[논문]알긴산에 의한 콘택트렌즈의 습윤성과 단백질 흡착 효과

고나영; 이경문; 이현미

doi:10.5012/jkcs.2017.61.6.352

알긴산에 의한 콘택트렌즈의 습윤성과 단백질 흡착 효과
The Effect of Wettability and Protein Adsorption of Contact Lens by Alginic Acid 원문보기

대한화학회지 = Journal of the Korean Chemical Society, v.61 no.6, 2017년, pp.352 - 358

고나영 (대구가톨릭대학교 안경광학과) , 이경문 ((주)비젼사이언스) , 이현미 (대구가톨릭대학교 안경광학과)

초록
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하이드로겔 콘택트렌즈의 습윤성 향상과 단백질 흡착량 감소을 위해 천연다당류인 알긴산을 첨가하였다. 하이드로겔 콘택트렌즈는 2-Methacryloyloxyethyl phosphorylcholine(MPC)와 NVP(N-Vinyl-2-pyrrolidone)와 같은 다양한 단량체를 이용하여 제작하였다. 알긴산 첨가방법은 초기 혼합 방법과 IPN (Interpenetrating Polymer Network) 방법을 사용하였다. 콘택트렌즈의 특성 평가를 위해 접촉각, 산소 투과도 및 단백질 흡착 량 등을 측정하였다. 산소 투과도와 습윤성 등 물리적 특성이 알긴산으로 IPN으로 처리 한 시료가 IPN으로 처리하지 않은 시료보다 높았다. 단백질 흡착은 알긴산의 첨가에 의해 감소되었고 IPN처리를 통해 더욱 감소되었다. 특히, MPC 및 NVP를 함유한 콘택트렌즈는 단백질 흡착을 상당히 감소시켰다. 따라서 알긴산이 콘택트렌즈의 기능 향상에 미치는 영향을 확인 하였다.

Abstract ▼ AI-Helper

The addition of alginic acid, a natural polysaccharide, to improve the wettability and the reduction of protein adsorption of hydrogel contact lenses. Hydrogel contact lenses were manufactured with various monomers such as 2-methacryloyloxyethyl phosphorylcholine (MPC) and NVP (N-Vinyl-2-pyrrolidone). Alginic acid was added by by the initial mixing method and the interpenetrating polymer networks(IPN) method. Properties of contact lens such as contact angle, oxygen permeability, and protein adsorption amount were evaluated. The oxygen permeability and wettability of the IPN-treated alginate samples were higher than those of the samples that were not treated with IPN. The physical properties were improved as the concentration of IPN-treated alginic acid increased. Protein adsorption decreased by the addition of alginic acid and further decreased with IPN. In particular, contact lenses containing MPC and NVP significantly decreased protein adsorption. Therefore, the effect of alginate on the functional improvement of contact lens was confirmed.

주제어

표/그림 (10)

그림 Figure 1. Scheme of the sequential semi-IPN formation for H1(upper) and HA1(lower) sample.
표 Table 1. Nomenclatures and percent compositions of sample (%)
그림 Figure 2. Water contents distribution of sample.
표 Table 2. Nomenclatures of sample after 24 hours IPN process*
그림 Figure 3. Contact angle of sample.
$Table 3. Refractive index (RI) of sample$ 표 Table 3. Refractive index (RI) of sample
그림 Figure 4. Oxygen permeability of sample.
표 Table 4. Oxygen permeability (OP) of sample Unit : 10^-9 (cm/sec) (mlO₂/ml×mmHg)
표 Table 5. Amount of protein absorption of sample Unit: mg/g
그림 Figure 5. The amount of protein adsorption.

AI 본문요약
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문제 정의

¹⁶IPN은 각각의 개별 네트워크가 개별 속성을 유지함으로 강도 또는 인성과 같은 속성의 시너지 향상이 가능하며, 광범위하게 제어 가능한 물리적 특성을 제공한다.^17,18본 연구에서는 천연 생체 고분자인 알긴산을 이용하여 콘택트렌즈 착용시 눈 건강과 직결되는 습윤성과 산소투과율을 높여주며, 단백질 흡착양을 줄여서 콘택트렌즈의 기능을 향상시키고자 하였다.

