[논문]상피성 난소암 세포에서 프로폴리스 추출물의 세포 증식 저해 효과

양가람; 윤경미; 오현호; 김민성; 황태호; 안원근

doi:10.5352/jls.2017.27.7.834

상피성 난소암 세포에서 프로폴리스 추출물의 세포 증식 저해 효과
Growth Inhibitory Effect of Extracts of Propolis on Epithelial Ovarian Cancer Cells 원문보기

생명과학회지 = Journal of life science, v.27 no.7 = no.207, 2017년, pp.834 - 839

양가람 (부산대학교 한의학전문대학원) , 윤경미 (부산대학교 한의학전문대학원) , 오현호 (부산대학교 한의학전문대학원) , 김민성 (부산대학교 해양생물기술연구소) , 황태호 (부산대학교 의학전문대학원 약리학교실) , 안원근 (부산대학교 한의학전문대학원)

초록
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Propolis는 꿀벌들이 나무로부터 수집한 천연물로서 항산화, 항염증, 항암 효과를 가지고 있어 전통의학에서 사용되고 있으며, 이러한 생리활성은 여러 가지 유용성분들이 혼합된 것과 관련이 있다. 난소암은 우리나라 여성에서 두 번째로 발병률이 높은 암이다. 대부분의 난소암 환자들은 초기에 수술적 기법과 항암요법에 우수하게 반응하지만, 항암제 내성에 의한 재발이 발생하게 되면 항암요법제에 의한 반응률이 매우 저조하여 높은 사망률을 보인다. 따라서, 난소암의 높은 치사율을 극복하기 위한 새로운 치료제 및 항암보조제의 개발이 필요하다. 본 연구에서는 인체 상피성 난소암 세포주인 A2780를 이용하여 Austalian propolis의 항암 효과와 활성기전을 조사하였다. Propolis 추출물은 농도 의존적으로 난소암 세포의 증식을 억제했으며. Flow cytometric 분석을 통해 G0/G1기에서 세포 주기 억제와 apoptosis 유도 효과를 확인하였다. 이러한 결과는 Austalian propolis의 인간 난소암에 대한 예방과 치료를 위한 보조제로서의 가능성을 제시한다.

Abstract ▼ AI-Helper

Propolis is a natural product collected from plants by honey bees product used extensively in traditional medicine for its antioxidant, anti-inflammatory, immunomodulatory and anti-cancer effects. Propolis exhibits a broad spectrum of biological activities because it is a complex mixture of natural substances. Ovarian cancer is the second most common newly diagnosed cancer from all cancers among women in Korea and the leading cause of death from gynecological malignancies. While most ovarian cancer patients initially respond to surgical debulking and chemotherapy, patients later succumb to the disease. Thus, there is an urgent need to test novel therapeutic agents to counteract the high mortality rate associated with ovarian cancer. In this study, we investigated the anti-cancer properties and the active mechanism of Australian propolis in human epithelial ovarian cancer A2780 cells. Our data revealed that propolis showed a cytotoxic activity in a dose-dependent manner. Flow cytometric analysis for cell cycle arrest and apoptosis using propidium iodide staning and annexin V-FITC indicated that propolis could induce cycle arrest in the G0/G1 phase and apoptosis in a dose-dependent manner on human epithelial ovarian cancer cells. These results suggest that the Australian propolis is potential alternative agent on ovarian cancer prevention and treatment.

주제어

AI 본문요약
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문제 정의

본 연구는 인체 상피성 난소암 세포주인 A2780 세포를 대상으로 세포증식 억제 효과, 세포주기 억제 및 apoptosis의 유도를 분석하여 propolis에 의한 암세포 증식 저해 효과를 확인하여, 난소암의 예방, 재발 억제 및 항암화학요법 치료의 보조제로서 근거를 제시하고자 수행하였다.

