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문제 정의
- 따라서, 본 연구에서는 제련 활동에 의해 장기적으로 중금속에 오염된 토양을 복원하는 데에 활용할 수 있는 다양한 방법들 중 생물학적인 방법으로 처리하기 위한 기초연구로 오염된 중금속 종을 효율적으로 흡착할 수 있는 박테리아를 분리하여 이들의 생장에 미치는 중금속 영향성에 대한 평가 연구를 진행하였다.
- 0의 조건에서 생장할 수 있는 균주들의 Lag phase가 다소 갈어진 것을 관찰할 수 있었는데 이는 최적 pH 조건에 도달하기까지 필요한 시간으로 생각된다. 본 연구는 오염 토양을 복원하는 데 활용할 수 있는 방법들에 이와 같은 박테리아를 추가적으로 처리하여 복원 효율을 높일 수 있는 가능성을 제시하고자 하는 목적이 있으므로 보다 다양한 환경에서 생존할 수 있는 균주를 분리하고 하였다. 따라서, 상기한 바와 같이 알칼리 환경에서도 비교적 안정한 상태로 생장을 유지할 수 있는 KM-15 균주를 활용하여 중금속 영향성을 관찰하였다.
- , 2010). 특히, 본 연구에서 채취한 토양 시료는 제련시설에 의해 장기적으로 중금속에 의해 오염된 미세입자가 포함된 토양을 대상으로 하였으므로 앞서 열거한 문제점들을 고려하여 생물학적인 처리 기술의 일환으로 중금속 내성 및 흡착능을 가지는 박테리아를 분리하여 토양 복원 시에 부분적으로 활용할 수 있는 가능성을 살펴보고자 하였다.
제안 방법
- , 2004) 을 사용하였고, 분석된 염기서열은 The National Center for Biotechnology Information(NCBI)의 Basic local Alignment Search Tool(BLAST) algorithm을 통해 Gene Bank database와 비교하여 미생물을 동정하였다. 16S rRNA gene 염기서열은 Bioedit(Ver. 7.0)을 이용해 정렬하였고, Phylogenetic analysis에 사용한 16S rRNA gene sequence는 NCBI data base에 근거하였으며, Phylogenetic tree는 MEGA(Ver.6.0) 프로그램을 이용하여 neighbor-joining method를 사용하여 1,000회의 bootstrap analysis를 진행하여 미생물의 종 유연성 분석을 하였다.
- Bacillus cereus KM-15 균주의 생장에 변화를 주는 중금속 영향성을 알아보기 위해 100mg/L의 As, Pb, Cu, Zn 등의 4종의 중금속을 배지에 공급하여 생장곡선 변화를 관찰하였다. Fig.
- KM-18, Azospirillum sp. KM-21 등의 4개 균주들의 생장에 미치는 pH 영향성을 확인하기 위해 배지의 pH를 3.0, 7.0, 11.0으로 조절하여 각 균주들을 배양하였고, 생장곡선 및 배양 후 배지 내 pH 변화를 관찰하였다. 각 균주들의 pH별 생장 곡선은 Fig.
- 25um syringe filter를 사용하여 주입하였다. 각각의 균주를 얻기 위한 전 배양과 생장 곡선을 관찰하기 위한 본 배양 등으로 나누어 실험을 진행하였으며, 전 배양은 멸균된 Nutrient broth를 상기한 바와 같이 pH별로 조성된 배지 20mL에 순수 분리한 Colony를 접종하여 28oC에서 24시간 동안 항온 교반 하였고, 그 이후에 전 배양에서 얻은 배양액으로 본 배양을 실시하여 동일 조건에서 항온 교반하며, 시간 별로 시료를 채취하여 UV-visible spectrophotometer(Biochrom, Cambridge, UK)로 600nm 파장에서 Turbidity를 측정하였다. 배양 72시간 후에는 각 배지의 pH를 측정하여 그 변화를 관찰하였다.
