비타민나무 잎 에탄올추출물의 AMPK 활성화를 통한 3T3-L1 지방전구세포의 adipogenesis 억제효과 Ethanol Extract of Hippophae Rhamnoides L. Leaves Inhibits Adipogenesis through AMP-activated protein kinase (AMPK) Activation in 3T3-L1 Preadipocytes원문보기
본 연구는 HRL의 3T3-L1 지방전구세포의 분화과정 중에 HRL이 지방의 축적에 미치는 영향을 확인하였다. MTT assay를 이용하여 세포 독성을 측정한 결과 100 ㎍/㎖의 농도에서도 세포증식에 영향을 미치지 않는 것을 확인하였고, 이와 같은 결과를 토대로 Oil Red O 염색법을 이용하여 지방세포 분화 억제능을 측정하였다. 그 결과, HRL의 경우 100 ㎍/㎖의 농도에서 82.25% 지방 축적 억제능을 나타내었다. 지방생성에 영향을 미치는 유전자 발현량을 측정하기 위해 RT-PCR법과 western blot법을 시행하였다. HRL은 SREBP-1c, PPARγ와 C/EBPα의 mRNA 발현을 억제시켰고, 지방생성에 영향을 미치는 효소인 FAS의 생성을 조절하는 것으로 나타났다. 또한, HRL 처리로 AMPKα의 단백질 발현이 증가하였으며, PPARγ의 발현량이 감소하는 것을 확인하였다. 이상의 결과들로부터 HRL은 AMPKα의 활성화를 통한 지방 합성을 억제를 보유하고 있는 바, 향후 항비만 기능성 소재로 활용될 수 있을 것으로 생각한다.
본 연구는 HRL의 3T3-L1 지방전구세포의 분화과정 중에 HRL이 지방의 축적에 미치는 영향을 확인하였다. MTT assay를 이용하여 세포 독성을 측정한 결과 100 ㎍/㎖의 농도에서도 세포증식에 영향을 미치지 않는 것을 확인하였고, 이와 같은 결과를 토대로 Oil Red O 염색법을 이용하여 지방세포 분화 억제능을 측정하였다. 그 결과, HRL의 경우 100 ㎍/㎖의 농도에서 82.25% 지방 축적 억제능을 나타내었다. 지방생성에 영향을 미치는 유전자 발현량을 측정하기 위해 RT-PCR법과 western blot법을 시행하였다. HRL은 SREBP-1c, PPARγ와 C/EBPα의 mRNA 발현을 억제시켰고, 지방생성에 영향을 미치는 효소인 FAS의 생성을 조절하는 것으로 나타났다. 또한, HRL 처리로 AMPKα의 단백질 발현이 증가하였으며, PPARγ의 발현량이 감소하는 것을 확인하였다. 이상의 결과들로부터 HRL은 AMPKα의 활성화를 통한 지방 합성을 억제를 보유하고 있는 바, 향후 항비만 기능성 소재로 활용될 수 있을 것으로 생각한다.
In the present study, we investigated the effect of 70% EtOH extract from Hippophae Rhamnoides L. leaves (HRL) on the anti-obesity effect in 3T3-L1 cells. The effects of HRL on lipid accumulation in 3T3-L1 cells were examined using Oil Red O staining. In addition, we examined the gene expression lev...
In the present study, we investigated the effect of 70% EtOH extract from Hippophae Rhamnoides L. leaves (HRL) on the anti-obesity effect in 3T3-L1 cells. The effects of HRL on lipid accumulation in 3T3-L1 cells were examined using Oil Red O staining. In addition, we examined the gene expression levels by using RT-PCR and western blot. The results of this analysis showed that 100 ㎍/㎖ HRL significantly increased the inhibition of lipid accumulation by 82.25%; significantly decreased the mRNA expression of sterol regulatory element binding protein-1c (SREBP-1c), peroxisome proliferator-activated receptor γ (PPARγ), CCAAT/enhancer binding proteins α (C/EBPα), and fatty acid synthase (FAS) in 3T3-L1 cells as well as the stimulated protein expression of AMP-activated protein kinase (AMPK); and suppressed the expression level of PPARγ. These results suggest that HRL can prevent adipogenesis through activation of AMPKα and inhibition of adipogenesis transcription factors.
