This study was conducted to isolate lactic acid bacteria (LAB) from dog intestine and identify potential probiotic strains for canine use. One hundred and one LAB were isolated from feces of 20 healthy dogs. Acid, bile, and heat resistance along with adherence to Caco-2 cells and antimicrobial activ...
This study was conducted to isolate lactic acid bacteria (LAB) from dog intestine and identify potential probiotic strains for canine use. One hundred and one LAB were isolated from feces of 20 healthy dogs. Acid, bile, and heat resistance along with adherence to Caco-2 cells and antimicrobial activity against pathogens were examined. To analyze immunomodulative effects, the production of nitric oxide (NO), TNF-${\alpha}$, and IL-$1{\beta}$ was measured using RAW 264.7 macrophages. Additionally, RAW BLUE cells were used to evaluate nuclear factor-${\kappa}B$ (NF-${\kappa}B$) generation. Ultimately, three strains were selected as canine probiotics and identified as Lactobacillus reuteri L10, Enterococcus faecium S33, and Bifidobacterium longum B3 by 16S rRNA sequence analysis. The L10 and S33 strains showed tolerance to pH 2.5 for 2 h, 1.0% Oxgall for 2 h, and $60^{\circ}C$ for 5 min. These strains also had strong antimicrobial activity against Escherichia coli KCTC 1682, Salmonella Enteritidis KCCM 12021, Staphylococcus aureus KCTC 1621, and Listeria monocytogenes KCTC 3569. All three strains exerted better immunomodulatory effects than Lactobacillus rhamnosus GG (LGG), a well-known commercial immunomodulatory strain, based on NO, NF-${\kappa}B$, IL-$1{\beta}$, and TNF-${\alpha}$ production. These results suggested that the three selected strains could serve as canine probiotics.
This study was conducted to isolate lactic acid bacteria (LAB) from dog intestine and identify potential probiotic strains for canine use. One hundred and one LAB were isolated from feces of 20 healthy dogs. Acid, bile, and heat resistance along with adherence to Caco-2 cells and antimicrobial activity against pathogens were examined. To analyze immunomodulative effects, the production of nitric oxide (NO), TNF-${\alpha}$, and IL-$1{\beta}$ was measured using RAW 264.7 macrophages. Additionally, RAW BLUE cells were used to evaluate nuclear factor-${\kappa}B$ (NF-${\kappa}B$) generation. Ultimately, three strains were selected as canine probiotics and identified as Lactobacillus reuteri L10, Enterococcus faecium S33, and Bifidobacterium longum B3 by 16S rRNA sequence analysis. The L10 and S33 strains showed tolerance to pH 2.5 for 2 h, 1.0% Oxgall for 2 h, and $60^{\circ}C$ for 5 min. These strains also had strong antimicrobial activity against Escherichia coli KCTC 1682, Salmonella Enteritidis KCCM 12021, Staphylococcus aureus KCTC 1621, and Listeria monocytogenes KCTC 3569. All three strains exerted better immunomodulatory effects than Lactobacillus rhamnosus GG (LGG), a well-known commercial immunomodulatory strain, based on NO, NF-${\kappa}B$, IL-$1{\beta}$, and TNF-${\alpha}$ production. These results suggested that the three selected strains could serve as canine probiotics.
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문제 정의
따라서 본 연구에서는 국내의 소형견 장관으로부터 생균제용 유산균인 Lactobacillus, Enterococcus, Bifidobacterium 속 균주를 분리하고, 생균제가 갖추어야 할 특성 조사와 함께, 면역활성 검증을 통해 개 생균제로 사용하기에 가장 적합한 유산균을 선발, 평가하는 것을 연구의 목적으로 하였다.
제안 방법
Caco-2 cell monolayer가 형성된 4- well chamber slide에 유산균(0.5 mL; 1.0 × 109CFU/mL in PBS)을 접종하고, 5개의 Caco-2 cell 당 부착한 유산균 수의 평균값을 계산하였다.
IL-1β와 TNF-α 생산량은 ELISA kit(eBioscience, USA)를 이용하여 측정하였다.
InvivoGen(USA)의 RAW BLUE cell은 nuclear factor-κB (NF-κB)를 측정하기 위한 세포로 위의 RAW 264.7 cell과 동일한 조건에서 배양하였고, 4~5회 계대 후 Zeocin (InvivoGen) 항생제를 처리 후 사용하였다.
