선택한 단어 수는 입니다.
최소 단어 이상 선택하여야 합니다.
최소 단어 이상 선택하여야 합니다.
선택한 단어 수는 30입니다.
최대 10 단어까지만 선택 가능합니다.
최대 10 단어까지만 선택 가능합니다.
문제 정의
- rbcL유전자를 분자마커로 선정하여 계통분류를 수행하여 형태적인 분류의 결과를 뒷받침하였다. 또한 이들 6종의 망그로브 식물의 줄기껍질(bark)에 포함되어 있는 페놀성화합물 함량 및 항산화 활성을 비교하여 산업적 활용 가능성을 검토하였다.
- 본 연구에서는 미크로네시아 웨노섬에 자생하고 있는 4속 6종의 망그로브에 대한 외부 형태학적 및 분자계통학적 연구, 그리고 이들의 항산화 활성에 대해 조사하였다. 형태학적 형질에 근거한 웨노섬 망그로브의 분류와 rbcL 유전자 분석을 통해 이들 사이의 계통학적 관계를 파악할 수 있었다.
- 이 연구에서는 미크로네시아 축주의 수도섬인 웨노섬에 서식하고 있는 4속 6종의 망그로브 식물을 채집하여 형태학적인 특징을 관찰하고, 분류키를 작성하여 손쉬운 분류가 가능하도록 하였다. rbcL유전자를 분자마커로 선정하여 계통분류를 수행하여 형태적인 분류의 결과를 뒷받침하였다.
제안 방법
- ABTS 분석은 Kambayashi 등[25]의 방법을 일부 수정하여 수행하였다. ABTS 용액은 증류수를 사용하여 7 mM 농도로 희석하였고, potassium persulfate 는 2.
- 이 연구에서는 미크로네시아 축주의 수도섬인 웨노섬에 서식하고 있는 4속 6종의 망그로브 식물을 채집하여 형태학적인 특징을 관찰하고, 분류키를 작성하여 손쉬운 분류가 가능하도록 하였다. rbcL유전자를 분자마커로 선정하여 계통분류를 수행하여 형태적인 분류의 결과를 뒷받침하였다. 또한 이들 6종의 망그로브 식물의 줄기껍질(bark)에 포함되어 있는 페놀성화합물 함량 및 항산화 활성을 비교하여 산업적 활용 가능성을 검토하였다.
- 특히 줄기의 껍질(bark)은 동결건조 과정 중에 분리하여 건조하였다. 건조된 시료는 미세분말로 만들어 페놀성 화합물 및 항산화 활성 분석에 사용하였다. Gallic acid, DPPH (1,1-diphenyl-2- picryl hydrazil) 및 ABTS [2,2‘-azinobis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid) diammonium salt] 등은 Sigma Chemicals Co.
- 남태평양의 서식하는 망그로브의 분자생물학적 종판별을 위해 rbcL (1,5-bisphosphate carboxylase large subunit) 유전자를 분자마커로 사용했으며, rbcL 유전자에 대한 프라이머를 디자인하고(Forward 5'-AAATTGACTTATTATACTCCT-3', Reverse 5'-AAAGTTCCTCCACCGAATTGTAG-3') PCR을 수행하였다.
- 60℃ 배양기에서 20분간 발색시킨 후, 765 nm 파장에서 흡광도를 측정하였다. 대조구로서는 50% 에탄올을 사용하였고, gallic acid를 사용하여 구한 검량 곡선으로부터 시료 중의 페놀성 화합물 함량을 계산하였다.
- 형태학적 형질에 근거한 웨노섬 망그로브의 분류와 rbcL 유전자 분석을 통해 이들 사이의 계통학적 관계를 파악할 수 있었다. 또한 망그로브의 높은 항산화 활성을 관찰하였다. 이러한 결과들은 앞으로 망그로브에 대한 기초학문적 연구와 상업적 응용에 대한 토대를 제공해 줄 수 있다.
- Louis, MO, USA)에서 구입하였으며, 다른 시약들은 99% 이상 순도를 가진 것을 실험에 사용하였다. 또한 분류학적 연구를 위한 확증표본용 재료는 꽃이나 열매가 달린 줄기 끝 부분을 채집하였고, 실험실 운반, 건조 후 표본을 제작하였다.
- 망그로브의 gDNA는 CTAB extraction method [22]를 일부 수정하여 추출하였다. 망그로브 시료는 액체질소하에서 막자사발을 사용하여 분쇄했고, 미세분쇄를 위해 cover glass를 첨가하였다.
