Cordycepin의 치밀결합 강화 및 MMPs의 활성 억제를 통한 HCT116 인체대장암세포의 이동성 및 침윤성의 억제 Cordycepin Inhibits Migration and Invasion of HCT116 Human Colorectal Carcinoma Cells by Tightening of Tight Junctions and Inhibition of Matrix Metalloproteinase Activity원문보기
Cordycepin은 C. militaris의 주요 생리활성 물질로서 인체 면역기능 강화, 항염증, 항산화, 항노화 및 항암활성을 포함한 다양한 약리효능이 있는 것으로 알려져 있다. 본 연구에서는 HCT116 대장암세포를 이용하여 암전이의 주요 과정인 암세포의 이동성 및 침윤성에 미치는 cordycepin의 효능에 관하여 조사하였다. 본 연구의 결과에 의하면 세포독성이 없는 범위에서 cordycepin은 HCT116 세포의 이동성과 침윤성을 유의적으로 억제하였다. RT-PCR 및 Western blotting 결과에 의하면 cordycepin은 TJs의 주요 구성인자인 claudin family 인자들의 발현을 억제하였으며, 이는 TJ의 전기적 저항성의 증대와 연관이 있었다. Cordycepin은 또한 MMP-2 및 -9의 발현과 활성을 저해함과 동시에 TIMP-1 및 -2의 발현은 증가시켰다. 따라서 cordycepin에 의한 HCT116 대장암세포의 전이능 억제는 TJ의 견고성 증대와 MMPs의 활성 억제와 연관성이 있음을 알 수 있었다.
Cordycepin은 C. militaris의 주요 생리활성 물질로서 인체 면역기능 강화, 항염증, 항산화, 항노화 및 항암활성을 포함한 다양한 약리효능이 있는 것으로 알려져 있다. 본 연구에서는 HCT116 대장암세포를 이용하여 암전이의 주요 과정인 암세포의 이동성 및 침윤성에 미치는 cordycepin의 효능에 관하여 조사하였다. 본 연구의 결과에 의하면 세포독성이 없는 범위에서 cordycepin은 HCT116 세포의 이동성과 침윤성을 유의적으로 억제하였다. RT-PCR 및 Western blotting 결과에 의하면 cordycepin은 TJs의 주요 구성인자인 claudin family 인자들의 발현을 억제하였으며, 이는 TJ의 전기적 저항성의 증대와 연관이 있었다. Cordycepin은 또한 MMP-2 및 -9의 발현과 활성을 저해함과 동시에 TIMP-1 및 -2의 발현은 증가시켰다. 따라서 cordycepin에 의한 HCT116 대장암세포의 전이능 억제는 TJ의 견고성 증대와 MMPs의 활성 억제와 연관성이 있음을 알 수 있었다.
Cordycepin is the major functional component of Cordyceps species and is widely used in traditional oriental medicine. Cordycepin has been shown to possess many pharmacological properties, such as enhancement of immune function along with anti-inflammatory, antioxidant, anti-aging, and anti-cancer e...
Cordycepin is the major functional component of Cordyceps species and is widely used in traditional oriental medicine. Cordycepin has been shown to possess many pharmacological properties, such as enhancement of immune function along with anti-inflammatory, antioxidant, anti-aging, and anti-cancer effects. Here, we investigated the inhibitory effects of cordycepin on cell migration and invasion, which are two critical cellular processes that are often deregulated during metastasis, using HCT116 human colorectal carcinoma cells. According to our data, cordycepin at non-cytotoxic concentrations markedly inhibited the motility and invasiveness of HCT116 cells in a time-dependent manner. RT-PCR and Western blotting results indicated that cordycepin reduced the levels of claudin proteins, which are major components of tight junctions (TJs), and induced tightening of TJs. Cordycepin also attenuated the expression and activities of matrix metalloproteinases (MMPs)-2 and -9, whereas levels of tissue inhibitor of metalloproteinases (TIMPs)-1 and -2 were simultaneously elevated. These findings suggest that cordycepin reduces the migration and invasion of HCT116 cells by modulating the activities of TJs and MMPs.