- 반응 후에 각 배양액은 10, 000rpm, 20min 조건으로 원심분리 하여 중금속 농도를 분석하기 위한 상등액(Supernatant)과 균체(pellet)를 분리하였다. 균체에 흡착되어 존재하는 중금속의 농도를 파악하기 위해 각 균체 시료에 에 왕수 14mL(35% HCl 10.5mL, 70% HNO3 3.5mL)를 넣어 16시간 방치 후 중탕으로 50~60oC에서 4시간 반응시키고 상온에서 냉각한 다음 상등액을 회수하여 희석한 시료를 ICP-AES에 주입하여 정량 분석을 실시하였다.
- 본 연구는 오염 토양을 복원하는 데 활용할 수 있는 방법들에 이와 같은 박테리아를 추가적으로 처리하여 복원 효율을 높일 수 있는 가능성을 제시하고자 하는 목적이 있으므로 보다 다양한 환경에서 생존할 수 있는 균주를 분리하고 하였다. 따라서, 상기한 바와 같이 알칼리 환경에서도 비교적 안정한 상태로 생장을 유지할 수 있는 KM-15 균주를 활용하여 중금속 영향성을 관찰하였다.
- 5M HNO3로 세척하였다. 반응용기를 정치시켜 불용성 잔류물이 현탁액에서 침전되도록 하여 고형분이 없는 상등액을 Whatman No. 40 여과지로 100mL 부피플라스크에 여과하고 여과지에 남은 불용성 잔류물을 0.5M HNO3로 세척하며 표시선 까지 0.5M HNO3로 채운 후 이 시료의 원액과 증류수로 희석한 시료를 ICP-AES로 분석하였다 (Korea Ministry of Environment, 2009).
- 각각의 균주를 얻기 위한 전 배양과 생장 곡선을 관찰하기 위한 본 배양 등으로 나누어 실험을 진행하였으며, 전 배양은 멸균된 Nutrient broth를 상기한 바와 같이 pH별로 조성된 배지 20mL에 순수 분리한 Colony를 접종하여 28oC에서 24시간 동안 항온 교반 하였고, 그 이후에 전 배양에서 얻은 배양액으로 본 배양을 실시하여 동일 조건에서 항온 교반하며, 시간 별로 시료를 채취하여 UV-visible spectrophotometer(Biochrom, Cambridge, UK)로 600nm 파장에서 Turbidity를 측정하였다. 배양 72시간 후에는 각 배지의 pH를 측정하여 그 변화를 관찰하였다.
- 분리 균주들의 중금속 저항성을 알아보기 위해 Nutrient Broth(pH 7.0) 배지 100mL에 균을 접종하여 24시간 진탕 배양을 실시하여(160rpm, 28oC) 얻은 전 배양액 10uL를 본 배양 배지에 접종한 후 124시간 동안 UV-visible spectrophotometer(Biochrom, Cambridge, UK)로 600nm 파장에서 각 Sampling 시간 별로 시료를 채취하여 흡광도를 측정하였다. 본 배양배지는 Nutrient Broth 배지에 2% 질산용액에 녹여져 있는 ICP 표준물질 용액을 100mg/L 농도로 첨가 후, pH 7.
- 상기한 바와 같이 중금속 흡착능을 가지는 박테리아를 분리한 토양 시료의 기본적인 특성을 분석하기 위해 채취한 토양 4.0g과 증류수 40mL(1:10)를 원심분리 튜브에 넣어 6시간 동안 진탕시킨 후, 3분간 2,000rpm으로 원심분리 하였고, 상등액을 0.45um membrane filter로 여과하여 pH/COND METER(D-54, Horiba)로 pH와 EC (Electric Conductivity)를 측정하였다. 동일한 토양 시료 내 중금속 오염도를 분석하기 위해 채취 시료를 50oC Dry oven에서 24시간 건조시킨 후, 2mm 체거름한 토양을 토양환경보전법에 의거하여 왕수추출법을 적용하여 분석하였다(Korea Ministry of Environment, 2009).
