[논문]Shewanella oneidensis PKA1008 유래 알긴산 분해 효소에 의해 제조된 알긴산 올리고당의 항염증 효과

김민지; 배난영; 박시우; 김꽃봉우리; 박지혜; 박선희; 안동현

doi:10.5657/kfas.2015.0888

Shewanella oneidensis PKA1008 유래 알긴산 분해 효소에 의해 제조된 알긴산 올리고당의 항염증 효과
Anti-Inflammatory Effect of Alginate Oligosaccharides Produced by an Alginate-Degrading Enzyme from Shewanella oneidensis PKA1008 on LPS-Induced RAW 264.7 Cells 원문보기

한국수산과학회지 = Korean journal of fisheries and aquatic sciences, v.48 no.6, 2015년, pp.888 - 897

김민지 (부경대학교 식품공학과) , 배난영 (부경대학교 식품공학과) , 박시우 (부경대학교 식품공학과) , 김꽃봉우리 (부경대학교 수산과학연구소) , 박지혜 (부경대학교 식품공학과) , 박선희 (부경대학교 식품공학과) , 안동현 (부경대학교 식품공학과)

Abstract ▼ AI-Helper

The anti-inflammatory effect of alginate oligosaccharides on LPS-induced RAW 264.7 cells was investigated at different time points (0-60 h). The alginate oligosaccharides were produced by an alginate-degrading enzyme from Shewanella oneidensis PKA1008. The alginate oligosaccharides decreased the production of nitric oxide and proinflammatory cytokines [tumor necrosis factor-${\alpha}$, interleukin (IL)-$1{\beta}$, and IL-6] in a dose-dependent manner. The alginate oligosaccharides showed peak anti-inflammatory activity after 36 h of incubation; at that time point, reduced protein expression of NF-${\kappa}B$ p65, iNOS, and COX-2 was detected. Furthermore, the alginate oligosaccharide treatment reduced the formation of ear edema at 36 h compared to samples examined at 0 h when the oligosaccharides were administered at 50 and 250 mg/kg body weight, as well as dermal thickness and mast cell numbers in a histological analysis. These results suggest that alginate oligosaccharides are a promising anti-inflammatory agent.

주제어

AI 본문요약
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문제 정의

, 1998). 따라서 본 연구에서는, 알긴산 올리고당화 시료의 염증성 cytokine의 분비에 대한 억제효과를 살펴보았다. 분비량을 측정한 결과(Fig.
본 연구에서는 항염증 효과가 가장 뛰어난 36 h 처리 알긴산 올리고당 시료가 NF-κB p65 발현에 어떠한 영향을 미치는지 확인하기 위해 western blot을 통해 단백질 발현량을 확인하였다.
알긴산 올리고당이 세포질 내 생성되는 iNOS, COX-2 및 NF-κB의 발현량에 미치는 영향을 알아보기 위하여 RAW 264.7 세포를 배양하였다.
이에 본 연구에서는 갈조류의 세포벽 점질 다당류이며 많은 기능성이 알려진 알긴산을 이전 연구에서(Sunwoo et al., 2013) 보고된 알긴산 분해능이 높은 Shewanella oneidensis PKA1008 유래 조효소와 반응시켜 생성된 알긴산 올리고당의 항염증 활성을 확인하고 산업적 이용가능성에 대하여 알아보고자 한다.