In the present study, we investigated the effect of 70% EtOH extract from Hippophae Rhamnoides L. leaves (HRL) on the anti-obesity effect in 3T3-L1 cells. The effects of HRL on lipid accumulation in 3T3-L1 cells were examined using Oil Red O staining. In addition, we examined the gene expression levels by using RT-PCR and western blot. The results of this analysis showed that 100 ㎍/㎖ HRL significantly increased the inhibition of lipid accumulation by 82.25%; significantly decreased the mRNA expression of sterol regulatory element binding protein-1c (SREBP-1c), peroxisome proliferator-activated receptor γ (PPARγ), CCAAT/enhancer binding proteins α (C/EBPα), and fatty acid synthase (FAS) in 3T3-L1 cells as well as the stimulated protein expression of AMP-activated protein kinase (AMPK); and suppressed the expression level of PPARγ. These results suggest that HRL can prevent adipogenesis through activation of AMPKα and inhibition of adipogenesis transcription factors.
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문제 정의
, 1998). 따라서 본 연구에서는 HRL에 의한 지방 전구세포의 분화 억제 효과를 확인하기 위하여 adipogenic transcription factor 및 관련 유전자들의 발현을 RT-PCR을 이용하여 확인하였다(Fig. 3).그 결과 분화를 유도한 대조군 그룹(Con)에서 SREBP-1c, PPARγ, C/EBPα 및 FAS의 mRNA발현이 증가하였으나, 분화 과정에서 HRL을 처리하여 분화를 유도한 경우 SREBP-1c, PPARγ, C/EBPα 및 FAS의 mRNA 발현이 모두 농도 의존적으로 감소하였음을 확인하였다(Fig.
하지만 비타민나무 잎 추출물의 지방 생성 및 축적 저해에 의한 항비만 작용기 전 연구는 미비한 실정이다. 따라서 본 연구에서는 비타민나무 잎 추출물을 이용하여 지방전구세포의 분화 억제 능과 세포 내 중성지방의 생성 및 축적과 관련된 작용기전을 분석함으로써 체지방 감소에 도움이 되는 기능성 식품 소재 개발을 위한 가능성을 규명하고자 하였다.
본 연구는 HRL의 3T3-L1 지방전구세포의 분화 과정 중에 HRL이 지방의 축적에 미치는 영향을 확인하였다. MTT assay 를 이용하여 세포독성을 측정한 결과 100 ㎍/㎖의 농도에서도 세포증식에 영향을 미치지 않는 것을 확인하였고, 이와 같은 결과를 토대로 Oil Red O 염색법을 이용하여 지방세포 분화 억제 능을 측정하였다.
제안 방법
세포의 분화는 2 × 104 cells/㎖의 농도로 6 well plate에 세포를 분주한 후, 100% confluent한 상태가 되도록 배양하였다. 2일 후 10% FBS, 1% PS 및 분화유도물질 MDI (0.5 mM IBMX, 1 μM DEX, 10 ㎍/㎖ insulin)가 첨가된 DMEM 배지를 처리하고, 그 이후 10% FBS와 10 ㎍/㎖ insulin만을 포함한 DMEM 배지로 교체하여 지방세포 분화를 유도하였다. 시료의 처리는 분화유도 배지첨가 시점부터 같이 처리하였다.
)에 transfer 하였다. 5% Skim milk (0.1% Tween 20 containing PBS, PBST) 용액에서 1시간 동안 nonspecific binding site를 blocking한 뒤 1차 항체[anti-PPARγ, anti-AMPK, anti-β-actin (1:1000), Cell Signaling Technology]로 4℃에서 overnight하고 2차 항체[anti-rabbit IgG or anti-mouse IgG linked with horseradish peroxidase, Santa Cruz Biotechnology, Inc. USA]로 상온에서 1시간 incubation 하였다. ECL solution (YoungInFrontier Co.
USA]로 상온에서 1시간 incubation 하였다. ECL solution (YoungInFrontier Co., Gasandong, Seoul, Korea)을 이 용하여 antibody-bound protein을 detection하였다.
HRL에 의해 지방세포 분화 시 나타나는 중성지방 축적 저해를 확인하기 위하여 3T3-L1 지방전구세포의 분화유도 시 추출물을 농도별(0, 10, 25, 50, 100 ㎍/㎖)로 처리하였다. 배지를 제거한 후, 10% formalin (Intron, Seongnam, Korea)을 처리하여 상온에서 1시간 고정시켰다.