- 본 연구에서 사용한 박테리아 분리 액체 배지는 Nutrient broth(BD Difco, USA)를 사용하였고, 분리의 확인을 위한 고체 배지는 Nutrient agar 배지를 사용하였다. 약 20 종의 다양한 균주를 Nutrient agar 배지에 Steaking하여 순수하게 균이 분리 될 때까지 5회의 계대 배양을 실시하여 총 12종의 균주를 순수 분리하였다. 이중에서 생장곡선이 빠르고, 10mg/L의 As, Pb, Cu, Zn(SPEX plasma standard, 1,000mg/L of H3AsO4, Pb(NO3)2, Zn, Cu) 등이 포함된 중금속 첨가 배지에서 내성을 나타낸 균주들을 순수 분리하여 얻은 colony를 16S rRNA 유전자의 염기 서열을 분석하였다.
- 약 20 종의 다양한 균주를 Nutrient agar 배지에 Steaking하여 순수하게 균이 분리 될 때까지 5회의 계대 배양을 실시하여 총 12종의 균주를 순수 분리하였다. 이중에서 생장곡선이 빠르고, 10mg/L의 As, Pb, Cu, Zn(SPEX plasma standard, 1,000mg/L of H3AsO4, Pb(NO3)2, Zn, Cu) 등이 포함된 중금속 첨가 배지에서 내성을 나타낸 균주들을 순수 분리하여 얻은 colony를 16S rRNA 유전자의 염기 서열을 분석하였다. 해당 염기 서열의 중첩을 방지하기 위해 primer는 518F(5'-CCA GCA GCC GCG GTA ATA CG-3') (Lu et al.
- 중금속 흡착능을 가진 박테리아 균주를 분리하기 위해 장기간 중금속으로 오염된 제련소 주변 토양을 멸균된 Falcon tube에 채취하였고, 오염토 3.0g을 증류수와 토양 분산용액 6.12g/L(NaPO3)6 (Sodium Hexametaphosphate) 을 1:1의 비율로 28oC, 13일 동안 진탕 배양한 후, 고체 배지에 접종하여 분리 여부를 확인하면서 28oC에서 24 시간 정치 배양하여 분리 균주의 순수 분리를 진행하였다. 본 연구에서 사용한 박테리아 분리 액체 배지는 Nutrient broth(BD Difco, USA)를 사용하였고, 분리의 확인을 위한 고체 배지는 Nutrient agar 배지를 사용하였다.
- 중금속으로 오염된 제련소 인근 지역 토양으로부터 해당 중금속 종을 흡착할 수 있는 박테리아를 분리하기 위해 5단계의 Enrichment를 통해 나타난 Colony를 순수분리하였다. 총 12종의 균주를 순수하게 분리하여 해당 균주들의 16SrRNA 유전자 염기서열을 분석하였다.
- 중금속을 흡착할 수 있는 분리 균주들의 생장곡선 및 생장에 미치는 각기 다른 3개의 영역에서의 pH 영향성을 분석하기 위해 Nutrient broth 배지를 pH 3.0, 7.0, 1 1.0 등의 3조건으로 조성한 후 각 분리 균주들의 생장곡선을 측정하였다. pH 3.
- 총 12종의 균주를 순수하게 분리하여 해당 균주들의 16SrRNA 유전자 염기서열을 분석하였다. 12종의 균주는 Bacillus cereus를 포함한 Bacillus sp.
- 이중에서 생장곡선이 빠르고, 10mg/L의 As, Pb, Cu, Zn(SPEX plasma standard, 1,000mg/L of H3AsO4, Pb(NO3)2, Zn, Cu) 등이 포함된 중금속 첨가 배지에서 내성을 나타낸 균주들을 순수 분리하여 얻은 colony를 16S rRNA 유전자의 염기 서열을 분석하였다. 해당 염기 서열의 중첩을 방지하기 위해 primer는 518F(5'-CCA GCA GCC GCG GTA ATA CG-3') (Lu et al., 2000)와 800R(5'-TAC CAG GGT ATC TAA TCC-3') (Vannini et al., 2004) 을 사용하였고, 분석된 염기서열은 The National Center for Biotechnology Information(NCBI)의 Basic local Alignment Search Tool(BLAST) algorithm을 통해 Gene Bank database와 비교하여 미생물을 동정하였다. 16S rRNA gene 염기서열은 Bioedit(Ver.
