Objectives : Bilobalide (BIL) is a predominant sesquiterpene trilactone constituent that accounts for a partial portion of the standardized Ginkgonis Folium extract, which has been widely used to treat a variety of neurological disorders involving cerebral ischemia and neurodegeneration. In this stu...
Objectives : Bilobalide (BIL) is a predominant sesquiterpene trilactone constituent that accounts for a partial portion of the standardized Ginkgonis Folium extract, which has been widely used to treat a variety of neurological disorders involving cerebral ischemia and neurodegeneration. In this study, it was tested whether BIL exhibits anti-inflammatory activities on inflammation response, or not. Methods : To elucidate the molecular mechanisms of BIL on pharmacological and biochemical actions in inflammation, we examined the effect of BIL on pro-inflammatory mediators in lipopolysaccharide (LPS)-stimulated macrophages. The investigation was focused on how BIL affect on inflammation-related mediators including various signals such as nitric oxide (NO), prostaglandin $E_2$ ($PGE_2$), inducible NO synthase(iNOS), cyclooxygenase-2(COX-2), interleukin-6(IL-6), tumor necrosis $factor-{\alpha}$ ($TNF-{\alpha}$), mitogen-activated protein kinases(MAPKs) and nuclear factor kappa-light-chain-enhancer of activated B cells ($NF-{\kappa}B$) in LPS-stimulated RAW 264.7 cells. Results : We found that BIL inhibited LPS-induced NO, $PGE_2$, IL-6 and $TNF-{\alpha}$ productions as well as the expressions of iNOS and COX-2. Furthermore, BIL suppressed the LPS-induced phosphorylation for MAPK activation. Conclusions : These results suggest that BIL has inhibitory effects on LPS-induced $PGE_2$, NO, IL-6 and $TNF-{\alpha}$ production, as well as the expressions of iNOS and COX-2 in the murine macrophage. It seems that these inhibitory effects occur by blocking the phosphorylation of MAPKs for activation. Then, BIL suppressed the activation of nuclear factor $NF-{\kappa}B$ in nucleus. These observations suggest that BIL has anti-inflammatory effect by inhibiting.
Objectives : Bilobalide (BIL) is a predominant sesquiterpene trilactone constituent that accounts for a partial portion of the standardized Ginkgonis Folium extract, which has been widely used to treat a variety of neurological disorders involving cerebral ischemia and neurodegeneration. In this study, it was tested whether BIL exhibits anti-inflammatory activities on inflammation response, or not. Methods : To elucidate the molecular mechanisms of BIL on pharmacological and biochemical actions in inflammation, we examined the effect of BIL on pro-inflammatory mediators in lipopolysaccharide (LPS)-stimulated macrophages. The investigation was focused on how BIL affect on inflammation-related mediators including various signals such as nitric oxide (NO), prostaglandin $E_2$ ($PGE_2$), inducible NO synthase(iNOS), cyclooxygenase-2(COX-2), interleukin-6(IL-6), tumor necrosis $factor-{\alpha}$ ($TNF-{\alpha}$), mitogen-activated protein kinases(MAPKs) and nuclear factor kappa-light-chain-enhancer of activated B cells ($NF-{\kappa}B$) in LPS-stimulated RAW 264.7 cells. Results : We found that BIL inhibited LPS-induced NO, $PGE_2$, IL-6 and $TNF-{\alpha}$ productions as well as the expressions of iNOS and COX-2. Furthermore, BIL suppressed the LPS-induced phosphorylation for MAPK activation. Conclusions : These results suggest that BIL has inhibitory effects on LPS-induced $PGE_2$, NO, IL-6 and $TNF-{\alpha}$ production, as well as the expressions of iNOS and COX-2 in the murine macrophage. It seems that these inhibitory effects occur by blocking the phosphorylation of MAPKs for activation. Then, BIL suppressed the activation of nuclear factor $NF-{\kappa}B$ in nucleus. These observations suggest that BIL has anti-inflammatory effect by inhibiting.
