[논문]도축장 출하차량에서 Lawsonia intracellularis 분포율 조사

이수지; 이희선; 서지수; 김태겸; 정재교

doi:10.7853/kjvs.2018.41.4.245

[국내논문] 도축장 출하차량에서 Lawsonia intracellularis 분포율 조사
Distribution of Lawsonia intracellularis in livestock transport car of slaughterhouse, Korea 원문보기

韓國家畜衛生學會誌 = Korean journal of veterinary service, v.41 no.4, 2018년, pp.245 - 250

이수지 (전라북도동물위생시험소 남부지소) , 이희선 (전라북도동물위생시험소 남부지소) , 서지수 (전라북도동물위생시험소 남부지소) , 김태겸 (전라북도동물위생시험소 남부지소) , 정재교 (전라북도동물위생시험소 남부지소)

Abstract ▼ AI-Helper

Lawsonia intracellularis is the pathogenic agent of porcine proliferative enteritis (PPE). The bacterial pathogen infects the intestinal crypt cells which causes hyperplasia of the infected cells and leads to the process of intestinal pathogenesis. PPE includes some clinical maninfestations, including acute hemorrhagic diarrhea with sudden death in growing pigs and porcine intestinal adenomatosis, to a chronic diarrhea with reduced productivity of the infected pigs. The purpose of the present studies were carried out to determine L. intracellularis in livestock transport car of slaughterhouse. Distribution of L. intracellularis in livestock transport car were conducted using real-time polymerase chain reaction (real-time PCR) testing method, total 300 samples. Of 300 samples, 119 (39.7%) were detected as positive to L. intracellularis in livestock transport car. In seasonal analysis, 42 (28.0%) out of 150 samples in spring and summer season. 77 (51.3%) out of 150 sample in autumn and winter season. In regional analysis, 53 (88.3%) out of 60 cars and the detection ratio showed that regional variation in livestock transport car.

Keyword

표/그림 (4)

표 Table 1. Isolates of L. intracellularis from livestock transport car
표 Table 2. Monthly detection rates of L. intracellularis using real-time PCR
표 Table 3. Seasonal detection rates of L. intracellularis by real-time PCR
표 Table 4. Regional differences in the detection rate of L. intracellularis

AI 본문요약
AI-Helper

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문제 정의

intracellularis는 농가에 경제적 피해를 주는 주요 세균성 원인체로 인식되고 있음에도 원인체의 순수 분리 및 증식이 어려워 양돈 축산 농가에 대한 감염실태 자료가 부족한 실정이다. 또한, 축산 관련 차량의 질병 전파에 대한 연구는 거의 확인할 수 없었기에, 본 연구에서는 축산 관련 차량 중에서도 특히,전국 각 지역의 양돈 차량에서 샘플을 채취할 수 있는 도축장 출하 차량에서 L. intracellularis의 분포 실태를 조사하여 방역 기초자료를 확보하고자 실시하였다.

제안 방법

즉, 반응액 50 μL를 50°C 2분, 95°C10분의 반응조건에서 1회 시행한 다음 계속하여95°C 15초, 60°C 1분의 반응조건에서 40회 반복 시행하였다.
즉, 반응액 50 μL를 50°C 2분, 95°C10분의 반응조건에서 1회 시행한 다음 계속하여95°C 15초, 60°C 1분의 반응조건에서 40회 반복 시행하였다. 증폭결과는 ABI7500 Fast (Applied Biosystems,USA) 프로그램을 이용하여 확인하였으며, CT값이 38이내인 경우 양성으로 판독하였다.

대상 데이터

2017년 1∼12월까지 전북 남부지역 관할 도축장에서 매월 가축 운반차량 5대씩 운전석 발판, 운전자 방역복 및 신발, 짐칸, 차량 외부, 타이어 등의 5부위를 swab하여 총 300건을 대상으로 하였으며, 시료는 실험을 실시하기 전까지 4°C에서 냉장보관 하여 24시간 이내에 실시하였다.