대상 데이터
- 0) 배지 100mL에 균을 접종하여 24시간 진탕 배양을 실시하여(160rpm, 28oC) 얻은 전 배양액 10uL를 본 배양 배지에 접종한 후 124시간 동안 UV-visible spectrophotometer(Biochrom, Cambridge, UK)로 600nm 파장에서 각 Sampling 시간 별로 시료를 채취하여 흡광도를 측정하였다. 본 배양배지는 Nutrient Broth 배지에 2% 질산용액에 녹여져 있는 ICP 표준물질 용액을 100mg/L 농도로 첨가 후, pH 7.0으로 조정하여 사용하였다. 반응 후에 각 배양액은 10, 000rpm, 20min 조건으로 원심분리 하여 중금속 농도를 분석하기 위한 상등액(Supernatant)과 균체(pellet)를 분리하였다.
- 0g을 왕수 추출 후, ICP-AES를 통해 분석된 중금속 농도를 Table 1에 나타내었다. 본 분석에서 다양한 중금속 종이 검출되었으나, 토양오염 우려 기준치를 초과하거나 용출 함량이 비교적 높게 나타난 As (48.1mg/kg), Pb(183.0mg/kg), Cu(98.6mg/kg), Zn(91.6 mg/kg) 등을 본 연구의 대상으로 하였다. 또한, 동일한 토양 시료의 기초 특성 분석 결과에서 토양 pH는 5.
- 12g/L(NaPO3)6 (Sodium Hexametaphosphate) 을 1:1의 비율로 28oC, 13일 동안 진탕 배양한 후, 고체 배지에 접종하여 분리 여부를 확인하면서 28oC에서 24 시간 정치 배양하여 분리 균주의 순수 분리를 진행하였다. 본 연구에서 사용한 박테리아 분리 액체 배지는 Nutrient broth(BD Difco, USA)를 사용하였고, 분리의 확인을 위한 고체 배지는 Nutrient agar 배지를 사용하였다. 약 20 종의 다양한 균주를 Nutrient agar 배지에 Steaking하여 순수하게 균이 분리 될 때까지 5회의 계대 배양을 실시하여 총 12종의 균주를 순수 분리하였다.
- 본 연구에서 중금속 흡착능이 있는 박테리아 균주를 분리한 제련소 인근 토양 내 중금속 오염도를 파악하기 위해 채취한 토양시료 3.0g을 왕수 추출 후, ICP-AES를 통해 분석된 중금속 농도를 Table 1에 나타내었다. 본 분석에서 다양한 중금속 종이 검출되었으나, 토양오염 우려 기준치를 초과하거나 용출 함량이 비교적 높게 나타난 As (48.
이론/모형
- 45um membrane filter로 여과하여 pH/COND METER(D-54, Horiba)로 pH와 EC (Electric Conductivity)를 측정하였다. 동일한 토양 시료 내 중금속 오염도를 분석하기 위해 채취 시료를 50oC Dry oven에서 24시간 건조시킨 후, 2mm 체거름한 토양을 토양환경보전법에 의거하여 왕수추출법을 적용하여 분석하였다(Korea Ministry of Environment, 2009). 건조 및 체거름된 토양 3.
성능/효과
- 관찰하였다. Fig. 3에 나타낸 바와 같이 KM-15 균주의 생장에 Cu를 제외한 대부분 중금속 종들의 영향 성이 크지 않았으나, Zn의 경우에는 생장 초기에 영향을 받아 Lag phase가 다른 반응기들에 비해 비교적 길게 나타났다. 그러나, 균주 생장이 이루어지면서 특이적인 저해 효과를 관찰할 수는 없었다.
- 1에 나타내었다. KM-11, KM-15, KM-18 균주들은 모두 Bacillus속에 포함되어 유사한 관계를 나타내었으며, KM-21 균주는 Azospirillum속에 포함되어 비교적 독립된 관계를 나타내었다. 기존의 다양한 연구들에서도 Bacillus cereus, Bacillus subtilis 등의 균주들이 중금속을 포함한 다양한 오염물질을 흡착 및 제거한다고 알려져 있어(Mullen et al.