Cordycepin is the major functional component of Cordyceps species and is widely used in traditional oriental medicine. Cordycepin has been shown to possess many pharmacological properties, such as enhancement of immune function along with anti-inflammatory, antioxidant, anti-aging, and anti-cancer effects. Here, we investigated the inhibitory effects of cordycepin on cell migration and invasion, which are two critical cellular processes that are often deregulated during metastasis, using HCT116 human colorectal carcinoma cells. According to our data, cordycepin at non-cytotoxic concentrations markedly inhibited the motility and invasiveness of HCT116 cells in a time-dependent manner. RT-PCR and Western blotting results indicated that cordycepin reduced the levels of claudin proteins, which are major components of tight junctions (TJs), and induced tightening of TJs. Cordycepin also attenuated the expression and activities of matrix metalloproteinases (MMPs)-2 and -9, whereas levels of tissue inhibitor of metalloproteinases (TIMPs)-1 and -2 were simultaneously elevated. These findings suggest that cordycepin reduces the migration and invasion of HCT116 cells by modulating the activities of TJs and MMPs.
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문제 정의
암세포의 전이 억제에 관한 선행 결과들을 종합해보면, MMPs의 발현 및 활성 증가가 기본적인 기전으로 설명되고 있지만, 여전히 더욱 구체적이고 추가적인 연구가 필요한 실정이다. 따라서 본 연구에서는 cordycepin의 암세포 전이 억제 효능에 관한 추가적인 기전 해석의 일환으로 현재 연구가 상대적으로 미비한 인체 대장암세포(HCT116)를 이용하여 이들 세포의 이동성과 침윤성에 미치는 효과와 관련 유전자들의 발현 변화를 조사하였다.
제안 방법
정상 배지로 2~3회 수세하고 1% FBS가 함유된 배지로 교체 후 적정 농도의 cordycepin을 처리하였다. Cordycepin 처리 48시간 후 도립현미경으로 이용하여 40배의 배율로 wounded 영역으로의 세포 이동성의 정도를 비교 관찰하였다.
HCT116 세포를 20 μg/mL의 rat tail collagen이 코팅된 dish(BD Biosciences, Bedford, MA, USA)에 적정 시간 동안 배양 후 파이펫 팁을 이용한 scraping으로 wounded 영역을 만들었다.
Louis, MO, USA)에서 구입하였으며, 증류수에 1 mg/mL 농도로 녹여 적정 농도로 희석하여 처리하였다. HCT116 세포의 증식에 미치는 cordycepin의 영향은 3-(4,5-dimethyl-2 thiazolyl)-2,5-diphenyl-2H-tetrazolium bromide(MTT, Sigma-Aldrich Co.)가 미토콘드리아 효소에 의하여 MTT-formazan을 형성하는 원리에 기반을 둔 MTT assay를 이용하여 조사하였다.
각각의 해당 유전자에 적절한 primer(Table 1)를 이용한 PCR은 Mastercycler (Eppendorf, Hamburg, Germany)를 사용하여 수행하였다. PCR 반응 산물을 1% agarose를 이용하여 분리한 후, ethidium bromide(EtBr) 염색을 통하여 발현의 정도를 비교하였다.
STX-2 chopstick electrode가 짝으로 형성된 EVOM Epithelial Tissue Voltohmmeter(World Precision Instruments, Sarasota, FL, USA)를 이용하여 TER 값을 측정하였다. 이를 위하여 HCT116 세포를 Transwell® (Corning Costar Corp.
분리된 단백질들의 농도를 측정한 후, Western blot analysis를 위해 동량의 단백질들을 sodium dodecyl sulfate(SDS)–polyacrylamide gel electrophoresis를 이용하여 분리하고 nitrocellulose membrane(Schleicher & Schuell, Keene, NH, USA)으로 전이시켰다. 각각의 membrane을 적정 항체 및 enhanced chemiluminescence(ECL, Amersham Corp.) 용액을 이용하여 단백질들의 발현 변화를 조사하였다. 본 실험에 사용된 1차 항체들(Table 2)은 Santa Cruz Biotechnology Inc.
, Arlington Heights, IL, USA)를 이용하여 complementary DNA를 합성하였다. 각각의 해당 유전자에 적절한 primer(Table 1)를 이용한 PCR은 Mastercycler (Eppendorf, Hamburg, Germany)를 사용하여 수행하였다. PCR 반응 산물을 1% agarose를 이용하여 분리한 후, ethidium bromide(EtBr) 염색을 통하여 발현의 정도를 비교하였다.
