표고버섯으로부터 유래한 eritadenine (EA)은 혈중 low density lipoprotein (LDL), triglyceride (TG), phospholipid를 감소시키는 물질이다. 최근 저희 연구팀은 in vitro 연구에서 EA가 angiotensin converting enzyme (ACE)의 활성을 저해함을 밝혔다. 본 연구에서는 EA와 EA 함유한 표고버섯균사체 고체배양 효소추출물(EA-LEMCEE)이 본태성 고혈압 쥐 SHR의 혈압을 낮추었음을 보고한다. EA 및 EA-LEMSCEE는 인체 탯줄 혈관내피세포 EA.hy926 세포의 ACE 활성을 억제하였다. EA-LEMSCEE는 SHR의 수축기 및 이완기 혈압을 Control 처리구에 비해 유의성 있게 낮추어 처리 5주에는 Positive control인 captopril (CP) 처리와 비슷한 혈압감소 효과를 나타내었다. EA-LEMCE는 LEMSCEE에 비해 수축기 및 이완기 혈압을 감소시켰지만 유의성은 없었다. EA- LEMSCEE는 renin과 ACE 활성을 Control 처리에 비해 유의성 있게 억제하였고, angiotensin II (Ang II) 함량을 감소시켜, 처리 5주 후에 이러한 CP의 효과와 유사하였다. 또한 EA-LEMCEE는 LEMCEE에 비해 유의성 있게 renin 및 ACE 활성을 억제하였고 및 Ang II 함량을 감소시켰다. 이와 같은 결과는 EA 및 EA-LEMCEE는 본태성 고혈압 SHR의 renin과 ACE 활성을 억제하여 혈압을 낮추었고, EA 및 EA-LEMSCEE는 인체 고혈압을 낮출 수 있음을 의미한다.
표고버섯으로부터 유래한 eritadenine (EA)은 혈중 low density lipoprotein (LDL), triglyceride (TG), phospholipid를 감소시키는 물질이다. 최근 저희 연구팀은 in vitro 연구에서 EA가 angiotensin converting enzyme (ACE)의 활성을 저해함을 밝혔다. 본 연구에서는 EA와 EA 함유한 표고버섯균사체 고체배양 효소추출물(EA-LEMCEE)이 본태성 고혈압 쥐 SHR의 혈압을 낮추었음을 보고한다. EA 및 EA-LEMSCEE는 인체 탯줄 혈관내피세포 EA.hy926 세포의 ACE 활성을 억제하였다. EA-LEMSCEE는 SHR의 수축기 및 이완기 혈압을 Control 처리구에 비해 유의성 있게 낮추어 처리 5주에는 Positive control인 captopril (CP) 처리와 비슷한 혈압감소 효과를 나타내었다. EA-LEMCE는 LEMSCEE에 비해 수축기 및 이완기 혈압을 감소시켰지만 유의성은 없었다. EA- LEMSCEE는 renin과 ACE 활성을 Control 처리에 비해 유의성 있게 억제하였고, angiotensin II (Ang II) 함량을 감소시켜, 처리 5주 후에 이러한 CP의 효과와 유사하였다. 또한 EA-LEMCEE는 LEMCEE에 비해 유의성 있게 renin 및 ACE 활성을 억제하였고 및 Ang II 함량을 감소시켰다. 이와 같은 결과는 EA 및 EA-LEMCEE는 본태성 고혈압 SHR의 renin과 ACE 활성을 억제하여 혈압을 낮추었고, EA 및 EA-LEMSCEE는 인체 고혈압을 낮출 수 있음을 의미한다.
Eritadenine (EA), derived from Lentinus edodes (LE), reduced low-density lipoprotein (LDL), triglyceride (TG), and phospholipids in bloods, and fatty acid depositions in animals and humans. Previously, we reported that EA inhibited angiotensin-converting enzyme (ACE) activity in vitro. Now, we repor...
Eritadenine (EA), derived from Lentinus edodes (LE), reduced low-density lipoprotein (LDL), triglyceride (TG), and phospholipids in bloods, and fatty acid depositions in animals and humans. Previously, we reported that EA inhibited angiotensin-converting enzyme (ACE) activity in vitro. Now, we report that EA reduced blood pressures in spontaneous hypertension rats (SHR). EA-containing LE mycelial culture enzyme extract (EA-LEMSCEE) was prepared from LE mycelial solid cultures and the hot-water extract of LE fruit bodies. Both EA and EA-LEMSCEE inhibited ACE activity in immortalized human umbilical endothelial cells (EA.hy926). EA-LEMSCEE treatments (7.5 mg/kg, 22.5 mg/kg) significantly reduced systolic and diastolic blood pressure in SHR. At five weeks of treatment, EA-LEMSCEE treatment significantly reduced systolic and diastolic blood pressure, similar to the positive control (captopril, CP; 4 mg/kg) treatment. In addition, the LEMSCEE without EA decreased systolic and diastolic blood pressures compared to the control, but not significant. EA-LEMSCEE decreased renin and ACE activities, and angiotensin II (Ang II) contents in SHR compared to the control. After five weeks of treatment, the effect of EA-LEMCEE was similar to that of CP. These results indicate that EA and EA-LEMSCEE reduce blood pressure by inhibiting the renin and ACE activity of SHR. Furthermore, these results imply that EA or EA-LEMSCEE could be used as an antihypertension agent in humans.
