[논문]급성 아토피 피부염 마우스 모델에서 한약조합약물의 염증반응 진정효과

정재훈; 김경준

doi:10.6114/jkood.2015.28.1.068

급성 아토피 피부염 마우스 모델에서 한약조합약물의 염증반응 진정효과
Anti-inflammatory effects of herbal medicines(Rubus coreanus, Rehmanniae Radix, Houttuynia cordata, Betulae cortex) EtOH extract on acute atopic dermatitis mice 원문보기

韓方眼耳鼻咽喉皮膚科學會誌 = The journal of Korean Medicine Ophthalmology & Otolaryngology & Dermatology, v.28 no.1, 2015년, pp.68 - 84

정재훈 (가천대학교 한의과대학 한방안이비인후피부과) , 김경준 (가천대학교 한의과대학 한방안이비인후피부과)

Abstract ▼ AI-Helper

Object : The object of this study was effected of composed of 4 herbal medicines(Rubus coreanus, Rehmanniae Radix, Houttuynia cordata, Betulae cortex) on acute atopic dermatitis mice. Methods : BALB/c mice were divided 4 groups ; normal group, negative control group of acute atopic dermatitis mice induced by DNCB, treated apply to the back skin with the herbal medicine group, and treated orally with herbal medicine group. Treated with herbal medicine and DNCB during 2 weeks. After treated, measured WBCs, RBCs, and platelet in the blood, and analysed mRNA expression of spleen. Result : Composed herbal medicines could reduce WBCs, lymphocytes, monocytes, neutrophils, and eosinophils in the mouse blood. And, could down TNF-${\alpha}$ levels in spleen. In the skin tissue histology results, herbal medicines reduce the cells and T cells. Conclusion : Composed herbal medicines help to another inflammatory disease because they reduce the cells and T cells in the skin tissues. And they have inhibitory effects of TNF-${\alpha}$ mRNA expression, and Th 2 immune responses. Therefore herbal medicines use for an acute atopic dermatitis treatment.

주제어

AI 본문요약
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문제 정의

연구자는 아토피 피부염에 대한 생약 특히 한약에 대한 효능을 확인하고자, 최근 연구 결과를 통해 항산화, 항염증효과가 입증되어 염증에 대한 진정효과가 우수할 것으로 추정되는 네 가지 한약(복분자, 생지황, 어성초, 화피)을 균등하게 혼합한 후, DNCB로 급성적으로 아토피 피부염이 유발된 마우스를 대상으로, 그 효과를 혈액 및 조직학적 분석과 사이토카인 분석을 통하여 알아보고자 한다.

제안 방법

급성 아토피 피부염을 유발시킨 마우스의 실험군에 2일 간격으로 2주 동안 약물을 처방하였다. 피부도포군은 약재추출물을 200 ㎎/㎖의 농도로 200 ㎕을 피부도포 하였고, 경구투여군은 50 mg/kg의 농도로 경구투여 하였다.
본 실험은 BALB/c 마우스에 DNCB를 등에 도포하여 유발시킨 급성 아토피 피부염에서 복분자, 생지황, 어성초, 화피의 혼합 한약재 처방에 따른 효과를 확인하기 위해 6주령의 BALB/c 마우스를 정상군, 대조군, 피부도포군, 경구투여군 총 4 그룹으로 나누어실험하였다. 실험약물의 아토피 치료 기전을 규명하고자, 실험동물의 혈액 및 조직학적 검사와 사이토카인 분석을 통하여 관찰하였던바, 다음과 같은 결론을 얻었다.
본 연구에서는 아토피 피부염에 대한 생약, 특히 한약에 대한 효능을 확인하고자, 최근 연구 결과를 통해 항산화, 항염증 효과가 입증되어 염증에 대한 진정효과가 우수할 것으로 추정되는 네가지 한약(복분자, 생지황, 어성초, 화피)을 균등하게 혼합한 후, DNCB로 급성적으로 아토피 피부염이 유발된 마우스를 대상으로 그 효과를 혈액학적 분석과 피부조직 관찰 및 사이토카인 분석 등을 통하여 알아보고자 하였다.
실험실 환경에서 1주간 적응시킨 Balb/c마우스를 각 세 마리씩 정상군(Normal), 대조군(Control), 피부도포군(DAHM), 경구투여군(OAHM)의 네 개 군으로 분류한 후 마우스 등의 털을 이발기와 면도기를 사용하여 제모한 다음 DNCB를 처리하여 급성 아토피 피부염을 유발시켰다. 단, 정상군은 DNCB를 녹일 때 사용한 용매인 아세톤을 DNCB 대신에 도포하였다.