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문제 정의
BIL의 RAW 264.7 cell 에서의 항염증효과의 기전에 관한 연구는 매우 미흡한 실정으로, iNOS 억제 기전 및 염증성관련 cytokine의 발현에 대한 연구를 수행하기 위하여 LPS 로 자극한 RAW 264.7 세포에서 나타나는 염증매개물질들에 미치는 영향을 평가하여 다음과 같은 결론을 얻었다.
따라서 이러한 전염증성 사이토카인의 활성을 억제함으로써 염증반응의 분자신호 전달기전인 MAPK superfamily에 속하는 세 가지 효소들인 ERK, JNK, p38 MAPK 등의 염증매개체들의 신호전달을 통해 억제하는지 알아보았다. 따라서 BIL의 억제 메커니즘이 MAPKs를 경유하는지 알아보기 위해 MAPKs의 인산화를 Western blot을 통해 확인하였다. 그 결과 LPS에 의해 활성화 된 RAW 264.
활성화된 MAPKs는 다른 kinase, 전사인자 등을 활성화하여 표적유전자의 발현을 변화시키고, 유전자 발현의 변화는 세포의 여러 소기관과 효소에 영향을 주게 된다. 따라서 이러한 전염증성 사이토카인의 활성을 억제함으로써 염증반응의 분자신호 전달기전인 MAPK superfamily에 속하는 세 가지 효소들인 ERK, JNK, p38 MAPK 등의 염증매개체들의 신호전달을 통해 억제하는지 알아보았다. 따라서 BIL의 억제 메커니즘이 MAPKs를 경유하는지 알아보기 위해 MAPKs의 인산화를 Western blot을 통해 확인하였다.
이에 본 연구는 BIL의 항염증 활성을 조사하기 위하여 LPS로 자극된 RAW 264.7세포에서 세포가 방출하는 NO, PGE2 생성량과 iNOS, COX-2의 발현 및 IL-6, TNF-α의 발현과 MAPKs에 미치는 영향을 알아보고 Iκ-Bα와 NF-κB의 활성화를 알아보고 그 기전을 밝히고자 수행하였다.
제안 방법
100 mm culture dish에 부착된 세포들을 cell scraper를 이용하여 세포를 이탈시킨 후, hemocytometer를 이용하여 세포수를 계산하였다. 이 후 실험방법에 따라 적정 농도로 희석한 후 well-plate에 접종하여 배양하였다.
MAPK의 발현 양을 검토하기 위한 항체로는 JNK, ERK p38 anti-mouse(1 :1000) (Calbiochem, La Jolla, CA, USA)를 TBST 용액에서 희석하여 상온에서 2시간 반응시킨 후 TBST로 3회 세정 하였다. 2차 항체로는 HRP(horse radish peroxidase)가 결합된 anti-mouse IgG(Amersham Pharmacia Biotech, Little Chalfont, UK)를 1 : 2,000으로 희석하여 상온에서 1 시간 반응시킨 후, TBST로 3회 세정하여 ECL 기질(Amersham Biosciences, Piscataway, NJ, USA)과 1-3분 간 반응시킨 다음 ImageQuantTM LAS 4,000mini(GE Healthcare, Aweden)을 이용하여 Chemiluminescence을 분석하였다.
BIL에 의한 mRNA 발현을 조사하였다. RNA 및 RT-PCR RNA 세포의 준비는 6-well culture plate에 3×105 세포로 분주하고, 하루 밤 동안 안정화 시켰다.
BIL은 pro-inflammatory cytokine의 억제기전과 관련이 있을 것으로 예상됨에 따라, 염증반응의 주체가 되는 RAW 264.7 세포에서 LPS로 유하여 IL-6와 TNF-α pro-inflammatory cytokine과 NO의 생성억제 효과를 확인하였다.