HRL의 지방 생성 및 분해와 관련된 단백질 발현과의 연관성을 확인하기 위해 western blot을 이용하여 AMPKα, PPARγ의발현량을 측정하였다 (Fig. 4). AMPK는 세포 내의 에너지 항상성 유지 역할을 하는 효소로 지방의 대사 조절에 중요한 역할을 한다.
HRL이 3T3-L1 세포에 미치는 영향을 알아보기 위하여 MTT assay를 통해 세포독성을 측정하였다 (Fig. 1). 추출물을 처리하지 않은 대조군의 세포 증식율을 100% 하였을 때, 100 ㎍/㎖의 농도에서 82.
지방의 축적에 미치는 영향을 확인하였다. MTT assay 를 이용하여 세포독성을 측정한 결과 100 ㎍/㎖의 농도에서도 세포증식에 영향을 미치지 않는 것을 확인하였고, 이와 같은 결과를 토대로 Oil Red O 염색법을 이용하여 지방세포 분화 억제 능을 측정하였다. 그 결과, HRL의 경우 100 ㎍/㎖의 농도에서 82.
추출된 RNA를 이용하여 cDNA를 합성한 후 template 로 사용하여 지방세포 분화 발현인자인 SREBP-1c, PPARγ, C/EBPα를 확인하고, 지방 축적, 합성 및 저장에 관련된 FAS의 primer (Genotech, Daejeon, Korea)를 이용하여 RT-PCR을 실시하였다. Primer 염기서열은 Table 1과 같고, PCR 조건은 초기변성 94℃ 5분, 변성은 94℃ 30초 , annealinge 56℃ (PPARγ), 58℃ (SREBP-1c, FAS), 60℃ (C/EBPα) 60초, 신장 반응은 72℃ 60초로 하여 35cycle을 진행하였다. 데이터는 UVIband Software (UVItec, Cambridge, UK)로 분석하였으며 유전자의 발현량은 differentiation media만 처리한 대조군을 1.
배지를 제거한 후, 10% formalin (Intron, Seongnam, Korea)을 처리하여 상온에서 1시간 고정시켰다.고정 후 증류수와 60% isopropanol 로 세척한 후 세포들을 완전히 건조시키고, Oil Red O working solution을 20분간 처리하여 세포 안에 축적된 지방구들을 염색하였다. 현미경을 사용하여 염색된 세포를 관찰한 후, 100% isopropanol을 이용하여 세포 내 염색되어 있는 Oil Red O를 용출 시켜 510 ㎚에서 흡광도를 측정하여 지방 축적을 확인하였다.
Primer 염기서열은 Table 1과 같고, PCR 조건은 초기변성 94℃ 5분, 변성은 94℃ 30초 , annealinge 56℃ (PPARγ), 58℃ (SREBP-1c, FAS), 60℃ (C/EBPα) 60초, 신장 반응은 72℃ 60초로 하여 35cycle을 진행하였다. 데이터는 UVIband Software (UVItec, Cambridge, UK)로 분석하였으며 유전자의 발현량은 differentiation media만 처리한 대조군을 1.0으로 간주하여 상대적인 값을 측정하였다.
, 2014), 두메부추 추출물의 100 ㎍/㎖ 농도에서 독성을 나타내지 않아(Choi and Kim, 2014a) 항비만제 및 원료개발에 있어서 유효한 물질의 가능성을 나타내었다. 따라서 본연구는 세포증식에 크게 영향을 미치지 않는 100 ㎍/㎖ 이하의 농도 10, 25, 50, 100 ㎍/㎖로 3T3-L1 세포에 처리하여 지방세포 분화억제능을 확인하였다.
배양 완료 후 5 ㎍/㎖ 농도의 MTT 시약을 100 ㎍씩 분주한 다음 37℃, 5% CO2 incubator에서 4시간 배양하였다. 배지를 제거하고 DMSO 100 ㎍를 가하여 생성된 formazan을 녹인 후 ELISA microplate reader (Model 680, Biorad Laboratories Inc., Hercules, CA, USA)를 이용하여 540 ㎚에서 흡광도를 측정하였다. 세포 생존율은 다음의 식에 따라 계산하였다.
