[논문]복분자 미숙과 추출물이 전립선암 세포주와 전립선비대 백서모델에 미치는 영향

이수정; 최혜란; 이정현; 권지웅; 이희권; 정종태; 이태범

doi:10.3746/jkfn.2014.43.4.507

복분자 미숙과 추출물이 전립선암 세포주와 전립선비대 백서모델에 미치는 영향
Effects of Unripe Black Raspberry Extracts on Prostate Cancer Cell Line and Rat Model of Benign Prostatic Hyperplasia 원문보기

한국식품영양과학회지 = Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition, v.43 no.4, 2014년, pp.507 - 515

이수정 ((재)고창복분자연구소) , 최혜란 ((재)고창복분자연구소) , 이정현 ((재)고창복분자연구소) , 권지웅 ((재)고창복분자연구소) , 이희권 ((재)고창복분자연구소) , 정종태 ((재)고창복분자연구소) , 이태범 ((재)고창복분자연구소)

초록
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본 연구는 전립선암세포주인 LNCaP 세포주와 테스토스테론으로 유도된 전립선비대 백서모델에서 복분자 추출물의 전립선비대 억제 효과를 조사하였다. 첫째, 전립선암 세포주(LNCaP)에서 복분자 미숙과 추출물의 안드로겐 관련 전립선비대 유전자 억제 효과를 조사한 결과 미숙과 50% 에탄올 추출물은 안드로겐 수용체(AR)뿐만 아니라 전립선특이항원(PSA)과 5-알파 환원 효소 type 2(5AR2)의 발현을 가장 높게 억제하였다. 또한 LNCaP 세포에 DHT로 안드로겐 관련 유전자를 유도한 후 복분자 미숙과 50% 에탄올 추출물을 처리한 결과 AR과 PSA mRNA의 발현이 억제됨을 확인하였다. 둘째, 테스토스테론을 이용하여 전립선비대를 유도한 동물모델에서 복분자 미숙과 50% 에탄올 추출물을 6주간 투여한 후 전립선비대 개선 효과를 조사한 결과, 전립선비대유발군에 복분자 미숙과 추출물을 투여한 군에서 전립선 무게, 전립선 소포의 상피세포 두께 및 면적이 감소함을 확인할 수 있었고, 전립선비대 유발 호르몬인 DHT level이 감소함을 확인할 수 있었다.

Abstract ▼ AI-Helper

Benign prostatic hyperplasia (BPH), which is commonly found in aging men, is characterized by hyperplasia of prostatic stromal and epithelial cells beginning in the periurethral zone of the prostate. The prevalence of BPH increases in an age-dependent manner. Here, we investigated the protective effects of unripe Rubus occidentalis extracts (UROE) on BPH development using a prostate cancer cell line and testosterone-induced BPH rat model. Experiments using an established hormone-dependent prostate cancer cell line (LNCaP) showed that UROE treatment significantly decreased expression of androgen-related genes, including androgen receptor (AR), prostate specific antigen (PSA), and 5-alpha reductase 2, but not 5-alpha reductase 1, which was also observed in flutamide-treated cells. Further, AR and PSA gene expression was reduced by UROE treatment under androgen-stimulated conditions using dihydrotestosterone (DHT). BPH animals displayed elevated prostate weights. However, UROE as well as finasteride treatment significantly reduced prostate weights and DHT levels compared to testosterone-induced BPH animals. Histopathological analysis also showed that UROE treatment suppressed testosterone-induced prostatic hyperplasia. Taken together, the results suggest that UROE may effectively inhibit the development of BPH and thus may be a useful agent in BPH treatment.

주제어

AI 본문요약
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문제 정의

최대 생산지인 고창을 비롯한 전국적으로 재배되고 있는 복분자(Rubus occidentalis)는 다양한 폴리페놀을 함유하고 있어 항산화, 항염증, 항암 효과가 있다고 알려져 있다(13). 본 연구는 전립선암세포주인 LNCaP 세포주와 테스토스테론으로 유도된 전립선비대 백서모델에서 복분자 미숙과 추출물의 전립 선비대 억제 효과를 확인해 보고자 연구를 진행하였다.
본 연구는 전립선암세포주인 LNCaP 세포주와 테스토스테론으로 유도된 전립선비대 백서모델에서 복분자 추출물의 전립선비대 억제 효과를 조사하였다. 첫째, 전립선암 세포주 (LNCaP)에서 복분자 미숙과 추출물의 안드로겐 관련 전립 선비대 유전자 억제 효과를 조사한 결과 미숙과 50% 에탄올 추출물은 안드로겐 수용체(AR)뿐만 아니라 전립선특이항원(PSA)과 5-알파 환원 효소 type 2(5AR2)의 발현을 가장 높게 억제하였다.