이 후 실험방법에 따라 적정 농도로 희석한 후 well-plate에 접종하여 배양하였다. BIL은 각각 PBS에 용해시킨 후 접종한지 24 시간 후에 RAW 264.7 세포만을 배양한 정상군인 대조군, lipopolysaccharide(LPS, Sigma Chemical)로 자극한 대조군, LPS와 시료를 농도별로 동시에 처리한 군으로 분류하였다.
BIL을 실험하기 위하여 인산완충 식염수(phosphate-buffered saline, PBS)에 농도 (10, 25, 50, 100, 및 200 µM)로 희석하였다.
BIL의 효과를 알아보기 위해 BIL 25, 50, 100 µM 농도로 처리하였다.
1% Tween20 + TBS) 용액에서 상온에서 2시간 동안 실시하였다. MAPK의 발현 양을 검토하기 위한 항체로는 JNK, ERK p38 anti-mouse(1 :1000) (Calbiochem, La Jolla, CA, USA)를 TBST 용액에서 희석하여 상온에서 2시간 반응시킨 후 TBST로 3회 세정 하였다. 2차 항체로는 HRP(horse radish peroxidase)가 결합된 anti-mouse IgG(Amersham Pharmacia Biotech, Little Chalfont, UK)를 1 : 2,000으로 희석하여 상온에서 1 시간 반응시킨 후, TBST로 3회 세정하여 ECL 기질(Amersham Biosciences, Piscataway, NJ, USA)과 1-3분 간 반응시킨 다음 ImageQuantTM LAS 4,000mini(GE Healthcare, Aweden)을 이용하여 Chemiluminescence을 분석하였다.
NCBI(National Center for biotechnology Information)의 GenBank (http://www.ncbi.nlm.nih.gov/Web/GenBank)를 통해 sequence를 얻은 후 증폭할 sequence를 선택하여 primer를 제작하고 annealing temperature를 계산한 후 cycling condition을 최적화하였다. Reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR)을 위해 여러 개의 primer를 사용하였다.
NO 생성과 iNOS protein 발현, mRNA 발현을 알아 보기 위해 Western blot과 RT-PCR을 수행하였다. BIL의 효과를 알아보기 위해 BIL 25, 50, 100 µM 농도로 처리하였다.
PBS로 희석한 BIL(10, 25, 50, 및 100 µM)로 처리하고 여기에 LPS (200 ng/mL)를 각각 주입한 다음 상기 대식세포주 RAW264.7을 24시간 배양하였다.
RAW 264.7 세포(5×104 cells/well)를 96-well culture plate에 100 µL의 RPMI 1640 배지와 함께 18시간 배양한 다음, BIL(10, 25, 50, 100, 및 200 µM)을 각각 처리하여 24시간 배양하였다.
The cell viability assessed using an MTS assay following incubation with different doses(10, 25, 50, 100 and 200 µM) of BIL for 24 hours.
각 well에 5 mg/mL 농도의 MTS 용액을 50 µL 씩 넣은 후 2시간 동안 배양하면서 환원반응을 유도하여 발색정도를 microplate reader를 이용하여 550 nm에서 흡광도를 측정하였으며, 세포독성(cell toxicity)은 세포만 배양한 무처리군의 생존도 100%를 기준으로 약물처리군의 상대적인 세포 생존률을 계산하였다.
다음으로 배지를 제거하고 BIL을 25, 50, 100 µM 농도로 2시간 동안 처리하고, 그람-음성 박테리아 내독소인 LPS(200 ng/mL)를 RAW 264.7 대식세포주를 자극한 후 2시간 배양하였다.
다음으로 전사인자 NF-κB 활성과의 연관성을 확인하기 위해 I-κB 분해와 NF-κB 활성 저해를 측정하였다.
