백하수오의 식품학적 영양 성분 및 휘발성 향기 성분 분석을 통한 관능적 특성 검토 Analysis of Nutritional Components, Volatile Properties, and Sensory Attributes of Cynanchi wilfordii Radix: Characterization Study원문보기
본 연구는 백하수오가 가지는 일반 성분과 영양 성분에 대한 탐색을 실시하였다. 무기질에서 높은 칼륨 성분을 보이고 있었으며 라디칼 소거능 역시 우수한 것으로 나타났다. 아미노산에서는 유리 및 구성 아미노산 모두 arginine이 높은 함량을 나타냈으며 생리활성이 우수한 것으로 보고되는 ${\gamma}$-aminobutyric acid(GABA) 역시 높은 함량을 보이고 있다. 지방산 조성을 볼 때 필수지방산으로 알려진 linoleic acid가 가장 주된 지방산으로 나타났으며 ${\omega}$-3 계열인 linolenic acid가 존재하는 것으로 볼 때 우수한 영양적 조성을 가지고 있다고 볼 수 있다. 관능검사를 통해 백하수오차의 경우 녹차에 비해 약간의 쓴맛과 단맛이 부족하다고 측정되었으나 농도 조절이나 부재료 첨가를 통해 개선할 수 있을 것으로 판단된다.
본 연구는 백하수오가 가지는 일반 성분과 영양 성분에 대한 탐색을 실시하였다. 무기질에서 높은 칼륨 성분을 보이고 있었으며 라디칼 소거능 역시 우수한 것으로 나타났다. 아미노산에서는 유리 및 구성 아미노산 모두 arginine이 높은 함량을 나타냈으며 생리활성이 우수한 것으로 보고되는 ${\gamma}$-aminobutyric acid(GABA) 역시 높은 함량을 보이고 있다. 지방산 조성을 볼 때 필수지방산으로 알려진 linoleic acid가 가장 주된 지방산으로 나타났으며 ${\omega}$-3 계열인 linolenic acid가 존재하는 것으로 볼 때 우수한 영양적 조성을 가지고 있다고 볼 수 있다. 관능검사를 통해 백하수오차의 경우 녹차에 비해 약간의 쓴맛과 단맛이 부족하다고 측정되었으나 농도 조절이나 부재료 첨가를 통해 개선할 수 있을 것으로 판단된다.
Nutritional compositions, volatile compounds, and sensory attributes of Cynanchi wilfordii Radix were analyzed in order to examine its practical utilization as a food resource. In the proximate analysis, protein and lipid contents were shown to be 14.6 and 5.0 mg/100 g, respectively, in C. wilfordii...
Nutritional compositions, volatile compounds, and sensory attributes of Cynanchi wilfordii Radix were analyzed in order to examine its practical utilization as a food resource. In the proximate analysis, protein and lipid contents were shown to be 14.6 and 5.0 mg/100 g, respectively, in C. wilfordii Radix. Potassium was the most predominant mineral (809 mg/100 g), as determined by inductively coupled plasma-optical emission spectrometry in parallel with microwave acid digestion. Total phenolic content was found to be 410 mg/100 g. Further, arginine and linoleic acid were the most abundant amino acid and fatty acid of C. wilfordii Radix, respectively. To examine its functional properties, classical 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH) analysis was performed. As a result, the concentration of C. wilfordii Radix required to scavenge 50% of DPPH radicals was 1.16 mg of dried material. Lastly, in olfactory and sensory tests, ${\beta}$-eudesmol (woody odor) was the major flavor compound responsible for the bitter taste and sensory attributes of C. wilfordii Radix. Taken altogether, the above results provide important preliminary results for utilization of C. wilfordii Radix as a food resource.
Nutritional compositions, volatile compounds, and sensory attributes of Cynanchi wilfordii Radix were analyzed in order to examine its practical utilization as a food resource. In the proximate analysis, protein and lipid contents were shown to be 14.6 and 5.0 mg/100 g, respectively, in C. wilfordii Radix. Potassium was the most predominant mineral (809 mg/100 g), as determined by inductively coupled plasma-optical emission spectrometry in parallel with microwave acid digestion. Total phenolic content was found to be 410 mg/100 g. Further, arginine and linoleic acid were the most abundant amino acid and fatty acid of C. wilfordii Radix, respectively. To examine its functional properties, classical 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH) analysis was performed. As a result, the concentration of C. wilfordii Radix required to scavenge 50% of DPPH radicals was 1.16 mg of dried material. Lastly, in olfactory and sensory tests, ${\beta}$-eudesmol (woody odor) was the major flavor compound responsible for the bitter taste and sensory attributes of C. wilfordii Radix. Taken altogether, the above results provide important preliminary results for utilization of C. wilfordii Radix as a food resource.