가설 설정

농도가 낮아지는 것을 가정할 수 있다. 결과적으로 복분자 미숙과에는 5AR을 저해하는 성분이 존재하는 것으로 추정된다.

제안 방법

First strand cDNA를 50 mM Tris-HCl(pH 8.3), 75 mM KCl, 3 mM MgCl2 , 10 mM DTT(Invitrogen, Carlsbad, CA, USA), 1 U/μL RNasin Invitrogen), 1 mM each dNTP, oligo(dT)20 100 ng과 MMLV reverse transcriptase (Invitrogen) 200 U가 함유된 20 μL의 용액에서 총 RNA2 μg으로부터 합성하였다.
LNCaP 세포를 96 well plate에 well당 4×104 cells/mL 의 농도로 분주한 후 24시간 동안 배양하고, 복분자 미숙과 추출물을 처리한 뒤 48시간 뒤에 methyl thiazolyl diphenyl tetrazolium(MTT) assay를 시행하였다(14).
RNA 농도(1 OD=40 μg/mL)는 DUR730 spectrophotometer(Beckman, Fullerton, CA, USA)를 이용하여 260 nm에서 측정하였다.
개체당 각각 종단면(longitudinal section)으로 정중면(median plane)이 나오도록 트리밍(trimming)하였고, 파라핀 포매 후, 4 μm 두께로 절편하여 H&E stain(Sigma-Aldrich)을 시행하였다.
전립선비대가 유발되는 과정에서 테스토스테론은 5AR에 의해 DHT로 전환되고, 이렇게 생성된 DHT는 핵 내 존재하는 AR과 결합하여 PSA mRNA의 발현을 증가시키게 된다. 따라서 전립선비대 모델을 유도하기 위해서 LNCaP 세포에 50 nM의 DHT를 처리한 후 AR과 PSA mRNA를 확인하였다. 그 결과 DHT 처리에 의해 AR mRNA의 변화는 없었지만 PSA mRNA의 발현은 1.
백서로부터 획득된 혈액에 EDTA를 처리하여 4℃, 3,000 rpm으로 15분간 원심분리 한 뒤 혈장(blood plasma)을 분리하여 DHT(dihydrotestosterone ELISA kit, ALPCO, Salem, NH, USA)의 농도를 측정하였다.
생후 10주령의 수컷 백서를 정상대조군, 전립선비대 유발군으로 나누고 testosterone propionate(Samil Pharmaceutical Company, Seoul, Korea)를 3 mg/kg으로 6주간 매일 피하 주사를 시행하여 전립선비대증을 유발하였다. 복분자 미숙과 추출물 투여군은 복분자 저용량 급이군(150 mg/kg), 중용량 급이군(300 mg/kg), 고용량 급이군(600 mg/kg)을 6주간 경구 투여하였고, 양성대조군은 전립선비대 개선에 사용되는 약물인 finasteride(TCI, Tokyo, Japan)를 1 mg/kg 으로 복분자 미숙과 추출물과 동일하게 6주간 경구 투여하였다.
본 실험에 사용된 복분자 에탄올 추출물은 미숙과 또는 완숙과 10 kg당 10 L의 에탄올(25, 50, 75% EtOH)로 환류 냉각장치를 사용하여 80℃에서 2시간 2회 반복 추출, 여과, 감압 농축하여 용매를 제거한 후 동결건조 하였으며, 물 추출물은 동량의 증류수로 100℃에서 2시간 2회 반복 추출, 여과한 후 감압 농축하여 동결건조 과정을 거쳐 제조하였다.
