[논문]H1299 인체폐암세포주에서 황기와 사삼의 항암 시너지 효과

이지민; 김홍재; 최영현; 지규용; 박신형

doi:10.15188/kjopp.2017.04.31.2.111

H1299 인체폐암세포주에서 황기와 사삼의 항암 시너지 효과
Synergistic Anticancer Effect of Astragalus Membranaceus and Adenophora Triphylla Var. Japonica in H1299 Human Lung Carcinoma Cells 원문보기

동의생리병리학회지 = Journal of physiology & pathology in Korean Medicine, v.31 no.2, 2017년, pp.111 - 117

이지민 (동의대학교 한의과대학 병리학교실 & 동의대학교 한의학연구소) , 김홍재 (동의대학교 한의과대학 생화학교실) , 최영현 (동의대학교 한의과대학 생화학교실) , 지규용 (동의대학교 한의과대학 병리학교실 & 동의대학교 한의학연구소) , 박신형 (동의대학교 한의과대학 병리학교실 & 동의대학교 한의학연구소)

Abstract ▼ AI-Helper

The anti-cancer effects of Astragalus membranaceus (AM) and Adenophora triphylla var. japonica (AT) have been described. Each of their effects mainly focused on the immunopotentiating and apoptosis inducing-ability in several cancer cell lines. Although the combination of AM and AT is occasionally used in Chinese medicine to treat lung cancers, their synergistic effect has not been proved yet. This study was designed to verify whether AM combined with AT exhibits a synergistic anti-cancer effect in H1299 human lung carcinoma cells. The ethanol extracts of AM (EAM) and AT (EAT) showed only slight cytotoxicity in H1299 cells when treated alone. However, the combination of EAM and EAT markedly suppressed the cell growth measured by MTT assay and trypan blue counting assay. In addition, co-treatment of EAM with EAT significantly reduced the colony-forming ability compared with single treatment of EAM or EAT in H1299 cells. We demonstrated that the synergistic effect of AM and AT was related with apoptosis induction proved by an accumulation of chromatin condensation, annexin V-positive cells, sub-G1 phase population, and cleaved-PARP expression, which were not observed by single treatment of EAM or EAT. In conclusion, the combination of EAM and EAT exhibited superior anti-cancer activity in H1299 cells than single treatment of EAM or EAT. We suggest that EAM combined with EAT might be a novel therapeutic option for lung cancer patients, and provide a reference for the development of more effective combination of Chinese herbs to treat lung cancer.

주제어

AI 본문요약
AI-Helper

문제 정의

본 연구에서는 폐암에 대한 황기와 사삼의 항암시너지 효과를 검증하였다. 한의학적으로 폐는 氣를 운행시키고, 습기를 머금고있어야 건강하며, 건조함을 싫어하는 장기로서 중의학의 다양한 임상연구에 따르면 폐암의 발병원인 역시 氣와 陰液이 虛해져 나타나는 것이므로 폐암치료에 益氣養陰法을 적극적으로 응용해왔다^6,7).

제안 방법

본 연구는 황기와 사삼의 항암활성을 밝힌 기존의 임상 혹은전임상 데이터와 폐암치료에 황기와 사삼을 필두로 한 益氣養陰法을 적극적으로 응용해온 기존의 중의임상연구를 바탕으로 디자인되었다. 황기와 사삼의 항암 시너지효과를 조사하기 위해 구체적으로 H1299 인체폐암세포주에 황기와 사삼을 단독 혹은 병합처리한 후 세포사멸효과를 in vitro 상에서 비교 검증하였으며, 유의한 결과를 얻었기에 보고하는 바이다.

대상 데이터

본 실험에 사용된 황기와 사삼은 주식회사 누리허브에서 구입한 것으로 화순한약재유통에서 대한민국약전을 기준으로 표준품 확인 및 순도 시험을 거친 것이다. 황기 에탄올 추출물(ethanol extract of Astragali membranaceus, EAM) 및 사삼 에탄올 추출물 (ethanol extract of Adenophora triphilla var.
본 연구에 사용된 H1299 인체 폐암세포주는 서울대학교 약학대학 이호영교수님으로부터 제공받았다. 세포의 배양을 위해 90%의 RPMI 1640에 10% FBS와 1% PS를 첨가하여 사용하였으며, 세포는 37℃, 5% CO₂ 조건하에서 배양하였다.