Lactobacillus 선택 배지인 LBS와 MRS, Enterococcus 선택 배지인 TATAC, Bifidobacterium 선택 배지인 BS와 비선택 배지인 BL 배지에 멸균된 diluent A(KH2PO4 4.5 g, Na2HPO4 6.0 g, L-cystein·HCl·H2O 0.5 g, Tween 80 0.5 g, Agar 1.0 g/1,000 mL DW)를 사용하여 각각 10배 단계 희석하여 도말하였다.
0 × 109CFU/mL in PBS)을 접종하고, 5개의 Caco-2 cell 당 부착한 유산균 수의 평균값을 계산하였다. Lactococcus lactis NIAI 527 (Meiji, Japan)과 Lactobacillus acidophilus KCTC 3111을 각각 양성 및 음성 대조군 균주로 사용하여, 부착능 음성 및 양성으로 판정하였다 [17, 25].
NF-κB 생성에 미치는 영향을 알아보기 위하여 RAW BLUE cells을 96 well plate의 각 well당 5.0 × 105 cell/mL 가 되도록 분주하여 2시간 안정화한 후, 새로운 DMEM 배지로 교체하였다.
NO의 농도는 Griess reagent system(Promega, USA) 을 사용하여 측정하였다. 96-well plate에 배양액 50 µL를 넣고 Griess reagent I(NED solution)과 Griess reagent II (Sulfanilamide solution)를 동량으로 혼합한 후, 암실에서 10분간 반응하고 30분 이내에 microplate reader(Tecan, Austria)를 이용하여 540 nm에서 측정하였다.
NO의 농도는 아질산나트륨의 표준곡선(0~100 μM)을 이용하여 계산하였다 [8].
내산성 균주로 판정된 유산균을 대상으로 0.3%, 0.5%, 1.0% Oxgall(pH 7.0; Difco, USA)이 첨가된 BHI broth에 유산균 배양액을 1%씩 접종하고 2시간 동안 배양한 후, BL medium에 도말하고 배양하여 생존한 균주를 내담즙성 균주로 판정하였다 [25, 27].
내산성 유산균을 선발하기 위하여 분리된 Lactobacillus, Enterococcus 및 Bifidobacterium을 L-cysteine(Junsei Chemical, Japan)이 0.05% 첨가된 BHI broth(pH 7.0)에 접종하여 37°C에서 24시간 배양하였다.
내산성과 내담즙성 균주 중에서 선발한 유산균을 L-cysteine(Junsei Chemical)이 0.05% 첨가된 BHI broth(pH 7.0)에 접종, 배양 후, 배양액을 50°C, 60°C, 70°C에 각각 5분간 노출시킨 후, BL medium에 도말하여 37°C에서 48시간 배양 후 집락이 형성된 균주는 내열성 균주로 판정하였다 [5, 25].
병원균 억제능을 검사하기 위하여 Flemming 등 [12]에 의해 언급된 agar spot assay를 변형하여 사용하였다. Agar spot assay의 병원균으로는 Escherichia coli KCTC 1682, Salmonella Enteritidis KCCM 12021, Staphylococcus aureus KCTC 1621, Listeria monocytogenes KCTC 3569균주의 4종류를 사용하였다.
본 실험에서는 개에서 분리된 Lactobacillus, Enterococcus, Bifidobacterium 속 균주 중에서 내산성, 내담즙성, 내열성, 병원성 억제능 등 생균제로서의 특성이 가장 우수한 상위 4개 균주씩, 합계 12개 균주를 대상으로 NO, TNF-α, IL-1β, NF-κB와 같은 면역활성 지표를 측정하고, 면역활성이 뛰어난 것으로 잘 알려진 상업용 균주인 LGG균주와 비교하였다.
분리된 Lactobacillus, Enterococcus, Bifidobacterium 속 균주 중에서 내산성, 내담즙성, 내열성, 병원성 억제능, 장관부착능 등이 가장 우수한 상위 균주를 각각 4개씩 선발하여 합계 12개 균주를 대상으로 면역활성능을 측정하였다.
선택 및 비선택 배지에서 유산균의 전형적인 집락을 선발하여 BL medium에 계대한 후, 37°C, 48시간 배양하였다.
유산균주가 NF-κB pathway를 활성화시키는지 확인하기 위하여 secreted alkaline phosphatase reporter gene이 안정적으로 transfection된 RAW BLUE cells(InvivoGen)을 사용하였다.
5의 BHI broth에 1% 접종하고, 37°C에서 2시간 동안 배양하였다. 이후 균주의 생존여부를 확인하기 위하여 배양균주를 BL medium에 도말하여 배양한 후, 생존한 균주를 내산성 균주로 판정하였다 [25].