7는 한국 세포주 은행과 ATCC으로부터 구입하여 사용하였다(Korea Research Institute of Bioscience, Biotechnology, American Tissue Culture Collection). 대식 세포주는 항생제 및 항균제로서 100 U/mL의 페니실린 G과 100 U/mL의 스트렙토마이신을 첨가하고 10% 열처리 우태아 혈청(heat inactivated FBS)을 첨가한 완전한 RPMI 1640 배지에서 5% CO2의 습한 대기, 37℃의 온도조건으로 배양하였다. 이 때 사용한 FBS는 사용하기 전 55℃에서 1시간 heat-inactivation시켜 사용하였다.
7을 24시간 배양하였다. 대식세포주의 상층액을 수집하여 Griess reagent(1% sulfanilamide, 0.1% N -(1-naphthyl)-ethylene diamine dihydrochloride in 2.5% phosphoric acid solution)와 동량으로 주입한 후 10분간 실온에서 방치하였다. 아질산의 농도는 ELISA 리더기를 이용하여 570 ㎚에서 흡광도를 측정하여 결정하였다.
대식세포주인 RAW 264.7 세포로부터 염증성 사이토카인 TNF-α의 생성을 ELISA를 이용하여 확인하였다.
COX-1은 정상적인 상황에서 발현하여 위장관 보호, 체내에서 혈소판의 형성, 신장 기능의 조절 등 신체의 항상성 유지에 관여한다24). 따라서 BIL의 PGE2, COX-2 protein 과 mRNA 발현에 대한 효과를 알아보기 위해 Western blot 과 RT-PCR을 수행하였다. 그 결과, LPS 처리에 의해 증가된 COX-2 발현은 50, 100 µM 농도에서 현저하게 억제되는 것을 확인하였다(Fig 4).
7세포의 생존율에 영향을 미치지 않았다(Fig 2). 따라서 이후 실험은 BIL의 세포독성이 없는 농도범위에서 수행하였다.
7 세포에서 LPS로 유하여 IL-6와 TNF-α pro-inflammatory cytokine과 NO의 생성억제 효과를 확인하였다. 또 한 iNOS와 COX-2의 단백질 억제와의 관련성을 조사하기 위해 Western blot 분석법을 이용하여 세포질 내의 iNOS 단백질 량을 조사하였고 COX-2의 단백질 발현 억제효과 및 PGE2생성 억제 효과를 확인하였다. 그 결과 iNOS와 COX-2의 단백질 발현이 BIL에 의해 농도 의존적으로 억제 되었음을 확인 하였고, MAPKs의 인산화에서는 JNK 와 ERK 인산화는 억제하는 반면 와 p38 MAPK의 인산화에는 아무런 영향을 주지 못했다.
이것을 얼음에서 5분간 incubation하고 4℃, 2,300 rpm에서 10분간 원심 분리하였다. 상등액 중 일부를 이용하여 단백질 농도를 결정하였다.
세포가 없는 배양액은 아질산이 0-30 µM로 나타나, 이 값을 표준으로 하여 여러 실험군의 아질산 값의 흡광도를 측정하였다.
5% phosphoric acid solution)와 동량으로 주입한 후 10분간 실온에서 방치하였다. 아질산의 농도는 ELISA 리더기를 이용하여 570 ㎚에서 흡광도를 측정하여 결정하였다. 세포가 없는 배양액은 아질산이 0-30 µM로 나타나, 이 값을 표준으로 하여 여러 실험군의 아질산 값의 흡광도를 측정하였다.
이후 배지를 제거하고 BIL를 각각 25, 50, 100 µM 농도로 1시간 동안 처리한 후, 그람-음성 박테리아 내독소인 LPS(200 ng/mL)로 RAW 264.7 대식세포주를 자극한 후 세포 부유액을 원심분리하여 세포들을 침전시켜 상층액을 수집하고, 상층액 내 IL-6, TNF-α 생성량을 ELISA kit(R&D Systems Inc., Minneapolis, MN, USA)를 이용하여 사용자 매뉴얼에 기재된 방법대로 정량해 분석하였다.