- 미크로네시아 웨노섬에 서식하고 있는 망그로브 식물의 뿌리 구조와 잎 모양 등을 중심으로 형태적 분류를 수행하였다. 그 결과, 뿌리의 구조는 아치나 긴 막대모양, 판상, 원뿔 모양의 3가지 유형으로 구분되었다.
- 상층액을 제거하고 70%에탄올을 사용해서 두 차례 세척한 후 50 μL 증류수로 pellet을 녹여 gDNA를 추출했다.
- 샘플링을 수행한 6종의 망그로브로부터 CTAB method를 통해 genomic DNA를 추출하였고, rbcL primer를 이용하여 PCR을 수행했다[Fig. 4]
- 1 mL의 DPPH (16 mg/100 mL EtOH) 용액을 첨가하고 10분간 상온에서 반응 시킨 후, 517 nm에서 흡광도를 측정하였다. 시료를 첨가하지 않은 대조군과 비교하여 유리래디칼 소거 활성을 백분율(%) 로 나타내었다. 계산식은 아래와 같다.
- 약 1,000 bp의 사이즈로 증폭된 rbcL 유전자의 염기서열은 바이오니아 서열 분석팀을 통해 분석되었다. 분석한 염기서열은 NCBI blast를 통해 상동성이 높은 유전자와 matching하였을 때 각각 형태적 분류 결과와 동일한 결과를 얻었다.
- 외부 형태학적 형질을 기반으로 하였던 웨노섬에 서식하는 망그로브의 종 판별을 분자분류학적으로 입증하기 위해, 망그로브 잎조직으로부터 rbcL 유전자를 클로닝하고 염기서열을 분석하였다. 샘플링을 수행한 6종의 망그로브로부터 CTAB method를 통해 genomic DNA를 추출하였고, rbcL primer를 이용하여 PCR을 수행했다[Fig.
- 재료로 이용한 6종의 망그로브 식물의 산업적 활용성을 검토하기 위하여 줄기껍질(bark)의 페놀성 화합물 함량 및 항산화 활성을 분석하였다. 페놀성화합물 함량은 gallic acid를 표준시약으로 사용하여 얻은 검량곡선에 기초하여 분석하였으며, 추출물 시료 mg 당 μg으로 표시하였다.
- 망그로브 추출물은 건조시키고 4℃ 암처에서 보관하였다. 추출물은 증류수로 재현탁하여 페놀성화합물 함량 및 항산화 활성 분석에 사용하였다.
- 페놀성화합물 함량은 gallic acid를 표준시약으로 사용하여 얻은 검량곡선에 기초하여 분석하였으며, 추출물 시료 mg 당 μg으로 표시하였다.
- 본 연구에서는 미크로네시아 웨노섬에 자생하고 있는 4속 6종의 망그로브에 대한 외부 형태학적 및 분자계통학적 연구, 그리고 이들의 항산화 활성에 대해 조사하였다. 형태학적 형질에 근거한 웨노섬 망그로브의 분류와 rbcL 유전자 분석을 통해 이들 사이의 계통학적 관계를 파악할 수 있었다. 또한 망그로브의 높은 항산화 활성을 관찰하였다.
대상 데이터
- Gallic acid, DPPH (1,1-diphenyl-2- picryl hydrazil) 및 ABTS [2,2‘-azinobis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid) diammonium salt] 등은 Sigma Chemicals Co. (St. Louis, MO, USA)에서 구입하였으며, 다른 시약들은 99% 이상 순도를 가진 것을 실험에 사용하였다.
- 망그로브 식물은 2013년 2월에 미크로네시아 축주의 웨노섬 동쪽 연안에서 채집했다. 웨노섬의 망그로브는 섬을 둘러싸고 전체적으로 분포하지만, 망그로브림 즉 홍수림을 이루는 3개 지점을 선정하여 채집을 수행하였다[Fig.
- 망그로브 식물은 2013년 2월에 미크로네시아 축주의 웨노섬 동쪽 연안에서 채집했다. 웨노섬의 망그로브는 섬을 둘러싸고 전체적으로 분포하지만, 망그로브림 즉 홍수림을 이루는 3개 지점을 선정하여 채집을 수행하였다[Fig. 1]. 채집한 망그로브 재료는 분자생물학적 분석을 위해 진공팩으로 포장하여 실험실로 옮겨져서 세척한 후 동결건조하였다.
데이터처리
- 데이터의 normality와 homogeneity는 ANOVA로 확인하였고, 실험구 간의 차이는 one-way ANOVA와 Duncan’'s multiple range test로 평가하였다.
- 실험은 3번 반복 수행하였으며, 결과는 평균값±SD로 표시하였다.
- 통계분석은 SPSS 통계 소프트웨어를 사용하여 수행하였다. 데이터의 normality와 homogeneity는 ANOVA로 확인하였고, 실험구 간의 차이는 one-way ANOVA와 Duncan’'s multiple range test로 평가하였다.