생후 10주령의 수컷 백서를 정상대조군, 전립선비대 유발군으로 나누고 testosterone propionate(Samil Pharmaceutical Company, Seoul, Korea)를 3 mg/kg으로 6주간 매일 피하 주사를 시행하여 전립선비대증을 유발하였다. 복분자 미숙과 추출물 투여군은 복분자 저용량 급이군(150 mg/kg), 중용량 급이군(300 mg/kg), 고용량 급이군(600 mg/kg)을 6주간 경구 투여하였고, 양성대조군은 전립선비대 개선에 사용되는 약물인 finasteride(TCI, Tokyo, Japan)를 1 mg/kg 으로 복분자 미숙과 추출물과 동일하게 6주간 경구 투여하였다.
3), 75 mM KCl, 3 mM MgCl₂ , 10 mM DTT(Invitrogen, Carlsbad, CA, USA), 1 U/μL RNasin Invitrogen), 1 mM each dNTP, oligo(dT)₂₀ 100 ng과 MMLV reverse transcriptase (Invitrogen) 200 U가 함유된 20 μL의 용액에서 총 RNA2 μg으로부터 합성하였다. 실시간 PCR은 Fast Start DNA Master SYBR Green Ⅰ kit(Roche, Mannheim, Germany) 을 이용하여 Light Cycler 2.0에서 증폭하였다. 사용한 primer와 PCR 조건은 Table 1, 2와 같으며 유전자의 정량분석은 Light Cycler Software 4.
실험동물 사육실은 아침 8시부터 저녁 8시까지 12시간 간격으로 명암을 조절하였고, 사육실의 온도는 22±2℃, 50±5% 습도를 유지하였다.
이후 1×TBS-T로 washing 후 ECL Western Blotting Substrate(Promega Corp., Madison, WI, USA)로 단백질의 발현 정도를 확인하였다.
개체당 각각 종단면(longitudinal section)으로 정중면(median plane)이 나오도록 트리밍(trimming)하였고, 파라핀 포매 후, 4 μm 두께로 절편하여 H&E stain(Sigma-Aldrich)을 시행하였다. 이후 광학 현미경(Nikon Eclipse E200, Nikon, Tokyo, Japan)으로 전립선 상피세포의 두께(epithelial thickness)와 전립선 소포(acina) 면적의 변화를 관찰하고(15,16), image analyzer(Focus Technology, Hamburg, Germany)를 이용하여 상피세포의 두께와 소포의 면적을 측정하였다.
피하주사와 경구 투여를 6주간 시행하고 마취기를 이용하여 마취시킨 뒤 수술대 위에서 하복부 종절개를 시행하였다. 전립선을 분리할 때에는 요도와 방광, 정낭선이 파열되지 않도록 최대한 둔성 분리하였고, 전립선이 파열되어 선액이 빠져나가지 않도록 분리하여 전립선의 크기와 무게를 측정하였다. 조직의 병리학적 변화를 관찰하기 위해 전립선 조직을 10% 중성포르말린에 24시간 이상 고정하였다.
1D). 추가적인 전립선비대 억제 효과를 조사하기 위하여 복분자 미숙과 중에서 AR, PSA, 5AR2의 억제 효과가 가장 뛰어난 미숙과 50% 에탄올 추출물을 선택하여 실험을 진행하였다. 미숙과 50% 에탄올 추출물을 농도 별로 처리한 결과 50 μg/mL의 농도에서 AR, PSA 및 5AR2 mRNA의 발현이 억제되었고(Fig.
피하주사와 경구 투여를 6주간 시행하고 마취기를 이용하여 마취시킨 뒤 수술대 위에서 하복부 종절개를 시행하였다. 전립선을 분리할 때에는 요도와 방광, 정낭선이 파열되지 않도록 최대한 둔성 분리하였고, 전립선이 파열되어 선액이 빠져나가지 않도록 분리하여 전립선의 크기와 무게를 측정하였다.