제안 방법

단백질 흡착된 각 시료를 PBS로 2회 세정 후 Sodium Dodecyl Sulfate(SDS)를 dd-H₂0에 3%로 녹인 용액에 넣고 오븐에서 15분간 95 ^oC로 가열한 후 vortex로 3분간 천천히 흔들어 시료에 붙은 단백질을 탈착시킨다. Agilent사의 Cary 60 UV-vis를 사용하여 흡광도를 측정하였으며, 단백질의 최대 흡수 파장인 280 nm에서 흡광도 값을 확인하였다. 몰 흡광계수 ε은 3.
IPN 하였을 때와 IPN하지 않았을 때의 접촉각을 알긴산농도에 따라 비교하였다. H보다 H1의 접촉각은 5.
본 연구에서는 알긴산을 첨가하여 중합한 시료의 단백질 흡착량과 알긴산의 농도별로 IPN을 한 각 시료의 단백질 흡착량을 알아보았으며, 단백질 흡착량에 대한 결과는 Table 5와 Fig. 5에 나타내었다.
습윤성은 콘택트렌즈를 착용 시 눈의 편안함을 결정하는 요인으로 접촉각을 통해 알 수 있으며, 접촉각이 클수록 소수성을 나타내고 접촉각이 작을수록 친수성을 나타낸다. 본 연구에서는 액체 속에 있는 시료 아래로 공기 방울을 주입하여 액체와 고체 사이의 접촉각을 측정하는 방식인 captive bubble method²¹을 사용하여 습윤성을 알아보았으며, 1%, 3%, 5% 알긴산에 24시간 IPN 한 시료의 접촉각을 Fig. 3에 나타내었다.
즉, 알긴산을 초기 시료에 첨가하여 중합하는 방법과, 중합 후에 다시 알긴산을 이용하여 2차로 IPN방법을 사용하였다. 실험에 사용 할 시료는 HEMA와 AIBN, EGDMA을 기본 혼합으로 MPC와 NVP, 알긴산을 각각 첨가하여 혼합한 후 캐스트 몰드법(cast mould)으로 100 ^oC에서 1시간 동안 열중합하였다(Table 1). 제작된 시료는 Phosphate-buffered saline(PBS)용액(pH 7.
알긴산으로 IPN 하기 전의 시료 H, HA, HMN, HMNA에 대해 함수율을 측정하였으며, 각 알긴산의 농도에 따라 시료를 24시간동안 IPN 한 후의 함수율을 구하였다. 각 시료에 대한 함수율은 Fig.
4)에서 24시간 수화시켰다. 알긴산은 dd-H₂0에 1%, 3%, 5%의 용액으로 제조하였으며, 각각의 농도에 시료를 담궈 24시간동안 IPN을 실시하였다. 각 시료에 대한 명명은 HEMA를 첨가하였을 경우 H, 알긴산은 A, NVP는 N, MPC는 M으로 명명하였으며, IPN한 알긴산의 농도에 따라 1%는 1,3%는 3, 5%는 5로 명명하였다.
제작된 시료의 함수율(EWC)과 굴절률, 접촉각, 산소투과율을 각각 측정하였으며, 각 측정항목에 대해 한 시료당 5회 측정한 값을 평균하였다.
하이드로겔 콘택트렌즈에 알긴산을 첨가하여 물성을 평가하고, 알긴산으로 IPN을 실시하여 알긴산 농도에 따른 물성 변화를 살펴보았다. 초기 시료에 알긴산을 첨가시에는 콘택트렌즈의 물리적 특성을 약간 향상시켰으며, 단백질의 흡착량은 많이 감소되었다.

