본 연구는 4종의 재래닭인 연산오계, 현인흑계, 횡성약닭, 황봉의 일반성분, 카르노신, 안세린 함량 및 면역활성을 비교하기 위하여 실시하였고, 대조구로 백색 레그혼을 사용하였다. 시험용 닭을 모두 동일한 조건에서 13주간 사육하여 도계한 후 화학적 성분조사를 실시하였다. 일반성분 분석에서는 4종의 재래닭이 백색레그혼에 비하여 조지방 함량이 높았으며, 콜레스테롤 함량은 현인흑계가 다른 품종에 비하여 높았고 횡성약닭이 유의적으로 낮았다(p<0.05). 면역증진 효능을 측정하기 위하여 대식세포를 이용하여 실험한 결과는 재래닭 4종의 가슴육에서만 대식세포 증식 및 NO 억제 효능이 있었다. 대식세포 탐식작용은 현인흑계와 횡성약닭가슴육에서 유의적으로 증가되었고, 염증 관련 사이토카인(IL-4, IL-10, $IFN-{\gamma}$) 유전자 발현은 백색레그혼에 비하여 4종의 재래닭에서 억제효과가 컸다. 결론적으로 4종류의 재래닭이 백색레그혼에 비하여 면역증진 효능이 높았으며, 특히 가슴육에서 효능이 있었다. 재래닭 품종 간에도 일반성분 및 면역조절능에 차이가 있는 것으로 나타났다.
본 연구는 4종의 재래닭인 연산오계, 현인흑계, 횡성약닭, 황봉의 일반성분, 카르노신, 안세린 함량 및 면역활성을 비교하기 위하여 실시하였고, 대조구로 백색 레그혼을 사용하였다. 시험용 닭을 모두 동일한 조건에서 13주간 사육하여 도계한 후 화학적 성분조사를 실시하였다. 일반성분 분석에서는 4종의 재래닭이 백색레그혼에 비하여 조지방 함량이 높았으며, 콜레스테롤 함량은 현인흑계가 다른 품종에 비하여 높았고 횡성약닭이 유의적으로 낮았다(p<0.05). 면역증진 효능을 측정하기 위하여 대식세포를 이용하여 실험한 결과는 재래닭 4종의 가슴육에서만 대식세포 증식 및 NO 억제 효능이 있었다. 대식세포 탐식작용은 현인흑계와 횡성약닭가슴육에서 유의적으로 증가되었고, 염증 관련 사이토카인(IL-4, IL-10, $IFN-{\gamma}$) 유전자 발현은 백색레그혼에 비하여 4종의 재래닭에서 억제효과가 컸다. 결론적으로 4종류의 재래닭이 백색레그혼에 비하여 면역증진 효능이 높았으며, 특히 가슴육에서 효능이 있었다. 재래닭 품종 간에도 일반성분 및 면역조절능에 차이가 있는 것으로 나타났다.
This study was conducted to compare the general composition and immunomodulatory activity of breast and thigh meats from four lines of Korean native chickens: Yeonsan Ogye, Hyunin Black, Hwangbong, and Hoengseong Yakdak. White Leghorn was used as a control. Fifteen male chickens (three chickens in e...
This study was conducted to compare the general composition and immunomodulatory activity of breast and thigh meats from four lines of Korean native chickens: Yeonsan Ogye, Hyunin Black, Hwangbong, and Hoengseong Yakdak. White Leghorn was used as a control. Fifteen male chickens (three chickens in each line) were grown under the same conditions and slaughtered at 13 weeks old. The four lines of Korean native chickens, regardless of the part, had higher contents of crude fat (p<0.05) than White Leghorn. The cholesterol contents were significantly higher in Hyunin Black and significantly lower in Hoengseong Yakdak than those of other chickens (p<0.05). The immunomodulatory effect, assessed by macrophage cell proliferation and nitric oxide production, was only observed in the breast meat of the four lines of Korean native chickens. The phagocytic activity of macrophage cells was significantly augmented by the breast meat of Hyunin Black and Hoengseong Yakdak. Furthermore, the mRNA expressions of pro-inflammatory cytokines, such as IL-4, IL-10 and $IFN-{\gamma}$, was significantly suppressed by Korean native chickens compared with White Leghorn. These results suggested that the four lines of Korean native chickens exhibited greater immune-enhancing activity than White Leghorn.