제안 방법

또한 미토콘드리아로부터 cytochrome C, apoptosis inducing factor를 방출시켜 세포자연사를 일으키기도 한다(Hippeli and Elastner, 1999). 0-60 h 동안 분해시킨 알긴산 올리고당 처리에 의한 NO 생성 억제 효과를 살펴보기 위하여 RAW 264.7 세포를 LPS로 활성화 시켰다. 그 후 알긴산 올리고당 시료를 10, 50 및 100 μg/ mL 농도로 처리하여 생성된 NO를 griess 시약을 이용하여 측정하였다(Fig.
0-60 h 동안 분해시킨 알긴산 올리고당을 대식세포에 대한 세포독성을 알아보고 항염증 효과 실험을 위한 농도 조건 설정을 위하여 RAW 264.7 세포에 대해 MTT assay를 실시하였다. 시료를 10, 50 및 100 μg/mL 농도로 첨가하여 실험한 결과(Fig.
NO의 농도는 배양액 내의 nitrite 농도를 griess 반응을 이용 하여 측정하였다(Lee et al., 2000). RAW 264.
RAW 264.7 cell을 1×106 cells/mL 농도로 well plate에 분주하고 20 h 전 배양 후, 1 μg/mL의 LPS와 알긴산 올리고당(10, 50, 100 μg/mL)을 첨가하여 37℃, 5% CO2 incubator (MCO-15AC, Sanyo, Osaka, Japan)에서 22 h 본 배양하였다.
Treatments: vehicle 2% Tween 80, prednisolone 0.08 mg/ear, 0 h sample 20 μL/ear, and 36 h sample 20 μL/ear.
iNOS, COX-2 및 NF-κB의 발현량을 검토하기 위한 항체로는 anti-mouse iNOS, COX-2 및 NF-κB를 사용하여 1:500으로 희석하고 상온에서 2시간 반응시킨 후 TBSS로 3회 세정하였다.
고정 후 파라핀 블록을 만들어 박편을 제조하고 hematoxylineosin (H&E) 및 toluidine-blue (T&B) 염색을 하여 조직을 관찰하였다.
귀 조직 관찰은 ICR 마우스의 오른쪽 귀에 샘플을 100 mg/mL 농도로 20 μL씩 도포하고 15분 뒤, 5% croton oil 을 20 μL씩 도포하였다.
그 후 알긴산 올리고당 시료를 10, 50 및 100 μg/ mL 농도로 처리하여 생성된 NO를 griess 시약을 이용하여 측정하였다(Fig. 3).
, Incheon, Korea)하여 상층액을 제거하였다. 그 후, 각 well에 DMSO를 첨가하고 이를 microplate reader(Model 550, Bio-rad, Richmond, CA, USA) 를 이용하여 540 nm에서 흡광도[optical density (O.D.)]를 측정하였다. 세포증식능은 다음 식에 의해 계산하였다.
5% croton oil을 20μL/ear 농도로 도포하였다. 도포 5시간 후 귀 두께를 측정하였고 croton oil의 처리로 귀 두께가 증가한 것을 부종의 형성으로 간주하였다. 귀 조직 관찰은 ICR 마우스의 오른쪽 귀에 샘플을 100 mg/mL 농도로 20 μL씩 도포하고 15분 뒤, 5% croton oil 을 20 μL씩 도포하였다.
1), 알긴산과 조효소액 반응 12시간 까지는 알긴산이 분해되지 않았으나, 반응 24 h부터 분해가 진행되어 36 h 까지는 trisaccharide와 pentasaccharide로 분해되었으며, 반응 48 h 이후부터는 monosaccharide까지 분해됨을 확인하였다. 따라서 S. oneidensis PKA 1008이 생산하는 조효소액은 알긴산을 단당 및 올리고당으로 분해시키는 것을 확인하였으며, 각 시간별 시료들을 이용하여 항염증 효과를 측정하였다.
따라서 이후의 RAW 264.7 세포를 이용한 항염증 효과 실험은 10, 50 및 100 μg/mL의 농도로 처리하여 실험을 진행하였다.
마우스 모델에서의 염증억제효과를 알아보기 위해 알긴산 0 h 및 36 h 알긴산 올리고당 시료를 10, 50 및 250 mg/kg 농도로 200 μL씩 경구 투여한 후 croton oil로 염증을 유발하였다.