대상 데이터

단백질은 인간의 알부민과 형상 및 화학적 성질이 유사한 Bovine Sailne Albumin(BSA)로 실험을 하였으며 Aldrich사 제품을 사용하였다. 단백질의 흡착은 BSA를 PBS에 5 mg/ml의 용액으로 제조하여 바이알에 2 ml씩 넣고 각각의 시료를 BSA 용액에 넣어 37 ^oC에서 24시간동안 incubation하여 단백질을 흡착시킨다.
본 실험의 주재료인 2-Hydroxyethylmethacrylate(HEMA), 알긴산(Alginic acid), 2-Methacryloyloxyethyl phosphorylcholine(MPC), N-Vinyl-2-pyrrolidone(NVP), 가교제인 Ethylenglycoldimethacrylate(EGDMA)은 Aldrich사 제품을 사용하였으며, 개시제인 2,2-Azobis(isobutyronitrile)(AIBN)은 JUNSEI사의 제품을 사용하였다. 알긴산의 혼합 방법은 두가지 방법으로 진행하였다.
사용된 폴라로그래픽 셀(polarographic cell)의 곡률반경은 8.7 mm를 사용하였으며, 35 oC ± 0.5 oC의 온도를 유지하였다.

이론/모형

굴절률의 측정기준은 ISO 18369-4:2006을 기준으로 하였으며, PBS용액에 24시간 수화시킨 시료를 ABBE Refractometer(ATAGO DR-A1)을 사용하여 측정하였다.
산소투과율(DK/t)은 ISO 18369-4:2006을 기준으로 측정하였으며, 폴라로그래픽 방법으로 Rehder사의 201T를 사용하였다. 사용된 폴라로그래픽 셀(polarographic cell)의 곡률반경은 8.
은 오븐에서 16시간 건조된 시료의 무게를 나타낸다. 접촉각 측정은 Kruss GMBH사의 DSA30을 사용하여 24시간 수화 된 시료를 Captive bubble 방법으로 측정하였다.
알긴산의 혼합 방법은 두가지 방법으로 진행하였다. 즉, 알긴산을 초기 시료에 첨가하여 중합하는 방법과, 중합 후에 다시 알긴산을 이용하여 2차로 IPN방법을 사용하였다. 실험에 사용 할 시료는 HEMA와 AIBN, EGDMA을 기본 혼합으로 MPC와 NVP, 알긴산을 각각 첨가하여 혼합한 후 캐스트 몰드법(cast mould)으로 100 ^oC에서 1시간 동안 열중합하였다(Table 1).
함수율은 ISO 18369-4:2006의 중량측정법을 사용하였으며 아래 식을 사용하여 함수율을 산출하였다.