최종 선발 균주는 16s rRNA sequencing 분석(SolGent, Korea)을 통해 동정하였다.
대상 데이터
병원균 억제능을 검사하기 위하여 Flemming 등 [12]에 의해 언급된 agar spot assay를 변형하여 사용하였다. Agar spot assay의 병원균으로는 Escherichia coli KCTC 1682, Salmonella Enteritidis KCCM 12021, Staphylococcus aureus KCTC 1621, Listeria monocytogenes KCTC 3569균주의 4종류를 사용하였다. 각 병원균과 유산균은 BBL BHI broth (Becton, Dickinson and Company)에서 37°C, 24시간 배양하여 접종액으로 사용하였다.
05%(w/v)로 첨가한 MRS broth (Difco) 5 mL에 접종하여 혐기적으로 37°C, 24시간 배양하였다. Caco-2 cell(한국세포주은행, 대한민국)은 20% inactivated fecal calf serum(Gibco-BRL, USA)과 0.2% penicillin/streptomycin(10,000 U/mL, Gibco-BRL)을 첨가한 DMEM(Gibco-BRL)에서 CO2 incubator(95% air, 5% CO2)를 사용하여 37oC에서 배양하였다. Caco-2 cell monolayer가 형성된 4- well chamber slide에 유산균(0.
충북 청주시 근교 가정집과 애견센터에서 사육하는 건강한 포유자견(2~4주령) 7마리, 이유자견(2~3개월령) 7마리, 성견(1~6세) 6마리의 합계 20마리를 유산균 분리용 공시 동물로 사용하였다. 품종은 Pomeranian, Maltese, Shih Tzu, 잡종견 등을 사용하였다.
충북 청주시 근교 가정집과 애견센터에서 사육하는 건강한 포유자견(2~4주령) 7마리, 이유자견(2~3개월령) 7마리, 성견(1~6세) 6마리의 합계 20마리를 유산균 분리용 공시 동물로 사용하였다. 품종은 Pomeranian, Maltese, Shih Tzu, 잡종견 등을 사용하였다.
한국세포주은행으로부터 분양받은 murine macrophage 세포인 RAW 264.7 cell을 10% fetal bovine serum과, 100 unit/mL의 streptomycin과 penicillin이 첨가된 DMEM 배지를 사용하여 37°C, 5% CO2 조건에서 배양하고 NO 및 cytokine 생성에 미치는 영향을 알아보기 위하여 사용하였다.
데이터처리
일원배치 분산분석(ANOVA)으로 평균과 표준편차를 분석하였으며, 사후 검정을 위해 Duncan test (p < 0.05)를 실시하였다.
이론/모형
IL-1β와 TNF-α 생산량은 ELISA kit(eBioscience, USA)를 이용하여 측정하였다. Sandwich ELISA 방법을 사용하였으며, 측정 방법은 제조사의 지침에 따라 진행하였다. 측정 시료는 microplate reader(Tecan)를 이용하여 450 nm 파장에서 3회 반복 측정하였다 [1, 8].
선택 및 비선택 배지에서 유산균의 전형적인 집락을 선발하여 BL medium에 계대한 후, 37°C, 48시간 배양하였다. 배양된 집락은 Mitsuoka 방법에 의해 Lactobacillus, Enterococcus, Bifidobacterium으로 분리, 동정하였다. 분리된 유산균은 혐기 상태에서 BL medium에 계대하여 37°C에 보관하며, 다음 실험에 사용하였다 [18, 20, 25].
성능/효과
7%)가 부착능을 보여 가장 높은 결과를 나타내었다. Bifidobacterium 속 4개 균주는 50%, Lactobacillus 속 8개 균주는 3개 균주만이 부착능 결과를 나타내었다.
Caco-2 cell을 사용한 유산균주의 부착능 검사를 시행한결과 Table 1에서와같이 Enterococcus 12개 균주 중 8개 균주(66.7%)가 부착능을 보여 가장 높은 결과를 나타내었다. Bifidobacterium 속 4개 균주는 50%, Lactobacillus 속 8개 균주는 3개 균주만이 부착능 결과를 나타내었다.
5%의 높은 항균활성을 나타내었다. Enterococcus 12개 균주는 Salmonella Enteritidis KCCM 12021, Staphylococcus aureus KCTC 1916균주에 대해 100% 항균활성을 나타내었고 나머지 2종류 병원균에 대해서도 91.7%의 매우 높은 항균활성을 나타내었다. 그러나 Bifidobacterium 속 4개 균주는 4종류 병원균에 대해 25.