대상 데이터

DNCB 도포 후 발생한 피부병변은 엄밀히 말해 아토피 피부염과 유사한 접촉성 과민반응이나, IgE 및 Th2 사이토카인의 증가 등 아토피 피부염의 면역 반응이 유발되는 것으로 미루어 인간에서의 아토피 피부염과 유사한 병변으로 볼 수 있다¹⁸⁾. 또한, 집먼지 진드기 항원의 도포와 달리 tape-stripping이 필요 없고 화학약품이므로 치료약제와의 상호작용이 적을 것으로 사료되어 본 실험의 아토피 피부염 유발물질로 사용하였다.
복분자, 생지황, 어성초, 화피 각 약재는 옴니허브(Korea)에서 구입하여 에탄올 추출법으로 추출하였다. 우선 각각의 약재를 믹서기를 이용하여 고운 분말로 분쇄시킨 후 분말화 된 시료 100 g을 정량 후 1 L의 80 % 에탄올을 가하여 30분간 Ultrasonicator를 이용하여 sonication 하였다.
실험동물은 생후 6주령이 된 수컷 Balb/c 마우스 12마리를 오리엔트(Korea)으로부터 공급받았다. 일주일간 온도(24±2 ℃), 습도(40~60 %)와 밤낮주기(12시간씩)가 일정하게 조절되는 환경인 경희대 한의과대학 동물 사육실에서 고형 사료와 물을 섭취시켜 환경에 적응시켰다.

데이터처리

실험결과의 통계처리는 SPSS 프로그램을 사용하였으며, 모든 측정값은 평균±표준오차(Mean±SEM)로 표시하였고, 분석에 대한 유의성은 Student's t-test로 검증하였으며, p-value < 0.05 에서 유의성이 있는 것으로 인정하였다.

이론/모형

마우스 심장에서 얻은 혈액의 혈장에서 혈중 IgE의 농도를 샌드위치 ELISA 방법을 통하여 확인할 수 있다.

성능/효과

1. 혈액학적 분석 결과 대조군에서 증가한 백혈구, 림프구, 단핵백혈구, 호중구, 호산구의 양이 피부도포군과 경구투여군에서 유의하게 감소하였다.
2. 조직학적 분석 결과 대조군에 비해 피부도포군과 경구투여군에서 진피세포의 수가 적고 T세포의 양도 유의하게 감소하였다.
3. 혈액 내 IgE 분석 결과 대조군에 비해 피부도포군에서 유의하게 감소하였다.
4. 비장의 사이토카인 분석결과 대조군에 비해 경구투여군에서 TNF-α가 유의하게 감소되었다.
그러나hematoxylin에 의해 염색되어 있는 세포의 수를 비교한 결과, 피부도포군과 경구투여군에서는 피부에 침윤되어 있는 세포들이 대조군에 비해 감소되어 있음을 확인할 수가 있다. 실험 결과로 보아 약물을 처방한 그룹에서 대조군에 비해 아토피 증상이 호전되어있다는 것을 확인할 수 있고, 피부도포군보다 경구투여군이 효과가 더 좋다는 것을 확인할 수 있었다. CD3 염색실험 결과 대조군에서는 외피와 진피 부분에 진하게 염색되어 있는 반면, 다른 그룹에서는 대조군에 비해 연하게 염색되어 있는 것을 확인할 수 있다.
혈액 및 조직학적 검사 결과로 보아 본 실험에서 사용한 혼합 한약재가 급성 아토피 피부염의 염증반응 진정 효과가 있다고 기대가 되며, IgE와 각종 사이토카인 mRNA의 발현 정도를 분석해본 결과 Th 2면역반응을 억제하고 있다고 사료된다. 하지만, 사이토카인 발현 변화정도가 혈액 및 조직학적 변화에 비해 유의성이 낮으므로 본 실험에서 확인해본 면역물질 이외에 다른 방법이나 경로에 의한 혼합 한약재의 효과가 있을 것으로 추정되며 이에 대해 향후 지속적인 연구가 필요할 것으로 사료된다.