비타민나무 잎 추출물(HRL)은 파쇄된 시료에 10배수의 70% 에탄올을 첨가하여 상온에서 12시간씩 2회 반복하여 추출하였다. 추출액은 filter하여 불순물을 제거한 다음, 감압 농축하여 농축물을 얻었으며, 이를 동결건조하여 사용하였다.
지방세포 분화가 완료된 세포를 PBS로 세척하여 harvest 한 후 Total RNA Extraction Kit (Intron)를 이용하여 RNA를 분리하였다. 추출된 RNA를 이용하여 cDNA를 합성한 후 template 로 사용하여 지방세포 분화 발현인자인 SREBP-1c, PPARγ, C/EBPα를 확인하고, 지방 축적, 합성 및 저장에 관련된 FAS의 primer (Genotech, Daejeon, Korea)를 이용하여 RT-PCR을 실시하였다.
추출된 RNA를 이용하여 cDNA를 합성한 후 template 로 사용하여 지방세포 분화 발현인자인 SREBP-1c, PPARγ, C/EBPα를 확인하고, 지방 축적, 합성 및 저장에 관련된 FAS의 primer (Genotech, Daejeon, Korea)를 이용하여 RT-PCR을 실시하였다. Primer 염기서열은 Table 1과 같고, PCR 조건은 초기변성 94℃ 5분, 변성은 94℃ 30초 , annealinge 56℃ (PPARγ), 58℃ (SREBP-1c, FAS), 60℃ (C/EBPα) 60초, 신장 반응은 72℃ 60초로 하여 35cycle을 진행하였다.
고정 후 증류수와 60% isopropanol 로 세척한 후 세포들을 완전히 건조시키고, Oil Red O working solution을 20분간 처리하여 세포 안에 축적된 지방구들을 염색하였다. 현미경을 사용하여 염색된 세포를 관찰한 후, 100% isopropanol을 이용하여 세포 내 염색되어 있는 Oil Red O를 용출 시켜 510 ㎚에서 흡광도를 측정하여 지방 축적을 확인하였다.
대상 데이터
본 실험에 사용된 mouse embryo 유래의 3T3-L1 지방전구세포는 한국세포주은행(KCLB, Korea)에서 분양받았고, 세포배양에 사용한 Dulbeco’s modified Eagle’s medium (DMEM), fetal bovine serum (FBS), bovine calf serum (BCS), penicilin/streptomycin solution (PS), phosphate buffered saline (PBS), trypsin-EDTA는 HyClone사(Logan, UT, USA)로부터 구입하여 사용하였다. Insulin, 3-isobutyl-1-methylxanthine (IBMX), dexamethasone (DEX) 및 Oil Red O, 3-(4, 5-dimethyl thiazol-2-yl)-2, 5-diphenyhl tetrazolium bromide (MTT)는 Sigma사(St. Louis, MO, USA)에서 구입하여 사용하였다.
)은 강원비타민나무 영농조합(Chuncheon, Korea)에서 제공받아 사용하였고, 강원대학교 식물자원 응용공학과 약용식물분류학실험실에서 동정받았으며 증거표본은 강원대학교 식물자원응용공학과 식물표본실에 보관하였다.본 실험에 사용된 mouse embryo 유래의 3T3-L1 지방전구세포는 한국세포주은행(KCLB, Korea)에서 분양받았고, 세포배양에 사용한 Dulbeco’s modified Eagle’s medium (DMEM), fetal bovine serum (FBS), bovine calf serum (BCS), penicilin/streptomycin solution (PS), phosphate buffered saline (PBS), trypsin-EDTA는 HyClone사(Logan, UT, USA)로부터 구입하여 사용하였다. Insulin, 3-isobutyl-1-methylxanthine (IBMX), dexamethasone (DEX) 및 Oil Red O, 3-(4, 5-dimethyl thiazol-2-yl)-2, 5-diphenyhl tetrazolium bromide (MTT)는 Sigma사(St.
본 실험에 시료로 사용된 비타민나무 잎(Hippophae rhamnoides L.)은 강원비타민나무 영농조합(Chuncheon, Korea)에서 제공받아 사용하였고, 강원대학교 식물자원 응용공학과 약용식물분류학실험실에서 동정받았으며 증거표본은 강원대학교 식물자원응용공학과 식물표본실에 보관하였다.본 실험에 사용된 mouse embryo 유래의 3T3-L1 지방전구세포는 한국세포주은행(KCLB, Korea)에서 분양받았고, 세포배양에 사용한 Dulbeco’s modified Eagle’s medium (DMEM), fetal bovine serum (FBS), bovine calf serum (BCS), penicilin/streptomycin solution (PS), phosphate buffered saline (PBS), trypsin-EDTA는 HyClone사(Logan, UT, USA)로부터 구입하여 사용하였다.