이후 배지를 제거하고 BIL를 각각 25, 50, 100 µM 농도로 1시간 동안 처리한 후, 그람-음성 박테리아 내독소인 LPS(200 ng/mL)로 RAW 264.7 대식세포주를 자극한 후 세포부유액을 원심분리하여 세포들을 침전시켜 상층액을 수집하고, 상층액 내 PGE2 생성량을 EIA kit(R&D Systems Inc., Minneapolis, MN, USA)를 이용하여 사용자 매뉴얼에 기재된 방법대로 정량해 분석하였다.
PGE2, IL-6와 TNF-α는 효소결합면역측정(ELISA) 키트를 R&D시스템스(MN, USA)로부터 구입하였으며, COX-2, iNOS, MAPKs(ERK, JNK, p38), 단일세포 항체 및 peroxidase-conjugated된 secondary antibody 는 Santa Cruz Biotechnology(CA, USA)에서 구입하였다.
본 실험에 사용된 세포인 murine macrophage cell line, RAW 264.7는 한국 세포주 은행과 ATCC으로부터 구입하여 사용하였다(Korea Research Institute of Bioscience, Biotechnology, American Tissue Culture Collection). 대식 세포주는 항생제 및 항균제로서 100 U/mL의 페니실린 G과 100 U/mL의 스트렙토마이신을 첨가하고 10% 열처리 우태아 혈청(heat inactivated FBS)을 첨가한 완전한 RPMI 1640 배지에서 5% CO2의 습한 대기, 37℃의 온도조건으로 배양하였다.
본 실험에 사용한 BIL은 3차 증류수와 DMSO(0.2%)에 용해시킨 다음 0.45 µm filter paper로 여과 후 보관하였다.
자극원으로 사용한 LPS와 세포배양에 사용되는 RPMI-1640 배지는 Sigma-Aldrich(St Louis, MO, USA)로부터 구입하였고, 우태아 혈청(Fetal bovine serum, FBS) 및 항생제는 깁코/RBL사(Gibco/RBL)로부터 구입하였다. 조직배양 플레이트와 직경 100㎜ 페트리접시는 넌크사(Nunc, Inc, USA)로부터 구입하여 사용하였다.
자극원으로 사용한 LPS와 세포배양에 사용되는 RPMI-1640 배지는 Sigma-Aldrich(St Louis, MO, USA)로부터 구입하였고, 우태아 혈청(Fetal bovine serum, FBS) 및 항생제는 깁코/RBL사(Gibco/RBL)로부터 구입하였다. 조직배양 플레이트와 직경 100㎜ 페트리접시는 넌크사(Nunc, Inc, USA)로부터 구입하여 사용하였다. PGE2, IL-6와 TNF-α는 효소결합면역측정(ELISA) 키트를 R&D시스템스(MN, USA)로부터 구입하였으며, COX-2, iNOS, MAPKs(ERK, JNK, p38), 단일세포 항체 및 peroxidase-conjugated된 secondary antibody 는 Santa Cruz Biotechnology(CA, USA)에서 구입하였다.
데이터처리
모든 실험은 3회 이상 반복으로 이루어졌으며, 실험결과는 각 항목에 따라 평균치 ± 표준편차(Mean ± SD)로 표시했으며, 통계처리는 IBM SPSS를 이용하였고 analysis of variance(ANOVA)를 구하여 신뢰수준 *p < 0.05 및 **p <0.01에서 통계적 유의차를 검정하였다.
이론/모형
NO 생성에 대한 BIL의 효과를 알아보기 위해 Griess assay 방법을 이용하여 세포 배양액 중에 존재하는 NO2−의 형태로 측정하였다.
RAW 264.7세포에서 BIL의 세포독성을 MTS assay 방법으로 조사하였다. 그 결과, BIL을 10, 25, 50, 100, 및 200 µM의 농도로 처리 하였을 때 10~100 µM의 농도에서는 RAW 264.
