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문제 정의
- 따라서 본 연구는 이와 같은 양‧한방의 원리를 바탕으로 오적산의 항비만 효과로 비만의 주 지표인 지방세포 분화에 대한 이해와 생체 내 지방세포 조절기전에 대한 규명으로 오적산이 효과적인 항비만 치료제로 개발할 수 있는 근거가 되므로, 동물실험과 지방세포 조절에 대한 연구를 진행하였다.
- 본 연구에서는 OJS의 항비만 효능을 효과를 검증하기 위하여 고지방식이 유도 비만 동물실험과 지방세포 (3T3-L1) 실험을 진행하여 다음과 같은 결론을 얻었다.
- 바 없었다. 이에 본 연구에서는 OJS의 품질관리를 위하여 주요성분에 대한 HPLC 분석을 실시하고, OJS의 비만 조절 작용이 어떠한 작용기전을 통하여 발휘되는 지를 밝혀 보고자 고지방식이로 유도한 마우스의 체중감소 효과와 3T3-L1 지방전구세포를 이용하여 지방 세포분화 및 지방 대사 관련 인자들에 대한 영향을 연구하였다.
제안 방법
- 5mM IBMX, 2µΜ DEX, 167nM insulin/10% FBS)으로 바꾸고 2일간 배양한다. 2일 후 167 nM insu-lin/10% FBS 배지로 교환하며 성숙한 지방세포(adipocytes)로 만들었다. 실험군 OJS 및 대조 실험군 BTSe 배지 교체시기마다 함께 처리하였다.
- 50, 200, 500µg/mL 농도로 OJS 및 BTS를 처리하며 분화 유도하여 3일간 배양한 3T3-L1 세포를 1X PBS로 세척 후, Protease & Phosphatase Inhibitor Cocktail을 포함하는 RIPA buffer (PIERCE, USA)로 균질화하였다. 균질화된 samplese 적정량의 단백질로 10% Sodium Dodecyl Sulfate (SDS)-PAGE에 분리한 후, PVDF membrane으로 단백질을 전이시켰다.
- 50, 200, 500µg/mL 농도로 OJS 및 BTS를 처리하며 분화 유도하여 3일간 배양한 3T3-L1 세포를 TRI-zol (Takara, Japan)를 이용하여 total RNA를 분리하였다. 분리된 total RNA는 1µg로 정량하여 oligo- dT, DEPC와 함께 70℃에서 5분간 반응시킨 후 바로 ice에서 반응을 중지시킨다.
- Atractylenolide Ⅲ, Atractylodin, Cin-namaldehyde, Cinnamic acid, Decursin, Decursinol angelate, Hesperidin, Hono-kiol, 6-gingerol, Glycyrrhizic acid, Liqu-ritin, Magnolol, Naringin, Neohesperidin, nodakenin, paeoniflorin 및 poncirin 17종의 표준품에 대한 표준원액은 무게를 정확히 측정한 후 methanol로 녹여 모두 1mg/mL의 농도로 조제한 후 냉장 보관하여 사용 전 표준용액으로 희석하여 사용하였다.
- HPLC는 Agilent 1200 HPLC system을 사용하여 측정하였으며, 분석에 사용된 컬럼은 Kinetex C18 (2.6µm, 3.0× 150mm, USA) 컬럼을 사용하였으며, 컬럼온도는 30℃로 하여 유속 0.2mL/min으로 흘려주었으며 10uL 주입하였다.
- 그 후, 5% Skin milk를 처리하여 비특이적인 단백질에 대한 blocking을 하였고, 각각의 1차 항체 (P-AMPK, AMPK, C/EBP-α, PPAR-γ, β-actin)를 4℃에서 Overnight 반응 시킨 후, HRP가 중합된 2차 항체를 반응시켰다. Immuno -positive bands는 enhanced chemiluminescent (ECL, Thermo Scientific, USA)에 의해 감광시켜 cheiluminescent detection system을 이용하여 현상하였다.
- OJS의 구성 한약재 중 작약의 주요 성분인 paeoniflorin, 감초의 주요성분인 liquritin과 glycyrrhizic acid, 진피의 주요 성분인 hesperidin과 neohesperidin, 지각의 주요 성분인 naringin과 poncirin, 계지의 주요 성분인 cinnamic acid와 cinnamaldehyde, 건강 및 생강의 주요성분인 6-gingerol, 후박의 주요성분인 honokiol과 magnolol, 창출의 주요성분인 atractylenolide Ⅲ과 atractylodin, 당귀의 주요성분인 nodakenin, decursin, decursinol angelate을 대상으로 50 분 이내에 분리하였으며, 230 nm에서 검출하였다. 검액에서의 peak는 표준용액 peak의 retention time과 UV 흡수 spectrum을 비교하여 특이성을 확보하였으며, 검액에서 13 종의 성분이 검출되었다(Fig.