This study was conducted to compare the general composition and immunomodulatory activity of breast and thigh meats from four lines of Korean native chickens: Yeonsan Ogye, Hyunin Black, Hwangbong, and Hoengseong Yakdak. White Leghorn was used as a control. Fifteen male chickens (three chickens in each line) were grown under the same conditions and slaughtered at 13 weeks old. The four lines of Korean native chickens, regardless of the part, had higher contents of crude fat (p<0.05) than White Leghorn. The cholesterol contents were significantly higher in Hyunin Black and significantly lower in Hoengseong Yakdak than those of other chickens (p<0.05). The immunomodulatory effect, assessed by macrophage cell proliferation and nitric oxide production, was only observed in the breast meat of the four lines of Korean native chickens. The phagocytic activity of macrophage cells was significantly augmented by the breast meat of Hyunin Black and Hoengseong Yakdak. Furthermore, the mRNA expressions of pro-inflammatory cytokines, such as IL-4, IL-10 and $IFN-{\gamma}$, was significantly suppressed by Korean native chickens compared with White Leghorn. These results suggested that the four lines of Korean native chickens exhibited greater immune-enhancing activity than White Leghorn.
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문제 정의
따라서 대식세포의 탐식 작용은 면역 기능에 영향을 미칠 수 있으므로 그 관련성을 알아보기 위하여 대식세포 증식능이 가장 높게 나타난 재래닭 가슴육 추출물(200 μg/mL)이 대식 세포 활성에 미치는 영향을 조사하였다.
지금까지 재래닭 관련 연구는 외형적 특징과 유전적 특성에 관한 연구가 주로 이루어졌으며, 재래닭의 기능성분이나 기능성에 대한 연구는 거의 없는 실정이다. 따라서 본 연구는 4종의 전통 재래닭인 연산오계, 현인흑계, 횡성약닭, 황봉의 일반성분을 분석하고, 면역 증강에 도움을 줄 가능성이 있는지를 알아보고자 in vitro 면역 실험에서 주로 이용되는 마우스의 대식세포 유래 세포주인 RAW264.7을 이용하여 면역활성에 미치는 영향을 평가하였다.
본 연구는 4종의 재래닭인 연산오계, 현인흑계, 횡성약닭, 황봉의 일반성분, 카르노신, 안세린 함량 및 면역활성을 비교하기 위하여 실시하였고, 대조구로 백색 레그혼을 사용하였다. 시험용 닭을 모두 동일한 조건에서 13주간 사육하여도계한 후 화학적 성분조사를 실시하였다.
, 2014). 본 연구에서는 재래닭 열수 추출물의 면역개선 효능을 검토하기 위하여 생쥐의 대식세포주인 RAW264.7 세포 증식에 미치는 영향을 관찰하였다. 대식세포는 탐식세포라고도 하며, 세균이나 바이러스 등 외부 병원균의 감염 시 다양한 염증인자 및 항균물질 분비, 식균작용 등을 통한 방어능력에 중요한 역할을 수행한다.
, 2001). 본 연구에서는 재래닭 추출물의 NO 생성조절에 대한 효과를 측정하기 위하여 LPS를 RAW264.7 대식세포에 인위적으로 처리하여 NO를 과량 생성하는 염증 환경을 만들고, 시료를 처리하여 NO 생성 저해활성을 조사하였다. Fig.
제안 방법
4계통 재래닭 및 백색레그혼의 부위별 시료(가슴 및 다리육) 열수추출물을 각각 50, 100, 200 μg/mL의 농도로 처리하였다.
Fig. 4에 나타난 것과 같이, 대식세포를 활성화시키는 물질인 LPS에 의해서 유도된 염증성 사이토카인 중 IL-4, IL-10, IFN-γ 및 TNF-α 등의 mRNA 유전자 발현에 미치는 재래닭 및 백색레그혼 가슴육 추출물의 영향을 살펴보았다.
각 well에 lipopolysaccharide(LPS, 1 μg/mL)를 처리하여 NO 분비를 유도하고, 4계통 재래닭 및 백색레그혼의 부위별 열수추출물 시료를 50∼200 μg/mL의 농도로 처리하였다.
다시 24시간 배양 후 20 μL의 MTT 시약(Sigma-Aldrich Inc., St. Louis, MO, USA)을 첨가하여 4시간 반응시킨 후, 배양액을 버리고, DMSO 100 μL씩 넣어 formazan을 용해하여 ELISA 측정기(ELX 808, Biotek Instruments, Vermont, USA)를 이용하여 570 nm에서 측정하였다.