- 1% 등 많은 양이 균체에 흡착한 결과를 확인할 수 있었다. KM-15 균주의 배양은 pH 7.0으로 조성이 된 배지에서 124시간 동안 진행이 되었는데, 배양이 끝난 후 배지의 pH를 측정한 결과, 생장이 저해된 Cu 첨가 배지의 pH가 7.04로 거의 변화가 없었으나, 특이적 저해 영향성을 관찰할 수 없었던 기타 배지들의 pH는 모두 상승하였다( Table 3). 상기 Table 2에서도 나타낸 바와 같이 KM-15 균주는 생장에 있어서의 최적 pH는 약알칼리성으로 판단되며, 이와 같은 환경을 조성해주기 위해 배지 내 pH를 상승시키는 특정 물질을 분비할 것으로 예상된다.
- 그러나, 균주 생장이 이루어지면서 특이적인 저해 효과를 관찰할 수는 없었다. 대조군으로 실험에 사용한 중금속을 첨가하지 않았거나 중금속 표준물질이 녹여져 있는 2% 질산을 첨가해 준 배지 내에서의 KM-15 균주의 생장 속도와 비교했을 때, As와 Pb를 첨가한 반응기에서는 KM-15 균주의 생장을 저해하는 유의차 있는 결과는 나타나지 않았다. 즉, KM-15 균주의 경우에는 Cu에 의해 생장이 저해되는 효과는 확인이 되었으나, As, Pb, Zn 등에 의해서는 큰 저해 효과가 없었으며, 본 연구에서 사용한 모든 중금속이 녹여져 있는 2% 질산에 대한 방해 효과는 없었다.
- , 2005). 따라서, 본 연구에서 적용한 4종의 박테리아가 조성된 조건에서 pH 9.0 주변에서 최적의 조건을 가질 것으로 생각되며, 알칼리 조건에서는 각 균주 별로 생존에 필요한 물질을 발생하거나 특이 대사 활동에 의해 배지의 pH를 각각 감소시켰을 것으로 예상할 수 있다. 이는 Fig.
- 6 mg/kg) 등을 본 연구의 대상으로 하였다. 또한, 동일한 토양 시료의 기초 특성 분석 결과에서 토양 pH는 5.80으로 약산성을 나타내었고, EC 값은 13.47mS/m로 분석되었다. 분석 결과를 바탕으로 본 연구에서 채취 및 연구한 토양 시료는 제련 등의 과정에서 상기 중금속들이 오염된 것으로 예상할 수 있으며, As, Pb, Cu, Zn 등의 오염이 두드러지는 현상은 휴폐광산 지역 토양 내 오염 경향과 유사하다(Jung and Jung, 2006; Kim, 2010).
- 07로 가장 큰 폭으로 상승하였다. 또한, 모든 균주들을 pH 11.0의 조건으로 조성된 배지에 접종하여 배양했을 때에는 반응기 pH가 9.0을 중심으로 감소하였다. 배지의 pH 가 증가하는 현상은 박테리아 활동에 의한 생물학적 산화보다 산소에 의한 무기적 산화작용이 우세하게 일어나기 때문으로 해석되며 H-이온이 소비되어 나타난 현상으로 볼 수 있다(Mousavi et al.
- 배양 후, 배지 내 pH 측정 결과 생장이 양호했던 배지의 pH는 약알칼리 수준으로 변하였다. 또한, 이들 중 가장 생장이 활발했던 Bacillus cereus KM-15를 이용하여 중금속 영향성을 관찰한 결과 100mg/L의 Cu를 첨가한 배지에서 생장이 저해되는 결과를 나타내었고, As, Pb, Zn 등에는 특이적인 생장 저해 효과가 나타나지 않았다. KM-15 균주의 생장이 저해되었던 Cu 첨가 배지에서는 pH의 변화가 미미하였으나, 영향성이 없었던 기타 배지들에서는 약알칼리 수준으로 배지 내 pH가 변하였다.