2. BIL은 LPS로 유도된 iNOS와 COX-2의 protein 생성과 mRNA발현을 억제하는 것이 관찰되었다.
3. BIL은 LPS로 유도된 전염증성 사이토카인 IL-6와 TNF-α발현을 현저하게 억제되는 것이 관찰되었다.
4. BIL처리 시 LPS로 유도된 MAPKs 인산화의 활성을 저해 하는지 알아보기 위해 Western blot을 수행한 결과 MAPKs (JNK, ERK), 인산화가 억제된 것이 관찰되었다.
5. BIL처리 시 LPS 유도된 NF-κB의 활성을 저해 하는지 알아보기 위해 Western blot을 수행한 결과 IκBα의 분해, NF-κB의 활성이 저해된 것이 관찰되었다.
LPS로 활성화 된 대식세포에 BIL을 25, 50, 100 µM로 처리한 경우 NF-κB 결합 활성 저해를 핵의 추출물에서 보였고, 세포질에서 I-κB 분해 역시 억제되는 것을 확인할 수 있었다(Fig 8).
이는 LPS로 유도한 대식세포의 염증반응은 JNK와 ERK의 신호전달 경로를 경유 하지만 p38은 경로를 경유하지 않는다는 것을 보여준다. 결론적으로, BIL의 세포내의 전염증성 인자들을 현저하게 억제하는 효과가 있음을 확인할 수 있었다.
그 결과 LPS로 활성화 된 대식세포에 BIL을 처리한 경우 NF-κB 결합 활성 저해를 나타냈으며, 세포질에서 I-κB분해 역시 억제되는 것을 확인할 수 있었다.
그 결과 LPS에 의해 활성화 된 RAW 264.7 대식세포에 BIL을 25, 50, 100µM을 처리한 경우 JNK와 ERK 인산화를 억제하는 것을 확인하였다(Fig 7).
또 한 iNOS와 COX-2의 단백질 억제와의 관련성을 조사하기 위해 Western blot 분석법을 이용하여 세포질 내의 iNOS 단백질 량을 조사하였고 COX-2의 단백질 발현 억제효과 및 PGE2생성 억제 효과를 확인하였다. 그 결과 iNOS와 COX-2의 단백질 발현이 BIL에 의해 농도 의존적으로 억제 되었음을 확인 하였고, MAPKs의 인산화에서는 JNK 와 ERK 인산화는 억제하는 반면 와 p38 MAPK의 인산화에는 아무런 영향을 주지 못했다. 이는 LPS로 유도한 대식세포의 염증반응은 JNK와 ERK의 신호전달 경로를 경유하는 반면 p38 의 경로와는 다르다는 것을 보여준다.
그 결과, BIL을 10, 25, 50, 100, 및 200 µM의 농도로 처리 하였을 때 10~100 µM의 농도에서는 RAW 264.7세포의 생존율에 영향을 미치지 않았다(Fig 2).
그 결과, LPS 자극원을 처리하였을 때 TNF-α 생성이 현저히 증가하였고, BIL을 처리하였을 때 TNF-α 생성 억제 효과가 나타났다(Fig 6).
그 결과, LPS 처리에 의해 증가된 COX-2 발현은 50, 100 µM 농도에서 현저하게 억제되는 것을 확인하였다(Fig 4).
대식세포주인 RAW 264.7 세포로부터 염증성 사이토카인 IL-6의 생성을 ELISA 와 RT-PCR 이용하여 실험한 결과, LPS 자극원을 처리하였을 때 IL-6 생성이 현저히 증가하였고, BIL를 처리하였을 때 IL-6 생성 억제 효과가 나타났다 (Fig 5).
따라서 ERK와 p38 인산화 저해는 I-κB분해 억제와 NF-κB 결합 활성저해에 의한 세포내 신호전달체계에 의한 것으로 확인되었다.