번역 수준에서 해당 유전자들의 발현 변화 조사를 위한 총 단백질은 25 mM Tris–Cl(pH 7.5), 250 mM NaCl, 5 mM ethylendiaminetetra acetic acid, 1% nonidet P-40, 0.1 mM sodium orthovanadate, 2 μg/mL leupeptin 및 100 μg/mL phenylmethylsulfonyl fluoride가 함유된 lysis buffer를 이용하여 분리하였다.
분리된 단백질들의 농도를 측정한 후, Western blot analysis를 위해 동량의 단백질들을 sodium dodecyl sulfate(SDS)–polyacrylamide gel electrophoresis를 이용하여 분리하고 nitrocellulose membrane(Schleicher & Schuell, Keene, NH, USA)으로 전이시켰다.
이를 위하여 정상 조건 및 적정 농도의 cordycepin이 6시간 동안 처리된 HCT116 세포를 cordycepin이 함유된 FBSfree 배지로 처리한 matrigel-coated filter의 apical side에 분주하였다. 이때 basolateral chamber에는 20% FBS가 함유된 배지를 분주하였으며, 48시간 후 filter의 하단부로 이동한 세포를 hematoxylin 및 eosin Y 염색액으로 염색하고 계수하였다.
이를 위하여 HCT116 세포를 Transwell® (Corning Costar Corp., Corning, NY, USA)의 8.0 μm pore size insert(upper chamber)로 seeding한 후 100% confluence를 이룰 때까지 배양하였다.
HCT116 세포의 침윤성에 미치는 cordycepin의 영향을 조사하기 위하여 matrigel invasion assay를 사용하였다. 이를 위하여 정상 조건 및 적정 농도의 cordycepin이 6시간 동안 처리된 HCT116 세포를 cordycepin이 함유된 FBSfree 배지로 처리한 matrigel-coated filter의 apical side에 분주하였다. 이때 basolateral chamber에는 20% FBS가 함유된 배지를 분주하였으며, 48시간 후 filter의 하단부로 이동한 세포를 hematoxylin 및 eosin Y 염색액으로 염색하고 계수하였다.
전사 수준에서 특정 유전자들의 발현 변화를 조사하기 위하여 RNeasy kit(Qiagen, San Diego, CA, USA)를 이용하여 RNA를 분리한 후, AMV reverse transcriptase(Amersham Corp., Arlington Heights, IL, USA)를 이용하여 complementary DNA를 합성하였다. 각각의 해당 유전자에 적절한 primer(Table 1)를 이용한 PCR은 Mastercycler (Eppendorf, Hamburg, Germany)를 사용하여 수행하였다.
HCT116 세포를 20 μg/mL의 rat tail collagen이 코팅된 dish(BD Biosciences, Bedford, MA, USA)에 적정 시간 동안 배양 후 파이펫 팁을 이용한 scraping으로 wounded 영역을 만들었다. 정상 배지로 2~3회 수세하고 1% FBS가 함유된 배지로 교체 후 적정 농도의 cordycepin을 처리하였다. Cordycepin 처리 48시간 후 도립현미경으로 이용하여 40배의 배율로 wounded 영역으로의 세포 이동성의 정도를 비교 관찰하였다.
5)에 24시간 침전시켰다. 추가적으로 0.5%(w/v) Coomassie brilliant blue G-250 (Bio-Rad, Hercules, CA, USA)로 염색한 후 methanol /acetic acid/water(3:1:6) 용액을 이용하여 탈색시켰으며 상위 band를 MMP-9로, 하위 band를 MMP-2의 활성 정도로 비교하였다.
대상 데이터
HCT116 세포는 American Type Culture Collection(Rockville, MD, USA)에서 구입하였으며, 10% fetal bovine serum(FBS, Gibco BRL, Gaithersburg, MD, USA) 및 1% penicillin–streptomycin이 함유된 RPMI 1640 배지를 사용하여 37°C, 5% CO2 조건에서 배양하였다.
데이터처리
A Student's t-test was used for determination of significance.
모든 실험결과는 평균±표준편차로 표시하였고 Sigma-Plot(Systat Software Inc., San Jose, CA, USA)을 이용하였으며, Student t-test를 이용하여 통계적 유의성을 얻었다.
이론/모형
5×105 cells per 60-mm plate, incubated for 24 h, and treated with various concentrations of cordycepin for 48 h. Cell viability was measured using an MTT assay. Each point represents the mean±SD of three independent experiments.