- 이는 상기한 바와 같이 여러 금속원소 들이 미생물 생장 환경에 존재하는 형태나 농도에 따라서 생장을 저해하는 요소로 작용할 수 있고, 반응을 하지 않아 잔류할 수도 있다는 예시로 생각된다. 반면에, Pb와 Zn는 KM-15 균주와 동시에 배양했을 때 각각 98.6%, 95.1% 등 많은 양이 균체에 흡착한 결과를 확인할 수 있었다. KM-15 균주의 배양은 pH 7.
- 특히, KM-15 균주의 생장 곡선이 가장 이상적인 Sig moid 형태를 나타내었고, KM-21 균주와 KM-11 균주는 생장을 진행하기는 하였으나, 그 효율이 KM-15 균주와 비교하였을 때 낮았다. 배양 후 72시간에 나타낸 균주의 생장 정도는 KM-18 균주가 가장 좋았으나, 반복 실험을 통해 확인한 결과 배양 중간에 균주의 생장이 안정적이지 못했다. 이러한 경향성은 pH 1 1.
- KM-21 등과 같았다. 본 박테리아 균주들이 분리된 토양을 왕수추출법으로 전처리하여 ICP-AES로 분석한 결과, 중금속의 오염도는 As(48.1mg/kg), Pb(183mg/kg), Cu(98.6mg/kg), Zn (91.6mg/kg) 등으로 분석이 되었다. 본 분리 균주들에 미치는 배지 내 pH 영향성을 관찰한 결과, 산성 배지(pH 3.
- 6mg/kg) 등으로 분석이 되었다. 본 분리 균주들에 미치는 배지 내 pH 영향성을 관찰한 결과, 산성 배지(pH 3.0)에서는 모든 균주들의 활성이 저해되었고, pH 7.0 배지에서의 생장은 활발했으며 pH 11.0의 알칼리 조건에서는 미미한 생장을 나타내었다. 배양 후, 배지 내 pH 측정 결과 생장이 양호했던 배지의 pH는 약알칼리 수준으로 변하였다.
- 0에서도 관찰할 수 있었는데, KM-15 균주의 경우에는 다소 더디지만 생장을 진행하는 현상을 관찰할 수 있었고, 기타 균주들은 생장 속도가 매우 느렸다. 본 연구에서 분리한 균주들은 호 알칼리성이 아님에도 불구하고 활성이 나타남을 확인하였는데, Table 2에 나타낸 바와 같이 배양 72시간 후에 각 반응기 내 배지의 pH를 측정한 결과 생장이 진행되지 않은 pH 3.0 산성 조건에서의 pH는 많은 변화가 없었으나, pH 7.0 및 pH 11.0으로 조성한 경우에는 그 변화를 관찰할 수 있었다. pH 7.
- 중금속으로 오염된 제련소 인근 오염토양으로부터 중금속 내성을 가지는 박테리아 4종을 분리하여 동정한 결과 Bacillus pumilus KM-11, Bacillus cereus KM-15, Bacillus thuringiensis KM-18, Azospirillum sp. KM-21 등과 같았다.
- 대조군으로 실험에 사용한 중금속을 첨가하지 않았거나 중금속 표준물질이 녹여져 있는 2% 질산을 첨가해 준 배지 내에서의 KM-15 균주의 생장 속도와 비교했을 때, As와 Pb를 첨가한 반응기에서는 KM-15 균주의 생장을 저해하는 유의차 있는 결과는 나타나지 않았다. 즉, KM-15 균주의 경우에는 Cu에 의해 생장이 저해되는 효과는 확인이 되었으나, As, Pb, Zn 등에 의해서는 큰 저해 효과가 없었으며, 본 연구에서 사용한 모든 중금속이 녹여져 있는 2% 질산에 대한 방해 효과는 없었다. 이와 같이 저해 효과가 미미한 원소들 중 As의 경우에는 미생물 생장에 미치는 중금속 영향성을 연구한 결과들 중에서 미생물 생장에 큰 저해 요소로 작용하지 않는다는 결과가 일부 나타난 바 있고(Nam et al.