대식세포가 분비하는 독성물질의 하나인 NO 생성에 대한 억제효능을 알아보기 위하여 대식세포에 시료를 처리하여 NO 생성량을 확인하였다. RAW264.
실험동물은 서울대학교 실험목장의 표준 관리 프로그램에 의해 관리되었고, 서울대학교 동물실험윤리위위원회에 의해 승인되었다(SNU-150827-1). 동일한 사료와 조건에서 사육된 13주령 수컷 4수씩 피부를 제거한 가슴육과 다리육을 분석하였다. 면역관련 효능분석에 사용한 시료는 피부를 제거한 가슴육과 다리육을 90℃에서 10시간 추출하여 감압농축한 후 동결건조하여 사용하였다.
동일한 사료와 조건에서 사육된 13주령 수컷 4수씩 피부를 제거한 가슴육과 다리육을 분석하였다. 면역관련 효능분석에 사용한 시료는 피부를 제거한 가슴육과 다리육을 90℃에서 10시간 추출하여 감압농축한 후 동결건조하여 사용하였다.
, 2011). 본 연구에서는 MTT assay를 이용하여 4계통 재래닭 및 백색레그혼의 가슴육과 다리육 추출물의 처리 농도에 따른 RAW 264.7 세포의 증식률을 측정하였다(Fig. 1). 그 결과, 4계통 재래닭 및 백색레그혼의 가슴육 추출물을 투여한 실험군은 모든 농도에서 통계적으로 유의한 대식세포 증식 효과를 나타내었으며(p<0.
본 연구는 4종의 재래닭인 연산오계, 현인흑계, 횡성약닭, 황봉의 일반성분, 카르노신, 안세린 함량 및 면역활성을 비교하기 위하여 실시하였고, 대조구로 백색 레그혼을 사용하였다. 시험용 닭을 모두 동일한 조건에서 13주간 사육하여도계한 후 화학적 성분조사를 실시하였다. 일반성분 분석에서는 4종의 재래닭이 백색레그혼에 비하여 조지방 함량이 높았으며, 콜레스테롤 함량은 현인흑계가 다른 품종에 비하여 높았고 횡성약닭이 유의적으로 낮았다(p<0.
염증성 사이토카인 분비억제에 대한 4계통 재래닭의 효능을 확인하기 위하여 염증 관련 유전자 발현을 측정하였다. RAW264.
이후 4계통 재래닭 가슴육 열수추출물을 200 μg/mL의 농도로 투여하고, LPS(1 μg/mL)를 이용하여 염증반응을 유도하였다.
이후 4계통 재래닭 및 백색레그혼의 가슴육 열수추출물 시료를 200 μg/mL의 농도로 투여하고, FITC(fluorescein isothiocyanate) 형광이 부착된 Latex Bead(Phagocytosis Assay Kit, IgG FITC, Caymann, Ann Arbor, MI, USA)를 100 μL 첨가하였다.
24시간 배양 후 배지를 제거한 다음 PBS로 세척하고, trypan blue 용액으로 남은 Bead를 제거하였다. 이후 형광(excitation 485/emission 535)을 이용하여 세포의 탐식작용을 측정하였다(Fluorescent microscope, BX60, Olympus, Tokyo, Japan).
추출된 RNA 1 ug과 SuperScript First-Strand cDNA synthesis kit(Invitrogen, Korea)를 이용하여 cDNA를 합성하고, SYBR Green RealTime PCR Kit(Qiagen, USA)를 이용하여 IL-4, IL-10, IFN-γ, TNF-α의 유전자 발현 정도를 Realtime PCR로 분석하였다.
수분 함량은 105℃ 상압 가열건조법, 조지방은 Soxhlet 추출법, 회분은 550℃ 직접회화법, 조단백질은 Kjeldahl 법에 의하여 분석하였다. 콜레스테롤 함량은 시료 2.0 g의 지질을 고온에서 50% 수산화칼륨 용액과 95% 에탄올 용액으로 비누화한 후, 콜레스테롤을 톨루엔으로 추출하고, 트리메틸실릴 에테르화하여 유도체화한 후, 이를 gas chromatography(7890A, Agilent, USA, FID detector)로 정량하였으며, 분석조건은 Table 1과 같다.