대상 데이터

RNA 추출은 total RNA extraction reagent인 Tri-reagent(RNAiso PLUS, TAKARA, Otsu, Japan)를 이용하였다. Tri-reagent 1 mL를 세포에 넣고 15초 동안 vortex한 뒤 15,000 rpm에서 15분 동안 원심분리 하였다.
본 연구에서 사용한 실험동물은 생후 10주령의 특정병원체부재(specific pathogen free, SPF) 상태인 수컷 Sprague Dawley(SD) rats를 중앙실험 동물(Seoul, Korea)에서 구입하여 사용하였다. 1주일간의 적응기간을 거친 뒤 플라스틱 케이지에 2마리씩 사육하였다.
1주일간의 적응기간을 거친 뒤 플라스틱 케이지에 2마리씩 사육하였다. 사료는 실험동물용 고형사료(Purina, Seoul, Korea)와 필터 및 자외선 살균기로 여과 살균된 정제수를 자유롭게 섭취하도록 하였다. 실험동물 사육실은 아침 8시부터 저녁 8시까지 12시간 간격으로 명암을 조절하였고, 사육실의 온도는 22±2℃, 50±5% 습도를 유지하였다.
, 37℃ 세포 배양기에서 배양하였다. 시험에 사용되는 세포는 배양접시에 세포가 60~70% 되었을 때 복분자 추출 물을 48시간 동안 처리한 후, 다음의 실험을 진행하였다.
/mL의 농도로 희석하여 분주하고, 복분자 미숙과 추출물을 48시간 동안 처리하였다. 양성대조군으로 AR 억제제인 flutamide를 사용 하였다. 복분자 미숙과 추출물과 양성대조군을 처리한 지 48시간 뒤에 차가운 PBS로 dish를 washing하고 lysis buffer를 dish에 뿌린 후 스크래퍼를 이용해 세포를 획득하였다.
전립선암세포주인 LNCaP 세포를 10% fetal bovine serum(PAA, Toronto, ON, Canada)과 항생제(penicillin/ streptomycin, Lonza, Walkersville, MD, USA)를 함유한 RPMI1640(Welgene, Daegu, Korea) 배지를 사용하여 5% CO2, 37℃ 세포 배양기에서 배양하였다.

데이터처리

Data shown in graphs are the mean±SE (n=3) a-cMeans indicates significant differences between groups at P<0.05 by Duncan's multiple comparison test.
각 개체의 전립선 상피세포의 두께와 소포의 면적은 개체당 각각 10번의 다른 부위를 임의로 측정하여 얻은 값의 평균±표준오차(mean±SE)로 나타내었다.
실험결과는 SPSS 12.0K(SPSS Inc., Chicago, IL, USA)를 이용하여 Duncan's multiple range test를 통해 분석하였고, P<0.05인 경우에 통계학적으로 유의한 것으로 판정하였다.

이론/모형

0에서 증폭하였다. 사용한 primer와 PCR 조건은 Table 1, 2와 같으며 유전자의 정량분석은 Light Cycler Software 4.0(Roche)을 이용하였다.
이후 13,000 rpm으로 15분 동안 원심분리를 하여 상층액을 획득하였다. 획득된 상층액은 Bradford 정량법을 이용해 단백질 정량을 시행하였고, SDS-PAGE gel에 loading 하였다. 이후 PVDF membrane (Bio-Rad, Hercules, CA, USA)에 단백질을 transfer (Trans-Blot® Turbo^TM Transfer System, Bio-Rad) 시킨 후, 5% blocking buffer(skim milk, Sigma-Aldrich Co.

