본 연구에서는 Candida albicans로 유도한 염증반응에 대해 스쿠알렌의 처치를 통해 염증반응을 경감시키는가에 대해 확인하였다. 실험동물은 (ICR계 생쥐) 각 실험군별 7마리씩을 사용하여 생체 내 실험을 하였다. Candida albicans-유도 염증인자 중 종양괴사인자-알파, 인터루킨-6, 산화질소는 ELISA kits 방법을 이용하여 관찰하였다. 실험을 통해 다음과 같은 결론을 얻었다. 1. Candida albicans를 감염시킨 군에서 1, 3일째 모두 신장조직 내에서의 산화질소 생성량을 감소시키는 것을 확인할 수 있었다 (p< 0.05). 2. 스쿠알렌 (80ml/kg)을 7일간 1일 1회 전 처치(복강투여)한 다음, Candida albicans를 감염시킨 군에서 3일째 군에서만 신장 조직 내에서의 종양괴사인자-알파 생성량을 감소시키는 것을 확인할 수 있었다(p< 0.05). 3. 스쿠알렌 (80m/kg)을 7일간 1일 1회 전 처치(복강투여)한 다음. Candida albicans를 감염 시킨 군에서 3일째 군에서만 신장 조직 내에서의 인터루킨-6 생성량을 감소시키는 것을 확인할 수 있었다(p< 0.05). 결론적으로 스쿠알렌이 Candida albicans-유도 염증인자들의 억제를 위해서는 예방적 차원에서 스쿠알렌을 공급하는 것이 효과가 있음을 알 수 있었다. 따라서 스쿠알렌 처치가 Candida albicans-유도 면역억제에 대해 회복 효과를 기대할 수 있을 것으로 사료된다.
본 연구에서는 Candida albicans로 유도한 염증반응에 대해 스쿠알렌의 처치를 통해 염증반응을 경감시키는가에 대해 확인하였다. 실험동물은 (ICR계 생쥐) 각 실험군별 7마리씩을 사용하여 생체 내 실험을 하였다. Candida albicans-유도 염증인자 중 종양괴사인자-알파, 인터루킨-6, 산화질소는 ELISA kits 방법을 이용하여 관찰하였다. 실험을 통해 다음과 같은 결론을 얻었다. 1. Candida albicans를 감염시킨 군에서 1, 3일째 모두 신장조직 내에서의 산화질소 생성량을 감소시키는 것을 확인할 수 있었다 (p< 0.05). 2. 스쿠알렌 (80ml/kg)을 7일간 1일 1회 전 처치(복강투여)한 다음, Candida albicans를 감염시킨 군에서 3일째 군에서만 신장 조직 내에서의 종양괴사인자-알파 생성량을 감소시키는 것을 확인할 수 있었다(p< 0.05). 3. 스쿠알렌 (80m/kg)을 7일간 1일 1회 전 처치(복강투여)한 다음. Candida albicans를 감염 시킨 군에서 3일째 군에서만 신장 조직 내에서의 인터루킨-6 생성량을 감소시키는 것을 확인할 수 있었다(p< 0.05). 결론적으로 스쿠알렌이 Candida albicans-유도 염증인자들의 억제를 위해서는 예방적 차원에서 스쿠알렌을 공급하는 것이 효과가 있음을 알 수 있었다. 따라서 스쿠알렌 처치가 Candida albicans-유도 면역억제에 대해 회복 효과를 기대할 수 있을 것으로 사료된다.
In the present study, whether squalene treatment relives inflammatory reactions induced by Candida albicans was checked. The experiment was conducted in vivo using seven experimental animals (ICR mice) per experimental group. Among C. albicans-induced inflammatory factors, TNF-${\alpha}$,...
In the present study, whether squalene treatment relives inflammatory reactions induced by Candida albicans was checked. The experiment was conducted in vivo using seven experimental animals (ICR mice) per experimental group. Among C. albicans-induced inflammatory factors, TNF-${\alpha}$, IL-6, and NO were observed using the ELISA kits method. Through the experiment, the following conclusions were obtained. 1. In the group infected with C. albicans, it could be identified that squalene treatment was inducing NO generation in renal tissues both on the 1st and 3rd days (p < 0.05). 2. In the group pre-treated(intraperitoneal administration) with SQ (80ml/kg) once per day for seven days and infected with C. albicans, it could be identified that squalene treatment was inducing TNF-${\alpha}$ generation in renal tissues only on the 3rd day(p < 0.05). 3. In the group pre-treated(intraperitoneal administration) with SQ (80ml/kg) once per day for seven days and infected with C. albicans, it could be identified that squalene treatment was inducing IL-6 generation in renal tissues only on the 3rd day(p < 0.05). In conclusion, it could be seen that for squalene to suppress C. albicans-induced inflammatory factors, preemptively supplying SQ should be effective. Therefore, effects for recovery from C. albicans-induced immunodepression can be expected from SQ treatment.
