[논문]고지방식이로 비만을 유발한 마우스의 알레르기 비염에 대한 방풍통성산(防風通聖散)의 효과

김동현; 홍승욱

doi:10.6114/jkood.2016.29.1.001

고지방식이로 비만을 유발한 마우스의 알레르기 비염에 대한 방풍통성산(防風通聖散)의 효과
The Effect of Bangpungtongsungsan on Allergic Rhinitis Of Obese Mouse Fed High Fat Diet. 원문보기

韓方眼耳鼻咽喉皮膚科學會誌 = The journal of Korean Medicine Ophthalmology & Otolaryngology & Dermatology, v.29 no.1, 2016년, pp.1 - 15

김동현 (동국대학교 한의과대학 한방안이비인후피부과교실) , 홍승욱 (동국대학교 한의과대학 한방안이비인후피부과교실)

Abstract ▼ AI-Helper

Objective : For various reasons, Obesity & Rhinitis are constantly rising. So Interest of treatment has been expanding. We want to verify The Chungyeol (fire extinguishing) Lisup (Draining) effect of Bangpungtongsungsan on obese model of allergy rhinitis.Material and Methods : BALB/c mouse were divided four groups: control(CON), allergic induction(ARE), Bangpungtongsungsan extract administration(BTT), Bangpungtongsungsan double concentration extract administration (BT2T). Every group except control group were caused allergic rhinitis by Ovalbumin. BTT & BT2T were orally administered the Bangpungtongsungsan for 21days. Since then we observed the liver tissue cell and the nasal mucous membrane.Results : In comparison with ARE, experimental groups show relief of the nasal mucous membrane damage(secretion of mucus decrease, Itching decrease), Th2 eruption control(IL-4 decline), effect of anti-inflamatory(reducing TNF-α creation, decreasing of iNOS through NF-κB activation-inhibition). In addition, experimental groups show a loss in weight, diminished accumulation of fat. (decreasing within liver tissue, reducing TNF-α creation) BT2T is more effective to BTT.Conclusion : Bangpungtongsungsan treat obese model on allergy rhinitis thereby control fat augmentation, relieving inflammation.

주제어

AI 본문요약
AI-Helper

문제 정의

이에 본 실험에서는 방풍통성산이 濕熱에 쓰는 처방임을 고려하여 실제 임상과 유사한 환경을 만들기위에 고지방식이를 통해 마우스를 비만하게 만든 다음 알레르기 비염을 유발하고 방풍통성산을 투여하는 과정에서 지방축적의 감소와 알레르기 비염 완화에 유효한 효과를 확인하였기에 이에 보고하는 바이다.

가설 설정

이러한 급속한 체중증가와 지방대사과정에서 축적된 지방으로 인한 지방간(Oil red O 염색으로 확인할 수 있는 지방방울을 통해 관찰 가능)으로 마우스에 비만, 즉 습열상황이 유발되었다고 가정한 다음 본 실험을 진행하였다.