- OJS의 항비만 효과에 대한 작용기전을 조사하기 위해 OJS 및 양성대조군 BTS을 처리하여 분화를 유도한 3T3-L1 세포에서 세포 에너지 대사 중심 단백질인 AMPK 활성화 정도를 조사하였다. 분화 유도 후 세포 내 단백질에서 Western blotting으로 AMPK 활성화 (인산화)를 분석한 결과, 분화 전 전구지방세포 (NC)에 비해 분화를 유도한 지방세포 (PC) 의 경우 AMPK 인산화는 아무런 변화가 없었으나, OJS 및 BTS를 처리 군에서는 AMPK 인산화 활성이 증가하는 경향을 나타내었다.
- OJS의 항비만 효과에 대한 작용기전을 조사하기 위해 OJS 및 양성대조군 BTS을 처리하여 분화를 유도한 3T3-L1 세포에서 지방 생성의 주요 전사인자인 C/EBP-α와 PPAR-γ의 유전자 및 단백질 발현조절을 통해 지방 분화 억제를 효과적으로 감소함을 조사하였다.
- 고지방식이로 8주간 비만을 유도하면서 마우스에 OJS 또는 양성대조군 BTS을 경구투여하고 체중증가에 미치는 영향을 1주 간격으로 측정하여 Fig. 2에 나타내었다. 실험 시작 전 체중은 실험군 간에 큰 차이 없이 시작하였으나, 고지방식이를 공급 후 마우스의 체중이 3주부터 유의적로 증가하는 현상을 보였고, 실험군 HF+OJS 및 HF+BTSe 4주부터 고지방 식이 군 HF에 비해 유의적인 체중 감소를 나타내었다.
- 균질화된 samplese 적정량의 단백질로 10% Sodium Dodecyl Sulfate (SDS)-PAGE에 분리한 후, PVDF membrane으로 단백질을 전이시켰다. 그 후, 5% Skin milk를 처리하여 비특이적인 단백질에 대한 blocking을 하였고, 각각의 1차 항체 (P-AMPK, AMPK, C/EBP-α, PPAR-γ, β-actin)를 4℃에서 Overnight 반응 시킨 후, HRP가 중합된 2차 항체를 반응시켰다. Immuno -positive bands는 enhanced chemiluminescent (ECL, Thermo Scientific, USA)에 의해 감광시켜 cheiluminescent detection system을 이용하여 현상하였다.
- 수행하였다. 먼저, 3T3-L1 세포 (1X104cell /96well)에 OJS을 100, 200, 500, 1000 µg/mL 농도별로 처리하여 24시간 배양 후, MTT 시약을 첨가하여 2시간 동안 반응하고, 490 nm에서 흡광도를 측정하였다. 세포독성 정도는 시료를 처리하지 않은 대조군(CON)과 약물 처리군의 비율로 계산하였다.
- 3%, 12:12 light-dark cycle로 일반사료 (퓨리나사료)로 일주일 적응시킨 후, 난괴 법으로 4개 실험군 (정상식이군:CON, 고지방식이군:HF, 고지방식이+OJS투여:HF+OJS, 고지방식이+BTS 투여:HF+BTS)으로 나누어 8주간 실험하였다. 물과 실험식이는 자율섭식 하도록 하였다.
- 먼저, 3T3-L1 세포 (1X104cell /96well)에 OJS을 100, 200, 500, 1000 µg/mL 농도별로 처리하여 24시간 배양 후, MTT 시약을 첨가하여 2시간 동안 반응하고, 490 nm에서 흡광도를 측정하였다. 세포독성 정도는 시료를 처리하지 않은 대조군(CON)과 약물 처리군의 비율로 계산하였다.
- 2일 후 167 nM insu-lin/10% FBS 배지로 교환하며 성숙한 지방세포(adipocytes)로 만들었다. 실험군 OJS 및 대조 실험군 BTSe 배지 교체시기마다 함께 처리하였다.
