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NTIS 바로가기韓國家畜衛生學會誌 = Korean journal of veterinary service, v.37 no.4, 2014년, pp.263 - 271
김희정 (경북대학교 수의과대학 & 수의전염병제어센터) , 김은미 (경북대학교 수의과대학 & 수의전염병제어센터) , 신연경 (농림축산검역본부 바이러스과) , 송재영 (농림축산검역본부 바이러스과) , 김성희 (농림축산검역본부 질병진단과) , 이경기 (농림축산검역본부 질병진단과) , 이명헌 (농림축산검역본부 질병진단과) , 김영화 (국립축산과학원) , 박준철 (국립축산과학원) , 여상건 (경북대학교 수의과대학 & 수의전염병제어센터) , 박최규 (경북대학교 수의과대학 & 수의전염병제어센터)
In this study, we developed a cost and time saving one-step multiplex RT-PCR for the simultaneous detection and differentiation of swine influenza viruses (SIV) and 2009 pandemic influenza H1N1 virus (pH1N1). The one-step multiplex RT-PCR using four sets of primer was confirmed to be capable of dete...
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핵심어 | 질문 | 논문에서 추출한 답변 |
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PCR 과정 중 핵산 오염에 의한 오진을 방지하기 위한 가장 효과적인 방법으로 여겨지고 있는 것은? | 그간 PCR 과정 중에 발생할 수 있는 실험실 내 핵산 오염 및 이에 의한 오증폭에 대한 우려가 꾸준히 제기되어 왔으며, 그 중에서도 이전의 PCR 과정에서 대량으로 증폭된 PCR 증폭산물에 의한 오염이 가장 심각한 문제로 대두되었다(Aslanzadeh, 2004). 이러한 PCR 과정 중 핵산 오염에 의한 오진을 방지하기 위한 다양한 방법들이 모색되어 왔으며(Rys와 Persing, 1993), uracil DNA glycosylase (UNG) 시스템을 이용한 핵산 오염 방지 전략은 가장 현실적이고, 효과적인 방법으로 제시되어왔다(Longo 등, 1990; Pang 등, 1992; Tetzner, 2009). 그러나 아직 수의학분야에서 가축 질병에 대한 PCR 진단과정의 오염을 방지하기 위한 목적으로는 UNG 시스템이 응용된 바는 많지 않으며, 특히 SIV의 PCR 진단에 적용된 예는 아직 보고된 바가 없다. | |
돼지 인플루엔자 바이러스가 유발하는 증상은? | 돼지 인플루엔자 바이러스(swine influenza virus; SIV)는 돼지에서 급성 호흡기질병을 유발하며, 임신 모돈의 유산을 유발하기도 한다. 일반적으로 돼지에서의 임상 증상은 경미하며, 대개 1주일 이내에 회복이 되기 때문에 양돈 산업에서의 피해는 그리 크지 않다고 알려져 있다(van Reeth 등, 2012). | |
현행 SIV 진단체계는? | 현재 한국의 가축방역기관의 SIV 진단체계는 세계 보건기구 및 세계동물보건기구에서 추천하는 전통적인 바이러스 배양법과 분자생물학적 진단법을 주로 적용하고 있다(Kim 등, 2014; OIE, 2012; WHO, 2010). 즉, 돼지의 비강에서 채취한 도말시료를 발육란 또는 배양세포에 접종하여 4-5일간 배양한 다음, 혈구응집 반응(hemagglutination test; HAT)을 실시하여 양성인 배양액에 대하여 1차 역전사-중합효소연쇄반응(reverse transcription-polymerase chain reaction, RT-PCR)을 실시하여 SIV의 M gene을 증폭함으로써 배양액 내 SIV 의 존재를 확인한 다음, 1차 RT-PCR 양성시료를 대상으로 H1, H3 아형의 SIV 및 pH1N1 인플루엔자 바이러스의 감별을 위한 2차 RT-PCR을 실시하여 바이러스 아형을 확진하고 있다(Kim 등, 2011; Kim 등, 2014). 이와 같이 현행 SIV 진단체계는 2단계의 RTPCR을 실시함으로서 검사시간과 경비가 많이 소요 되며, 반복적인 RT-PCR 과정을 통하여 기 증폭된 DNA에 의한 실험실내부 환경 및 기구의 오염과 이로 인한 위양성 반응이 나타날 가능성이 상존하고 있 다(Li 등, 2012, Rys와 Persing, 1993). |
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