후속연구

이상의 결과로 복분자, 생지황, 어성초, 화피의 복합 약물은 아토피 피부염이나 기타 염증 질환에 효과가 있을 것으로 기대되며 향후 지속적인 연구가 필요할 것으로 사료된다.
혈액 및 조직학적 검사 결과로 보아 본 실험에서 사용한 혼합 한약재가 급성 아토피 피부염의 염증반응 진정 효과가 있다고 기대가 되며, IgE와 각종 사이토카인 mRNA의 발현 정도를 분석해본 결과 Th 2면역반응을 억제하고 있다고 사료된다. 하지만, 사이토카인 발현 변화정도가 혈액 및 조직학적 변화에 비해 유의성이 낮으므로 본 실험에서 확인해본 면역물질 이외에 다른 방법이나 경로에 의한 혼합 한약재의 효과가 있을 것으로 추정되며 이에 대해 향후 지속적인 연구가 필요할 것으로 사료된다.

질의응답

핵심어	질문	논문에서 추출한 답변
	아토피 피부염의 국내 유병률은?	아토피 피부염은 대부분 유아기나 소아 때 호발하여 호전과 악화를 반복하는 만성 재발성 피부염으로, 진단기준으로는 소양감, 특징적인 형태와 분포, 만성피부염, 아토피질환의 병력이나 가족력 등이 제시되고 있다1). 국내에서 유병률은 꾸준히 증가하고 있는 중으로, 소아에서는 10-20 %, 성인에서는 2-4 %의 유병률을 보이며, 대기오염, 주거환경 변화로 인한 항원에 대한 노출의 증가, 모유 수유 감소, 소아기 감염질환의 감소, 생활 방식의 서구화, 정신적 스트레스 등이 증가의 원인으로 추측된다2).
	아토피 피부염이란?	아토피 피부염은 대부분 유아기나 소아 때 호발하여 호전과 악화를 반복하는 만성 재발성 피부염으로, 진단기준으로는 소양감, 특징적인 형태와 분포, 만성피부염, 아토피질환의 병력이나 가족력 등이 제시되고 있다1). 국내에서 유병률은 꾸준히 증가하고 있는 중으로, 소아에서는 10-20 %, 성인에서는 2-4 %의 유병률을 보이며, 대기오염, 주거환경 변화로 인한 항원에 대한 노출의 증가, 모유 수유 감소, 소아기 감염질환의 감소, 생활 방식의 서구화, 정신적 스트레스 등이 증가의 원인으로 추측된다2).
	아토피 피부염의 진단기준은?	아토피 피부염은 대부분 유아기나 소아 때 호발하여 호전과 악화를 반복하는 만성 재발성 피부염으로, 진단기준으로는 소양감, 특징적인 형태와 분포, 만성피부염, 아토피질환의 병력이나 가족력 등이 제시되고 있다1). 국내에서 유병률은 꾸준히 증가하고 있는 중으로, 소아에서는 10-20 %, 성인에서는 2-4 %의 유병률을 보이며, 대기오염, 주거환경 변화로 인한 항원에 대한 노출의 증가, 모유 수유 감소, 소아기 감염질환의 감소, 생활 방식의 서구화, 정신적 스트레스 등이 증가의 원인으로 추측된다2).

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표제어: PCR

동의어: Packet Collision Rate

용어 설명 출처 목록 (6)

용어 설명: PCR은 세균 특이성이 있는 primer를 이용하여 적은 수의 세균이 있을지라도 쉽게 검출할 수 있는 유용한 방법이며, 이를 이용하여 구강 내 치면세균막이나 타액에서 직접 세균을 검출할 수 있게 되었다[8].

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