데이터처리
, NC, USA) 통계프로그램을 이용하여 분석하였고 평균±표준편차로 표시하였으며, 실험군 간 평균의 차이는 one-way ANOVA로 유의성을 확인하였다. 대조구인 분화control에 대한 시료처리구의 통계적 유의성은 Tukey’s multiple comparison test로 검정하였고 p < 0.05 이상일 때만 통계적 유의성이 있는 것으로 판단하였다.
모든 결과는 SAS (ver. 9.2, SAS Institute Inc., NC, USA) 통계프로그램을 이용하여 분석하였고 평균±표준편차로 표시하였으며, 실험군 간 평균의 차이는 one-way ANOVA로 유의성을 확인하였다. 대조구인 분화control에 대한 시료처리구의 통계적 유의성은 Tukey’s multiple comparison test로 검정하였고 p < 0.
이론/모형
3T3-L1 cells were treated with different concentrations (0~100 ㎍/㎖) of HRL for 24 h. Cell viability was measured by MTT assay. The viability of untreated control cells was defined as 100%.
HRL의 세포독성은 Ishiyanma et al. (1996)의 MTT assay로 실험하였다. 세포를 1 × 104 cells/well의 농도로 96 well plate 에 100 ㎍씩 분 주한 후 37℃, 5% CO2 incubator에서 24시간 배양하여 일정 농도로 희석된 추출물을 첨가한 후 다시 24시간 배양하였다.
, 2013). 따라서 3T3-L1 세포분화 과정에서 HRL이 지방구 생성을 억제하는지 확인하기 위해 Oil Red O 염색법을 이용하였다. 분화처리 군(Con)의 경우, 세포질 내 지방구의 형성이 활발하게 유도되는 것을 확인하였고, HRL을 10, 25, 50, 100 ㎍/㎖ 로 처리하였을 때 농도의존적으로 붉은색이 적게 관찰되어 지질 축적이 감소함을 확인하였다 (Fig.
25% 지방 축적 억제능을 나타내었다. 지방 생성에 영향을 미치는 유전자 발현량을 측정하기 위해 RT-PCR법과 western blot법을 시행하였다. HRLe SREBP-1c, PPARγ와 C/EBPα의 mRNA 발현을 억제시켰고, 지방 생성에 영향을 미치는 효소인 FAS의 생성을 조절하는 것으로 나타났다.
성능/효과
지방 생성에 영향을 미치는 유전자 발현량을 측정하기 위해 RT-PCR법과 western blot법을 시행하였다. HRLe SREBP-1c, PPARγ와 C/EBPα의 mRNA 발현을 억제시켰고, 지방 생성에 영향을 미치는 효소인 FAS의 생성을 조절하는 것으로 나타났다. 또한, HRL 처리로 AMPKα의 단백질 발현이 증가하였으며, PPARγ의 발현량이 감소하는 것을 확인하였다.
, 1998; Fryer, 2002). HRL을 농도별로 처리한 결과, AMPK 및 PPARγ의 발현이 유의성 있는 변화를 나타냈고, P-AMPK의 발현은 100 ㎍/㎖의 농도에서 3.5배 증가되는 것을 확인하였으며 PPARγ의 발현은 0.1배 감소되는 것을 확인하였다. 이러한 결과는 비타민나무 잎에 존재하는 quercetin의 영향으로 생각된다.
3).그 결과 분화를 유도한 대조군 그룹(Con)에서 SREBP-1c, PPARγ, C/EBPα 및 FAS의 mRNA발현이 증가하였으나, 분화 과정에서 HRL을 처리하여 분화를 유도한 경우 SREBP-1c, PPARγ, C/EBPα 및 FAS의 mRNA 발현이 모두 농도 의존적으로 감소하였음을 확인하였다(Fig. 3).특히, HRL 100 ㎍/㎖의 농도에서 SREBP-1c, PPARγ 및 C/EBPα는 분화처리군(Con) 대비, 각각 0.