성능/효과

24시간동안 IPN 한 H의 단백질 흡착량은 1% 알신산 사용시에는 28.8%, 5% 알긴산을 사용하였을 때에는 46.3%로 크게 감소하였다. HA는 IPN하는 알긴산의 농도에 따라 단백질 흡착량이 27.
초기 시료에 알긴산을 첨가시에는 콘택트렌즈의 물리적 특성을 약간 향상시켰으며, 단백질의 흡착량은 많이 감소되었다. 2차로 알긴산을 이용한 IPN을 거친 시료는 함수율, 습윤성, 산소투과율은 높아져 콘택트렌즈가 갖추어야 할 특성이 크게 향상되었으며, 단백질의 흡착 또한 감소하였다. 또한 IPN하는 알긴산의 농도가 높을수록 물리적 성질이 향상되었다.
H와 HA 그리고 HMN와 HMNA를 비교했을 때 알긴산이 첨가된 시료의 접촉각이 낮아졌으며, 고함수성과 고습윤성을 지닌 MPC와 NVP를 첨가한 HMN와 HMNA는 H와 HA보다 접촉각이 약 10° 가량 낮아졌다.
시료 H를 IPN 한 시료의 굴절률은 알긴산 농도를 1%에서 5%로 변화시 거의 변화 없었으며, IPN 한 시료 HA도 알긴산 농도가 1%에서 5%로 변화시에 거의 변화가 없었다. MPC와 NVP가 포함된 시료인 HMN을 알긴산에 1%에서 5%로 IPN 하였을 때 굴절률은 MPC와 NVP가 포함되지 않은 H에 IPN한 시료의 굴절률 보다 0.044에서 0.055의 차이로 감소하였고, 알긴산에 IPN을 하지 않은 H와 HMN의 차이는 0.036으로 알긴산에 IPN을 하였을 때의 굴절률이 더 감소하였다. 모든 시료에서 IPN을 하지 않은 시료 보다 약간 감소하는 경향성은 보이나 감소폭이 매우 적었다(Table 3).
02×10⁻⁹로 나타났다. MPC와 NVP를 첨가한 시료 HMN의 산소투과율(DK/t)이 H에 비해 60.2% 증가 하였으며, 알긴산을 첨가한 시료 HMNA의 산소투과율이 HMN에 비해 10.6% 증가하였다.
384로 가장 낮게 나타났다. MPC와 NVP의 첨가로 인해 굴절률은 현저하게 감소되었으며, 알긴산 첨가에 의한 굴절률은 감소되는 경향을 보였으나 큰 변화는 없었다. 굴절률과 함수율의 결과 값을 살펴보면 반비례 관계에 있음을 알 수 있다.
알긴산은 dd-H₂0에 1%, 3%, 5%의 용액으로 제조하였으며, 각각의 농도에 시료를 담궈 24시간동안 IPN을 실시하였다. 각 시료에 대한 명명은 HEMA를 첨가하였을 경우 H, 알긴산은 A, NVP는 N, MPC는 M으로 명명하였으며, IPN한 알긴산의 농도에 따라 1%는 1,3%는 3, 5%는 5로 명명하였다. IPN한 각 시료에 대한 명명은 Table 2에 나타내었으며 IPN과정을 scheme으로 나타내었다(Fig.
따라서 알긴산이 콘택트렌즈의 기능 향상에 도움이 됨을 확인하였다.
6%만큼 감소하였으며 HA5 시료가 가장 감소율이 크게 나타났다. 또한 HMN의 경우, 5% 알긴산으로 IPN하였을때에 45.7%의 단백질 흡착량 감소를 보였으며, HMNA는 36.1%만큼 감소하였다. HA3을 제외한 모든 시료의 단백질 흡착량은 알긴산의 농도가 높아짐에 따라 감소하는 경향을 나타냈다.
2차로 알긴산을 이용한 IPN을 거친 시료는 함수율, 습윤성, 산소투과율은 높아져 콘택트렌즈가 갖추어야 할 특성이 크게 향상되었으며, 단백질의 흡착 또한 감소하였다. 또한 IPN하는 알긴산의 농도가 높을수록 물리적 성질이 향상되었다.
5% 증가하였다. 또한 MPC와 NVP를 첨가한 경우에도 HMN의 함수율은 58.7%인 반면 알긴산으로 추가적인 IPN 한 HMNA는 61.3%로 나타났다. 이와 같은 결과로 보아 알긴산의 첨가는 함수율을 증가시키는데 기여함을 알 수 있었다.
이러한 결과는 습윤성을 가진 MPC와 알긴산이 함량이 증가됨으로써 콘택트렌즈의 표면에 윤활층 생성하고¹⁴ 알긴산의 농도가 증가 됨으로 써 접촉각의 감소가 더욱 두드러진 것으로 본다. 또한 알긴산의 보습 특성이 하이드로겔의 표면에 충분한 막을 형성하여 표면 안정화가 이루어지며,²³ IPN 시 알긴산의 농도가 증가함에 따른 함수율의 증가로 접촉각이 낮아지는 것으로 판단된다.
H와 HA 그리고 HMN와 HMNA를 비교했을 때 알긴산이 첨가된 시료의 접촉각이 낮아졌으며, 고함수성과 고습윤성을 지닌 MPC와 NVP를 첨가한 HMN와 HMNA는 H와 HA보다 접촉각이 약 10° 가량 낮아졌다. 또한 함수율이 가장 높은 HMNA의 접촉각이 가장 낮게 나타났으며, 이는 함수율이 높을수록 습윤성이 증가한다는 기존 연구와 일치함을 알 수 있었다.²²