이론/모형

5 mL의 Phosphate buffered saline (PBS)로 희석하여 DNA 추출에 사용하였다. DNA 추출은 QIAamp cador Pathogen (Qiagen, USA)을 이용하여 공시된 방법에 준하여 수행하였다. Sample 200 μL에 RLT buffer 400 μL를 넣고 2분 이상 Vortexing 하였다.
L. intracellularis 검출은 PowerChek^TM Lawsonia intracellularis Real-time PCR Kit (Kogenebiotech, Korea)제품을 사용하여 다음과 같은 방법으로 realtime-PCR을 실시하였다. 즉, 반응액 50 μL를 50°C 2분, 95°C10분의 반응조건에서 1회 시행한 다음 계속하여95°C 15초, 60°C 1분의 반응조건에서 40회 반복 시행하였다.

성능/효과

월별로 각 5대씩 운전석 발판, 운전자 방역복 및 신발, 짐칸, 차량 외부, 타이어 등 출하차량 5부위에서 채취한 총 300건의 검사 결과는 119건(39.7%)의 시료에서 L. intracellularis균의 항원이 검출되었으며, 채취 부위별로는 운전자 방역복 및 신발 26건(43.3%), 운전석 발판 25건(41.7%), 짐칸 23건(38.3%), 타이어 23건(38.3%) 그리고, 차량외부 23건(36.7%)의 순으로 나타났다(Table 1)
0%) 이었다. 경남지역 차량에서는 전체 시료 20건 중 4건(20.0%), 시군 지역별로는 함양이 3대 15건 중 3대 4건(26.7%)이었고, 전남은 전체 시료 30건 중 14건(46.7%)이 양성이었으며, 시군 지역별로는 광주가 2대 10건 중 2대 5건(50.0%), 함평이 3대 15건 중 3대 9건(60.0%), 충남 보령은 1대 5건 중 1대 2건(40.0%)이 항원 양성인 것으로 나타났다(Table 4).
계절별로 L. intracellularis의 검출률은 큰 차이를 나타내었는데 특히, 가을에서 겨울사이의 검출률이 봄과 여름에 비하여 23.3% 높게 나타났는데 이는 가을에서 겨울 사이에 출하농장에서 돼지 증식성 회장염의 발병률이 증가되었음을 의미하므로 계절에 따른 출하 차량 관리와 농장에서의 철저한 방역 관리가 요구된다. Lee 등(2001)은 간접형광항체법으로 65 농가를 검사한 결과 100%의 양성률을 보고하였으나 본조사에서의 차량 60대 중 53대(88.
전북 남부지역 도축장 출하차량 60대 300건을 대상으로 L. intracellularis의 검출률을 조사한 결과 양성은 119건(39.7%)이었으며, 운전자 방역복 및 신발이 26건(43.3%), 운전석 발판이 25건(41.7%), 짐칸이 23건(38.3%), 타이어가 23건(38.3%) 그리고 차량외부가 23건(36.7%)으로 채취 부위에 따라 결과가 유사하였지만, 계절별로는 겨울 58.7%, 여름 26.7%로 약 두 배의 차이가 나타나는 것을 확인할 수 있었다. 또한, 차량 60대 중 53대(88.

후속연구

국내 구제역, AI 등 축산농가에 피해를 미치고 있는 가축전염병의 역학조사 결과에서 축산 관련 차량이 질병 전파와 밀접하게 관련이 있는 것으로 보고 있어, 질병 전파의 방어에 축산 관련 차량 관리의 중요성이 대두되고 있다 (질병관리본부, 2017a; 질병관리본부 2017b). 그럼에도, 축산관련 차량의 질병 전파에 대한 연구는 미흡하여, 국내에서는 나 등(2013)이 노계 운반 전용 차량에서의 살모넬라 오염율을 조사한 것 한편만 확인할 수 있었기에, 축산관련 차량과질병 전파에 대한 체계적인 연구의 필요성이 요구된다.
0%로 큰 차이가 나타났는데 이는 시료 채취 시기, 농장 출하 시 차량의 세척과 소독 유무, 출하농장의 발병 유무 등의 영향 때문으로 사료된다. 또한, 검출되지 않은 시군이라고 하더라도 도축장 출입을 통하여 L. intracellularis 검출지역 출하차량에 의한 교차 오염이 일어날 수 있기 때문에 도축장 축산차량에 대한 오염 예방을 위한 강도 높은 노력이 필요하며, 현재 양돈농장의 설사 증상 유무와 관련 없이 L. intracellularis균의 감염 실태를 주기적으로 파악하여 질병 근절 대책을 강구하여야 할 것으로 보인다. 또한.
또한. 출하농장의 유병률과 출하차량의 연관성에 대하여는 추가적인 연구가 이루어져야 할 것으로 사료된다.