- 함유 식이를 제공하였다. 실험군은 그룹 당 6마리씩 4그룹으로나누었고, CON, HF군은 각각 정상식이 및 고지방 식이와 생리식염수를 제공하고, 실험군에는 고지방식이와 OJS (HF+ OJS)과 실험대조군 BTS (HF+BTS) 복합 물추출물을 각각 500㎎/㎏ 씩 경구 투여하여 8주간 사육하였다. 체중은 일주일에 한 번씩 일정한 시간에 측정하였다.
- 실험에 사용한 식이는 표 3와 같이 AIN-76A 조성을 정상식이군 (Normal Diet, CON)에게 제공하고, 고지방식이군 (High fat Diet, HF)은 AIN-76A 조성을 바탕으로 한 40% Beef tallow 함유 식이를 제공하였다. 실험군은 그룹 당 6마리씩 4그룹으로나누었고, CON, HF군은 각각 정상식이 및 고지방 식이와 생리식염수를 제공하고, 실험군에는 고지방식이와 OJS (HF+ OJS)과 실험대조군 BTS (HF+BTS) 복합 물추출물을 각각 500㎎/㎏ 씩 경구 투여하여 8주간 사육하였다.
- 분리된 total RNA는 1µg로 정량하여 oligo- dT, DEPC와 함께 70℃에서 5분간 반응시킨 후 바로 ice에서 반응을 중지시킨다. 여기에 dNTP's, RT buffer와 reverse transcriptase을 첨가한 완충 반응액 (Promega, USA)을 넣어 45℃에서 약 60분간 반응시킨 후 72℃에서 10분간 처리하여 cDNA를 합성하였다. 이 template DNA와 Taq polymerase 등이 포함된 반응 혼합액 (Promega, USA)과 각각의 Primer sequuence인 ATT CTG GCC CAC CAA CTT CGG (Forward), TGG AAG CCT GAT GCT TTA TCC CCA (Reverse); Peroxisome proliferator activated receptor-γ (PPAR-γ), CTC AGT GGG AGC GAC TCT TCA (Forward), GGC CTC TGT GGT ACA CGA CAA (reverse);carnitine palmitoyltransferase1 (CPT1)로 PCR 증폭 후, 1.
- 여기에 dNTP's, RT buffer와 reverse transcriptase을 첨가한 완충 반응액 (Promega, USA)을 넣어 45℃에서 약 60분간 반응시킨 후 72℃에서 10분간 처리하여 cDNA를 합성하였다. 이 template DNA와 Taq polymerase 등이 포함된 반응 혼합액 (Promega, USA)과 각각의 Primer sequuence인 ATT CTG GCC CAC CAA CTT CGG (Forward), TGG AAG CCT GAT GCT TTA TCC CCA (Reverse); Peroxisome proliferator activated receptor-γ (PPAR-γ), CTC AGT GGG AGC GAC TCT TCA (Forward), GGC CTC TGT GGT ACA CGA CAA (reverse);carnitine palmitoyltransferase1 (CPT1)로 PCR 증폭 후, 1.5% Agarose gel 전기영동으로 분석하였다.
- 이동상은 0.05% phosphoric acid in water (A)와 0.05% phosphoric acid in acetonitrile (B)을 사용하여 기울기 용매 조건 (0-20분, 18-40% B, 20-25분, 40-45% B, 25-40 분, 45-80% B, 41-50분, 80-18% B)이며, 검출파장은 230nm에서 검출하였다.
- 중앙실험동물 SLC사 (서울, 한국)에서 분양 받은 ICR계체중 25-26g내외의 5주령 암컷 생쥐를 각각 한 cage당 한 마리씩 넣고 온도 22±2℃, 습도 53.3%, 12:12 light-dark cycle로 일반사료 (퓨리나사료)로 일주일 적응시킨 후, 난괴 법으로 4개 실험군 (정상식이군:CON, 고지방식이군:HF, 고지방식이+OJS투여:HF+OJS, 고지방식이+BTS 투여:HF+BTS)으로 나누어 8주간 실험하였다. 물과 실험식이는 자율섭식 하도록 하였다.
대상 데이터
- 3T3-L1 마우스유래 배아섬유아세포는 미국세포주은행 (American Type Culture Collection; ATCC, CL-173TM)에서 구입하여 사용하였으며, 세포는 10% BCS, 1% P/S을 포함한 DMEM 배지를 처리하여 37℃, 5% CO2 배양기 (MCO-15AC, SANYO, Japan)에서 배양시킨 후 배양액을 분화유도 배양액 (0.5mM IBMX, 2µΜ DEX, 167nM insulin/10% FBS)으로 바꾸고 2일간 배양한다. 2일 후 167 nM insu-lin/10% FBS 배지로 교환하며 성숙한 지방세포(adipocytes)로 만들었다.