Eritadenine (EA), derived from Lentinus edodes (LE), reduced low-density lipoprotein (LDL), triglyceride (TG), and phospholipids in bloods, and fatty acid depositions in animals and humans. Previously, we reported that EA inhibited angiotensin-converting enzyme (ACE) activity in vitro. Now, we report that EA reduced blood pressures in spontaneous hypertension rats (SHR). EA-containing LE mycelial culture enzyme extract (EA-LEMSCEE) was prepared from LE mycelial solid cultures and the hot-water extract of LE fruit bodies. Both EA and EA-LEMSCEE inhibited ACE activity in immortalized human umbilical endothelial cells (EA.hy926). EA-LEMSCEE treatments (7.5 mg/kg, 22.5 mg/kg) significantly reduced systolic and diastolic blood pressure in SHR. At five weeks of treatment, EA-LEMSCEE treatment significantly reduced systolic and diastolic blood pressure, similar to the positive control (captopril, CP; 4 mg/kg) treatment. In addition, the LEMSCEE without EA decreased systolic and diastolic blood pressures compared to the control, but not significant. EA-LEMSCEE decreased renin and ACE activities, and angiotensin II (Ang II) contents in SHR compared to the control. After five weeks of treatment, the effect of EA-LEMCEE was similar to that of CP. These results indicate that EA and EA-LEMSCEE reduce blood pressure by inhibiting the renin and ACE activity of SHR. Furthermore, these results imply that EA or EA-LEMSCEE could be used as an antihypertension agent in humans.
4A, Fig. 4B) 하였기 때문에, EA의 항고혈압효과를 확인하기 위해 SHR에 EA-LEMSCEE를 6주간 강제 경구투여하고 1주에 1회 혈압을 측정하였다(Fig. 5A, Fig.
EA는 ZORBAX Eclipse XDB-C18 column (4.6×250 mm, 5μm)이 부착된 Agilent Technologies 1200 series HPLC를 사용하여 gradient system으로 분석하였다. 즉, 0~15 min에 99.
EA의 항고혈압 효과를 조사하기 위해 혈장 RAS에 관련되는 인자들의 활성을 분석하였다. RAS는 동맥의 혈압조절에 가장 중요한 인자이며, 이 시스템의 결함은 고혈압 발병에 주요한 요인 중 하나이다[2, 16].
하지만, 이들 연구는 rat에서 분리한 ACE에 EA를 처리하여 얻은 in vitro 결과로, 생체세포나 동물에서 수행된 적은 없다. 본 연구에서는 EA.hy926 세포에서 EA에 의한 ACE의 변화를 측정하였다. 먼저 EA의 무독성량을 조사하기 위하여 EA를 농도 별로 처리하여 세포 viability를 측정하였다(Fig.
시료 EA-LEMSCEE에 대한 세포 viability와 ACE 활성은 시료를 EA 함량으로 0. 15, 30, 45 μg/ml을 처리하고 EA의 세포 viability와 ACE 활성 측정과 동일한 방법으로 측정하였다.
수축기혈압이 150 mmHg 이상인 SHR을 사용하였다. 실험군은 6마리를 처리군으로 하여 총 5개 처리군으로 나누었다[Negative control (NC), Positive control (Captopril, CP; 4 mg/kg),LEMSCEE (EA 0 mg/kg), T1 (EA-LEMSCEE: EA 7.5 mg/kg),T2 (EA-LEMSCEE; EA 22.5 mg/kg)]. 증류수에 용해한 시료를 처리군 SHR에 경구용 주사기를 사용하여 500 μl를 6주간 매일 강제 경구 투여 하였으며, 고혈압 Control 처리는 증류수 500μl를 경구 투여하였다.
이 추출 농축물을 60% ethanol 농도로 2회 추출하여 다시 원심분리(7,000 rpm)한 후 농축(Brix 30, <60℃) 하였다. 이 60% ethanol 추출농축을 90% ethanol 농도로 60% ethanol 농도 추출과 동일한 방법으로 3회 추출하고 농축(Brix 4)하여 고농축된 EA를 함유하는 표고버섯자실체 추출물(EAcontaining Lentinus edodes fruit body hot-water extract;EA-LEFHWE)을 제조하였다. LEMSCEE에 EA-LEFHWE를일정량 혼합하여 세포실험 및 동물실험용 EA-LEMSCEE시료를 제조하였다.