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문제 정의
본 연구는 백하수오가 가지는 일반 성분과 영양 성분에 대한탐색을 실시하였다. 무기질에서 높은 칼륨 성분을 보이고있었으며 라디칼 소거능 역시 우수한 것으로 나타났다.
5 g/100 g) 이하일 것으로 판단된다. 본 연구에서는 조회분, 단백질, 지질의 세부적 구성 성분을 보고하였다.
다만식품의 부재료로서의 적용사례가 있는데(9-11), 이는 적하수오가 부재료로 이용된 사례이며 백하수오의 경우는 양갱의 부재료로 사용된 연구만이 보고되는 실정이다(12). 이에본 연구에서는 국내 공정서에 백하수오로 기록되어 있지만하수오로 사용되는 백하수오에 대한 올바른 영양학적 정보가 필요하다고 판단되어 백하수오에 대한 식품학적 접근과주로 달여서 먹는 백하수오의 특성으로 식용 차(tea)로서의잠재성을 위해 휘발성 성분을 탐색하여 식품 영양 소재로서의 잠재성을 검토하였다.
가설 설정
1) Total carbohydrate content of foods has been calculated by difference. The other constituents in the sample (moisture, ash, protein, and lipid) are summed and subtracted from the total weight of the sample.
제안 방법
다. 2 mL의 hexane을첨가과정을 3번 반복하여 hexane층을 수집한 다음 질소가스를 이용하여 hexane을 제거한 후 샘플을 다시 1 mL의 hexane에 녹여 지방산 분석을 위한 실험에 사용하였다.
, Rockford, IL, USA)에서 24시간 이상 가열하여 가수분해를 실시하였다. 50℃ 온도에서 rotary evaporator(R-田, BUCHI, Postfach, Switzerland)로 산을 제거한 후 sodium dilution buffer로 50 mL 정용한 다음 1 mL를 취하여 0.2 μm membrane filter로 여과시켜 아미노산 자동분석기(L-8900, Hitachi High Tech, Tokyo, Japan)를 이용하여 정량 분석하였다.
GC/MS를 통해 분리된 각각의 휘발성 향기 성분은 GC/ MSD에 장착된 olfactory detection port with heated mixing chamber(ODP 3, Gerstel, Inc., Linthicum, MD, USA) 를 이용하여 휘발성 물질에 대한 실험자의 후각을 통한 sniffing test를 실시하였다. 개인이 느끼는 후각의 정도 차이와 시간이 경과함에 따른 후각의 민감성이 감소되는 점을고려하여 3명의 숙련된 실험자가 동일 실험을 참여하고 각각의 휘발 성분들에 대한 강도를 검사하였다.
GC/MS와 olfactory를 이용하여 실험자의 후각기능을 통해 직접 향을 분석하였고 aroma-gram을 나타내었다(Fig. 2b). 전체적으로 실험자가 향을 강하게 느끼는 구간은 15- 20분, 23~28분, 31~34분 구간으로 나타났다.
0 mL/min, split ratio는 1:10이었다. Total ionization chromatogram(TIC)에서 분리된 각 성분은 mass spectrum library(NIST 12)와 참고문헌(19)을 이용하여 동정하였으며, 각 시료의 향기 성분은 피크 면적과 이를 기준으로하여 전체 피크 면적을 100%로 환산하여 각 성분들이 가지는 피크 면적을 상대적인 비율(%)로 나타내었다.
, Linthicum, MD, USA) 를 이용하여 휘발성 물질에 대한 실험자의 후각을 통한 sniffing test를 실시하였다. 개인이 느끼는 후각의 정도 차이와 시간이 경과함에 따른 후각의 민감성이 감소되는 점을고려하여 3명의 숙련된 실험자가 동일 실험을 참여하고 각각의 휘발 성분들에 대한 강도를 검사하였다.