In the present study, whether squalene treatment relives inflammatory reactions induced by Candida albicans was checked. The experiment was conducted in vivo using seven experimental animals (ICR mice) per experimental group. Among C. albicans-induced inflammatory factors, TNF-${\alpha}$, IL-6, and NO were observed using the ELISA kits method. Through the experiment, the following conclusions were obtained. 1. In the group infected with C. albicans, it could be identified that squalene treatment was inducing NO generation in renal tissues both on the 1st and 3rd days (p < 0.05). 2. In the group pre-treated(intraperitoneal administration) with SQ (80ml/kg) once per day for seven days and infected with C. albicans, it could be identified that squalene treatment was inducing TNF-${\alpha}$ generation in renal tissues only on the 3rd day(p < 0.05). 3. In the group pre-treated(intraperitoneal administration) with SQ (80ml/kg) once per day for seven days and infected with C. albicans, it could be identified that squalene treatment was inducing IL-6 generation in renal tissues only on the 3rd day(p < 0.05). In conclusion, it could be seen that for squalene to suppress C. albicans-induced inflammatory factors, preemptively supplying SQ should be effective. Therefore, effects for recovery from C. albicans-induced immunodepression can be expected from SQ treatment.
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문제 정의
병원성이 강하고 가장 빈번히 동물에 질병을 유발시키는 C. albicans-유도 염증반응에 대해 생쥐를 이용한 생체 내 실험을 통해 C. albicans에 의해 유도 되어지는 염증반응 억제에 대한 스쿠알렌의 처치가 염증반응을 경감시키는지 여부를 알아보고자 하였다.
본 실험에서도 스쿠알렌을 실험동물인 생쥐에 C. albicans 감염 7일 전에 처치한 in vivo 실험에서 염증반응 인자들의 감소 결과를 관찰하였는데, 결과는 같았다. 하지만 C.
본 연구에서는 Candida albicans로 유도한 염증반응에 대해 Squalene의 처치를 통해 염증반응을 경감시키는가에 대해 확인하였다.
본 연구의 목적은 Candida 속 진균 중에서도 피부, 구강 및 질 점막에 기생하고 있다가 숙주동물의 저항력을 약화시키는 수술 및 다른 질병으로 인하여 항균제 및 steroid제 면역억제제 등을 오랫동안 사용하여 비정상적인 신체로 인해 면역기능이 저하되어 기회감염(opportunistic infection)을 일으킨다.
제안 방법
5N HCl, Sigma) 100㎕를 첨가하였다. 15분간 실온에서 방치한 후, 540nm 파장에서 microplate reader (Molecular Devices, Sunnyvale, CA, USA)를 이용하여 nitrite 농도를 측정하였다. 이 때 Sodium nitrate (0.
C. albicans-유도 염증인자 중 TNF-α, IL-6, NO는 ELISA kits 방법을 이용하여 관찰하였다.
그 후, 정지 용액을 각 well에 100㎕씩 넣고 30분 이내에 세포배양액에 분비되어 kit내 반응시약과 반응한 TNF-α, IL-6 분비량을 각각 측정하였다(microplate reader:450㎚, wavelength correction:570㎚, USA).
의 형태로서 Griess시약을 이용하여 측정하였다. 상층액을 96 well plates에 각 분주한 후 Griessreagent (0.8% sulfanilamide/0.75% N-(naphthyethylene)diamine in 0.5N HCl, Sigma) 100㎕를 첨가하였다. 15분간 실온에서 방치한 후, 540nm 파장에서 microplate reader (Molecular Devices, Sunnyvale, CA, USA)를 이용하여 nitrite 농도를 측정하였다.
생쥐는 23±2℃, 습도는 45±5%로 유지된 사육실에서 폴리카보네이트로 제작된 사육장 (40×25×17㎝)에서 사육하였으며, 사료 (제일제당 제품)와 급수는 자유롭게 섭취하도록 하였다.
생쥐에 C. albicans를 감염(복강투여, 2×106/㎏)시킨 후, IL-6 생성량을 신장 조직을 통해 오염 후 1일, 3일 경과 후 관찰하였다.
생쥐에 C. albicans를 감염(복강투여, 2×106/㎏)시킨 후, NO 생성량을 신장 조직을 통해 1일, 3일째 경과 후 관찰하였다.
생쥐에 C. albicans를 감염(복강투여, 2×106/㎏)시킨 후, TNF-α 생성량을 신장 조직을 통해 감염 후 1일, 3일 경과 후 관찰하였다.
