비율은 비티, X. nematophila 배양액 및 보존제 에탄올의 비율이 5:4:1 (v/v)로 결정되었다. 비티를 증가키는 경우는 X.
nematophila 배양액 물질이 이러한 살충력 상승을 유도한 것으로 해석된다. 본 연구에서도 조제된 비티플러스 액제 제형을 1,000 배 희석하여 야외에 처리한 결과 현재 배추좀나방을 대상으로 시판되는 비티제제와 친환경농자재에 비해 우수한 방제효과를 나타낸 것으로 확인되었다. 또한 어린 배추 잎을 대상으로 기준량(1,000 배 희석)과 배량(500 배 희석)의 약제 처리에서 약해를 나타내지 않았고, 등록과정에서 실시된 포유동물 및 어류에 대한 독성시험에서 낮은 독성치를 보였다(목록공시: 공시 2-2-2).
서로 다른 혼합 비율에 따라 배추좀나방 4령충에 미치는 방제효과는 상이하였다. 비티 단독 효과는 60% 방제가를 나타내지 못하였으나, Xn 배양액이 40% 첨가되면 살충력은 100% 가까이 도달하였다. 따라서 액상제형의 비티플러스 최적 혼합 비율은 비티 배양액과 Xn 배양액이 5:4 (v/v)로 결정하였다.
nematophila 배양액 및 보존제 에탄올의 비율이 5:4:1 (v/v)로 결정되었다. 비티를 증가키는 경우는 X. nematophila의 양이 줄어들어 면역 억제자들의 농도가 줄어들어 살충력이 낮아진 것으로 해석되고, 비티를 줄이는 경우도 유사하게 낮아져 이들의 상대비율 및 일정 한계 함량을 지녀야 한다는 결론을 얻을 수 있었다. 유사한 연구로서 Seo and Kim(2011)은 배추좀나방의 경우 5:5 및 파밤나방의 경우 6:4의 최적비율을 결정하였다.
채취된 단일 균총을 TSB 액체배지를 이용하여 28℃에서 16 시간 동안 배양한 후, 글리세롤이 30%가 되도록 첨가하여 보관용 세균 균주를 만들었다. 이 보관 균주는 반복되는 세균 배양의 원시료로 이용되어 계대배양에 따른 세균 변이 가능성을 줄였다.
5). 이때 물질의 극성에 따라 보다 비극성 물질(PY, oxindole, indole, HPA, cPY, BZA)은 헥산 추출물에 보다 많이 포함했고, 덜 비극성 물질(PHPP, Ac-FGV)은 에틸아세테이트 추출물에 존재한 것을 확인할 수 있었다.
처리 3일차에서는 비티플러스의 약효가 상용화된 비티 약제보다 높았지만, 친환경방제제인 응삼이 보다는 낮았다. 이러한 방제 효과는 시간이 경과하면서 증가했으며, 최종 7 일차에는 1,000 배 희석의 액상 비티플러스가 다른 상용화된 두 생물농약과 비등한 방제 효과를 나타냈다. 이와 더불어 조사된 배추에 대한 약해조사에서 비티플러스는 기준량(1,000 배 희석)과 배량(500 배 희석)에서 모두 약해를 나타내지 않았다.
그러나 이렇게 제조된 비티플러스 액상제형은 1,000 배 희석에서 높은 살충력을 보이지 않았다. 이를 해결하기 위해 비티 농도를 10배로 농축하여 동일한 비율로 X. nematophila의 배양액과 혼합하였을 때, 1,000 배 희석배수에서 거의 100%에 가까운 방제 효과를 얻을 수 있었다. 이러한 결과는 비티플러스의 살충력을 결정하는 데 기본적으로 가져야 할 비티의 최소농도가 존재한다는 것을 의미했다.
3B). 초기의 100% 방제효과는 저장 기간이 증가함에 따라 다소 감소하는 경향을 보였으나, 통계적으로 큰 차이 없는 것으로 보여 액상 제형의 비티플러스는 최소 한 달간의 저장 동안 약효에 있어서도 차이를 보이지 않는 안정성을 나타냈다(4℃ 보관: F = 3.75; df = 4, 10; P = 0.0410, 25℃ 보관: F = 1.44; df = 4, 10; P = 0.2915, 두 온도의 상관관계: F = 0.15; df = 4, 20; P = 0.9608).
이를 위해 액상 제형을 상온과 저온에서 각각 저장하고 시기별로 시료를 추출하여 약효를 분석하였다. 총 5 주까지 분석된 연구에서 저온의 경우 비티의 포자수의 증감에서 차이를 보이지 않았고, 약효에서도 뚜렷한 차이를 보이지 않았다. 그러나 상온에 저장한 액상제형은 통계학적으로는 차이가 없으나 3 주 이후 약효의 감소 추세를 보였으며, 5 주가 경과하면서 약 10%의 약효 감소를 나타냈다.