HCT116 세포의 침윤성에 미치는 cordycepin의 영향을 조사하기 위하여 matrigel invasion assay를 사용하였다. 이를 위하여 정상 조건 및 적정 농도의 cordycepin이 6시간 동안 처리된 HCT116 세포를 cordycepin이 함유된 FBSfree 배지로 처리한 matrigel-coated filter의 apical side에 분주하였다.
0 μm pore size insert(upper chamber)로 seeding한 후 100% confluence를 이룰 때까지 배양하였다. 이후 cordycepin을 48시간 동안 처리하고 Grant-Tschudy 및 Wira(26)의 방법에 준하여 upper 및 lower chamber에 electrode를 넣어 전기 저항도를 측정하였다.
성능/효과
ECM의 분해에 결정적인 역할을 하는 MMPs의 발현과 활성에 미치는 cordycepin의 영향을 조사한 결과, MMP-2뿐만 아니라 MMP-9의 발현도 전사 및 번역 수준에서 모두 감소되었으며, zymography에 의한 MMP-2 및 MMP-9의 발현도 cordycepin 처리 농도 의존적으로 모두 감소되었다. 그러나 MMPs의 억제인자에 해당하는 TIMPs의 경우 cordycepin의 처리에 의하여 모두 발현이 증가되었다(Fig.
침윤성 암세포는 이들 효소를 사용하여 세포외기질(extracellular matrix, ECM)의 분해와 전이 동안 기저체 막의 붕괴를 촉진함으로써 암세포의 침윤과 전이를 증대시킨다(8,9). MMPs 중 특히 gelatinase A와 B로 알려진 MMP-2와 -9가 다양한 암세포에서 활성이 비정상적으로 높게 관찰되며, 암세포의 침윤과 전이에 중요한 역할을 하는 것으로 알려졌다. 일반적으로 MMP2는 섬유아세포와 다양한 상피세포에서 MMP-9는 염증성 세포에서 우선적으로 높은 활성을 보이지만, 두 효소 모두 침윤-전이 잠재력과 깊은 상관성이 있다(10,11).
1A에 나타낸 바와 같다. 결과에서 알 수 있듯이 정상 배지에 배양된 세포에 비하여 cordycepin 처리 농도 의존적으로 HCT116 세포의 이동성이 현저하게 억제되었음을 알 수 있었다. 이러한 이동성의 억제가 cordycepin 의 세포독성에 의한 것인지의 여부를 조사하기 MTT assay 를 실시한 결과 본 실험에 시용된 농도 범위에서는 유의적인 세포증식 억제 효과가 관찰되지 않았다(Fig.
따라서 cordycepin의 TIMPs 발현 증가와 동반된 MMPs의 생성 및 활성 억제는 ECM의 분해를 차단함으로써 HCT116 세포의 이동성과 침윤력을 억제하였을 것으로 생각된다. 결론적으로 cordycepin에 의한 HCT116 인체 대장암세포의 이동성과 침윤력의 차단은 TJ 활성의 증가와 MMPs 발현의 억제에 의한 것임을 보여주는 것이다. 물론 이러한 결과가 대장암세포 특이적인 현상이라고는 할 수 없으며 동물 실험을 포함한 추가적인 연구가 필요하지만, 본 연구의 결과는 cordycepin이 항전이 인자로서 항암활성을 나타낸다는 귀중한 실험적 증거로서 활용될 것으로 생각한다.
5). 따라서 cordycepin의 TIMPs 발현 증가와 동반된 MMPs의 생성 및 활성 억제는 ECM의 분해를 차단함으로써 HCT116 세포의 이동성과 침윤력을 억제하였을 것으로 생각된다. 결론적으로 cordycepin에 의한 HCT116 인체 대장암세포의 이동성과 침윤력의 차단은 TJ 활성의 증가와 MMPs 발현의 억제에 의한 것임을 보여주는 것이다.
MMPs의 활성은 TIMPs에 의하여 상대적으로 차단될 수 있으므로 MMPs에 대한 TIMPs의 상대적인 발현 증가는 암세포 침윤력의 억제를 측정하는 주요 인자로 활용이 가능하다(4,19). 따라서 cordycepin이 이들 인자들의 발현에 어떤 영향을 미치는지를 조사한 결과, MMP-2와 MMP-9의 mRNA 및 단백질의 발현뿐만 아니라 그들의 효소적 활성도 억제되었음을 알 수 있었다. 그러나 cordycepin은 TIMPs의 발현을 처리 농도 의존적으로 매우 증가시켰다(Fig.