반응 시간별 알긴산 올리고당으로의 분해 정도는 thin-layer chromatography (TLC)를 이용하여 확인하였으며, silica gel F254 plate를 이용하여 sample 3 μL씩을 spotting하고 1-butanol:acetic acid:water (2:1:1 v/v/v) 전개액을 이용하여 전개한 다음 silica gel plate 에 10% 황산첨가 에탄올 용액을 분무한 후 110℃에서 20분간 가열하였다.
반응시간에 따른 조효소에 의한 알긴산 분해 정도 S. oneidensis PKA1008 균주가 생산하는 조효소액을 알긴산에 처리하였을 시 알긴산이 분해되어 올리고당이 생성되는지를 확인하기 위하여 TLC 분석을 실시하였다. 0-60 h 까지 분해 정도를 살펴본 결과(Fig.
배양이 끝난 세포를 수집하여 3회 phosphate buffered saline (PBS)으로 세척한 후, Sheeba and Asha (2009)의 방법에 따라 iNOS 및 COX-2의 경우 cytosol lysis buffer [50 mM HEPES (pH 7.4), 150 mM NaCl, 5 mM EDTA, 1% deoxycholate, 5 mM phenylmethylsulfonyl fluoride, 1 μg/mL aprotinin, 1% Triton X-100, 0.1% NP-40을 이용하였으며, NF-κB의 경우 nucleus lysis buffer (10 mM HEPES, 100 mM NaCl, 1.5 mM MgCl2 , 0.1 mM EDTA, 0.1 mM ditiotreitol)를 첨가하여 30분간 4°C에서 lysis 시킨 후 15,520 g에서 20분간 원심분리 하여 세포막 성분 등을 제거하였다.
생후 8주령의 수컷, ICR 마우스에 알긴산 0 h, 알긴산 올리고당(36 h) 시료를 10, 50 및 250 mg/kg·body weight 농도로 200 μL 씩 경구투여하고 한 시간 후 오른쪽 귀에 2.5% croton oil을 20μL/ear 농도로 도포하였다.
1% naphthylendiamine dihydrochloride, 1:1)을 첨가하여 실온에서 10분간 반응시키고, microplate reader (Model 550, Bio-rad)를 이용하여 540 nm에서 흡광도를 측정하였다. 세포 배양액 내 NO의 농도는 sodium nitrite (NaNO₂)의 농도별 표준곡선과 비교하여 산출하였다.
세포배양액 내의 TNF-α, IL-6 및 IL-1β cytokine의 분비량을 ELISA kit (Mouse ELISA set, BD Bioscience, San Diego, CA, USA)를 이용하여 측정하였다.
세포에 1 μg/mL의 LPS와 10, 50, 100 μg/mL의 농도로 알긴산 올리고당을 각각 처리하여 24 h 재 배양하였다.
시료의 세포독성을 평가하기 위해 Park et al. (2006)의 방법을 약간 변형하여 MTT assay를 실시하였다. RAW 264.
알긴산 올리고당의 항염증 효과를 in vivo 상에서 알아보기 위하여 Kim et al. (2002)과 Saraiva et al. (2011)의 방법에 의거하여 귀부종 억제율을 측정하고 조직 관찰을 실시하였다. 생후 8주령의 수컷, ICR 마우스에 알긴산 0 h, 알긴산 올리고당(36 h) 시료를 10, 50 및 250 mg/kg·body weight 농도로 200 μL 씩 경구투여하고 한 시간 후 오른쪽 귀에 2.
5). 앞선 NO 와 pro-inflammatory cytokine의 분비 억제 결과에서 36 h 시료가 가장 좋은 항염증 효과를 나타내어 iNOS 및 COX-2의 발현 변화를 알아보았다. 그 결과, RAW 264.
염증 관련 cytokine의 분비량을 측정하기 위해 RAW 264.7 cell을 DMEM 배지를 이용하여 2.5 × 105 cells/mL로 조절한 후 24 well plate에 접종하고 5% CO2 incubator (MCO-15AC, Sanyo, Osaka, Japan)에서 18 h 전배양한 후, 1 μg/mL의 LPS 와 10, 50, 100 μg/mL의 알긴산 올리고당을 처리하여 12 h 재배양하였다.