후속연구

그러나 상온에 저장한 액상제형은 통계학적으로는 차이가 없으나 3 주 이후 약효의 감소 추세를 보였으며, 5 주가 경과하면서 약 10%의 약효 감소를 나타냈다. 본 연구 개발에서는 액상 보존제로서 10%의 에탄올을 이용하였으나, 본 연구 최적의 상온 저장을 위해 새로운 보존제를 개발하여야 한다는 결론을 얻었다.
여기서 물질 추출은 두 유기용매를 이용하였으며, 일반적으로 에틸아세테이트 추출액에서 보다는 헥산 추출액에서 보다 많은 비극성물질들이 추출되었으나, 추출 반복에 따라 서로 차이를 보였다. 이후 차례로 추출되는 에틸아세테이트 추출액에 포함된 동일한 물질의 양을 산출하여 이들을 합한 함량은 추출 반복별로 차이를 적게 보여 정확한 물질 함량 분석을 위해서는 이들 두 추출액의 HPLC 분석이 이뤄져야하며, 이들에서 산출된 세균 대사물질의 함량을 산출하는 것이 바람직하다. 그러나 편의상 이들 8종의 물질을 모두 분석하기 보다는 대표적 물질이 되는 cPY 또는 BZA의 함량을 산출하는 것이 제시된다.

질의응답

핵심어	질문	논문에서 추출한 답변
	비티 살충제는 무엇인가?	비티 살충제는 토양에 서식하는 그람양성균인 Bacillus thuringiensis에서 유래된 미생물 농약이다. 이 세균은 포자를 형성할 수 있어 다양한 환경 조건에서 내성을 띌 수 있으며, 포자 형성 시기에 결정체 형태의 내독소 단백질을 생성한다(Tanada and Kaya, 1993).
	비티 살충제의 작용 특성은 무엇인가?	비티 살충제의 작용 특성은 섭식에 의해 이루어지며 화학농약에 비해 비교적 살충 속도가 느리다. 또한 최근 다양한 해충이 비티 살충제에 대해서 살충제 저항성을 발현하고 있다.
	Bacillus thuringiensis의 특징은 무엇인가?	비티 살충제는 토양에 서식하는 그람양성균인 Bacillus thuringiensis에서 유래된 미생물 농약이다. 이 세균은 포자를 형성할 수 있어 다양한 환경 조건에서 내성을 띌 수 있으며, 포자 형성 시기에 결정체 형태의 내독소 단백질을 생성한다(Tanada and Kaya, 1993). 이 내독소는 곤충 중장 막에 존재하는 세포막 단백질에 특이적으로 결합하여 중장 세포막을 손상시키는 작용을 가져 궁극적으로 중장세포를 파괴시키는 결과를 초래한다(Gill et al.

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저자의 다른 논문 :

표제어: PCR

동의어: Packet Collision Rate

용어 설명 출처 목록 (6)

용어 설명: PCR은 세균 특이성이 있는 primer를 이용하여 적은 수의 세균이 있을지라도 쉽게 검출할 수 있는 유용한 방법이며, 이를 이용하여 구강 내 치면세균막이나 타액에서 직접 세균을 검출할 수 있게 되었다[8].

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