IL-1β 측정 결과는 Enterococcus균주 중에서 S33, S17균주의 생성량이 많았지만, LGG균에 유의적인 증가는 나타내지 않았다.
6 pg/mL보다 유의적으로 증가 하였다. Lactobacillus도 4개 균주 모두 유의적인 증가세를 보였으며, 그중에서 L10균주가 101 pg/mL의 가장 높은 결과를 보였다. 그러나 Bifidobacterium균주는 B3와 B6균주만이 LGG에 비해 유의적인 증가를 나타내었으며, B3가 100.
NF-κB 흡광도 측정결과, 면역활성을 측정한 12개 균주 중에서 S36, B1, B9의 3개 균주를 제외한 모든 균주가 LGG 균주에 비해 유의적인 증가결과를 나타내었다.
NO 생성량의 경우 Enterococcus S33균주(6.3 μM/mL), Lactobacillus L10균주(11.6 μM/mL), L31균주(82.8 μM/mL), Bifidobacterium B3균주(5.9 μM/mL)의 NO 생성량이 면역증진 효과가 입증된 상업용 균주인 Lactobacillus rhamnosus GG(LGG)의 2.5 μM/mL보다 유의적인 증가 결과를 나타내었다(Fig. 1).
TNF-α 측정결과 Enterococcus S33, S17, S45, S36 4개 균주 모두 LGG의 24.6 pg/mL보다 유의적으로 증가 하였다.
개의 분변으로부터 분리된 총 101개 균주를 대상으로 내산성 시험을 실시한 결과 Table 1에서와 같이 Enterococcus 47개 균주 중 32개 균주(68.1%)가 pH 2.5, 2시간에서 내산성을 나타내었다. 그러나 Lactobacillus 속 45개 균주 중 8개 균주(17.
본 실험에서는 개에서 분리된 Lactobacillus, Enterococcus, Bifidobacterium 속 균주 중에서 내산성, 내담즙성, 내열성, 병원성 억제능 등 생균제로서의 특성이 가장 우수한 상위 4개 균주씩, 합계 12개 균주를 대상으로 NO, TNF-α, IL-1β, NF-κB와 같은 면역활성 지표를 측정하고, 면역활성이 뛰어난 것으로 잘 알려진 상업용 균주인 LGG균주와 비교하였다. 그 결과 Lactobacillus L10, Enterococcus S33, Bifidobacterium B3의 3개 균주가 생균제로서의 특성은 물론이고 면역활성까지 모두 갖춘 최적의 개 생균제용 유산균주로 판단되었다.
7%의 매우 높은 항균활성을 나타내었다. 그러나 Bifidobacterium 속 4개 균주는 4종류 병원균에 대해 25.0%~50.0%의 비교적 낮은 항균활성만을 나타내었다(Table 1).
Lactobacillus도 4개 균주 모두 유의적인 증가세를 보였으며, 그중에서 L10균주가 101 pg/mL의 가장 높은 결과를 보였다. 그러나 Bifidobacterium균주는 B3와 B6균주만이 LGG에 비해 유의적인 증가를 나타내었으며, B3가 100.2 pg/mL의 생성량을 나타내었다.
현재 국내외적으로 개 생균제용 유산균주에 관한 많은 연구보고는 이루어지지 않았지만, Strompfová 등 [31]이 보고한 Enterococcus faecalis EE4균주와 Enterococcus faecium EF01균주는 본 실험에서 최종 선발된 Enterococcus faecium S33균주에 비해, 박테리오신 생성능, 항생제 감수성 등을 추가로 보고하고 있다. 그러나 내산성(pH 3.0, 3 h), 내담즙성 (1% bile), 장관 부착성, 항균활성 등의 기본 특성은 선발 균주와 비슷한 결과를 나타내었고, 반대로 선발 균주는 내열성, 면역활성 등의 우수한 특성이 있었다. 또한 개 유래의 생균제로 우수성을 보고한 Lactobacillus fermentum AD1균주 [30]와 최종 선발 균주인 Lactobacillus reuteri L10균주의 특성을 비교해보면, 내산성, 내담즙성, 장관 부착성에서는 비슷한 특성 결과를 나타내었지만, 본 실험의 선발 균주는 Lactobacillus fermentum AD1균주에서 없는 매우 우수한 면역활성 능력을 나타내었다는 특징을 갖고 있었다.