대상 데이터

Murine의 대식세포주인 RAW 264.7 세포는 한국세포주은행 (KCLB 40071)에서 분양받아 사용하였으며, DMEM에 10% inactivated fetal bovine serum과 1% penicillin-streptomycin 을 첨가한 배지를 배양액으로 37℃, 5% CO₂ 조건에서 배양하였다. 실험과정의 모든 세포는 80-90% 정도의 밀도로 자랐을때 계대 배양하였고, 20 passages를 넘기지 않은 세포만 사용하였다.
반응 시간별 알긴산 올리고당으로의 분해 정도는 thin-layer chromatography (TLC)를 이용하여 확인하였으며, silica gel F254 plate를 이용하여 sample 3 μL씩을 spotting하고 1-butanol:acetic acid:water (2:1:1 v/v/v) 전개액을 이용하여 전개한 다음 silica gel plate 에 10% 황산첨가 에탄올 용액을 분무한 후 110℃에서 20분간 가열하였다. Standard mixture는 cellooligosaccharide를 사용하였으며, cellobiose, cellotriose, cellotetraose, cellopentaose, cellohexaose는 Megazyme (Megazyme Co., Wicklow, Ireland) 및 glucose는 Sigma-Aldrich Chemical Co. (St. Louis, MO, USA)에서 구입하여 사용하였다.
마우스 귀 조직 관찰 실험에서 생후 8주령의 수컷, ICR 마우스를 오리엔트바이오(Seongnam, Korea)에서 구입하여 사용하였으며 마우스는 온도 20±2°C, 습도 50±10%, 12 h 명암주기가 유지되는 동물 사육실에서 1주일간 예비 사육한 후 실험에 사용하였다.
본 실험에서 사용한 균주는 부산 연안 송정 앞바다에서 사멸기에 접어들어 분해가 진행 중인 녹조류 구멍갈파래(Ulva pertusa)를 채집하여 이로부터 획득한 알긴산 분해능이 뛰어난 S. oneidensis PKA1008 균주를 이용하였다(Sunwoo et al., 2013).
, 1995). 본 연구에서는 시료의 귀 부종 억제 효과를 비교 하기 위하여 시판 항염증제인 prednisolone을 사용하였으며, 이는 corticosteroid 합성 항염증제로 croton oil 유도 염증 반응을 효과적으로 억제한다고 알려져 있다(Tak and Firestein, 2001). Croton oil을 도포한 오른쪽 귀의 두께 차이를 비교하여 염증 유발의 억제 활성을 확인한 결과(Fig.
7 세포는 한국세포주은행 (KCLB 40071)에서 분양받아 사용하였으며, DMEM에 10% inactivated fetal bovine serum과 1% penicillin-streptomycin 을 첨가한 배지를 배양액으로 37℃, 5% CO₂ 조건에서 배양하였다. 실험과정의 모든 세포는 80-90% 정도의 밀도로 자랐을때 계대 배양하였고, 20 passages를 넘기지 않은 세포만 사용하였다.
조효소액은 S. oneidensis PKA1008를 marine broth (Difco, Sparks, MD, USA) 배지를 이용하여 30°C에서 24시간 배양 후, 원심분리기(Supra 30K, Hanil Sciecne Co., Korea)를 이용하여 4℃에서 10,000 g로 30분간 원심 분리하여 상층액으로 하였다.

데이터처리

실험 결과의 통계처리는 SAS program (Statistical analytical system V8.2, SAS Institute Inc., Cary, NC, USA)을 이용하여 평균값을 분산분석한 후, Duncan의 다중검정법으로 P<0.05 수준에서 항목들 간의 유의적 차이를 검정하였다.

