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문제 정의
- 이번 조사에서는 교육시설 및 공원 내 토양 중에 존재하는 분원성대장균군의 오염 실태를 조사함과 동시에 분원성대장균군에 대해서는 균종별 분포 및 항생제 감수성 시험을 실시하여 토양오염 방지를 위한 기초자료로 활용하기 위해 실시하였다.
제안 방법
- 이후 항생제 디스크를 dispenser로 접종한 후 37℃에서 16∼18시간 배양한 후 발육억제대의 크기를 측정하였다.
- 추정시험 양성 시험관으로부터 EC-MUG 배지(Difco, USA)에 접종하여 44.5℃에서 24±2시간 배양하여 가스가 발생하면 확정시험 양성으로 판정하였다.
- 추정시험은 시험용액 1 mL, 0.1 mL 및 0.01 mL을 발효관을 넣은 10 mL Lactose broth (Difco, USA) 배지에 접종 후, 35±0.5℃에서 배양하여 발효관 내 가스발생이 있을 때는 추정시험 양성으로 판정하였으며, 24±2시간 내에 가스가 발생하지 아니하였을 때에는 48±3시간까지 계속하여 배양하였다.
- 이후 항생제 디스크를 dispenser로 접종한 후 37℃에서 16∼18시간 배양한 후 발육억제대의 크기를 측정하였다. 판정 결과는 CLSI의 기준에 따라 감수성, 내성의 2단계로 구분하였으며, 중등도 이상의 내성을 보이는 균주들은 내성으로 판정 구분하였다.
- 확정시험에서 양성으로 판정된 시료를 Eosin Methylene Blue agar (EMB, MERCK, Germany)에 접종하여 37℃에서 18∼24시간 배양 후 EMB 상에서 금속성 또는 비금속성을 나타내는 집락에 대해서는 MacConkey agar (MERCK)에 도말 후 37℃, 18∼24시간 배양한 후 자동화 미생물 검사장비(Vitek 2 compact, BioMérieux, France)를 이용하여 동정하였다.
대상 데이터
- 2013년 9월부터 12월까지 서울시내 교육시설(231곳) 및 공원 놀이터(45곳) 내 토양의 기생충검사를 위해 보건환경연구원에 의뢰된 토양 시료 276건(어린이 공원 45건, 유치원 27건, 초등학교 122건, 중학교 46건, 고등학교 35건, 특수학교 1건)을 사용하였다.
- 2013년 9월부터 12월까지 서울지역 교육시설 및 어린이 공원 내 놀이터에서 채취한 토양시료 276건에 대한 분원성대장균군의 검출 및 이들 균주에 대한 항생제 감수성 시험을 시험한 결과는 다음과 같다. 분원성대장균군은 276곳 중 69건(25.
데이터처리
- 시료 채취 시설에 따른 분원성 대장균군의 검출률은 chi-square test로 순위검증을 실시하였고, fisher’s exact test로 확인하였다.
이론/모형
- 분원성 대장균군 검사는 먹는물수질공정시험법(환경부, 2013)에 따라 실시하였다. 채취한 모래 250 g을 멸균생리식염수 40 mL에 넣어 혼합 후 상층액을 분리하여 실험 재료로 사용하였다.
- 항생제 감수성 시험은 Clinical and Laboratory Standard Institute (CLSI, 2012)의 방법에 따라 디스크 확산법으로 실시하였다. 사용한 항생제 디스크(Oxoid, UK)는 ampicillin (AMP, 10 μg), amoxacillin- clavulanic acid (AMC, 30 μg), cephalothin (KF, 30 μg), cefepime (FEP, 30 μg), ceftiofur (EFT, 30 μg), gentamicin (CN, 10 μg), apramycin (APR, 15 μg), neomycin (N, 30 μg), streptomycin (S, 300 μg), tetracycline (TE, 30 μg), ciprofloxacin (CIP, 5 μg), enrofloxacin (ENR, 5 μg), nalidixic acid (NA, 30 μg), sulfamethoxazole/trimethoprim (SXT, 25 μg), chloramphenicol (CM, 30 μg), florfenicol (FFC, 30 μg) 등 16종이었다.
성능/효과
- pneumoniae는 AMP과 APR에 100% 내성률을 보였고, 나머지 약제에 대해서는 감수성을 나타내었다. A. baumannii는 AMP와 KF, EFT, APR, N, CM 및 FFC에 대해서는 100%의 내성률을 나타내었지만, FEP, CN, TE, CIP, ENR, NA 및 SXT에 대해서는 분리된 모든 균주가 감수성을 보였다.