내산성, 내담즙성, 내열성이 우수한 유산균주를 대상으로 4종류 병원성 세균에 대한 병원성 억제능을 평가한 결과, Lactobacillus 속 8개 균주는 Salmonella Enteritidis KCCM 12021균주에 대해 100% 항균활성을 나타내었으며, 나머지 병원균 3종류에 대해서도 75%~87.5%의 높은 항균활성을 나타내었다. Enterococcus 12개 균주는 Salmonella Enteritidis KCCM 12021, Staphylococcus aureus KCTC 1916균주에 대해 100% 항균활성을 나타내었고 나머지 2종류 병원균에 대해서도 91.
내산성과 내담즙성 균주 중에서 선발된 유산균을 대상으로 70℃에서 5분간 내열성을 확인한 결과 Table 1에서와 같이, Lactobacillus, Enterococcus, Bifidobacterium 균주는 각각 4/8(50%), 19/32(59.4%), 2/4(50%)의 내열성을 나타내었다. 그러나 60℃, 5분의 낮은 열처리 조건에서는 각각 5/8(62.
따라서 면역활성을 측정한 12개 균주 중에서 가장 우수한 결과를 보인 Lactobacillus L10, Enterococcus S33, Bifidobacterium B3의 3개 균주가 생균제로서의 특성과 면역활성모두 갖춘 최적의 개 생균제용 유산균주로 판단되었다.
0, 3 h), 내담즙성 (1% bile), 장관 부착성, 항균활성 등의 기본 특성은 선발 균주와 비슷한 결과를 나타내었고, 반대로 선발 균주는 내열성, 면역활성 등의 우수한 특성이 있었다. 또한 개 유래의 생균제로 우수성을 보고한 Lactobacillus fermentum AD1균주 [30]와 최종 선발 균주인 Lactobacillus reuteri L10균주의 특성을 비교해보면, 내산성, 내담즙성, 장관 부착성에서는 비슷한 특성 결과를 나타내었지만, 본 실험의 선발 균주는 Lactobacillus fermentum AD1균주에서 없는 매우 우수한 면역활성 능력을 나타내었다는 특징을 갖고 있었다. 그러나 본 실험에서는 최종 선발 균주를 사용한 동물 임상 효능 실험을 아직 시행하지 않았기 때문에 추후 개를 대상으로 한 효능 실험이 진행되어야 할 것으로 판단되었다.
따라서 우수한 특성을 가진 유산균주를 생균제용 균주로 사용하기 위해서는 먼저 내산성과 내담즙성의 특성을 갖추어야 한다 [22]. 본 실험 결과 Enterococcus 47개 균주는 pH 2.5에서 32개 균주(68.1%)가 강한 내산성을 보였지만, Lactobacillus 45개 균주는 17.8%, Bifidobacterium은 11.1%만이 내산성을 나타내어 비교적 낮은 내산성 균주임을 알 수 있었다. Strompfová 등 [31]의 연구에 의하면 개에서 분리한 Enterococcus 속 세균의 76~87%가 pH 3.
Bifidobacterium 속 세균은 60℃, 5분간 반응시킨 결과 31개의 균주 중 8개의 균주만이 내열성을 보인 것으로 확인되기도 하였다 [28]. 본 실험에서 Enterococcus는 60℃, 5분에서 87.5%, 70℃, 5분에서 59.4%가 내열성을 보였으며, Lactobacillus와 Bifidobacterium는 시험 균주의 50%가 70℃, 5분에서 내열성을 보였다.
유산균의 병원성 억제능에 관한 많은 연구에서 Lactobacillus, Enterococcus, Bifidobacterium 등의 유산균은 Salmonella Typhimurium, Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Listeria monocytogenes 등에 대한 억제능이 보고되었다 [32, 35]. 본 실험에서 시행한 병원성 억제능 결과, Enterococcus 의 경우 12개 균주 중 10개 균주가, Lactobacillus는 8개 균주 중 3개의 균주가 4가지 병원균 모두에 대해 억제능을 나타내었지만, Bifidobacterium은 4가지 병원균 모두에 억제능이 있는 균이 존재하지 않았다. 이와 같은 결과는 Enterococcus, Lactobacillus의 산 생성 능력이 Bifidobacterium에 비해 뛰어난 것으로 추측된다.