이론/모형

iNOS, COX-2 및 NF-κB의 발현량을 검토하기 위한 항체로는 anti-mouse iNOS, COX-2 및 NF-κB를 사용하여 1:500으로 희석하고 상온에서 2시간 반응시킨 후 TBSS로 3회 세정하였다. 2차 항체로 horseradish peroxidase가 결합된 anti-mouse IgG 및 anti-rabbit IgG 를 1:2,000으로 희석하여 상온에서 1시간 반응시킨 다음 TBSS 로 3회 세정하여 ECL 기질과 1-3분간 반응 후 각각의 단백질 밴드는 Gene tool (GeneGnome5, Syngene, Cambridge, UK)을 이용하여 가시화하였다.
BCA protein assay kit (Pierce, Rockford, IL, USA)을 사용하여 단백질을 정량하였으며, 30 μL의 lysate를 Laemmli (1970)의 방법을 사용하여 10% SDS-PAGE로 분리하였다.
Cells were incubated in the presence of samples (10, 50, and 100 μg/ mL) for 24 h. Cell proliferation was determined by MTT assay. Proliferation index (%) = (sample O.
또한 COX-2는 cytokine, 자외선, 세균성 내독소 등에 의해 과발현 되어 각종 퇴행성 질환의 발병과 진행에 영향을 미치며, 특히 체내에 발생되는 prostaglandin E2 (PGE₂) 등의 염증인자 등과 관련되어 염증반응을 촉진한다(Chun and Surh, 2004). 따라서 알긴산 올리고당화 시료가 세포질 내에서의 iNOS 및 COX2 단백질 발현에 미치는 영향을 알아보기 위해 western blot 방법을 시행하였다(Fig. 5). 앞선 NO 와 pro-inflammatory cytokine의 분비 억제 결과에서 36 h 시료가 가장 좋은 항염증 효과를 나타내어 iNOS 및 COX-2의 발현 변화를 알아보았다.
BCA protein assay kit (Pierce, Rockford, IL, USA)을 사용하여 단백질을 정량하였으며, 30 μL의 lysate를 Laemmli (1970)의 방법을 사용하여 10% SDS-PAGE로 분리하였다. 분리된 단백질은 Towbin et al. (1979)의 방법을 참고하여 polyvinylidene difluoride membrane (Bio-Rad)에 1시간 동안 전사시켜 5% skim milk가 포함된 tris buffered saline (TBSS, pH 7.5) 용액으로 상온에서 2시간 동안 blocking 하였다. iNOS, COX-2 및 NF-κB의 발현량을 검토하기 위한 항체로는 anti-mouse iNOS, COX-2 및 NF-κB를 사용하여 1:500으로 희석하고 상온에서 2시간 반응시킨 후 TBSS로 3회 세정하였다.

