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문제 정의
- 따라서, 본 연구의 목적은 개의 피부상태를 보다 객관적으로 평가하기 위해 비침습적인 방법을 이용한 피부세정제 적용 빈도에 따른 피부 산성도, 피부 수화도와 같은 객관적 피부 기능평가 및 D-Squame®을 이용한 피부 건조증 평가 가능성을 알아보고 이러한 결과들을 토대로 적절한 피부세정제 적용빈도를 확립하는 것이다.
- 본 실험은 상용 샴푸 사용빈도에 대한 개 피부의 변화상을 비 침습적인 방법으로 알아보았다. 본 연구에서 적용된 D-squame®은 각화된 표피의 단백질을 분석하여 피부 건조증의 진단에 유용할 것으로 생각된다.
제안 방법
- 각 측정부위는 시료가 주변부로 확산되는 것을 방지 위하여 60 × 60 mm 크기의 Medical Bandage (Micropore®, 3M)로 구획화 하였다.
- 실험견의 등 부위는 좌측과 우측 두 부분으로 구분하고, 좌우 각 부위를 다시 좌측, 중앙, 우측의3개 부위로 구분하였다. 측정 부위는 기본 데이터를 얻기 전에 10호 제모기(Oyster®, USA)로 제모하였다.
- 염색한 D-Squame®은 슬라이드 글라스에 고정시킨 후 현미경을 이용하여 이미지 분석을 실시하였다.
- 샴푸를 2일 1회 적용한 최초 구역은 그룹 A, 5일 1회 적용한 2번째 구역은 그룹 B, 마지막으로 8일 1회 적용한 3 번째 구역은 그룹 C로 설정하였다. 우측의 대조군 구역은 좌측의 샴푸적용 시기와 동일하게 생리식염수로 처치하였다.
- 피부 건조도와 스케일링은 투명한 자동 접착 디스크인 D-Squame® (CuDerm Corporation, Dallas, TX, USA, 1.4 cm)을 이용하여 측정하였다.
- 피부의 수화도는 Corneometer(Corneometer CM825, Courage & Khazaka)로 측정하였다(8).
- 피부표면의 산성도는 피부 pH 측정기 pH900(Courage & Khazaka)으로 측정하였으며, 수치는 5회 측정치를 평균값으로 표시하였다.
대상 데이터
- 실험동물은 피부질환을 보이지 않는 수컷 2마리와 암컷 6마리, 총8마리의 잡종견이며, 년령은 2-5세, 체중은 5-6 kg정도이다. 실험 전 일반적인 신체검사와 피부검사를 시행하여 피부질환이 관찰되지 않은 개체를 선정하였다. 실험동물은 실험전 1시간 정도 실내에서 계류하였다.
- 실험동물은 피부질환을 보이지 않는 수컷 2마리와 암컷 6마리, 총8마리의 잡종견이며, 년령은 2-5세, 체중은 5-6 kg정도이다. 실험 전 일반적인 신체검사와 피부검사를 시행하여 피부질환이 관찰되지 않은 개체를 선정하였다.
이론/모형
- 피부 단백질 함량 측정 실험(Bio-Rad Protein-Assay-Kit, Bio-Rad Laboratories, Munich, Germany)은 예전에 제시된 방법을 적용해 단백질량을 정량하였다(13,18). 단백질 정량은 BSA (Bovine serum albumin)의 흡광도법을 이용하여 실시하였다. 회수된 5개의 D-Squame®은 1M NaOH 4 ml와 함께 37℃에서 1시간 동안 120rpm으로 진탕 배양기(Shaking incubator) 안에서 유지한 후 1M의 HCl로 중화시켰다.
성능/효과
- 일반적인 포유류의 피부 pH는 산성이다(10). 본 연구에서 정상적인 개의 피부 pH는 6.2에서 7.8로서 부위와 검사 일에 따라 다양한 결과를 보였다. 하지만 적은 개체수 측정에도 불구하고 실험동물의 pH는 연속적으로 정상치를 나타냈다.