- Fetal bovine serum (FBS), Dulbecco's modified eagle's medium (DMEM), Penicillin-streptomucin, Phosphate buffered saline (PBS)는 Hyclone사 (USA)제품, 세포배양 플레이트와 100mm 페트리 접시는 Nunc Inc사 (USA) 로부터구입하여 사용하였다. 실험에 사용된 시약 중 3-Isobutyl-1-methylxanthine (IBMX), Dexamethasone (DEX), Oil red O 시약들은 Sigma Aldrich사 (USA), Bovine calf serum (BCS), Insulin 시약은 Thermo Scientific사 (USA), AMP-activated protein kinase (AMPK), pAMPK, Acetyl CoA carboxylase (ACC), pACC 항체는 cell signaling technology사 (USA)에서 구입하였고, PPAR γ, C/EBPα, β-actin 1차 항체 및 2차 항체는 Santa Cruz사 (USA) 에서구입하였다.
- 본 연구에 사용된 오적산 및 방풍통성산 처방 구성 약재들은 ㈜휴먼허브 (경북 경산, 한국)와 ㈜옴니허브 (대구, 한국) 에서 각각 구입하였다.
- 본 연구에 사용한 OJS과 BTS는 표 1과 표 2와 같이 한국의 공정서에 표기된 처방 약재를 각 구성 비율로 배합한 후 약탕기 (대웅약탕기, 서울, 한국)로 10배의 정제수와 100℃에서 3시간동안 추출한 후, Whatman filter paper (No. 4) 로여과하고 감압동결건조기를 사용하여 분말을 얻었다 (수율 OJS : 21.87%/ BTS : 23.70%).
- 시료 전처리 및 HPLC 분석을 위한 methanol, acetonitrile는 J.T. Baker사 (USA)에서 구입하였고, phosphoric acid는 Junsei (Japan)에서 구입하여 사용하였다. 성분분석을 위한 HPLC는 Agilent 1200 HPLC system (USA)을 사용하였으며, 분석 data 처리에는 Agilent Open LAB CDS ChemStation(A.
- 사용하였다. 실험에 사용된 시약 중 3-Isobutyl-1-methylxanthine (IBMX), Dexamethasone (DEX), Oil red O 시약들은 Sigma Aldrich사 (USA), Bovine calf serum (BCS), Insulin 시약은 Thermo Scientific사 (USA), AMP-activated protein kinase (AMPK), pAMPK, Acetyl CoA carboxylase (ACC), pACC 항체는 cell signaling technology사 (USA)에서 구입하였고, PPAR γ, C/EBPα, β-actin 1차 항체 및 2차 항체는 Santa Cruz사 (USA) 에서구입하였다.
- 표준물질인 naringin, neohesperidin, cinnamic acid, cinnamaldehyde, glycyrrhizic acid, 6-gingerol, honokiol, liquritine Sigma 제품 (USA)에서, paeoniflorin, atractylenolide Ⅲ, atractylodine Ava-chem Scienfific사 (USA), decursinol an-gelate는 ㈜천연물화학에서 구입 사용하였으며, nodakenin, poncirin, hesperidin, decursin, magnolole 식품의약품안전처에서 분양 받아 사용하였으며 각 표준물질의 순도는 98% 이상이었다. 시료 전처리 및 HPLC 분석을 위한 methanol, acetonitrile는 J.
데이터처리
- 실험결과의 통계 처리는 SPSS package를 이용하였으며, 실험에 대한 측정값은 In vivo 값은 mean±SEM (n=6), In vitro 값은 mean±SEM (n=3)로 표시하였고 분석에 대한 유의성은 one-way ANOVA를 실시, 분석결과에 대한 p< 0.05 의 수준에서 LSD 다중검정법으로 사후검정을 실시하여 각 처리구간의 평균치에 대한 유의성을 분석하였다.
이론/모형
- OJS의 3T3-L1 세포에 대한 독성정도를 알아보기 위하여 3-[4, 5-dimethyl thiazolyl]-2, 5-diphenyltetra zolium bromide (MTT)assay를 수행하였다. 먼저, 3T3-L1 세포 (1X104cell /96well)에 OJS을 100, 200, 500, 1000 µg/mL 농도별로 처리하여 24시간 배양 후, MTT 시약을 첨가하여 2시간 동안 반응하고, 490 nm에서 흡광도를 측정하였다.