데이터처리

모든 실험 결과는 mean±SD으로 표시하였으며, 통계적 유의성 검증은 Student’s t-test를 이용하여 P <0.05인 것을 유의성있다고 판단하였다.

성능/효과

4). 이들 결과는 황기와 사삼을 단독으로 투여했을 때보다 병용투여했을 때 폐암 치료에 보다 효과적일 것임을 시사하며, 실제 중의학에서 폐암 치료 시 益氣養陰法을 바탕으로 황기와 사삼을 주요한 약재로 병용투여하고 있는 데에 전임상적 근거를 제시하고 있다고 하겠다. 그러나 본 연구는 황기와 사삼의 항암 시너지 효과가 어떤 분자적 기전을 통해 일어나는 것인지 명확히 밝히지 못했으므로 향후 그 기전에 대한 연구가 심도 깊게 진행되어야 할 것으로 사료된다.
H1299 인체폐암세포에서 황기와 사삼 병용처리의 항암시너지효과를 조사하여 다음과 같은 결론을 얻었다. 황기와 사삼 단독처리에 비해 병용처리 시 H1299 세포의 생존율과 colony 형성이 현저히 감소하였고, 이러한 결과는 황기와 사삼의 병용처리 시 H1299 세포의 apoptosis 유발이 현저히 증가하였기 때문으로 판단된다.

후속연구

이상의 결과는 황기와 사삼의 병용처리에 의해 폐암에 대한 항암효과를 높일 수 있으며, 향후 새로운 폐암 치료제 개발에 있어서 한약재의 combination effect와 그 기전을 연구해야 할 필요성이 있음을 시사하는 것으로 사료된다.

질의응답

핵심어	질문	논문에서 추출한 답변
	황기의 생리활성작용에는 어떠한 것들이 있는가?	에서 上品의 약으로 분류되어 있으며, 性味가 甘溫하고 脾肺經에 작용하여 生用하면 益氣固表, 利水消腫하는 효능이 있고, 炙用하면 補脾益氣하는 효능이 있다8). 황기의 생리활성작용으로서 항산화효과, 항바이러스효과, 면역증강효과, 간기능보호효과, 세포성장효과 등 다양한 효능이 알려져 있다9,10). 특히 황기의 항암작용에 대해 에서는 황기가 一切癌과 癰疽 및肺癰 등을 치료한다고 하였으며11), 홍 등12-14)은 황기약침이 면역작용을 증강시키며 발암과정을 억제함을 보고하였다.
	황기란 무엇인가?	황기(Astragali membranaceus)는 콩과에 속한 다년생초본인 Atragalus membranceus Bunge의 周皮를 벗긴 뿌리를 건조한 것이다. 에서 上品의 약으로 분류되어 있으며, 性味가 甘溫하고 脾肺經에 작용하여 生用하면 益氣固表, 利水消腫하는 효능이 있고, 炙用하면 補脾益氣하는 효능이 있다8).
	사삼의 효능에는 어떠한 것들이 있는가?	japonica Hara 및 동속근연식물의 뿌리를 건조한 것이다. 성미가 苦微寒하고 肺胃經에 작용하여 肺胃陰不足으로 인한 乾咳, 口渴에 養陰淸肺, 祛痰止咳하는 효능이 있다8). 그 동안 사삼의 생리활성 작용으로서 면역조절효과, 천식억제효과, 항염증효과, 항산화효과 등이 보고되어 왔다22-25).

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용어 설명: PCR은 세균 특이성이 있는 primer를 이용하여 적은 수의 세균이 있을지라도 쉽게 검출할 수 있는 유용한 방법이며, 이를 이용하여 구강 내 치면세균막이나 타액에서 직접 세균을 검출할 수 있게 되었다[8].

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