대상 데이터
본 실험에 사용된 공시계는 4계통 재래종인 연산오계, 현인흑계, 횡성약닭 및 황봉과 대조구로 산란계인 백색 레그혼을 사용하였다. 실험동물은 서울대학교 실험목장의 표준 관리 프로그램에 의해 관리되었고, 서울대학교 동물실험윤리위위원회에 의해 승인되었다(SNU-150827-1).
실험에 사용한 대식세포주인 RAW264.7 세포는 American Type Culture Collection(ATCC, Manassas, VA, USA)에서 분양받아 사용하였다. 세포는 10% fetal bovine serum(Hyclone Laboratories, Logan, UT, USA), 1% penicillin/streptomycin이 함유된 RPMI 1640(GIBCO BRL, Grand Island, NY) 배지를 배양액으로 하여 37℃와 5% CO2 환경에서 배양하였다.
데이터처리
실험에서 얻어진 모든 자료들의 통계분석은 GRAPHPAD prism(ver. 6)을 이용하여 One-way ANOVA를 실시하였고, 처리구 간의 유의성은 Duncan’s multiple range test에 의해 5%수준에서 검증하였다.
이론/모형
세포증식은 MTT assay 방법으로 측정하였다. MTT(3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyl tetrazolium bromide) 시약이 세포내로 흡수된 후, 미토콘드리아 내막에 존재하는 oxido-reductase의 효소 작용에 의해 환원되어 보라색의 formazan을 형성하게 되며, 그 발색정도를 흡광도로 측정함으로써 세포증식을 측정하는 방법이다.
수분, 지방, 단백질, 회분 및 콜레스테롤의 분석은 식품공전 및 AOAC법(AOAC, 2012)에 따라 실시하였다. 수분 함량은 105℃ 상압 가열건조법, 조지방은 Soxhlet 추출법, 회분은 550℃ 직접회화법, 조단백질은 Kjeldahl 법에 의하여 분석하였다. 콜레스테롤 함량은 시료 2.
수분, 지방, 단백질, 회분 및 콜레스테롤의 분석은 식품공전 및 AOAC법(AOAC, 2012)에 따라 실시하였다. 수분 함량은 105℃ 상압 가열건조법, 조지방은 Soxhlet 추출법, 회분은 550℃ 직접회화법, 조단백질은 Kjeldahl 법에 의하여 분석하였다.
성능/효과
IFN-γ발현은 백색레그혼 및 4계통 재래닭 모두에서 유의적으로 감소하였지만, 백색레그혼에 비하여 4계통 재래닭이 더 큰 억제효과를 나타내었고, 연산오계와 황봉이 가장 큰 억제효능을 보였다.
그러나 백색레그혼은 통계적 유의성은 없었지만, IL-4 유전자 발현을 증가시키는 경향을 나타냈다. IL-10의 발현 역시 재래닭 모두 대조군에 비하여 감소하는 경향을 나타내었고, 특히 황봉과 횡성약닭 가슴육 추출물이 각각 28.9% 및 27.7%를 억제하여 유의적인 효과를 보였다. 백색레그혼은 IL-10 유전자 발현을 증가시키는 경향을 보였다.
가슴육의 경우, 열량, 수분, 조단백질 및 조회분 함량은 품종 간 유의적인 차이는 없었으나, 조지방 함량의 경우에는 백색레그혼에 비하여 재래닭이 유의적으로 높았으며, 특히 횡성약닭과 연산오계의 함량이 다른 품종에 비하여 유의적으로 높았다(p<0.05).
대식세포 탐식작용은 현인흑계와 횡성약닭 가슴육에서 유의적으로 증가되었고, 염증 관련 사이토카인(IL-4, IL-10, IFN-γ) 유전자 발현은 백색레그혼에 비하여 4종의 재래닭에서 억제효과가 컸다. 결론적으로 4종류의 재래닭이 백색레그혼에 비하여 면역증진 효능이 높았으며, 특히 가슴육에서 효능이 있었다. 재래닭 품종 간에도 일반성분 및 면역조절능에 차이가 있는 것으로 나타났다.
그 결과, 4계통 재래닭 및 백색레그혼의 가슴육 추출물을 투여한 실험군은 모든 농도에서 통계적으로 유의한 대식세포 증식 효과를 나타내었으며(p<0.05), 품종간 유의적 차이는 없었다.
다리육의 경우도 열량, 수분, 조단백질 및 회분 함량에서 품종 간 유의적인 차이가 없었고, 조지방 함량에서 백색레그혼에 비하여 재래닭이 유의적으로 높았으며, 연산오계, 현인흑계 및 황봉이 유의적으로 높게 나타났다(p<0.05).