성능/효과

oneidensis PKA1008 균주가 생산하는 조효소액을 알긴산에 처리하였을 시 알긴산이 분해되어 올리고당이 생성되는지를 확인하기 위하여 TLC 분석을 실시하였다. 0-60 h 까지 분해 정도를 살펴본 결과(Fig. 1), 알긴산과 조효소액 반응 12시간 까지는 알긴산이 분해되지 않았으나, 반응 24 h부터 분해가 진행되어 36 h 까지는 trisaccharide와 pentasaccharide로 분해되었으며, 반응 48 h 이후부터는 monosaccharide까지 분해됨을 확인하였다. 따라서 S.
100 μg/mL 농도에서는 24-60 h 샘플이 유의적인 차이가 없었으나, 36 h 시료가 10 및 50 μg/mL 농도에서 다른 시료에 비해 분비 억제 효과가 가장 좋았으며, 약 30% 및 40%정도의 분비 감소 효과를 나타냈다.
본 연구에서는 시료의 귀 부종 억제 효과를 비교 하기 위하여 시판 항염증제인 prednisolone을 사용하였으며, 이는 corticosteroid 합성 항염증제로 croton oil 유도 염증 반응을 효과적으로 억제한다고 알려져 있다(Tak and Firestein, 2001). Croton oil을 도포한 오른쪽 귀의 두께 차이를 비교하여 염증 유발의 억제 활성을 확인한 결과(Fig. 6), 0 h 및 36 h 시료는 농도 의존적으로 감소효과를 보였으며, 10 mg/kg bw 농도에서는 유의적인 차이가 없었으나 50 및 100 mg/kg bw 농도에서는 36 h이 0 h보다 부종 억제에 효과가 더 좋았다. 특히, 36 h 올리고당 시료를 250 mg/kg body weight로 처리 시 positive control 50 mg/kg 농도로 경구 투여했을 때와 유사한 정도의 귀 부종 억제 효과를 나타내었다.
IL-6의 경우 LPS 단독 처리시 557.52±18.48 pg/mL으로 분비량이 증가하였고, 모든 시료 처리에 의해 분비 감소 효과를 나타내었지만, 24-60 h 처리 시분비량 억제에 더 효과를 나타내었으며, 특히, 48-60 h 시료가 100 μg/mL 농도에서 약 60% 정도의 감소 효과를 나타내었다.
TNF-α의 경우 0-60 h 샘플이 10-50 μg/mL 농도에서는 분비 억제에 큰 효과가 없었으나, 12-36 h 시료가 100 μg/mL 농도에서 LPS 단독 처리구와 비교 시 약 30% 정도로 분비 억제 효과가 가장 크게 나타났다.
그 결과(Fig. 5), 처리 농도에 따라 NF-κB p65의 단백질 발현량이 감소함을 나타내었으며, 50 μg/mL 농도 이상에서는 40% 이상으로 감소하였다.
그 결과, RAW 264.7 세포에 LPS (1 μg/mL) 처리하였을 경우 iNOS 및 COX-2의 단백질 발현이 증가하였고 알긴산 올리고당화 시료 10 μg/mL에서는 발현의 변화가 거의 없었지만, 50 μg/mL 및 100 μg/mL에서 억제되는 것을 확인 하였다.
이를 통해 0 h 시료보다 36 h 알긴산 올리고당 시료가 염증 반응을 보다 효과적으로 억제하는 것을 확인하였다. 또한 조직 관찰 결과에서(Fig. 7), croton oil로 부종을 유발한 마우스 귀 조직에 0 h 및 36 h 시료를 처리하였을 때 prednisolone 처리구와 유사한 정도로 진피 두께가 감소 하였으며, 진피에서의 침윤된 mast cell의 수도 가장 적은 것으로 나타났다. 이상으로, trisaccharide와 pentasaccharide로 저분자화된 알긴산 올리고당 시료가 고분자량인 알긴산에 비해 항염증 효과가 더 뛰어남을 확인하여, S.
반응 시간별 NO 분비량은 24 h 처리 이후에, 50-100 μg/mL 농도에서 알긴산 (0 h) 시료와 비교 시 농도 의존적으로 감소하는 것을 확인하였다.
분비량을 측정한 결과(Fig. 4), 시료를 10, 50 및 100 μg/mL 농도로 처리 시 농도의존적으로 각각의 cytokine의 분비가 유의적으로 억제됨을 확인하였다.