한편 세포와 세포 사이의 밀착 정도를 측정하는 가장 보편적인 방법 중의 하나인 TER은 최근 세포연접중 TJ의 견고성을 대별할 수 있기에 세포 해리의 억제 정도를 측정하는 도구로서 활용되고 있다. 따라서 이러한 cordycepin의 암세포 이동성 및 침윤성의 저해 효과가 TJ의 기능 변화와 관련이 있는지를 조사하기 위하여 TJ의 견고성을 나타내는 TER의 값(26)을 조사한 결과, cordycepin 처리에 의하여 유의적으로 증가하였음을 알 수 있었다(Fig. 3).
이와 연계되어 몇몇 선행연구들에서 항암활성을 가지는 물질들의 암세포 이동성 및 침윤성 억제가 TPP의 상승과 연관되어 있음이 보고된 바 있다(2,31,32). 본 연구의 결과에서도 세포독성이 없는 범위에서 cordycepin에 의한 HCT116 세포 이동성 및 침윤성 억제(Fig. 1 및 2)가 TER의 증가와 연관성이 있었는데(Fig. 3), 이는 cordycepin이 TJ의 누출을 억제하거나 역전시켰음을 의미하는 결과이다. TJ의 누출이 암세포의 전이과정과 밀접한 연관성을 지닌다는 점에서 TJ의 견고성 유지는 항전이의 척도로 사용된다는 점을 고려할 경우, cordycepin은 최소한 TJ의 활성을 증가시킴으로써 항전이 활성을 나타낸다고 할 수 있다.
최근 간암세포의 침윤력 획득에 claudin-1이 중요한 역할을 함이 밝혀졌는데, 이는 MMP-2의 발현 증가에 따른 활성 증가와 연관성이 있었으며 claudin-1의 발현을 인위적으로 차단할 경우 간암세포의 침윤력이 완벽 하게 차단되었음이 밝혀졌다(34). 이러한 결과들은 claudin 단백질들이 암세포의 검출과 진단을 위한 biomarker로서의 활용 가능성을 보여주는 것이며, 본 연구의 결과에서 제시한 claudin family들의 발현 저하(Fig. 4)는 cordycepin의 항전이 효능이 TJ의 기능 강화와 연계성이 있음을 의미하는 것이다. 또한 TJ 형성에는 E-cadherin이 조절인자로서 작용하며(35), 비록 암세포의 종류에 따라 다양하지만 EMT의 조절인자인 snail은 E-cadherin의 발현을 억제하면서 세포와 세포 사이의 접착력을 낮추거나 침윤력을 증가시키는 것으로 알려져 있다(27,36).
결과에서 알 수 있듯이 정상 배지에 배양된 세포에 비하여 cordycepin 처리 농도 의존적으로 HCT116 세포의 이동성이 현저하게 억제되었음을 알 수 있었다. 이러한 이동성의 억제가 cordycepin 의 세포독성에 의한 것인지의 여부를 조사하기 MTT assay 를 실시한 결과 본 실험에 시용된 농도 범위에서는 유의적인 세포증식 억제 효과가 관찰되지 않았다(Fig. 1B).
이상에서 관찰된 cordycepin에 의한 TER 증가와 TJ 구성 인자들의 발현 변화와 연계성을 조사한 결과, cordycepin 처리 농도 의존적으로 조사된 5종류의 claudin family 인자들(claudin-1, -2, -3, -4 및 -5) 중에서 claudin-2를 제외하고는 전사 및 번역수준에서 모두 감소하였다(Fig. 4). 또한 zinc finger transcription factor의 일종으로 epithelial-mesenchymal transition(EMT) 조절자에 해당되는 snail(27,28)의 발현 역시 cordycepin 처리에 의하여 감소되었으며, TJ뿐만 아니라 AJ의 형성을 조절하는 type Ⅰ transmembrane glycoprotein의 일종인 E-cadherin(29, 30)의 발현에는 큰 변화가 없었다(Fig.