제안 방법

Propolis 처리에 의한 세포 증식 억제 효과가 세포주기에 미치는 영향을 확인하기 위해, propolis를 농도별로 24시간 처리 후 propodium iodide으로 염색하여 flow cytometry를 이용한 세포주기 분석을 하였다. 그 결과 150 ug/ml 과 200 ug/ml 실험군에서 각각 66.
Propolis에 의한 상피성 난소암 세포 증식억제 효과가 apoptosis에 의해 유도되는 것인지를 확인하기 위해, Annexin V-propodium iodide 염색을 이용하여 apoptosis가 일어난 세포 비율을 측정하였다. 분석결과, 150 ug/ml의 농도까지 early apoptosis가 농도 의존적으로 유도되다가 200 ug/ml 농도에서 early apoptosis와 late apoptosis 세포 비율이 각각 35.
Propolis의 암세포주의 증식에 대한 성장억제활성을 확인하기 위하여, 난소암 세포주인 A2780 세포를 대상으로 세포성장을 측정하였다. Propolis를 50, 100, 150, 200 ug/ml의 농도로 24시간 처리하였을 때, control 그룹보다 propolis의 농도가 증가함에 따라 각각 79.

대상 데이터

본 실험에 사용한 propolis는 mothernest (Seven Hills, NSW, Australia)에서 구입하였으며, 400 mg/ml 동결건조 추출물을 시료로 사용하였다.
본 연구에 사용한 난소암세포(A2780 cells)는 American Type Culture Collection (ATCC, Manassas, VA,USA)에서 분양 받았으며, 10%(v/v) fetal bovine serum (FBS; Gibco, Grand Island, NY, USA)와 1% antibiotic-antimycotic (Gibco)가 포함된 RPMI (Gibco) 배지에서 37℃, 5% CO₂ 조건으로 배양하였다. 배양된 세포는 2일 간격으로 Dulbecco’s phosphate-buffered saline (DPBS; Gibco)로 2회 세척한 후 0.

데이터처리

모든 실험결과에 대한 분석은 통계 프로그램인 SPSS 23(SPSS, IL, USA)의 Student’s t-test로 검정하였으며, p<0.05인 경우 통계적으로 유의한 차이가 있다고 판정하였다. 실험결과는 mean±S.

성능/효과

Propolis의 암세포주의 증식에 대한 성장억제활성을 확인하기 위하여, 난소암 세포주인 A2780 세포를 대상으로 세포성장을 측정하였다. Propolis를 50, 100, 150, 200 ug/ml의 농도로 24시간 처리하였을 때, control 그룹보다 propolis의 농도가 증가함에 따라 각각 79.89±4.82%, 61.27±2.29%, 46.38±2.97%, 37.16±1.69%, 28.37±0.59%로 농도 의존적으로 세포의 증식이 억제되는 유의적인 차이를 보였다. 이상의 결과는 murine colon 26-L5, murine B16-BL6 melanoma 및 human HT-1080 fibrosarcoma cell lines에 대한 네덜란드산 propolis의 methanol 추출물의 세포 증식 억제 효과와, human hormone-sensitive LNCap prostate cancer cell line에 대한 브라질산 green propolis와 tumour necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand (TRAIL)의 병합 요법을 통한 apoptosis 유도 효과가 본 연구결과와 유사하게 나타났다[22, 33].
Propolis 처리에 의한 세포 증식 억제 효과가 세포주기에 미치는 영향을 확인하기 위해, propolis를 농도별로 24시간 처리 후 propodium iodide으로 염색하여 flow cytometry를 이용한 세포주기 분석을 하였다. 그 결과 150 ug/ml 과 200 ug/ml 실험군에서 각각 66.83±1.58%, 79.93±0.46%로 농도 의존적으로 G0/G1기의 세포군집이 증가하는 유의적인 차이를 보였다. 세포주기는 인산화 효소인 CDK와 cyclin의 활성에 의해 조절되는데 cyclin E와 CDK2에 의해 G1기에서 S기로의 진행이 조절된다[19].
본 연구의 결과는 유방암 세포주 MCF-7과 MDA-MB-231에 대한 Chinese propolis 에탄올 추출물의 세포 주기 억제와 intrinsic apoptosis 유발 효과와 유사한 결과를 나타내며, 교모세포종 SF-295에 대한 Brazilian propolis의 항암 활성과도 일치한다[17]. 이와 같은 사실은 수집원이 되는 지역적 특성과 관계없이 propolis가 다양한 세포주에서 apoptosis를 유발하여 항암활성을 나타내는 것으로 판단된다.