이론/모형
- DPPH (1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl) 측정은 Lu와 Foo의 방법[24]에 따라 실시하였다. 시료 0.
- 망그로브 식물 줄기껍질의 페놀성 화합물 함량은 Kim 등[23]의 방법에 따라 실시하였다. 망그로브 추출물 0.
- 망그로브 줄기껍질 추출물의 항산화 활성은 DPPH 및 ABTS 기법을 사용하여 분석하였다. R.
- 분석한 염기서열은 NCBI blast를 통해 상동성이 높은 유전자와 matching하였을 때 각각 형태적 분류 결과와 동일한 결과를 얻었다. 분석된 염기서열은 mega 5 program을 통해 maximum likeilhood tree method로 분석하였다. 결과에 의하면, E.
성능/효과
- 6종의 망그로브 식물별 페놀성화합물의 함량은 0.72-1.10 mM/mg으로, R. apiculata와 X. granatum의 함량이 높았다(p<0.05).
- 55%)이 가장 낮은 것으로 나타났다[Table 1]. ABTS를 이용한 항산화 활성 결과도 DPPH 방법의 결과와 유사하였는데, S. alba의 활성(26.56%)이 가장 낮게 나타났다. 특이적인 것은 4종의 레드망그로브와 1종의 블랙망그로브 추출물에서의 항산화 활성은 페놀성화합물의 함량과 비례하는 결과가 얻어졌으나, 화이트망그로브인 E.
- 3C, 3D)의 뿌리는 레드 망그로브와 같이 원줄기 기부에서부터 사방으로 퍼진 stilit 또는 buttress 형태로 관찰되었다. E. agallocha의 큰 특징 중의 하나는 잎과 줄기를 자르면 맹독성의 유즙이 분비되었으며, 줄기는 밝은 갈색으로 다른 종과는 확연히 구분되었다.
- 망그로브 줄기껍질 추출물의 항산화 활성은 DPPH 및 ABTS 기법을 사용하여 분석하였다. R. apiculata, X. granatum, X. moluccensis 및 E. agallocha의 DPPH 항산화 활성결과는 82.50-84.85%로 높은 항산화 활성을 나타냈으며, S. alba의 활성(59.55%)이 가장 낮은 것으로 나타났다[Table 1]. ABTS를 이용한 항산화 활성 결과도 DPPH 방법의 결과와 유사하였는데, S.
- 분석된 염기서열은 mega 5 program을 통해 maximum likeilhood tree method로 분석하였다. 결과에 의하면, E. agallocha가 가장 먼저 분지되는데, 이는 E. agallocha만이 잎과 줄기에서 유독성 유즙을 분비하는 특징으로 나머지 5종과 구분했던 형태학적 결과와 일치하였다. 나머지 5종 중 Xylocarpus 속은 Rhizophora 속 보다는 Sonneratia 속과 더 가깝게 묶이는 점은, 망그로브를 줄기의 상대적 명암 차이(블랙, 화이트)와 발아하는 뿌리의 색깔(레드)로 망그로브를 구분해 사용하는 블랙, 레드, 화이트 망그로브라는 용어에는 식물의 계통적 의미는 없다고 할 수 있다.
- 미크로네시아 웨노섬에 서식하고 있는 망그로브 식물의 뿌리 구조와 잎 모양 등을 중심으로 형태적 분류를 수행하였다. 그 결과, 뿌리의 구조는 아치나 긴 막대모양, 판상, 원뿔 모양의 3가지 유형으로 구분되었다. 잎은 전체적 모양과 광택, 잎 선단부의 돌기나 가시가 종 구분에 이용되었다.
- 약 1,000 bp의 사이즈로 증폭된 rbcL 유전자의 염기서열은 바이오니아 서열 분석팀을 통해 분석되었다. 분석한 염기서열은 NCBI blast를 통해 상동성이 높은 유전자와 matching하였을 때 각각 형태적 분류 결과와 동일한 결과를 얻었다. 분석된 염기서열은 mega 5 program을 통해 maximum likeilhood tree method로 분석하였다.
- 56%)이 가장 낮게 나타났다. 특이적인 것은 4종의 레드망그로브와 1종의 블랙망그로브 추출물에서의 항산화 활성은 페놀성화합물의 함량과 비례하는 결과가 얻어졌으나, 화이트망그로브인 E. agallocha의 경우 페놀성 화합물의 함량이 낮은데도 불구하고 항산화 활성은 높은 것으로 나타났다[Table 1].
※ AI-Helper는 부적절한 답변을 할 수 있습니다.