성능/효과

LNCaP 세포에서 복분자 미숙과의 물과 에탄올 농도별 추출물의 세포독성실험을 실시한 결과, 모든 추출 물의 50 μg/mL 농도에서 80% 이상의 생존율을 보였다 (data not shown).
LNCaP 세포주에서 복분자 미숙과 추출물이 안드로겐 관련 유전자(AR, PSA, 5AR1, 5AR2)에 미치는 영향을 확인해본 결과, 미숙과 추출물 중 50% 에탄올 추출물이 안드로겐 관련 유전자에 대해 억제 효과를 나타내었다(Fig. 1). 미숙과 50% 에탄올 추출물은 AR mRNA뿐만 아니라 PSA 및 5AR2 mRNA의 발현을 억제하였다(Fig.
농도가 낮아지는 것을 가정할 수 있다. 결과적으로 복분자 미숙과에는 5AR을 저해하는 성분이 존재하는 것으로 추정된다. 또한 Bisson 등(25)은 cocoa의 폴리페놀 성분이 혈청 내의 DHT의 level과 전립선비대를 감소시킨다고 보고하였고, 녹차의 폴리페놀 성분인 EGCG 성분이 athymic nude mice 혈청에서 PSA level을 낮춘다는 연구 결과가 보고된바 있다.
따라서 전립선비대 모델을 유도하기 위해서 LNCaP 세포에 50 nM의 DHT를 처리한 후 AR과 PSA mRNA를 확인하였다. 그 결과 DHT 처리에 의해 AR mRNA의 변화는 없었지만 PSA mRNA의 발현은 1.8배 증가되었다. 또한 DHT 처리 그룹과 비교하여 미숙과 50% 에탄올 추출물 처리에 의해 AR 및 PSA mRNA의 발현이 감소되는 효과를 보였다(Fig.
복분자 미숙과에 다량 함유된 폴리페놀 성분이 DHT의 합성을 돕는 5AR을 억제시킨다는 보고(20)와 본 연구 결과를 토대로 복분자 미숙과 추출물이 DHT 농도를 낮추는 기작에 대해서 복분자 성분에 의해 테스토스테론으로부터 DHT를 생성하는 효소인 5AR의 활성이 억제되어 혈중 DHT였다. 둘째, 테스토스테론을 이용하여 전립선비대를 유도한 동물모델에서 복분자 미숙과 50% 에탄올 추출물을 6주간 투여한 후 전립선비대 개선 효과를 조사한 결과, 전립선비대 유발군에 복분자 미숙과 추출물을 투여한 군에서 전립선 무게, 전립선 소포의 상피세포 두께 및 면적이 감소함을 확인할 수 있었고, 전립선비대 유발 호르몬인 DHT level이 감소 함을 확인할 수 있었다.
복분자 미숙과에 다량 함유된 폴리페놀 성분이 DHT의 합성을 돕는 5AR을 억제시킨다는 보고(20)와 본 연구 결과를 토대로 복분자 미숙과 추출물이 DHT 농도를 낮추는 기작에 대해서 복분자 성분에 의해 테스토스테론으로부터 DHT를 생성하는 효소인 5AR의 활성이 억제되어 혈중 DHT였다. 둘째, 테스토스테론을 이용하여 전립선비대를 유도한 동물모델에서 복분자 미숙과 50% 에탄올 추출물을 6주간 투여한 후 전립선비대 개선 효과를 조사한 결과, 전립선비대 유발군에 복분자 미숙과 추출물을 투여한 군에서 전립선 무게, 전립선 소포의 상피세포 두께 및 면적이 감소함을 확인할 수 있었고, 전립선비대 유발 호르몬인 DHT level이 감소 함을 확인할 수 있었다.
8배 증가되었다. 또한 DHT 처리 그룹과 비교하여 미숙과 50% 에탄올 추출물 처리에 의해 AR 및 PSA mRNA의 발현이 감소되는 효과를 보였다(Fig.4). 양성대조군인 flutamide는 전립선암 치료제로서 AR 억제제로 알려져 있지만(17), 본 연구에서는 전립선암 세포주 에서 복분자 처리에 의해 AR뿐만 아니라 PSA mRNA도 억제함을 확인할 수 있었다.
첫째, 전립선암 세포주 (LNCaP)에서 복분자 미숙과 추출물의 안드로겐 관련 전립 선비대 유전자 억제 효과를 조사한 결과 미숙과 50% 에탄올 추출물은 안드로겐 수용체(AR)뿐만 아니라 전립선특이항원(PSA)과 5-알파 환원 효소 type 2(5AR2)의 발현을 가장 높게 억제하였다. 또한 LNCaP 세포에 DHT로 안드로겐 관련 유전자를 유도한 후 복분자 미숙과 50% 에탄올 추출물을 처리한 결과 AR과 PSA mRNA의 발현이 억제됨을 확인하였다. 둘째, 테스토스테론을 이용하여 전립선비대를 유도한 동물모델에서 복분자 미숙과 50% 에탄올 추출물을 6주간 투여한 후 전립선비대 개선 효과를 조사한 결과, 전립선비대유발군에 복분자 미숙과 추출물을 투여한 군에서 전립선 무게, 전립선 소포의 상피세포 두께 및 면적이 감소함을 확인할 수 있었고, 전립선비대 유발 호르몬인 DHT level이 감소함을 확인할 수 있었다.
2D). 또한 복분자 미숙과 50% 에탄올 추출물의 처리는 AR 단백 질의 발현을 눈에 띄게 억제하였고 flutamide는 AR의 단백질 발현을 완전히 억제하였다(Fig. 3).
미숙과 50% 에탄올 추출물을 농도 별로 처리한 결과 50 μg/mL의 농도에서 AR, PSA 및 5AR2 mRNA의 발현이 억제되었고(Fig. 2A~C), 양성대조군인 flutamide(10 μg/mL) 처리 시 미숙과 50% 에탄올 추출물 50 μg/mL를 처리했을 때와 비슷한 억제 효과를 보였다.