건조된 백하수오를 농도별(200, 400, 600, 800 ug/mL)로 희석한 후 시료 용액 80 此에 0.2 mM의 DPPH 용액(dissolved in 99% ethanol, Sigma-Aldrich Co.) 320 此를 넣고 교반한 다음 37℃에서 30분간 방치한후 517 nm에서 흡광도를 측정하였으며, 다음의 식에 대입하여 항산화력을 측정하였다.
함께 10분간 교반을 실시하였다. 교반 후 3, 000 rpm 에서 20분간 원심분리 하였고 상층액을 감압 농축한 후 25 mL sample dilution buffer로 용해시키고, sulfosalicylic acid 20을 첨가하여 4℃에서 1시간 동안 방치한 후 다시 3, 000 rpm에서 20분간 원심분리 하였고 0.2 ym membrane filter로 여과시켜 아미노산 자동분석기(L-8900)로 정량 분석하였다. 아미노산 분석조건은 Table 1에 나타내었다.
1 g을 취하여 3 mL의 6 N HCl과 함께 test tube에 넣고 10분간 교반을실시하였다. 교반하여 감압 밀봉한 후 110℃로 가열된 heating block(Thermo Fisher Scientific Co., Rockford, IL, USA)에서 24시간 이상 가열하여 가수분해를 실시하였다. 50℃ 온도에서 rotary evaporator(R-田, BUCHI, Postfach, Switzerland)로 산을 제거한 후 sodium dilution buffer로 50 mL 정용한 다음 1 mL를 취하여 0.
백하수오차에 대한 대조구로 녹차를 사용하였고실험에 사용된 녹차는 시중에서 구입 가능한 티백 형태의 소비자 구매 빈도가 높은 제품을 이용하였다. 백하수오차의 관능적 평가는 녹차와의 상대적인 비교를 통해 검사하였다.
DPPH는 짙은 보라색을 띠는 안정한 free radical로 항산화제에 의해 환원되어 색이 보라색에서 점차 탈색되는데 이러한 원리를 통해 다양한 천연 소재로부터 항산화성을 측정하는 데 이용되고 있다(22). 본 실험에서는 백하수오의 수용성추출물에 대해서 항산화 효과를 DPPH의 소거 활성을 측정하여 비교하였으며 그 결과는 Table 4에 나타내었다. 수용성 백하수오 추출물의 IC5o(50%의 라디칼 소거능의 활성에필요한 함량)은 1.
본 연구에 추출된 백하수오 지질의 지방산 조성을 알아보기 위해 6% sulfuric acid(H2SO4)를 이용한 유도체화를 실시하였다(17). 약 100 mg의 추출된 지질을 Reacti-vialTM reaction vial(5 mL size, Thermo Fisher Scientific Co.
모든 분석은 3회 반복하여 실시하였다. 분석된 결과는 지방산 표준품을 이용하여 각각의 머무름 시간을 이용하여 동정하였다.
apparatus, SDE)를 이용하였다. 분쇄된 백하수오 100 g에 증류수(초순수) 1,000 mL를 가하여 혼합한 후 내부표준물질로 1 mL의 n-pentadecane(1 mg/mL, Sigma- Aldrich Co.)을 첨가하여 110℃에서 증류를 실시하고, 포집을 위한 유기용매는 재증류한 n-pentane과 diethyl ether 혼합용매(1:1, v/v) 100 mL를 사용하여 상압 하에서 3시간동안 증류를 통한 향기 성분과 유기용매의 혼합으로 휘발성향기 성분을 추출하였다. 추출이 끝난 후 이 추출액에 10 g의 무수황산나트륨(NazSOq)을 가하여 4℃에서 하룻밤 방치시켜 탈수시키고 n-pentane과 diethyl ether 혼합용매증은 질소가스를 통해 1 mL까지 농축 후 GC/MS 분석시료로사용하였다.
45 um 필터를 사용하여 시료를 필터링 한 후 분석용 시료로 사용하였다. 분해된 샘플의 무기질 분석은 유도결합플라즈마 분광광도계 /ICP-OES(Inductively Coupled Plasma-Optical Emission Spectrometer, 5300DV, Perkin Elmer Co.)를 사용하였다.