후속연구
또한 TJ 형성에는 E-cadherin이 조절인자로서 작용하며(35), 비록 암세포의 종류에 따라 다양하지만 EMT의 조절인자인 snail은 E-cadherin의 발현을 억제하면서 세포와 세포 사이의 접착력을 낮추거나 침윤력을 증가시키는 것으로 알려져 있다(27,36). 따라서 본 연구에서 관찰된 cordycepin이 E-cadherin의 발현에는 큰 영향을 미치지 못하였으나 snail의 발현은 억제한 점(Fig. 4)에 대해서는 추가적인 연구가 필요한 부분이라고 생각된다.
결론적으로 cordycepin에 의한 HCT116 인체 대장암세포의 이동성과 침윤력의 차단은 TJ 활성의 증가와 MMPs 발현의 억제에 의한 것임을 보여주는 것이다. 물론 이러한 결과가 대장암세포 특이적인 현상이라고는 할 수 없으며 동물 실험을 포함한 추가적인 연구가 필요하지만, 본 연구의 결과는 cordycepin이 항전이 인자로서 항암활성을 나타낸다는 귀중한 실험적 증거로서 활용될 것으로 생각한다.
최근 cordycepin의 암세포 전이 억제 가능성에 관한 연구로는 전립선암세포(22), 방광암세포(23) 및 유방암세포(24) 등에서 이루어진 바 있고 in vivo 실험계에서도 확인된 바 있다(25). 암세포의 전이 억제에 관한 선행 결과들을 종합해보면, MMPs의 발현 및 활성 증가가 기본적인 기전으로 설명되고 있지만, 여전히 더욱 구체적이고 추가적인 연구가 필요한 실정이다. 따라서 본 연구에서는 cordycepin의 암세포 전이 억제 효능에 관한 추가적인 기전 해석의 일환으로 현재 연구가 상대적으로 미비한 인체 대장암세포(HCT116)를 이용하여 이들 세포의 이동성과 침윤성에 미치는 효과와 관련 유전자들의 발현 변화를 조사하였다.
질의응답
핵심어
질문
논문에서 추출한 답변
기질 금속단백분해효소 중 암세포에서 활성이 비정상적으로 높게 관찰되는 것은?
침윤성 암세포는 이들 효소를 사용하여 세포외기질(extracellular matrix, ECM)의 분해와 전이 동안 기저체 막의 붕괴를 촉진함으로써 암세포의 침윤과 전이를 증대시킨다(8,9). MMPs 중 특히 gelatinase A와 B로 알려진 MMP-2와 -9가 다양한 암세포에서 활성이 비정상적으로 높게 관찰되며, 암세포의 침윤과 전이에 중요한 역할을 하는 것으로 알려졌다. 일반적으로 MMP2는 섬유아세포와 다양한 상피세포에서 MMP-9는 염증성 세포에서 우선적으로 높은 활성을 보이지만, 두 효소 모두 침윤-전이 잠재력과 깊은 상관성이 있다(10,11).
상피세포 사이에서 볼 수 있는 특화된 세포간의 구조는?
전이는 암이 발병 부위로부터 인체의 다른 곳으로 이동하여 증식하는 현상으로 암에 의한 사망률을 증가시키는 가장 큰 요인이다. 상피세포에는 세포들 사이에는 gap junction, tight junction(TJ), adherens junction(AJ) 및 desmosome 과 같은 몇 가지 종류의 특화된 세포간의 구조를 가지는데, 그중 TJ는 세포 사이의 치밀한 이음부로서 다양한 분자와이온의 이동을 차단하는 역할을 한다(1,2). 그러나 많은 상피조직 유래 암세포들의 경우 TJ 체계가 무질서해지거나 붕괴됨으로써 상피 전기 저항성(transepithelial electrical resistance, TER)으로 대변되는 TJ의 전기적 저항이 감소 되어 있거나 상피곁세포투과성(transepithelial paracellular permeability, TPP)이 증가되어 있다.
암의 전이란?
전이는 암이 발병 부위로부터 인체의 다른 곳으로 이동하여 증식하는 현상으로 암에 의한 사망률을 증가시키는 가장 큰 요인이다. 상피세포에는 세포들 사이에는 gap junction, tight junction(TJ), adherens junction(AJ) 및 desmosome 과 같은 몇 가지 종류의 특화된 세포간의 구조를 가지는데, 그중 TJ는 세포 사이의 치밀한 이음부로서 다양한 분자와이온의 이동을 차단하는 역할을 한다(1,2).
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