- AMPK는 지방산 합성에서 ACC 등 핵심 효소를 억제함으로써 ATP의 추가적 사용을 억제한다22). 본 연구에서는 비만의 표적 단백질인 AMPK 인산화 활성을 보고자 Western blot 방법으로 측정하였다. Fig.
- Baker사 (USA)에서 구입하였고, phosphoric acid는 Junsei (Japan)에서 구입하여 사용하였다. 성분분석을 위한 HPLC는 Agilent 1200 HPLC system (USA)을 사용하였으며, 분석 data 처리에는 Agilent Open LAB CDS ChemStation(A.02.08)을 이용하였다.
성능/효과
- 1. OJS는 유의한 체중억제와 지방 조직무게 감소 효과를 나타내었다.
- 2. OJS는 농도 의존적으로 3T3-L1 지방세포의 분화를 억제시켰다.
- 3. OJS는 3T3-L1세포에서 C/EBP-α와 PPAR-γ의 발현을 억제함으로써 지방축적을 감소시켰다.
- 3T3-L1 세포에 OJS을 처리하여 8일동안 분화를 유도한 후 Oil red O 염색을 통하여 지방세포 분화 정도를 측정한 결과, 분화를 유도한 지방세포 (PC)에서는 분화전 전구 지방세포 (NC)에 비해 유의적인 지방 분화를 나타내었으며, OJS을처리한 세포는 PC에 비하여 농도 의존적으로 감소하는 경향을 보였다(Fig. 5). 또한 OJS 200, 500㎍/mL을 처리한 군에서는 약 각각 44.
- 4. OJS는 3T3-L1세포에서 AMPK의 인산화를 현저히 증가시켰다.
- 실험 시작 전 체중은 실험군 간에 큰 차이 없이 시작하였으나, 고지방식이를 공급 후 마우스의 체중이 3주부터 유의적로 증가하는 현상을 보였고, 실험군 HF+OJS 및 HF+BTSe 4주부터 고지방 식이 군 HF에 비해 유의적인 체중 감소를 나타내었다. 8주 째 체중을 군간 비교해보면 OJS 투여군은 고지 방식이 대조군에 비해 체중이 20.74% 감소하였다(Fig. 2A). 양성대조군 약물인 BTS 투여군은 고지방식이 대조군에 비해 체중이 23.
- OJS처리에 의한 3T3-L1 지방전구세포의 생존율을 세포독성검사를 통하여 평가한 결과, 처리 최고농도인 1, 000µg/mL 에서 86.40 %로 세포독성이 나타나지 않았다(Fig. 4).
- 검액에서의 peak는 표준용액 peak의 retention time과 UV 흡수 spectrum을 비교하여 특이성을 확보하였으며, 검액에서 13 종의 성분이 검출되었다(Fig. 1).
- 28% 감소하였다. 따라서 본 실험 결과 OJS는 양성대조군 BTS처럼 체중억제에 우수한 효능을 가진 것으로 나타났다. 하루식이 섭취량에서는 정상식이에 비해 고지방식이 마우스의 경우 식이 섭취량의 차이가 없었으나, OJS 및 BTS 투여군의 경우 고지방식이 대조군에 비해 다소 감소하였으나 유의한 차이가 나타나지 않았다(Fig.
- 조사하였다. 분화 유도 후 세포 내 단백질에서 Western blotting으로 AMPK 활성화 (인산화)를 분석한 결과, 분화 전 전구지방세포 (NC)에 비해 분화를 유도한 지방세포 (PC) 의 경우 AMPK 인산화는 아무런 변화가 없었으나, OJS 및 BTS를 처리 군에서는 AMPK 인산화 활성이 증가하는 경향을 나타내었다. 특히, OJS 500㎍/mL을 처리 군에서는 38.
- 2에 나타내었다. 실험 시작 전 체중은 실험군 간에 큰 차이 없이 시작하였으나, 고지방식이를 공급 후 마우스의 체중이 3주부터 유의적로 증가하는 현상을 보였고, 실험군 HF+OJS 및 HF+BTSe 4주부터 고지방 식이 군 HF에 비해 유의적인 체중 감소를 나타내었다. 8주 째 체중을 군간 비교해보면 OJS 투여군은 고지 방식이 대조군에 비해 체중이 20.