산화적 스트레스에 대한 효능을 확인하기 위해 백하수오의 항산화력을 확인하기 위한 라디칼 소거능을 측정하였다. DPPH는 짙은 보라색을 띠는 안정한 free radical로 항산화제에 의해 환원되어 색이 보라색에서 점차 탈색되는데 이러한 원리를 통해 다양한 천연 소재로부터 항산화성을 측정하는 데 이용되고 있다(22).
제조하였다. 제조된 식용차의 관능검사는 경남과학기술대학교 재학생 15명을 대상으로 15점법을 이용하여색, 향, 짠맛, 쓴맛, 신맛, 떫은맛, 단맛, 종합적 선호도를 조사하였다. 백하수오차에 대한 대조구로 녹차를 사용하였고실험에 사용된 녹차는 시중에서 구입 가능한 티백 형태의 소비자 구매 빈도가 높은 제품을 이용하였다.
)을 첨가하여 110℃에서 증류를 실시하고, 포집을 위한 유기용매는 재증류한 n-pentane과 diethyl ether 혼합용매(1:1, v/v) 100 mL를 사용하여 상압 하에서 3시간동안 증류를 통한 향기 성분과 유기용매의 혼합으로 휘발성향기 성분을 추출하였다. 추출이 끝난 후 이 추출액에 10 g의 무수황산나트륨(NazSOq)을 가하여 4℃에서 하룻밤 방치시켜 탈수시키고 n-pentane과 diethyl ether 혼합용매증은 질소가스를 통해 1 mL까지 농축 후 GC/MS 분석시료로사용하였다.
) 600 uL와 증류수 160 uL를 가하여혼합하고 25℃에서 2시간 동안 정치 반응한 후 750 nm에서흡광도를 측정하였다. 표준물질로는 gallic acid(Sigma- Aldrich Co.)를 사용하여 0~500 ug/mL 농도로 하여 샘플과 동일한 방법으로 분석한 후 얻은 검량선으로부터 총 폴리페놀 함량을 산출하였다.
대상 데이터
제조된 식용차의 관능검사는 경남과학기술대학교 재학생 15명을 대상으로 15점법을 이용하여색, 향, 짠맛, 쓴맛, 신맛, 떫은맛, 단맛, 종합적 선호도를 조사하였다. 백하수오차에 대한 대조구로 녹차를 사용하였고실험에 사용된 녹차는 시중에서 구입 가능한 티백 형태의 소비자 구매 빈도가 높은 제품을 이용하였다. 백하수오차의 관능적 평가는 녹차와의 상대적인 비교를 통해 검사하였다.
본 연구에서 사용된 백하수오는 산청 생약농업협동조합을 통해 재배된 것을 구입하였으며, 연구에 사용될 백하수오의 검증을 위해 경남과학기술대학교 농학.한약자원학부 정은주 교수를 통해서 감별 받았고 본 연구에 사용된 백하수오표본(specimen voucher number: GFS-006)은 경남과학기술대학교 식품과학부 표본실에 보관하였다.
Santa Clara, CA, USA)가 사용되었다. 분석 칼럼은 SP-2560 capillary column(100 mX0.25 mm i.d., 0.25-ym film thickness; Agilent Technologies)이 사용되었고, carrier gas로 helium(2.7 mL/min)이 이용되었다. 주입구및 검출기 온도는 모두 250℃였고 split ratio는 50:1이며, 불꽃 이온을 위한 수소와 air는 검출기에서 분당 40 mL와 450 mL가 각각 사용되었다.
) 에 옮긴 후 100 yL의 내부표준물질 heptadecanoic acid (C17:0)(1 mg/mL hexane)를 함께 vial에 첨가하였다. 샘플은 2 mL의 transmethylation reagent인 6% H2SO4/ CH3OH를 사용하였고, 70℃의 온도에서 Reacti-Therm 田 Heating/Stirring Module(Thermo Fisher Scientific Co.) 을 통해 16시간 동안 유도체화 시켰다. 16시간 후 샘플을실온에 방치하여 냉각시킨 후 1 mL의 물을 첨가하여 1분간 vortex 시킨 다음 2 mL의 hexane을 첨가하여 1분간 vortex 시킨 후 hexane증을 수집하였.