- 7%로 미미하였는데, 일부 필요한 부분을 균주가 활용하다가 생장에 영향을 받고 대사 활동이 저해되어 대부분의 Cu가 배지 내 잔류한 것으로 유추할 수 있다. 즉, 본 결과로 예상할 수 있는 부분은 Pb나 Zn와는 달리 Cu가 세포 내로 이동하여 세포 내 활동에 영향성을 미치다가 세포의 파쇄 등의 작용으로 배지로 모두 이동했을 가능성을 생각해 볼 수 있다. As는 KM-15 균주의 생장에 저해를 받지는 않았으나, 균체에 흡착한 양은 8.
- , 2002). 특히, KM-15 균주의 생장 곡선이 가장 이상적인 Sig moid 형태를 나타내었고, KM-21 균주와 KM-11 균주는 생장을 진행하기는 하였으나, 그 효율이 KM-15 균주와 비교하였을 때 낮았다. 배양 후 72시간에 나타낸 균주의 생장 정도는 KM-18 균주가 가장 좋았으나, 반복 실험을 통해 확인한 결과 배양 중간에 균주의 생장이 안정적이지 못했다.
- 0의 초기 배지 pH가 배양 후에는 모든 배양기에서 증가하였다. 특히, 활성이 가장 좋았던 KM-15 균주가 포함된 배지의 pH가 9.07로 가장 큰 폭으로 상승하였다. 또한, 모든 균주들을 pH 11.
후속연구
- 상기 Table 2에서도 나타낸 바와 같이 KM-15 균주는 생장에 있어서의 최적 pH는 약알칼리성으로 판단되며, 이와 같은 환경을 조성해주기 위해 배지 내 pH를 상승시키는 특정 물질을 분비할 것으로 예상된다. 다만, 보다 명확한 이해를 위해 후속 연구에서 해당 물질을 정성, 정량적으로 분석하고 이 물질이 중금속 종들과 혹은 KM-15 균주와 어떠한 물질을 주고 받고 영향을 미치는 지에 대한 연구가 필요할 것으로 사료된다. 이와 같은 결과들로 KM-15 균주의 특이성을 실제 오염된 환경에 적용할 때 흡착 가능한 중금속 종 혹은 오염농도에 따른 복원 방법 설정에 기초 자료로 활용될 수 있을 것을 기대한다.
- , 1989) 본 연구에서 분리한 중금속 흡착능이 있는 균주들은 기존에 알려진 균주들과 활성 면에서 유사성이 있다고 여겨지며, 본 연구에서 채취한 특이적인 제련소 인근 토양에도 장기간에 걸쳐 해당 균주들이 생존하며 오염환경에 적응한 것으로 이해할 수 있다. 따라서, 본 연구에서 분리한 균주들을 해당 오염 토양의 복원 사업에 부분적으로 활용을 하면 보다 다양한 복원 방법을 적용할 수 있는 하나의 예시가 될 수 있을 것으로 생각된다.
- KM-15 균주의 생장이 저해되었던 Cu 첨가 배지에서는 pH의 변화가 미미하였으나, 영향성이 없었던 기타 배지들에서는 약알칼리 수준으로 배지 내 pH가 변하였다. 본 연구결과는 중금속 오염 토양에서 분리한 박테리아 균주들의 중금속 내성을 확인하여 향후 중금속 오염 토양에 적용시켜 중금속을 저감하거나 여러 복원 방법에 다양하게 응용할 수 있는 가능성을 제시한다.
- 다만, 보다 명확한 이해를 위해 후속 연구에서 해당 물질을 정성, 정량적으로 분석하고 이 물질이 중금속 종들과 혹은 KM-15 균주와 어떠한 물질을 주고 받고 영향을 미치는 지에 대한 연구가 필요할 것으로 사료된다. 이와 같은 결과들로 KM-15 균주의 특이성을 실제 오염된 환경에 적용할 때 흡착 가능한 중금속 종 혹은 오염농도에 따른 복원 방법 설정에 기초 자료로 활용될 수 있을 것을 기대한다.
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