- 그러므로 개의 피부는 여름철 특히 고온 다습한 환경에서 세균감염에 특히 취약하다고 할 수 있다. 본 연구에서는 샴푸 적용 후에 피부 표면의pH가 다소 상승을 보이긴 하였지만, 정상 범위를 유지하였다. 이는 개의 피부에서도 사람의 피부 완충능과 같은 산성도의 항상성을 유지하려는 생체반응이 일어나기 때문인 것으로 생각된다.
- 건조한 피부는 외관상 거칠고 각질 생성으로 피부 표면 색이 다소 창백하며, 혹은 더 진행된 경우 거친 면에 비듬과 같은 특징적인 피부증상을 보인다. 본 연구에서는 샴푸를 적용한 군과 생리식염수만 적용한 군 모두에서 기저값에 비해 피부 수화도가 감소하였으나 유의하지는 않았다. 대조군과의 피부 수화도 차이가 없는 이유는 적용된 상용샴푸(Bio Pet B&B, Hurbis, Henkel Germany)의 보습효과가 낮기 때문일 수도 있어 다른 상용샴푸와의 비교실험이 필요할 것으로 생각된다.
- 샴푸 적용 후 D-squame®을 이용하여 단백농도를 측정한 그룹 A에서 대조군이나 기본값에 비해 단백농도가 높게 나타났다.
- 샴푸 적용 후 D-squame®을 이용한 이미지 분석 결과, 그룹 A에서 대조군과 비교하여 gray scale level이 낮게 나타났다(Fig 8).
- 샴푸 적용 후 그룹 A는 대조군과 비교해 산성도가 유의적으로 증가하였으나 8일 이후부터는 산성도의 변화가 없었다(Fig 4). 그룹B, C는 대조군과 비교하여 산성도의 차이가 없었다(Figs 5, 6).
- 하지만 개의 털이 측정에 미치는 영향과 피부 각 부위의 차이도 고려해야 할 것이다. 위의 모든 결과를 토대로 개의 샴푸 적용빈도는 5-8일이 적당한 것으로 생각된다. 사람 피부에서 정립되어 있는 각화지수(17,18)와 비듬지수(18) 또한 수의 피부학 분야에서 확립시켜야 할 것이며, 개 피부의 기본 생리에 대한 체계적인 연구가 진행되어야 할 것이다.
- 피부 단백질 검사 결과에서 보여지듯 2일에 1회의 빈도로 샴푸를 적용한 경우 다른 그룹과 비교해 더 많은 피부 단백질 소실이 D-squame®을 통해 확인되었다.
후속연구
- 그리고 샴푸의 적용기간을 장기화하여 관찰하는 것이 필요하다. 건조한 정도는 임상적으로도 평가할 수 있으나 객관적으로 평가 할 수 있는 지표가 먼저 확립되어야 하며, 특히 임상분야와 연관하여 특이질병 발병 시의 피부 상태나, 정상피부에서의 기본적인 구조와 기능에 대한 연구가 활발히 진행되어야 할 것이다.
- 본 연구에서 적용된 D-squame®은 각화된 표피의 단백질을 분석하여 피부 건조증의 진단에 유용할 것으로 생각된다.
- 위의 모든 결과를 토대로 개의 샴푸 적용빈도는 5-8일이 적당한 것으로 생각된다. 사람 피부에서 정립되어 있는 각화지수(17,18)와 비듬지수(18) 또한 수의 피부학 분야에서 확립시켜야 할 것이며, 개 피부의 기본 생리에 대한 체계적인 연구가 진행되어야 할 것이다.
- 본 연구에 사용된 pH meter는 피부에 아무런 해를 끼치지 않고 활용 가능한 비 침습성 기구이다. 하지만 본 연구의 기간이 짧고 측정한 자료의 양과 범위가 제한적이어서 더 다양한 부위에 반복적이며 장기간에 걸친 샴푸 적용시 측정자료가 필요할 것으로 생각된다.
- 이는 빈번한 샴푸적용이 각질세포간의 부착력에 영향을 미치고 탈락을 유발하는 것으로 생각된다. 하지만 제거된 피부 단백질의 근원에 대해서는 더 연구되어야 할 것이다.
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