한약자원학부 정은주 교수를 통해서 감별 받았고 본 연구에 사용된 백하수오표본(specimen voucher number: GFS-006)은 경남과학기술대학교 식품과학부 표본실에 보관하였다. 실험에 사용된 백하수오 샘플은 60℃에서 열풍건조 시킨 후 50 mesh 입도로 파쇄하여 연구에 사용하였다.
지방산 분석을 위해서 사용된 gas chromatography로는 Agilent Technologies 6890N 장치(Agilent Technologies, Santa Clara, CA, USA)가 사용되었다. 분석 칼럼은 SP-2560 capillary column(100 mX0.
Hexane, meth- anol(CH3OH), ethanol chloroform(CHCl3)은 HPLC- grade를 사용하였고, anhydrous sodium sulfate(Na2SO4), n-pentane, diethyl ether, phosphoric acid, hydrochloric acid, Folin-Ciocalteu, sodium chloride(NaCl)는 ACS- grade를 이용하였다. 지방산 조성을 확인하기 위해 Supelco- 37 fatty acid methyl ester(FAME) 표준품 및 heptadecanoic acid(C17:0)가 사용되었다.
검증을 위해 경남과학기술대학교 농학.한약자원학부 정은주 교수를 통해서 감별 받았고 본 연구에 사용된 백하수오표본(specimen voucher number: GFS-006)은 경남과학기술대학교 식품과학부 표본실에 보관하였다. 실험에 사용된 백하수오 샘플은 60℃에서 열풍건조 시킨 후 50 mesh 입도로 파쇄하여 연구에 사용하였다.
Technologies)로 분석하였다. 향기 성분의 분석은 HP- 5MS 칼럼(30 mX0.25 mm i.d.x0.25 ym film thickness) 을 사용하였다. 이때 분석조건으로 오븐 온도는 40℃에서 5분 머무른 후 200℃까지 분당 5℃의 속도로 승온시켰으며, injector 온도는 220℃, carrier gas인 helium의 유속은 1.
데이터처리
백하수오의 영양 및 기능성 성분에 대한 결과는 3반복을통해 평균값과 평균편차를 통해서 비교하였고, 관능검사에사용된 결과는 Microsoft Excel software(version 2010, Microsoft Corp., Redmond, WA, USA)를 이용하여 방사형 그래프를 통해 백하수오와 녹차의 관능적 차이를 항목별로 제시하였다.
이론/모형
단백질을 구성하는 구성아미노산의 함량을 조사하기 위해 산분해법을 이용하였다. 동결 건조된 샘플 0.
백하수오에 함유된 종 페놀 함량은 Folin-Ciocalteu의 방법(15)에 따라 측정하였다. 시료를 1 mg/mL로 희석시킨 후그중 40 uL에 증류수 200 uL를 첨가하고, 여기에 2 N Folin-Ciocalteu's reagent(Sigma-Aldrich Co.
관능적인 부분에서 약용식물의 특징적인 부분인 쓴맛의 강도가 매우 중요한부분으로 대두되었다. 8가지 항목을 비교해 볼 때 전체적인선호도에서는 백하수오차보다는 녹차에 대한 선호도가 높게 나타났다. 녹차와의 비교에서 백하수오차의 색도와 짠맛과 신맛이 녹차보다 더 나은 것으로 나타났으며, 떫은맛과단맛의 정도는 기호도가 낮게 나타났다.
8가지 항목을 비교해 볼 때 전체적인선호도에서는 백하수오차보다는 녹차에 대한 선호도가 높게 나타났다. 녹차와의 비교에서 백하수오차의 색도와 짠맛과 신맛이 녹차보다 더 나은 것으로 나타났으며, 떫은맛과단맛의 정도는 기호도가 낮게 나타났다. 선호도가 녹차에비해 낮은 관능적 부분은 단맛을 줄 수 있는 부재료의 첨가로써 백하수오차가 가지는 단점을 보완해야 할 것으로 판단된다.
실시하였다. 무기질에서 높은 칼륨 성분을 보이고있었으며 라디칼 소거능 역시 우수한 것으로 나타났다. 아미노산에서는 유리 및 구성 아미노산 모두 arginine이 높은함량을 나타냈으며 생리활성이 우수한 것으로 보고되는 Y- aminobutyric acid(GABA) 역시 높은 함량을 보이고 있다.