본 실험 결과를 요약하면, BIL은 RAW 264.7 세포에서 LPS에 의해 유도되는 iNOS, COX-2, IL-6 그리고 IL-12유전자의 발현, PGE2 생성을 효과적으로 저해한다. 그러므로 이러한 결과들은 한의학에서 BIL의 항염증 기전을 밝힘으로써 그 과학적 근거를 제시할 수 있을 것으로 사료된다.
이와 같은 결과로 보아 BIL은 대식세포에 작용하여 MAPKs의 인산화와 IκBα 분해, NF-κB 활성의 저해를 통해 NO, PGE2, IL-6와 TNF-α의 생성과 iNOS, COX-2 발현을 억제함으로써 항염증에 효과가 있음을 알 수 있었디.
BIL의 효과를 알아보기 위해 BIL 25, 50, 100 µM 농도로 처리하였다. 이후 측정하였을 때 농도 의존적이고 유의적으로 억제되는 것으로 나타났다(Fig 3 A,B,C).
후속연구
, IL-6와 TNF-α의 생성과 iNOS, COX-2 발현을 억제함으로써 항염증에 효과가 있음을 알 수 있었디. 그러므로 이러한 결과들은 BIL의 항염증 기전 효과를 밝힘으로써 그 과학적 근거를 제시할 수 있을 것으로 사료된다.
7 세포에서 LPS에 의해 유도되는 iNOS, COX-2, IL-6 그리고 IL-12유전자의 발현, PGE2 생성을 효과적으로 저해한다. 그러므로 이러한 결과들은 한의학에서 BIL의 항염증 기전을 밝힘으로써 그 과학적 근거를 제시할 수 있을 것으로 사료된다.
질의응답
핵심어
질문
논문에서 추출한 답변
BIL이란 무엇인가?
은행나무 잎은 flavonoids, terpenes, organic acids 및 기타 다양한 화합물들을 함유하고 있으며6) 테르펜류인 ginkgolide, bilobalide(BIL) 등이 신경계 질병을 치료하는데 일부 이용되고 있으며, flavoneglycoside인 zincomine이 혈액청정제로 상품화되었다7-9). BIL은 은행잎의 약리성분으로 뇌빈혈 (cerebral ischemia)과 신경손상(neurodegeneration)을 포함한 다양한 신경질환에 널리 쓰이며 sesquiterpene trilactone 계열의 성분이다10,11). 은행나무 잎의 추출물은 6%의 sesquiterpene trilactone(3.
PGE2가 과량 생산되면 어떠한 염증성 질환을 야기하는가?
PGE2는 NO와 마찬가지로 손상된 부위나 조직에서 통증과 발열의 전달에 주로 관여하는 중요한 염증매개물질로서 COX-2에 의해 합성되는데, 과량 생산되면 과도한 면역반응을 야기하여 다발성 경화증, 파킨슨병, 알츠하이머병, 대장암과 같은 각종 염증성 질환을 유발시키게 된다22). PGE2는 국소적으로 활성화되며 arachidonic acid로부터 COX 효소의 작용에 의해 합성된다23).
적정 수준의 염증 반응과 항염 반응의 항상성이 필요한 이유는 무엇인가?
선천성 면역 체계는 병원체 침입의 1차적 방어 역할을 수행한다16). 생체조직의 방어기전으로 나타나는 염증반응은 염증 매개물질들에 의해 진행된다. 그러나 염증매개물질들은 주변조직의 발적, 발열, 종창, 동통 및 기능장애 등의 증상을 유도하며17), 면역반응이 지나치게 되면 염증성 장염이나 다발성경화증, 류머티즘과 같은 자가면역질환을 야기할 수 있고 나아가 endotoxin shock과 같은 극심한 면역 부작용을 야기한다18). 따라서 적정수준에서의 염증 반응과 항염 반응의 항상성은 필수적이고, 염증성 질환의 치료 및 수술 후의 환자관리에서 염증반응의 적절한 제어는 대단히 중요하다19).
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