- 2A). 양성대조군 약물인 BTS 투여군은 고지방식이 대조군에 비해 체중이 23.28% 감소하였다. 따라서 본 실험 결과 OJS는 양성대조군 BTS처럼 체중억제에 우수한 효능을 가진 것으로 나타났다.
- 이상의 결과들로 OJS 한약제제의 동물실험에서 유의적인체 중 감소 및 지방 축적 감소와 지방세포 3T3-L1에서 초기지방세포 분화 관련인자인 C/EBP-α와 PPAR-γ의 발현억제 및 AMPK의 인산화 증가로 지방세포의 분화 억제 및 세포 내 지방합성 억제 효과로 OJS의 항비만 예방 및 치료의 후보 한약제제로서의 개발 가능성을 보여준다.
- 내장 등에 축적된 지방조직들은 에너지 저장 뿐만 아니라, 체내 지방 및 당 대사 등으로 체내 에너지 대사를 조절하는데 중요한 역할을 한다16). 이에 본 연구에서는 OJS의 체지방 축적에 대한 억제 효과를 확인하기 위해, 고지방 식이로 비만을 유도한 생쥐에서 OJS을 함께 투여하여 대조군인 BTS 대조군과 같이 유의한 체중감소와 내장지방 축적량이 감소하는 것을 볼 수 있었고, 또한 3T3-L1 지방세포 분화에도 유의적으로 감소하는 것으로 보아 OJS이 지방세포에서 지방축적 및 지방분화를 억제하는 것으로 보인다. 또한, OJSe 단순한 지방축적 및 분화의 억제뿐 만이 아니라, 지방전구세포의 지방세포 분화 조절 기전에서 분화 후기에 발현되어 지방세포에 특이적인 유전자의 발현을 활성화시킴으로써 분화를 더욱 촉진시켜 분화과정을 완성17) 시키고, 성숙한 지방세포 생성을 위한 인슐린 감수성에 중요한 역할을 담당하는18), cytidine-cytidine- adenosine -adenosine-thymidine (CCAAT)/enhancer binding proteins (C/EBP-α, C/EBP-β, C/EBP-δ) 및 peroxisome proliferator -activated receptor (PPAR-γ) 등과 같은 지방합성 전사인자 등19) 또한 OJS이 용량 의존적으로 대조군인 BTS보다 감소하는 것을 나타내었다.
- 이의 결과, 분화 전 전구지방세포 (NC)에 비해 분화를 유도한 지방세포 (PC)의 경우 C/EBP-α와 PPAR-γ의 유전자 및 단백질 발현이 증가하는 경향을 나타냈었으나, OJS 및 BTS를 처리 군에서는 C/EBP-α 및 PPAR-γ의 유전자 및 단백질 발현이 감소하는 것을 나타내었다. 특히, OJS 500㎍ /mL을 처리한 군에서는 PPAR-γ의 유전자 및 C/EBP-α 단백질 발현에서는 48.
- 3에 나타내었다. 정상식이군 (CON)에 비해 고지방식이군 (HF)의 경우 복부지방이 유의하게 증가하였고(p<0.05) 간의 무게도 CON에 비해 HF가 유의하게 증가 하였다(p<0.05). 간 조직의 경우 HF에 반해 HF+OJS군과 HF+BTS군에서 간 조직의 무게가 각각 14.
- 발현이 감소하는 것을 나타내었다. 특히, OJS 500㎍ /mL을 처리한 군에서는 PPAR-γ의 유전자 및 C/EBP-α 단백질 발현에서는 48.78 % 및 51.59 %로 유의적인 감소를 나타내었으며, BTS 군은 PPAR-γ의 유전자 발현에서 100, 200, 500 ㎍/mL을 처리한 군에서 유의적인 감소를 나타내었지만 C/EBP-α 및 PPAR-γ 단백질 발현에서는 유의적인 결과를 나타내지 못하였다(Fig. 6).
- 따라서 본 실험 결과 OJS는 양성대조군 BTS처럼 체중억제에 우수한 효능을 가진 것으로 나타났다. 하루식이 섭취량에서는 정상식이에 비해 고지방식이 마우스의 경우 식이 섭취량의 차이가 없었으나, OJS 및 BTS 투여군의 경우 고지방식이 대조군에 비해 다소 감소하였으나 유의한 차이가 나타나지 않았다(Fig. 2B).
후속연구
- 따라서 OJS는 고지방식이 비만 마우스에서 항비만 효과와 3T3-L1 지방세포분화 억제효과를 통해 비만개선약물로 활용될 수 있을 것으로 사료되었다.
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