제안 방법

코점막에서는 직접적인 비염 유발후 호흡상피손상을 관찰하였고 재채기, 가려움, 콧물 등의 증상완화 정도를 미루어 짐작할 수 있는 술잔세포 내 점액분비와 substance P를 관찰하였다. 또한 Th2의 분화 조절을 관찰하기 위해서 IL-4를 측정하고, 여기에서도 역시 TNF-α의 발현조절을 관찰한 다음, 항염증효과를 보기 위해서 NF-κB와 iNOS의 활성정도를 관찰하였다.
또한 기존의 연구는 濕熱상황을 가정하지 않고 일반적인 상황에서 항알러지 효과를 검증하고자 하였는데, 본 실험에서는 방풍통성산이 濕熱에 쓰는 처방으로 임상에서 체격이 肥實한 사람에게 사용하기에 기존의 연구와는 다르게 마우스에게 고지방식이를 먹여 방풍통성산을 쓰는 實熱의 체질과 유사한 비만형 병태모델을 만들고, 실제로 임상환경과 유사하게 환자들이 약을 먹는 중간에 여러 원인에 인해 알러지성 비염이 심해질 수도 있는 상황을 가정하여 실험 중에도 처음 알러지 감작 후 약을 투여하다가 일주일 후 다시 OVA를 통해 알러지를 감작시키는 등의 과정을 거쳐 최대한 임상에서 방풍통성산을 쓰는 환경과 유사하게 실험을 진행하였다.
방풍통성산의 淸熱利濕효능이 비만한 마우스의 알레르기 비염 치료에 미치는 영향을 알아보기 위해서 고지방식이 섭식한 Balb/c 마우스 비강 점막에 OVA 항원자극을 통하여 인위적으로 알레르기 비염을 유발시킨 다음 방풍통성산 추출물을 경구투여하여 다음과 같은 결과를 얻었다.
알레르기 비염을 유발하고 방풍통성산과 그 배방을 투여한 다음 기본적으로 체중변화를 측정하였으며, 먼저 간 조직에서는 지방대사에 따른 변화를 보기위해서 지방 분포변화를 비교해보았으며, 염증의 완화정도를 알아보기 위해서 TNF-α를 측정해보았다. 코점막에서는 직접적인 비염 유발후 호흡상피손상을 관찰하였고 재채기, 가려움, 콧물 등의 증상완화 정도를 미루어 짐작할 수 있는 술잔세포 내 점액분비와 substance P를 관찰하였다.
일반적으로 정상체중의 보다 20%이상 차이가 나는 쥐를 비만한 마우스로 가정하는데21) 본 실험에서는 생후 6주된 쥐를 2주간 적응시킨 후 고지방식이를 10주간 먹이면서, 생후 8주차부터 15주, 16주, 17주, 18주에 체중을 측정했다. 다른 처치를 하지 않은 대조군을 기준삼았을 때 체중은 8주차에 20g에서 15주차 30g으로 10g, 50%가 증가했는데, 일반적으로 Balb/c 마우스가 8주차에서 15주차로 접어들 때 3g, 10%정도 증가하는 것과 비교한다면 상당한 증가가 이뤄졌다고 할 수 있다22).
대한실험동물센타에서 분양 받은 태령 6주된 Balb/c계 수컷 생쥐를 무균사육장치내에서 2주일동안 적응시킨 후 체중 20g된 생쥐를 선별하여 사용하였다. 정상군(CON), 알러지성 비염 유발군(ARE), 알러지성 비염 유발 후 방풍통성산 투여군(BTT) 그리고 알러지성 비염 유발 후 배방-방풍통성산 투여군(BT2T)으로 나누었다. 각 군에 각 10마리씩 배정하였으며, 실험기간동안 high fat diet(fat, 60%; carbohydrate, 20%; protein, 20%; DIO DIET, USA)를 섭취시켰다.
선행연구를 보는 과정에서 ‘임상에서는 효과적인 방풍통성산이 왜 항알러지에 대해서 유효성을 검증받지 못하였던 것일까?’ 가 본 논문의 또 다른 출발점이였다. 첫 번째로 분석하면서 측정지표간의 미묘한 충돌이 관찰되는데, IL-4는 Th2의 촉진과 Th1의 억제와 관계있는데 IFN-γ는 Th1세포를 촉진하여 IL-4, IgE의 생성감소와 관계가 있으며, IL-5는 IgE합성과 관계있는 등 전반적인 지표들이 OVA감작으로 알레르기가 유발되었다는 지표가 되지만 항알러지 기능에 대해서 알아보는데는 적합한 지표로 생각되지 않았기에 IL-4 외에는 TNF-α, NF-κB, iNOS, substance P를 새로운 지표로 선정해보았다.
알레르기 비염을 유발하고 방풍통성산과 그 배방을 투여한 다음 기본적으로 체중변화를 측정하였으며, 먼저 간 조직에서는 지방대사에 따른 변화를 보기위해서 지방 분포변화를 비교해보았으며, 염증의 완화정도를 알아보기 위해서 TNF-α를 측정해보았다. 코점막에서는 직접적인 비염 유발후 호흡상피손상을 관찰하였고 재채기, 가려움, 콧물 등의 증상완화 정도를 미루어 짐작할 수 있는 술잔세포 내 점액분비와 substance P를 관찰하였다. 또한 Th2의 분화 조절을 관찰하기 위해서 IL-4를 측정하고, 여기에서도 역시 TNF-α의 발현조절을 관찰한 다음, 항염증효과를 보기 위해서 NF-κB와 iNOS의 활성정도를 관찰하였다.
배방된 방풍통성산(이하 BT2T) 4첩도 동일한 방법을 적용하여 추출물 71g (수득률 21%)을 얻어 사용하였다. 투여량은 BTT에 0.35㎎/㎏, BT2T에 0.59㎎/㎏로 결정하였고, 알러지성 비염 유발 후 경구투여 하였다(Fig. 1).

대상 데이터

대한실험동물센타에서 분양 받은 태령 6주된 Balb/c계 수컷 생쥐를 무균사육장치내에서 2주일동안 적응시킨 후 체중 20g된 생쥐를 선별하여 사용하였다. 정상군(CON), 알러지성 비염 유발군(ARE), 알러지성 비염 유발 후 방풍통성산 투여군(BTT) 그리고 알러지성 비염 유발 후 배방-방풍통성산 투여군(BT2T)으로 나누었다.
실험에 사용된 防風通聖散(Bangpungtongsungsungsan)은 조은한약에서 구입하여 사용하였다(Table 1). 방풍통성산(이하 BTT) 4첩을 증류수 1500㎖에 넣고 3시간동안 전탕한 후 여과하였다.