036으로 알긴산에 IPN을 하였을 때의 굴절률이 더 감소하였다. 모든 시료에서 IPN을 하지 않은 시료 보다 약간 감소하는 경향성은 보이나 감소폭이 매우 적었다(Table 3).
본 연구에 사용한 시료 중에서 HMNA5는 접촉각이 31.7°로 가장 낮은 값을 나타냄으로써 습윤성이 가장 좋다는 것을 확인하였다.
본 연구에서 IPN을 하지 않은 시료 중 함수율이 가장 높은 HMNA의 산소투과율이 가장 높은 것으로 보아 산소투과율은 함수율의 영향을 받으며, 함수율이 증가하면 산소투과도 또한 증가함을 알 수 있었다.²⁴ 따라서 함수율을 증가시키는 알긴산의 첨가가 산소투과율에 영향을 준다고 판단된다.
치환율이 높은 가교 결합에서는 밀도가 높아짐으로 인해 팽윤현상이 거의 없다고 보고되며²⁰ 따라서 굴절률이 가장 높은 시료 H에서 가장 낮은 함수율이 나타난 것임을 알 수 있다. 시료 H를 IPN 한 시료의 굴절률은 알긴산 농도를 1%에서 5%로 변화시 거의 변화 없었으며, IPN 한 시료 HA도 알긴산 농도가 1%에서 5%로 변화시에 거의 변화가 없었다. MPC와 NVP가 포함된 시료인 HMN을 알긴산에 1%에서 5%로 IPN 하였을 때 굴절률은 MPC와 NVP가 포함되지 않은 H에 IPN한 시료의 굴절률 보다 0.
알긴산 농도별로 IPN한 결과 H1의 시료가 37.48%로 가장 낮은 함수율을 나타내었고, HMNA5의 함수율이 61.61%로 가장 높게 나타났다.
알긴산에 IPN 하지 않은 H의 산소투과율(DK/t)은 5.34×10−9로 가장 낮은 산소투과율을 나타냈으며, HA는 5.43×10−9, HMN은 13.42×10−9, HMNA는 15.02×10−9로 나타났다.
알긴산에 IPN하지 않은 시료 H, HA, HMN, HMNA의 단백질 흡착량은 각각 10.10 mg/g, 9.84 mg/g, 7.95 mg/g, 7.43 mg/g로 MPC, NVP, 알긴산을 모두 첨가한 HMNA가 가장 낮게 나타났다. 이는 렌즈의 물리적 특성에 영향을 받음으로⁶ 친수성에 따라 단백질의 흡착을 감소시키며²⁷이 등²⁸의 연구에서 HEMA와 알긴산을 공중합한 하이드로겔의 단백질 부착이 감소된다는 결과로 본 연구에서도 확인 할 수 있었다.
그러나 MPC와 NVP가 포함된 시료와 그렇지 않은 시료에서는 많은 함수율의 차이가 있다. 이는 고함수 단량체인 NVP와 고습윤 단량체인 MPC가 포함됨으로써 함수율이 크게 향상되었으며, 상대적으로 알긴산에 의한 함수율의 변화는 낮은 것으로 나타났다.
하이드로겔 콘택트렌즈에 알긴산을 첨가하여 물성을 평가하고, 알긴산으로 IPN을 실시하여 알긴산 농도에 따른 물성 변화를 살펴보았다. 초기 시료에 알긴산을 첨가시에는 콘택트렌즈의 물리적 특성을 약간 향상시켰으며, 단백질의 흡착량은 많이 감소되었다. 2차로 알긴산을 이용한 IPN을 거친 시료는 함수율, 습윤성, 산소투과율은 높아져 콘택트렌즈가 갖추어야 할 특성이 크게 향상되었으며, 단백질의 흡착 또한 감소하였다.
4%로 증가되었다. 초기 시료에 알긴산을 첨가하지 않은 시료 H와 HMN은 IPN 하였을 때 알긴산에 농도에 따라 산소투과율은 크게 증가하였으나 초기 시료에서 알긴산이 첨가된 HA와 HMNA은 IPN 하였을 때 알긴산의 농도에 따라 산소투과율이 증가하는 경향을 보였으나 큰 변화는 나타나지 않았다.
초기 중합 시에도 알긴산을 첨가하지 않았고 추가적인 IPN을 하지 않은 시료인 H의 함수율은 35.9%로 나타났다. HA와 같이 중합 시 알긴산을 넣었을 경우에는 함수율이 38.
초기 중합시 알긴산을 포함한 콘택트렌즈인 HA와 MNNA의 경우 알긴산의 농도를 변화시키면서 IPN과정을 거쳐도 알긴산의 농도가 1%일때에만 산소투과율이 증가하였고 3% 이상에서는 변화가 거의 없는 것으로 나타났다. 이것은 알긴산의 농도가 증가되어도 중합체 내부로 알긴산이 더 이상 네크워크를 형성하지 못한 것으로 판단된다.
1% 감소하였다. 한편 HMN의 접촉각은 알긴산 농도에 따라 최소8.7%에서 최고 14.6%감소하였으며 HMNA의 접촉각의 경우에는 알긴산의 농도에 따라 HMNA1는 5.5%, HMNA5는 13.2%로 각각 나타났다. 본 연구에 사용한 시료 중에서 HMNA5는 접촉각이 31.