신장 조직에서 생성된 NO의 양은 NO2-의 형태로서 Griess시약을 이용하여 측정하였다. 상층액을 96 well plates에 각 분주한 후 Griessreagent (0.
실험군는 다음과 같다. 실험군 1은 대조군, 실험군 2는 C. albicans만 투여한 군(1, 3일째), 실험군 3은 SQ (80㎖/㎏)를 7일간 복강투여(1일 1회)한 후, C. albicans를 투여한 군(1일, 3일째), 실험군 4는 SQ (80㎖/㎏)를 3일간 복강투여(1일 1회)한 후, C. albicans를 투여한 군(1일, 3일째), 실험군 5는 C. albicans를 투여한 후 SQ(80㎖/㎏)를 투여한 군(1일, 3일째)으로 각 실험군별, 생쥐 7마리씩을 사용하였다(Table 1).
대상 데이터
C. albicans NIH A-207은 전남대학교 생화학교실(광주, 한국)로부터 공급받아 Sabouraud dextrose broth(BBL Microbiology Systems, Cockeysville, MD)에서 교반을 하면서 28°C에서 배양하였다.
본 실험에 사용한 시약은 Squalene (SQ)는 (주)세모(순도 99%이상), Sodium nitrate (Sigma, USA), sulfanilamide(Sigma, USA), Tris (Bio Basic, 미국)Ethylene diamine tetraacetic acid (EDTA, Sigma, USA), Sodium chloride(NaCl, Junsei, Japan), Triton-X 100 (Junsei, Japan), Sodium nitrate (Sigma, USA), TNF-α, IL-6에 대한 단 클론항체(monoclonal antibody)의 ELISA Kits(R&D systems, MIN, USA)는 Bioneer (Daejeon, Korea)에서 구입하여 사용하였다.
본 실험에 사용한 실험동물은 다물 실험동물센터 (대전, 한국)에서 생산, 공급하고 있는 ICR계 생쥐 (체중 25-35 g)를 사용하였다. 생쥐는 23±2℃, 습도는 45±5%로 유지된 사육실에서 폴리카보네이트로 제작된 사육장 (40×25×17㎝)에서 사육하였으며, 사료 (제일제당 제품)와 급수는 자유롭게 섭취하도록 하였다.
실험동물은 (ICR계 생쥐) 각 실험군별 7 마리씩을 사용하여 in vivo로 실험을 하였다. C.
데이터처리
각 실험군별 통계학적 유의성은 개인용 컴퓨터 통계프로그램인 Statisitcal Analsis System (SAS)를 이용한 ANOVA test에 의하여 검정하였고, 각 p값은 0.05 미만의 것을 유의한 수준으로 고려하였다.
이론/모형
TNF-α, IL-6 등의 사이토카인의 측정 방법은 Bioneer 회사의 메뉴얼에 따랐다.
성능/효과
1. C. albicans를 감염시킨 군에서 1, 3일째 모두 신장조직 내에서의 NO 생성량을 감소시키는 것을 확인할 수 있었다(p < 0.05).
2. SQ (80㎖/㎏)를 7일간 1일 1회 pre-treated(복강투여)한 다음, C. albicans를 감염시킨 군에서 3일째 군에서만 신장조직 내에서의 TNF-α 생성량을 감소시키는 것을 확인할 수 있었다(p < 0.05).
3. SQ (80㎖/㎏)를 7일간 1일 1회 pre-treated(복강투여)한 다음, C. albicans를 감염 시킨 군에서 3일째 군에서만 신장조직 내에서의 IL-6 생성량을 감소시키는 것을 확인할 수 있었다(p < 0.05).
SQ (80㎖/㎏)를 7일간 1일 1회 pre-treated(복강 투여)한 다음, C. albicans를 감염시킨 군에서 1, 3일째 모두 신장 조직 내에서의 NO 생산량을 감소시키는 것을 관찰할 수 있었다(p < 0.05)(Fig. 1).
SQ (80㎖/㎏)를 7일간 1일 1회 pre-treated(복강투여)한 다음, C. albicans를 감염 시킨 군에서 3일째 군에서만 신장 조직 내에서의 IL-6 생성량을 감소시키는 것을 관찰할 수 있었다(p < 0.05)(Fig. 3).
SQ (80㎖/㎏)를 7일간 1일 1회 pre-treated(복강투여)한 다음, C. albicans를 감염시킨 군에서 3일째 군에서만 신장 조직 내에서의 TNF-α 생성량을 감소시키는 것을 관찰할 수 있었다(p < 0.05)(Fig. 2).