시중에서 구입한 생 표고버섯(5 kg)에 20 l 증류수(w/v)를 가하여 고압 열수추출(121℃, 1 hr; Steam stelizer ST-65G, JeioTech., Daejeon, Korea)하여 여액과 침전물을 분리하고, 침전물은 다시 증류수 10 l를 가하여 고압추출 하고 여액을 분리하였다. 이들 여액을 합하여 원심분리(7,000 rpm)한 후 농축(Brix 30, <60℃)하였다.
데이터처리
Data는 Mean ± S.E.M.으로 나타내었으며, GraphPad Prism,version 5.01 (GraphPad Software, Inc., CA, USA)을 이용하여 one-way ANOVA로 분석하였다. p value는 <0.
이론/모형
EA.hy926 세포주의 생육에 대한 EA의 영향은 Cell Counting Kit-8 (CCK-8, Dojindo, Japan)을 이용해 제조회사의 manual procedure에 따라 측정하였다. 간략히, 96 well plate에 EA.
혈압측정은 CODA™ Mouse & Rat Tail-Cuff Blood Pressure System (Kent Scientific CO., CT, USA)를 이용하여 tail cuff method로 측정하였다[11]. Acclimation cycle 5 회, regular cycle 10회 2반복으로 측정하였다.
성능/효과
결론적으로 EA-LEMCEE는 in vitro 실험에서 EA.hy926 세포에서 ACE 활성을 억제하였고, 본태성 고혈압 쥐인 SHR을 이용한 in vivo 연구에서 SHR의 수축기 및 이완기 혈압을 유의성 있게 낮추었고, RAS 관련 인자를 조절(renin과 ACE 활성 억제, Ang II 함량 감소)하여 혈압을 감소시켰다. 이러한 EALEMCEE의 효과는 CP의 효과와 유사하였다.
또한 처리 5주에 EA를 함유하지 않은LEMSCEE 처리는 수축기 및 이완기 혈압을 NC 처리보다 낮추었지만, 그 효과는 EA-LEMSCEE 보다는 낮았다. 따라서 EA-LEMSCEE의 효과는 EA와 LEMSCEE의 시너지 효과가 있음을 의미한다.
처리 5주에서의 그 효과는 CP (4mg/kg) 처리와 유사하였고, EA-LEMSCEE T1과 T2 처리 간에는 유의성이 없었다. 또한 처리 5주에 EA를 함유하지 않은LEMSCEE 처리는 수축기 및 이완기 혈압을 NC 처리보다 낮추었지만, 그 효과는 EA-LEMSCEE 보다는 낮았다. 따라서 EA-LEMSCEE의 효과는 EA와 LEMSCEE의 시너지 효과가 있음을 의미한다.
Kabir 등[8]은 표고버섯에 의한 항혈압효과에 관한 과학적 증거를 제시하고 있지만, 그 이후에는 혈압과 표고버섯의 상관관계에 관한 직접적 연구결과는 전무한 상태이다. 본 연구 결과는 표고버섯에 함유된 EA (건조 표고버섯, 3.17~6.33 mg/g)[4]가 표고버섯의 항혈압효과에 주요한 인자라는 것을 시사한다.
후속연구
이러한 EALEMCEE의 효과는 CP의 효과와 유사하였다. 따라서 EALEMCEE는 고혈압 원인 중 ACE 활성에 의한 고혈압 환자의 예방 및 치료에 활용할 수 있을 것으로 생각된다.
질의응답
핵심어
질문
논문에서 추출한 답변
표고버섯의 다당체는 어떤 효과가 있는가?
표고버섯의 다당체는 항산화효과[23], 항염증효과[23], 항암효과[6], 면역조절효과[6], 항바이러스 효과[24]가 있음이 밝혀졌다. 또한 표고버섯 균사체 배양물도 HIV, 간염바이러스등에 대한 항바이러스효과[9]와 항암효과[15]가 있는 것으로 보고되었다.
본 논문의 연구팀은 in vitro 연구에서 eritadenine이 어떤 효소의 활성을 저해함을 밝혔나?
표고버섯으로부터 유래한 eritadenine (EA)은 혈중 low density lipoprotein (LDL), triglyceride (TG), phospholipid를 감소시키는 물질이다. 최근 저희 연구팀은 in vitro 연구에서 EA가 angiotensin converting enzyme (ACE)의 활성을 저해함을 밝혔다. 본 연구에서는 EA와 EA 함유한 표고버섯균사체 고체배양 효소추출물(EA-LEMCEE)이 본태성 고혈압 쥐 SHR의 혈압을 낮추었음을 보고한다.
eritadenine은 어떤 물질인가?
표고버섯으로부터 유래한 eritadenine (EA)은 혈중 low density lipoprotein (LDL), triglyceride (TG), phospholipid를 감소시키는 물질이다. 최근 저희 연구팀은 in vitro 연구에서 EA가 angiotensin converting enzyme (ACE)의 활성을 저해함을 밝혔다.
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