1 mg/g의 함량을 나타내었다. 본 연구에서 나타난 GABA의 함량은 mg/g 단위로환산했을 때 5.62 mg/g으로 백하수오의 GABA 함량이 기존의 약용식물이 가진 함량보다 우수하다고 판단된다.
본연구에서는 linoleic acid 함량을 전체 지방산 중 63%로 보고되어(Table 6) linoleic acid가 가지는 과산화물 생성을예측할 수 있었다. 본 연구에서도 hexanal이 검출되었으나피크 면적으로 비교할 때 소량으로 존재하는 향기 성분으로분석되었다. Eugen이은 clove에서 주로 검출되는 향기 성분으로 강한 spicy 향을 가지고 있고 항균성 효과를 보이는것으로 보고되고 있다(34).
약용식물의 향기 성분 추출을 위해 파쇄과정에서 세포가 파괴되어 유리된 chloroplast의 세포벽 성분들인 linoleic acid에서 생성된 리놀렌산 과산화물(13-hydroperoxide linoleic acid)이 생성되며, 다시 분해효소에 의해 분해되어 생성된다(31-33). 본연구에서는 linoleic acid 함량을 전체 지방산 중 63%로 보고되어(Table 6) linoleic acid가 가지는 과산화물 생성을예측할 수 있었다. 본 연구에서도 hexanal이 검출되었으나피크 면적으로 비교할 때 소량으로 존재하는 향기 성분으로분석되었다.
본 실험에서는 백하수오의 수용성추출물에 대해서 항산화 효과를 DPPH의 소거 활성을 측정하여 비교하였으며 그 결과는 Table 4에 나타내었다. 수용성 백하수오 추출물의 IC5o(50%의 라디칼 소거능의 활성에필요한 함량)은 1.16±0.09 mg으로 나타났다. Table 4에나타난 높은 polyphenol 함량을 비추어 볼 때 백하수오는항산화에 유용한 식품 소재로서의 잠재력을 가진 것으로 판단된다.
조성을 Table 5에 나타내었다. 전체 아미노산에서필수아미노산 8종은 전체의 31.55%를 차지하였다. 유리아미노산의 경우에는 10.
2b). 전체적으로 실험자가 향을 강하게 느끼는 구간은 15- 20분, 23~28분, 31~34분 구간으로 나타났다. 첫 구간에서동정된 향기 성분은 fruit-odor를 가진 2-pentyl furan, 두번째 구간에서 동정된 주된 향기 성분은 2, 4-decadienal, eugen이이었으며, 마지막 구간에서는 5-selinene, Q-eu- desmol, Q-humulene이었다.
전체적으로 실험자가 향을 강하게 느끼는 구간은 15- 20분, 23~28분, 31~34분 구간으로 나타났다. 첫 구간에서동정된 향기 성분은 fruit-odor를 가진 2-pentyl furan, 두번째 구간에서 동정된 주된 향기 성분은 2, 4-decadienal, eugen이이었으며, 마지막 구간에서는 5-selinene, Q-eu- desmol, Q-humulene이었다. 상대적인 함량이 높은 hydrocarbone 검출되는 구간에서의 실험자의 반응은 매우낮았다.
후속연구
지방산 조성을 볼 때 필수지방산으로 알려진 linoleic acid가가장 주된 지방산으로 나타났으며 5-3 계열인 linolenic acid가 존재하는 것으로 볼 때 우수한 영양적 조성을 가지고있다고 볼 수 있다. 관능검사를 통해 백하수오차의 경우 녹차에 비해 약간의 쓴맛과 단맛이 부족하다고 측정되었으나농도 조절이나 부재료 첨가를 통해 개선할 수 있을 것으로판단된다.
녹차와의 비교에서 백하수오차의 색도와 짠맛과 신맛이 녹차보다 더 나은 것으로 나타났으며, 떫은맛과단맛의 정도는 기호도가 낮게 나타났다. 선호도가 녹차에비해 낮은 관능적 부분은 단맛을 줄 수 있는 부재료의 첨가로써 백하수오차가 가지는 단점을 보완해야 할 것으로 판단된다. 백하수오의 부재료와의 부합으로 인해 개선되는 식용차의 관능성에 대한 시도의 연구가 발표되고 있다.
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