시료를 10, 50 및 100 μg/mL 농도로 첨가하여 실험한 결과(Fig. 2), RAW 264.7 세포의 증식능이 모든 처리 농도에서 PBS 처리구와 유의적인 차이를 보이지 않아 세포 독성을 가지지 않음을 확인하였다.
위의 결과로 미루어보아, 알긴산 올리고당 시료가 LPS로 유도된 대식세포에서 활성화된 NF-κB signaling을 저해하고 전사인자로부터 증가되는 다양한 염증매개물들의 단백질 발현을 억제함으로써 항염증 효과를 보인 것으로 생각된다.
7 세포에 LPS (1 μg/mL) 처리하였을 경우 iNOS 및 COX-2의 단백질 발현이 증가하였고 알긴산 올리고당화 시료 10 μg/mL에서는 발현의 변화가 거의 없었지만, 50 μg/mL 및 100 μg/mL에서 억제되는 것을 확인 하였다. 이는 36 h 시료에 의한 NO 분비 억제가 iNOS 활성 저해에 의한 것임을 확인 하였고, 또한 COX-2의 발현도 저해됨을 확인하여 COX-2에 의한 염증 조절에도 효과를 나타낼 것으로 사료된다.
특히, 36 h 올리고당 시료를 250 mg/kg body weight로 처리 시 positive control 50 mg/kg 농도로 경구 투여했을 때와 유사한 정도의 귀 부종 억제 효과를 나타내었다. 이를 통해 0 h 시료보다 36 h 알긴산 올리고당 시료가 염증 반응을 보다 효과적으로 억제하는 것을 확인하였다. 또한 조직 관찰 결과에서(Fig.
이를 통해 핵 내로 NF-κB p65의 이동이 억제되었음을 확인할 수 있었다.
(2010)의 연구에서는 키토산 올리고당의 분자량별 항염증 효과에 대해 측정한 결과, IL-1β 분비량 감소에 효과가 있었지만, 분비량 감소 효과가 분자량이 작은 경우(1-3 kDa)에는 분비 억제에 효과가 없었다고 보고하여 본 연구 결과와 유사하였다. 이상의 결과, 조효소와 알긴산을 시간별로 반응시킨 결과, 36 h 시료에서 가장 좋은 항염증 효과를 나타냄을 확인하였다.
특히, 36 h 반응시킨 알긴산 올리고당 시료가 100 μg/mL 농도에서 30.93±0.88μM의 분비량을 보이며 LPS 단독 처리구에 비해 44% 억제율을 나타내 가장 높은 NO 분비 억제 효과를 가지는 것을 확인하였다.
6), 0 h 및 36 h 시료는 농도 의존적으로 감소효과를 보였으며, 10 mg/kg bw 농도에서는 유의적인 차이가 없었으나 50 및 100 mg/kg bw 농도에서는 36 h이 0 h보다 부종 억제에 효과가 더 좋았다. 특히, 36 h 올리고당 시료를 250 mg/kg body weight로 처리 시 positive control 50 mg/kg 농도로 경구 투여했을 때와 유사한 정도의 귀 부종 억제 효과를 나타내었다. 이를 통해 0 h 시료보다 36 h 알긴산 올리고당 시료가 염증 반응을 보다 효과적으로 억제하는 것을 확인하였다.

후속연구

7), croton oil로 부종을 유발한 마우스 귀 조직에 0 h 및 36 h 시료를 처리하였을 때 prednisolone 처리구와 유사한 정도로 진피 두께가 감소 하였으며, 진피에서의 침윤된 mast cell의 수도 가장 적은 것으로 나타났다. 이상으로, trisaccharide와 pentasaccharide로 저분자화된 알긴산 올리고당 시료가 고분자량인 알긴산에 비해 항염증 효과가 더 뛰어남을 확인하여, S. oneidensis PKA1008 유래 알긴산 분해효소는 알긴산의 고점도 문제 해결과 함께 알긴산 올리고당의 항염증 활성도 증진시켜 산업적으로 활용 가능성이 높을 것으로 사료된다.

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저자의 다른 논문 :

표제어: PCR

동의어: Packet Collision Rate

용어 설명 출처 목록 (6)

용어 설명: PCR은 세균 특이성이 있는 primer를 이용하여 적은 수의 세균이 있을지라도 쉽게 검출할 수 있는 유용한 방법이며, 이를 이용하여 구강 내 치면세균막이나 타액에서 직접 세균을 검출할 수 있게 되었다[8].

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