- 0% 이상의 내성률을 보였으나, 나머지 약제에 대해서는 낮은 내성률을 보였다. K. pneumoniae는 AMP과 APR에 100% 내성률을 보였고, 나머지 약제에 대해서는 감수성을 나타내었다. A.
- 특히 APR의 경우 Cro. sakazakii를 제외한 공시균 대부분에서 내성을 보여 모래에서 분리된 분원성대장균군에서 APR에 대한 내성은 심각한 수준에 도달해 있음을 알 수 있었다. 따라서 이에 대한 대책 마련이 시급한 실정이다.
- 한편 최근까지 국내 교육시설 및 공원 내 모래에서 분리된 분원성대장균군에 대한 항생제 내성양상에 관한보고는 없어 이번 조사의 결과를 타 연구자들의 결과와 비교하기는 어렵다. 그러나 이번 조사에서 교육시설 및 공원 내 모래에서 여러 종류의 분원성대장균군이 검출되었고 또한 일부 항생제에 내성을 지닌 세균들이 검출되었다. 교육시설 및 공원 놀이터는 학생과 어린이들의 활동공간으로 사용되고 있고, 이들 주변 환경은 병원체를 함유하고 있는 개와 고양이의 배설물 및 기타 오염물로 인하여 병원성 세균에 노출 될 가능성은 배제할 수 없다.
- 서울지역 교육시설 및 공원 내 놀이터 모래에서 분원성대장균군의 검출률은 Table 1 및 2와 같다. 모래를 채취한 276곳 중 분원성 대장균군이 검출된 곳은 61곳(22.1%), 비검출된 곳은 215곳(77.9%)으로 나타났다. 이중 분원성대장균군은 중학교에서 32.
- 분리 균주에 대한 항생제 감수성 검사 결과 대장균은 APR에 100% 내성을 보였고, KF에서 51.9%의 내성을 보였으나, 공시된 나머지 약제에 대해서는 20.0% 이하의 낮은 내성률을 보였다. Cro.
- 총 69주의 분원성대장균군에 대한 항균제 감수성 검사 결과는 Table 4와 같다. 분리된 균주에 대해 가장 높은 내성을 보인 항생제는 APR로 98.6%의 내성률을 나타내었고, KF, AMP와 N에는 각각 52.2%, 29.0% 및 13.0%의 내성률을 나타내었다. 나머지 항생제에 대해 10% 이하의 낮은 내성률을 나타냈다.
- 4%) 순이었다. 분원성대장균군은 APR에 98.6%로 가장 높은 내성률을 보였고, KF, AMP와 N에는 각각 52.2%, 29.0% 및 13.0%의 내성률을 나타내었다. 나머지 항생제에 대해서는 10% 이하 낮은 내성률을 나타냈다.
- 이번 조사에서 분리된 분원성대장균군은 사용된 대부분의 항생제에 대해 71.0∼98.0%의 높은 감수성을 보였으나, APR과 KF에 대해서는 각각 98.6%와 52.2%의 높은 내성을 나타내었다.
- 대장균군과 분원성대장균군은 오염지표로서 호수 및 하천수의 수질관리를 위한 주요한 감시 항목이다(Park 등, 2009). 이번 조사에서 서울지역 교육시설 및 공원에서 분원성대장균군의 검출률은 0%에서 32.6%로 Jung 등(2009)이 조사한 광주지역 어린이 놀이터에서 분원성대장균군 검출률 47.6%보다는 낮고, 아파트 놀이터에서 27.5%보다는 높았다. Matsuo 등(2005)은 일본의 공원 내 놀이터 모래의 68%에서 분원성대장균군이 검출되었다고 보고함과 동시에, 놀이터의 크기, 모래 채취 장소 및 깊이에 따라서도 대장균군의 검출률에 차이가 있을 수 있다고 하였다.
- 이번 조사의 결과 분원성대장균군 양성 시료에서 분리된 세균의 중 균종별 검출률은 75.4%로 가장 많이 분리되었고, Cro. sakazakii와 K.
- 1% 순으로 나타났다. 한편 어린이 공원은 45곳 중 14곳(31.1%)에서, 교육시설은 231곳 중 55곳(23.8%)에서 분원성 대장균군이 검출되었으며, 두 시설 간 검출률에 있어 유의적 차이는 없었고(P＞0.05), 교육시설 간의 검출률도 유의적 차이는 보이지 않았다(P＞0.05).
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