MTT assay 를 이용하여 세포독성을 측정한 결과 100 ㎍/㎖의 농도에서도 세포증식에 영향을 미치지 않는 것을 확인하였고, 이와 같은 결과를 토대로 Oil Red O 염색법을 이용하여 지방세포 분화 억제 능을 측정하였다. 그 결과, HRL의 경우 100 ㎍/㎖의 농도에서 82.25% 지방 축적 억제능을 나타내었다. 지방 생성에 영향을 미치는 유전자 발현량을 측정하기 위해 RT-PCR법과 western blot법을 시행하였다.
(2014) 및 Choi and Kim (2014b)의 보고와 일치한다. 따라서 HRLe 3T3-L1 지방전구세포에서 adipogenic transcription factor인 SREBP-1c의 발현을 억제시킴으로써 SREBP-1c의 타겟유전자이며 지방형성과정에 주요 인자인 PPARγ와 C/EBPα의 발현을 억제하고 지질의 합성 수송, 저장에 관여하는 FAS의 발현에 영향을 미쳐 지방분화를 억제를 이끌어 세포 내 중성지방의 축적이 감소되는 것으로 사료된다.
(2008)의 연구에 따르면 quercetin이 AMPK의 발현을 증가시켜 adipogenesis를 억제시키고, PPARγ, C/EBPα, SREBP-1 및 FAS의 발현 감소로 지방전구 세포에서 지방세포로의 분화를 억제시킨다고 보고된 바 있다. 따라서 HRLe 활성화된 AMPK의 발현을 증가시킴으로써, 지방형성과정에 주요 인자인 PPARγ의 발현에 영향을 준 것으로 생각되며, 이는 3T3-L1 지방전구세포에서 지방세포로의 분화 억제를 이끌어 세포 내중성지방의 축적이 감소되는 것으로 판단된다.
HRLe SREBP-1c, PPARγ와 C/EBPα의 mRNA 발현을 억제시켰고, 지방 생성에 영향을 미치는 효소인 FAS의 생성을 조절하는 것으로 나타났다. 또한, HRL 처리로 AMPKα의 단백질 발현이 증가하였으며, PPARγ의 발현량이 감소하는 것을 확인하였다. 이상의 결과들로부터 HRLe AMPKα 의 활성화를 통한 지방합성을 억제를 보유하고 있는 바, 향후 항비만 기능성 소재로 활용될 수 있을 것으로 생각한다.
2).이를 정량 분석한 결과, 분화처리군 (Con)에 비해 HRL 25, 50, 100 ㎍/㎖ 처리군이 각각 20.76, 45.29 및 82.25%로 중성지방 축적을 억제하는 것으로 나타났다 (Fig. 2).이는 Yoon et al.
3% (30 μM)의 중성지방 축적 억제 효과를 나타내는 것을 확인하였다. 이와 같은 결과로 HRL 처리가 지방 구의 생성을 저해시켜 지방 축적을 억제하는 효과가 있음을 확인하였다.
1). 추출물을 처리하지 않은 대조군의 세포 증식율을 100% 하였을 때, 100 ㎍/㎖의 농도에서 82.68 ± 1.35%로 80% 이상의 세포 생존율을 나타내었다. 식물 추출물에 의한 세포 생존율에 관한 연구를 보면 칡잎 추출물의 경우에는 100 ㎍/㎖ 농도에서 89.
3).특히, HRL 100 ㎍/㎖의 농도에서 SREBP-1c, PPARγ 및 C/EBPα는 분화처리군(Con) 대비, 각각 0.87, 0.91 및 0.35배 감소하였으며(Fig. 3), 이들 전사인자들의 하위인자인 FAS의 mRNA 발현도 0.49배 감소하는 것을 확인하였다(Fig. 3D).이전의 연구는 비타민나무 잎 에탄올 추출물이 PPARα 및 CPT-1의 발현 증가에 영향을 미쳐 지방산 베타-산화를 촉진시킴으로써 항비만 효과를 나타낸다고 보고된 바 있고(Pichiah et al.
후속연구
또한, HRL 처리로 AMPKα의 단백질 발현이 증가하였으며, PPARγ의 발현량이 감소하는 것을 확인하였다. 이상의 결과들로부터 HRLe AMPKα 의 활성화를 통한 지방합성을 억제를 보유하고 있는 바, 향후 항비만 기능성 소재로 활용될 수 있을 것으로 생각한다.
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