복분자 미숙과 추출물 저용량 급이군은 2,919.5±222.26 μm2, 중용량 급이군은 2,677.8± 153.13 μm2, 고용량 급이군은 2,794.3±114.83 μm2로 테스토스테론 투여군과 비교했을 때 유의한 감소 효과를 확인할 수 있었고 복분자 추출물 그룹 간의 차이는 보이지 않았 다(Fig. 6B, 6D)(P<0.05).
복분자 미숙과에 다량 함유된 폴리페놀 성분이 DHT의 합성을 돕는 5AR을 억제시킨다는 보고(20)와 본 연구 결과를 토대로 복분자 미숙과 추출물이 DHT 농도를 낮추는 기작에 대해서 복분자 성분에 의해 테스토스테론으로부터 DHT를 생성하는 효소인 5AR의 활성이 억제되어 혈중 DHT였다. 둘째, 테스토스테론을 이용하여 전립선비대를 유도한 동물모델에서 복분자 미숙과 50% 에탄올 추출물을 6주간 투여한 후 전립선비대 개선 효과를 조사한 결과, 전립선비대 유발군에 복분자 미숙과 추출물을 투여한 군에서 전립선 무게, 전립선 소포의 상피세포 두께 및 면적이 감소함을 확인할 수 있었고, 전립선비대 유발 호르몬인 DHT level이 감소 함을 확인할 수 있었다.
05). 복분자를 주성분으로 산수유, 토사자를 배합한 생약제제를 이용하여 전립선비대 유발 쥐에서 효능을 확인한 결과, 전립선비대 유발군에서는 전립선 상피세포가 불규칙하게 배열되어 gland 및 간질세포가 과대하게 발달되어 있었으나 복합추출물을 투여한 군에서는 전립선의 증식과 gland의 발달이 현저히 감소됨을 확인할 수있었다(23).
세 그룹 모두 테스토스테론 투여군과 비교하여 상피세포의 두께가 유의하게 감소됨을 확인하였다(Fig. 6A, 6C)(P<0.05).
양성 대조군인 finasteride 투여군의 상피세포 두께의 평균값은 37.0±5.59 μm로 테스토스테론 투여군과 비교하여 현저한 감소를 보였고, 복분자 미숙과 추출물 저용량 급이군은 38.2±4.02 μm, 중용량 급이군은 37.7±3.98 μm, 고용량 급이군은 26.7±2.80 μm로 측정되었다.
양성 대조군인 finasteride군에서도 54.9±8.9 ng/ mL로 테스토스테론 투여군에 비해 혈청 DHT의 양이 눈에 띄게 감소된 것을 확인하였다(Fig. 7)(P<0.05).
4). 양성대조군인 flutamide는 전립선암 치료제로서 AR 억제제로 알려져 있지만(17), 본 연구에서는 전립선암 세포주 에서 복분자 처리에 의해 AR뿐만 아니라 PSA mRNA도 억제함을 확인할 수 있었다.
복분자는 폴리페놀 이외에 전립선비대 개선에 좋다고 알려진 무기질(아연, 마그네슘, 셀레늄 등), 비타민, 아미노산 등이 많이 함유되어 있다(26). 이러한 선행 연구내용과 본 연구 결과들을 종합해 볼 때 복분자의 주성분인 폴리페놀 성분과 무기질 및 미네랄 등 다양한 생리활성 물질들이 복합적으로 작용하여 전립선비대 개선 효과를 나타내는 것으로 생각 되어진다.
정상 대조군의 상피세포 두께의 평균값은 14.8± 3.19 μm이었고, 테스토스테론 투여군의 평균값은 72.0±7.18 μm로 유의하게 크기가 증가된 것을 확인할 수 있었다(P< 0.05).
정상대조군의 전립선 무게는 100± 5.95 mg이었고, 전립선비대 유발군인 테스토스테론 투여군의 전립선 무게는 256.5±14.1 mg으로 통계학적으로 유의하게 증가되었으며, 이는 테스토스테론이 전립선비대를 유도하였음을 보여주고 있다.
본 연구는 전립선암세포주인 LNCaP 세포주와 테스토스테론으로 유도된 전립선비대 백서모델에서 복분자 추출물의 전립선비대 억제 효과를 조사하였다. 첫째, 전립선암 세포주 (LNCaP)에서 복분자 미숙과 추출물의 안드로겐 관련 전립 선비대 유전자 억제 효과를 조사한 결과 미숙과 50% 에탄올 추출물은 안드로겐 수용체(AR)뿐만 아니라 전립선특이항원(PSA)과 5-알파 환원 효소 type 2(5AR2)의 발현을 가장 높게 억제하였다. 또한 LNCaP 세포에 DHT로 안드로겐 관련 유전자를 유도한 후 복분자 미숙과 50% 에탄올 추출물을 처리한 결과 AR과 PSA mRNA의 발현이 억제됨을 확인하였다.
테스토스테론 투여군 90.7±1.4 ng/mL와 비교하였을 때, 복분자 미숙과 추출물 저용량, 중용량, 고용량 급이군에서는 각각 79.4±5.1, 65.7±6.8, 63.4±4.5 ng/mL로 중용량과 고용량 급이군에서 혈청 DHT의 유의적인 감소 효과를 나타내었다.
테스토스테론의 피하주사와 finasteride를 경구 투여한 양성대조군의 전립선 무게는 178.4±13.6 mg으로 측정되었고, 복분자 미숙과 50% 에탄올 추출물 저용량 급이군, 중용량 급이군, 고용량 급이군의 전립선 무게는 각각 224.8±9.3, 182.1±13.1, 192.1±10mg으로 측정되었다.