본 연구에서는 총 20마리 개의 분변에서 유산균 101개 균주를 분리하였는데, Enterococcus가 47개 균주(46.5%), Lactobacillus가 45개 균주(44.6%)로 대부분을 차지하였으며 Bifidobacterium 속은 9개 균주로 8.9%에 불과하였다. 이와 같은 결과는 16S rRNA gene pyrosequencing 방법을 사용하여 건강한 개의 장내세균총을 분석하였을 때 Bifidobacterium 속 세균은 우점종으로 항상 검출되지 않는다는 Handl 등 [14]의 연구결과와 일치하고 있다.
분리된 총 101개 균주의 내담즙성을 확인한 결과, Bifidobacterium 속 1개 균주만이 1% Oxgall에서 사멸하였고, 나머지 모든 균주는 0.3%, 0.5%, 1.0% Oxgall에서 내담즙성을 나타내었다(Table 1).
총 20마리 개의 분변에서 분리된 유산균은 총 101개 균주였으며, 그중에서 Enterococcus 속 균주가 47개 균주 (46.5%)로 가장 많이 분리되었으며, Lactobacillus 속 균주도 45개 균주(44.6%)가 분리되었다. 그러나 편성혐기성 유산균인 Bifidobacterium 속 균주는 9개 균주(8.
최종 선발 균주인 Lactobacillus L10, Enterococcus S33, Bifidobacterium B3균주는 16s rRNA sequence 분석 결과 Lactobacillus reuteri L10(99%), Enterococcus faecium S33 (99%), Bifidobacterium longum B3(99%)로 각각 최종 동정되었으며, 그 생균제적 특성은 Table 2에 나타내었다.
후속연구
또한 개 유래의 생균제로 우수성을 보고한 Lactobacillus fermentum AD1균주 [30]와 최종 선발 균주인 Lactobacillus reuteri L10균주의 특성을 비교해보면, 내산성, 내담즙성, 장관 부착성에서는 비슷한 특성 결과를 나타내었지만, 본 실험의 선발 균주는 Lactobacillus fermentum AD1균주에서 없는 매우 우수한 면역활성 능력을 나타내었다는 특징을 갖고 있었다. 그러나 본 실험에서는 최종 선발 균주를 사용한 동물 임상 효능 실험을 아직 시행하지 않았기 때문에 추후 개를 대상으로 한 효능 실험이 진행되어야 할 것으로 판단되었다.
앞으로 최종 선발 균주를 대상으로 실제 동물실험을 진행하고, 임상 효능 검증 연구가 뒷받침된다면, 다른 산업동물에 비해 많은 연구가 진행되지 않은 개 생균제용 유산균주 개발에 활용 가치가 매우 높을 것으로 생각된다.
질의응답
핵심어
질문
논문에서 추출한 답변
유산균에서 대표적인 균주는?
생균제(probiotics)는 일반적으로 숙주에 유익한 작용을 하는 미생물 제제 또는 미생물의 성분으로 정의된다 [13]. 일반적으로 생균제용 미생물로는 유산균(lactic acid bacteria)을 많이 사용하고 있는데, 그중에서 Lactobacillus, Enterococcus, Bifidobacterium 등이 대표적인 균주로 알려졌다. 유산균은 동물의 장내세균총(intestinal microflora) 생태계 균형 유지와 병원성 세균의 억제에 중요한 역할을 하는 유익한 균으로 알려졌는데, 일반적으로 소장에는 Lactobacillus, Enterococcus 등의 통성혐기성(facultative anaerobic) 유산균이, 대장에는 Bifidobacterium과 같은 편성혐기성(strict anaerobic) 유산균이 우점종으로 분포하고 있다 [20].
우수한 특성을 가진 유산균주를 생균제용 균주로 사용하기 위해서는 내산성과 내담즙성의 특성을 먼저 갖추어야 하는 이유는?
생균제를 급여하면 우선 위와 소장을 거쳐 대장까지 도달하게 되는데, 제일 먼저 위의 낮은 산성과 십이지장의 높은 알칼리성인 담즙에 노출된다. 따라서 우수한 특성을 가진 유산균주를 생균제용 균주로 사용하기 위해서는 먼저 내산성과 내담즙성의 특성을 갖추어야 한다 [22].
생균제란?
생균제(probiotics)는 일반적으로 숙주에 유익한 작용을 하는 미생물 제제 또는 미생물의 성분으로 정의된다 [13]. 일반적으로 생균제용 미생물로는 유산균(lactic acid bacteria)을 많이 사용하고 있는데, 그중에서 Lactobacillus, Enterococcus, Bifidobacterium 등이 대표적인 균주로 알려졌다.
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