질의응답

핵심어	질문	논문에서 추출한 답변
	콘택트렌즈는 어떤 방식으로 눈 건강에 악영향을 끼치는가?	그러나 착용시간과 착용주기를 지키지 않거나 잘못된 관리 방법으로 인해 눈 건강에 많은 문제점들이 발생하고 있다.2 콘택트렌즈는 각막 위 눈물층에 놓여있어 눈물 속 성분에 의해 칼슘, 지방, 단백질 등 많은 침착물이 침전되며,3 이들은 착용감 저하, 시력저하, 건성안, 세균감염, 거대유두각막염 등 여러 가지 안질환을 유발시키고, 심할 경우 합병증을 유발시킨다.4 특히 단백질 중 구조적 안정성이 낮은 성질의 알부민과 양전하를 띄어 내부적으로 결합력이 강한 성질의 라이소자임이 콘택트렌즈 침전물 중 약 60~90%의 많은 양을 차지하고 있으며5 이러한 단백질의 침착으로 인해 습윤성과 산소투과율에 영향을 미치며 단백질의 흡착은 렌즈의 재질이나 물리적 특성에 많은 영향을 받는다.
	콘택트렌즈 중합에서 물리적 결합의 특징은?	고분자 중합시 크게 화학적 결합과 물리적 결합으로 분류되는데 콘택트렌즈의 중합에서는 둘 이상의 서로 다른 모노머 간에 상호 결합으로 전자쌍이 공유되는 화학적 공유결합이 있으며, 물리적 결합은 Interpenetrating polymer networks(IPN)이 있다. Interpenetrating polymer networks 방법은 두 개의 서로 다른 고분자 네트워크 조합으로 구성되어 있으며 이들 사이에는 공유 결합이 없다. 이러한 방식으로 가교 결합된 중합체를 함유하는 물리적 혼합물이 생긴다.
	콘택트렌즈의 단백질의 침착으로 인해 눈에 미치는 영향은?	2 콘택트렌즈는 각막 위 눈물층에 놓여있어 눈물 속 성분에 의해 칼슘, 지방, 단백질 등 많은 침착물이 침전되며,3 이들은 착용감 저하, 시력저하, 건성안, 세균감염, 거대유두각막염 등 여러 가지 안질환을 유발시키고, 심할 경우 합병증을 유발시킨다.4 특히 단백질 중 구조적 안정성이 낮은 성질의 알부민과 양전하를 띄어 내부적으로 결합력이 강한 성질의 라이소자임이 콘택트렌즈 침전물 중 약 60~90%의 많은 양을 차지하고 있으며5 이러한 단백질의 침착으로 인해 습윤성과 산소투과율에 영향을 미치며 단백질의 흡착은 렌즈의 재질이나 물리적 특성에 많은 영향을 받는다.6 습윤성은 콘택트렌즈 표면에 누액의 젖음 양상을 결정하여 눈물층유지를 하며 함수율과 밀접한 관계를 가지고 습윤성과 산소투과율이 낮을 경우 저산소증에 의한 각막부종, 각막지각 소실 등이 있으며, 눈물층의 변화로 인해 건성안 현상이 나타날 수 있다.

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저자의 다른 논문 :

표제어: PCR

동의어: Packet Collision Rate

용어 설명 출처 목록 (6)

용어 설명: PCR은 세균 특이성이 있는 primer를 이용하여 적은 수의 세균이 있을지라도 쉽게 검출할 수 있는 유용한 방법이며, 이를 이용하여 구강 내 치면세균막이나 타액에서 직접 세균을 검출할 수 있게 되었다[8].

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