성능/효과

마지막으로 술잔세포에 탈과립에 따른 점액분비를 수치화시켜 관찰하기 위해서 미세혈관의 투과성을 증가시키고 비만세포의 탈과립과 염증세포의 증식 등을 유도하기에 주관적인 가려움 등의 증상을 객관화시킬 수 있는 지표인 substance P를 측정하였는데 ARE군에 비해서 BTT군이 32%, BT2T군이 51% 유의성 있기 반응 감소를 보였고 BT2T군이 BTT군에 비해서 27%유의성 있게 감소하였다34,35).
아래코선반의 염증에 대해서 방풍통성산의 항염증기능을 알아보기 위해서는 TNF-α와 NF-κB, iNOS를 측정하였는데, TNF-α는 ARE군에 비해서 BTT군은 48%, BT2T군은 82% 유의성있게 감소하였으며, BT2T군이 BTT군에 비해 66% 유의성있는 감소를 보였으며, NF-κB는 ARE군에 비해 BTT군은 77%, BT2T군은 90% 유의성있게 감소했고 BT2T군이 BTT군에 비해 58% 유의하게 감소했다. iNOS는 BTT군이 30%, BT2T군이 62% 유의하게 감소했고, BT2T군이 BTT군에 비해 45% 유의성 있게 감소했다.
이상의 결과에서 비만성(습열형) 알러지성 비염에 방풍통성산을 투여하였을 때 ARE군에 비해서 BTT군과 BT2T군이 모두 유의성 있게 감소하였으며, 특히 BT2T군이 BTT군보다 유의성있는 감소를 보였음을 알 수 있는데, 여기에서 최초에 가정했었던 습열을 더 많이 제거할수록 비염의 완화효과가 더 크다는 것을 검증할 수 있었다. 이를 통해볼 때 방풍통성산의 투여는 비만을 조절하고 지방대사조절을 통해 지방축적을 감소시켜 신체의 염증을 완화시키는 淸熱利濕의 작용으로 손상된 호흡상피를 회복하고 염증과 알러지 반응을 완화시켜 알러지성 비염을 완화시킴을 알 수 있다.
이상의 결과에서 비만성(습열형) 알러지성 비염에 방풍통성산을 투여하였을 때 ARE군에 비해서 BTT군과 BT2T군이 모두 유의성 있게 감소하였으며, 특히 BT2T군이 BTT군보다 유의성있는 감소를 보였음을 알 수 있는데, 여기에서 최초에 가정했었던 습열을 더 많이 제거할수록 비염의 완화효과가 더 크다는 것을 검증할 수 있었다. 이를 통해볼 때 방풍통성산의 투여는 비만을 조절하고 지방대사조절을 통해 지방축적을 감소시켜 신체의 염증을 완화시키는 淸熱利濕의 작용으로 손상된 호흡상피를 회복하고 염증과 알러지 반응을 완화시켜 알러지성 비염을 완화시킴을 알 수 있다.
이상의 실험결과로 볼 때 방풍통성산은 淸熱利濕작용으로 고지방식이에 의한 지방 증가를 조절하는 한편 이를 통해 알러지성 비염의 호흡점막 손상을 효과적으로 치료하는 것으로 생각된다.
즉, 방풍통성산이 단순한 항염증, 항알레르기 효능을 가진 것만이 아니라 지질대사를 개선시켜 심한 염증을 유발하는 지방세포를 줄이고 이와 동시에 알레르기 비염을 완화시킨다는 것을 관찰할 수 있었고, 이를 통해서 단순히 증상을 호전시키는 것만이 아닌 인체반응을 조절하여 체질개선을 시킨다는 한약의 사용목적도 어느 정도는 입증할 수 있었다.

후속연구

그러나 한약처럼 변증에 따른 복합치법의 의미를 가진 약이 양약에는 존재하지 않아서 서양의학과 적합한 비교를 하지 못한 점과 실험상의 한계로 방풍통성산을 20일간 먹인 후에 다시 알레르기 항원을 노출시켜 다시 그 반응을 보거나 정상체중 알레르기비염 유발 마우스에서의 방풍통성산 투여 후 반응과 비교하는 등의 연구를 하지 못한 점은 한계로 생각된다. 이에 따라 이러한 부분에 대한 추가적인 연구가 계속되어야 한다고 생각되는 바이다.

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표제어: PCR

동의어: Packet Collision Rate

용어 설명 출처 목록 (6)

용어 설명: PCR은 세균 특이성이 있는 primer를 이용하여 적은 수의 세균이 있을지라도 쉽게 검출할 수 있는 유용한 방법이며, 이를 이용하여 구강 내 치면세균막이나 타액에서 직접 세균을 검출할 수 있게 되었다[8].

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