질의응답

핵심어	질문	논문에서 추출한 답변
	DHT 생성에 관련된 효소는?	DHT는 5-알파환원효소 type 1(5-alpha reductase type 1, 5AR1, skin and liver)과 type 2(5AR2, skin/scalp, prostate, and liver) 동종효소를 통해 테스토스테론으로부터 전환되어 생성된다(2,3). 전립선 내에서는 5AR2에 의해 테스토스테론으로부터 DHT로 전환되며, 5AR2는 정상 전립선의 발달과 노년의 전립선 비대에서 중요한 역할을 담당 한다(4).
	전립선비대증을 치료하는 식물성 천연약제에는 어떤 것들이 있는가?	유럽에서는 식물 추출물들이 전립선비대증 치료제로서 처방될 뿐 아니라 보험적용이 되는 치료 옵션인 반면 미국에서는 건강보조식품으로서 분류되어 처방 없이 구입이 가능하다. 전립선비대증을 치료하는 식물성 천연약제로 saw palmetto(Serenoa repens), African pygeum(Pygeum afficanum), pumpkin(Cucurbita pepo) 그리고 stinging nettle root가 알려져 있다(8). 이러한 phytotherapeutic 식물 추출물의 구성성분을 살펴보면 phytosterols, β-sitosterol, delta-5-sterols, delta-7-sterols, campesterol, stigmasterol, lupenone, lupeol, terpenoids, fatty acids, lectins, plant oils, polysaccharides, flavonoids, phytoestrogens, coumestrol, genistein 등으로 구성되어 있다(9).
	phytotherapeutic 식물 추출물의 구성성분은 어떤 효과가 있는가?	이러한 phytotherapeutic 식물 추출물의 구성성분을 살펴보면 phytosterols, β-sitosterol, delta-5-sterols, delta-7-sterols, campesterol, stigmasterol, lupenone, lupeol, terpenoids, fatty acids, lectins, plant oils, polysaccharides, flavonoids, phytoestrogens, coumestrol, genistein 등으로 구성되어 있다(9). 이러한 구성성분들은 항안드로겐 효과(AR 억제) 및 5AR 억제 효과가 있다고 알려져 있다(8). 특히 beta-sitosterol은 가장 풍부한 식이 phytosterol로서 채소, 과일 및 콩 등에 많이 함유되어 있고, 이 성분은 pygeum, 톱야자 등과 같은 전립선에 특이적인 생약에서 중요한 성분으로 생각되고 있다.

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표제어: PCR

동의어: Packet Collision Rate

용어 설명 출처 목록 (6)

용어 설명: PCR은 세균 특이성이 있는 primer를 이용하여 적은 수의 세균이 있을지라도 쉽게 검출할 수 있는 유용한 방법이며, 이를 이용하여 구강 내 치면세균막이나 타액에서 직접 세균을 검출할 수 있게 되었다[8].

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