후속연구

이와 같은 사실은 수집원이 되는 지역적 특성과 관계없이 propolis가 다양한 세포주에서 apoptosis를 유발하여 항암활성을 나타내는 것으로 판단된다. 따라서 본 연구에서는 Australian propolis가 상피성 난소암 세포주인 A2780 세포에서 apoptosis를 유도하는 과정을 확인하였으며 새로운 천연물 유래 항암활성 후보물질을 연구하는 데 있어 의미가 있는 자료로 사용될 수 있을 것이다. 앞으로 이러한 연구결과를 실질적인 화학 항암요법 보조제로 적용하기 위해서는 Australian propolis의 정확한 성분분석 및 동물모델에서 항암활성 확인 등 확실한 증거를 제시해야 할 것으로 사료된다.
따라서 본 연구에서는 Australian propolis가 상피성 난소암 세포주인 A2780 세포에서 apoptosis를 유도하는 과정을 확인하였으며 새로운 천연물 유래 항암활성 후보물질을 연구하는 데 있어 의미가 있는 자료로 사용될 수 있을 것이다. 앞으로 이러한 연구결과를 실질적인 화학 항암요법 보조제로 적용하기 위해서는 Australian propolis의 정확한 성분분석 및 동물모델에서 항암활성 확인 등 확실한 증거를 제시해야 할 것으로 사료된다.

질의응답

핵심어	질문	논문에서 추출한 답변
	난소암이란?	난소암은 우리나라의 여성에서 자궁 경부암에 이어 두 번째로 발생빈도가 높으며, 난소암의 90% 이상이 난소표면의 상피세포에서 발생하는 암으로 부인암 중 가장 높은 치사율을 보인다[30]. 상피성 난소암은 복부 내의 원격 부위로 광범위하게 전이가 일어날 때까지 증상이 없는 경우가 대부분을 차지하기 때문에 75% 이상이 진행된 병기에서 진단이 된다[6, 18, 27].
	난소암의 주된 치료법은?	상피성 난소암은 복부 내의 원격 부위로 광범위하게 전이가 일어날 때까지 증상이 없는 경우가 대부분을 차지하기 때문에 75% 이상이 진행된 병기에서 진단이 된다[6, 18, 27]. 난소암의 주된 치료법은 종양 감축술과 더불어 파클리탁셀(paclitaxel), 플래티늄(platinum)의 복합 항암요법을 시행하는 것이다[2, 20]. 최근 수술기법과 항암요법제의 발전으로 초기반응률은 80-90%로 양호하지만 대부분의 경우 항암제 내성에 의한 재발이 일어나 5년 생존율은 30% 정도로 낮다[16].
	천연물에는 다양한 화학성분을 함유하고 있는 데 그 중 Propolis란 무엇인가?	천연물은 항암 및 항균활성을 포함하여 생리활성을 가지는 다양한 화학성분을 함유하고 있다[36]. Propolis는 꿀벌들이 나무에서 분비되는 resin을 수집하여 체내에서 대사하여 생성한 물질로서, 플라보노이드(flavones, flavanones, flavonols, dihydroflavonols, chalcones), phenolic acid, esters와 같은 150여 가지 이상의 폴리페놀 화합물을 포함하고 있다[13, 28]. Propolis는 수집원이 되는 지역적 특성에 의해 포함된 화합물이 다르며, 브라질의 red propolis의 경우 새롭게 발견된 3가지를 포함하여 43종의 활성 물질이 분리된 바 있다[1, 4, 15].

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저자의 다른 논문 :

표제어: PCR

동의어: Packet Collision Rate

용어 설명 출처 목록 (6)

용어 설명: PCR은 세균 특이성이 있는 primer를 이용하여 적은 수의 세균이 있을지라도 쉽게 검출할 수 있는 유용한 방법이며, 이를 이용하여 구강 내 치면세균막이나 타액에서 직접 세균을 검출할 수 있게 되었다[8].

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