질의응답

핵심어	질문	논문에서 추출한 답변
	돼지증식성장병증이 양돈 농가에 경제적 피해를 끼치는 이유는 무엇인가?	PPE는 발병시기가 6∼20주령의 육성기 및 비육기인 출하를 앞둔 시기에 다발하는 질병으로써, 급성형인 돼지출혈성장염(proliferative hemorrhagic enteropathy)과 만성형인 돼지장선종증(intestinaladenomatosis)으로 대별된다(Park 등, 2009). 감염돈에서의 급성 출혈성 장염과 폐사 그리고 만성형 설사에 의한 증체율 감소로 비육 성적 저하와 폐사율 증가가 생산성 감소로 연계되어 양돈 농가에 경제적 피해를 나타내는 것으로 알려져 있다(Roberts 등, 1977;Lawson과 McOrist, 1993a; Park 등, 2009). PPE는 임상 증상으로 식욕부진, 증체량 감소 및 갑작스런 폐사 등을 나타내며, 병리적 소견에 따라 장의 병변은 4가지 형태로 설명할 수 있다.
	기존 L. intracellularis의 검출법의 단점과 이를 개선한 최근 이용하는 방법은 무엇인가?	intracellularis의 검출을 위해서는 감염된 장 조직 또는 분변에서 원인체를 순수 분리하여 IEC-18 세포주를 이용한 간접형광항체법 또는 감염된 조직을 도은염색하여 검경하면 장관 음와상피세포에서 이 균을 확인할 수 있다(McOrist 등, 1987; Lawson 등, 1993a; Guedes 등, 2002). 그러나 분변을 이용한 도은염색이나 형광항체법은 민감하지 못하고 비특이반응이 많이 나타나기 때문에 널리 활용되지 못하며 장 조직을 이용할 경우, 폐사된 돼지에서만 가능하여 이 균에 대한 검출에 많은 제약이 따른다(Lym 등, 1999). 최근에는 진단 특이성이 높고 미량의 균 검출을 위하여 DNA probe를 이용한 hybridization기법 또는 중합효소연쇄반응(PCR)을 가장 많이 이용하고 있다(Jones 등, 1993b; McOrist 등, 1994; McCormick 등, 1995; Cooper등, 1997).
	L. intracellularis의 검출 방법에는 무엇이 있는가?	L. intracellularis의 검출을 위해서는 감염된 장 조직 또는 분변에서 원인체를 순수 분리하여 IEC-18 세포주를 이용한 간접형광항체법 또는 감염된 조직을 도은염색하여 검경하면 장관 음와상피세포에서 이 균을 확인할 수 있다(McOrist 등, 1987; Lawson 등, 1993a; Guedes 등, 2002). 그러나 분변을 이용한 도은염색이나 형광항체법은 민감하지 못하고 비특이반응이 많이 나타나기 때문에 널리 활용되지 못하며 장 조직을 이용할 경우, 폐사된 돼지에서만 가능하여 이 균에 대한 검출에 많은 제약이 따른다(Lym 등, 1999).

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표제어: PCR

동의어: Packet Collision Rate

용어 설명 출처 목록 (6)

용어 설명: PCR은 세균 특이성이 있는 primer를 이용하여 적은 수의 세균이 있을지라도 쉽게 검출할 수 있는 유용한 방법이며, 이를 이용하여 구강 내 치면세균막이나 타액에서 직접 세균을 검출할 수 있게 되었다[8].

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