대식세포 탐식작용은 현인흑계와 횡성약닭 가슴육에서 유의적으로 증가되었고, 염증 관련 사이토카인(IL-4, IL-10, IFN-γ) 유전자 발현은 백색레그혼에 비하여 4종의 재래닭에서 억제효과가 컸다.
LPS에 의해 생성되는 NO는 인체에 염증반응을 유발하는 것으로 알려져 있다. 따라서 NO 생성 억제제의 개발은 이러한 질병치료제로서의 개발 가능성이 높으며, 이러한 관점에서 재래닭 가슴육 추출물은 면역 및 염증 관련 효능을 나타내는 것을 확인할 수 있었다.
다리육 추출물은 통계적으로 유의하지는 않았으나, 대식세포를 증식시키는 경향성은 확인할 수 있었다. 따라서 가슴육 추출물의 대식 세포 증식효과가 다리육보다 더 우월하였고, 재래닭과 백색 레그혼의 유의적 차이는 없었다.
05). 면역증진 효능을 측정하기 위하여 대식세포를 이용하여 실험한 결과는 재래닭 4종의 가슴육에서만 대식세포 증식 및 NO 억제 효능이 있었다. 대식세포 탐식작용은 현인흑계와 횡성약닭 가슴육에서 유의적으로 증가되었고, 염증 관련 사이토카인(IL-4, IL-10, IFN-γ) 유전자 발현은 백색레그혼에 비하여 4종의 재래닭에서 억제효과가 컸다.
TNF-α는 모든 군에서 유의적 효과가 없었다. 이상의 결과로 백색레그혼에 비하여 재래닭 가슴육은 LPS로 유도된 염증 관련 사이토카인 mRNA 발현을 억제하는 경향을 나타내며, 특히 황봉이 발현억제 효과가 가장 높은 것으로 확인되었다. 닭고기 부위별 면역활성 관련 연구는 없으나, Man et al.
일반성분 분석에서는 4종의 재래닭이 백색레그혼에 비하여 조지방 함량이 높았으며, 콜레스테롤 함량은 현인흑계가 다른 품종에 비하여 높았고 횡성약닭이 유의적으로 낮았다(p<0.05).
결론적으로 4종류의 재래닭이 백색레그혼에 비하여 면역증진 효능이 높았으며, 특히 가슴육에서 효능이 있었다. 재래닭 품종 간에도 일반성분 및 면역조절능에 차이가 있는 것으로 나타났다.
2B). 탐식된 형광 beads를 측정한 결과, 모든 시료 처리군에서 탐식작용이 증가하는 경향이 있었지만, 특히 현인흑계 및 횡성 약닭이 대조군에 비하여 각각 10.2% 및 11.7% 증가하여 대식세포의 탐식능을 유의적으로 향상시켜 면역활성을 증가시키는 것을 확인할 수 있었다(Fig. 2C).
특히 100 μg/mL 및 200 μg/mL 추출물에서 유의적 억제효능을 보였으며, 재래닭 품종 간 차이는 없었다(p<0.05).
질의응답
핵심어
질문
논문에서 추출한 답변
닭고기의 영양적 이점은?
8 kg으로 2배 정도 증가하였다(2015 농림축산식품 주요 통계). 닭고기는 다른 육류와 비교해서 콜레스테롤과 포화지방산 함량이 적고 열량은 낮은 반면, 단백질 함량은 높아서 타 육류에 비해 건강에 좋다고 알려져(Jaturasitha et al., 2008; Jeon et al.
재래닭의 특성은?
재래닭은 풍미가 우수하며, 특유의 쫄깃한 육질 특성을 가지고 있음에도 불구하고, 아직까지 재래닭에 대한 소비자 들의 관심이 크게 집중되지 못하고 있었다(Kim et al., 1999; Ahn and Park 2002).
닭고기 육수의 효능을 확인하기 위해 관찰한 것은?
, 2014). 본 연구에서는 재래닭 열수 추출물의 면역개선 효능을 검토하기 위하여 생쥐의 대식세포주인 RAW264.7 세포 증식에 미치는 영향을 관찰하였다. 대식세포는 탐식세포라고도 하며, 세균이나 바이러스 등 외부 병원균의 감염 시 다양한 염증인자 및 항균물질 분비, 식균작용 등을 통한 방어능력에 중요한 역할을 수행한다.
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