결론적으로 Squalene이 C. albicans-유도 염증인자들의 억제를 위해서는 예방적 차원에서 SQ를 공급하는 것이 효과가 있음을 알 수 있었다. 따라서 SQ 처치가 C.
본 연구에서는 Candida 속 진균 중에서도 피부, 구강 및 질의 점막에 기생하고 있다가 숙주 동물의 저항력을 약화시키는 영양장애, 만성소모성질병, 수술 및 다른 질병으로 인하여 항균제 및 steroid제, 면역억제제 등을 오랫동안 사용하여 면역기능이 저하되어 기회감염(opportunistic infection)을 일으킨다. 따라서 병원성이 강하고, 가장 빈번히 질병을 유발시키는 C. albicans-유도염증 반응에 대해 mouse kidney tissue를 스쿠알렌을 이용한 in vivo 실험을 통해 C. albicans-유도 급성 염증반응을 경감시키는 것을 관찰하였다. 본 연구를 위해 선행연구를 살펴보았다.
본 연구결과에서 SQ (80㎖/㎏)를 7일간 1일 1회 pre-treated(복강투여)한 다음, C. albicans를 감염 시킨 군에서 3일째 군에서만 신장 조직 내에서의 IL-6 생성량을 감소시키는 것을 관찰할 수 있었다(p < 0.05).
본 연구를 통해서 C. albicans는 신장조직에 급성염증 반응을 유도하는 것을 알 수 있었다. 하지만 C.
본 연구에서도 C. albicans를 감염시킨 군에서 1, 3일째 모두 신장 조직 내에서의 NO 생산량을 감소시키는 것을 관찰할 수 있었는데, 오가피를 처치한 경우에 NO 농도가 감소한다는 것과 결과와 같았다.
본 연구의 결과에서 SQ (80㎖/㎏)를 7일간 1일 1회 pre-treated(복강투여)한 다음, C. albicans를 감염시킨 군에서 3일째 군에서만 신장 조직 내에서의 TNF-α 생성량을 감소시키는 것을 관찰할 수 있었다(p < 0.05)
albicans는 신장조직에 급성염증 반응을 유도하는 것을 알 수 있었다. 하지만 C. albicans-유도 급성 염증반응에 대해 스쿠알렌의 처치가 농도 및 투여 방식에 따라 염증반응 정도를 억제시키는 것을 실험으로 알 수 있었다.
후속연구
결론적으로, 본 연구를 통해 스쿠알렌이 예방적 측면에서 C. albicans-유도 면역억제에 대해 회복 효과를 기대할 수 있을 것으로 사료된다.
albicans-유도 염증인자들의 억제를 위해서는 예방적 차원에서 SQ를 공급하는 것이 효과가 있음을 알 수 있었다. 따라서 SQ 처치가 C. albicans유도 면역억제에 대해 회복 효과를 기대할 수 있을 것으로 사료된다.
최종적으로 향후에는 in vitro 실험과 같은 다양한 연구가 이루어져야 할 것이다.
질의응답
핵심어
질문
논문에서 추출한 답변
Candida albicans란 무엇인가?
Candida albicans(이하, C. albicans)는 정상인의 경우 소화기관이나 질 점막 및 피부 등에서 나타나는 가장 흔한 병원성균주로 인체의 정상세균총으로 Candida 속중 가장 독성이 강한 균종으로 알려져 왔다. 또한 면역억제제 복용, 스테로이드나 항생제 남용, 비타민 결핍증, 만성소모성질병, 후천성면역결핍 증후군환자들에서 자주 발견이 된다1).
Candida albicans는 어떠한 환자들에게서 주로 발견되는가?
albicans)는 정상인의 경우 소화기관이나 질 점막 및 피부 등에서 나타나는 가장 흔한 병원성균주로 인체의 정상세균총으로 Candida 속중 가장 독성이 강한 균종으로 알려져 왔다. 또한 면역억제제 복용, 스테로이드나 항생제 남용, 비타민 결핍증, 만성소모성질병, 후천성면역결핍 증후군환자들에서 자주 발견이 된다1).
사이토카인의 종류에는 어떠한 것들이 있는가?
사이토카인은 림포카인으로 인체의 대식세포, 림프구, 호 중구, 섬유아세포, vascular endothelial cells 등의 다양한 세포 내에서 분비되어 신체내의 염증 작용, 조혈 작용 및 대사에 관여하는 물질로, 인터루킨(IL), 표피성장인자(EGF), 세포독성인자, 활성 또는 저해인자, 콜로닉자극인자, 종양괴사인자 알파(TNF-α), 인터페론(IFN), erythropoietin, 혈소판유래 증식인자(PDGF) 등의 다양한 종류가 알려져 있다6,7).
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